木聚糖酶發(fā)酵車間的工藝流程分析案例目錄TOC\o"1-3"\h\u3897木聚糖酶發(fā)酵車間的工藝流程分析案例 1134691.1高產(chǎn)木聚糖酶的黑曲霉工程菌株的選取 1205331.2黑曲霉工程菌株發(fā)酵生產(chǎn)木聚糖酶 1278561.1.1菌種活化 1206841.1.2一級(jí)種子培養(yǎng) 180971.1.3二級(jí)種子培養(yǎng) 226081.1.4發(fā)酵罐發(fā)酵 2120401.3發(fā)酵液后處理獲得木聚糖酶 256061.3.1板框壓濾 262221.3.2噴霧干燥 316601.3.3篩分分級(jí)和包裝 3195721.4工藝流程 41.1高產(chǎn)木聚糖酶的黑曲霉工程菌株的選取根據(jù)楊付偉等人的對(duì)于空間誘變選育高產(chǎn)木聚糖酶工程菌種的研究，原始菌株黑曲霉TG-Y經(jīng)過空間誘變，黑曲霉菌株菌落形態(tài)和產(chǎn)酶能力發(fā)生了不同程度的變化，通過多次首篩、復(fù)篩篩選出優(yōu)勢菌株SP1-523,和SP2-801，其可以相對(duì)高效分泌木聚糖酶，與原始菌株酶活力相比提高20.22%和21.76%，遺傳性質(zhì)平穩(wěn)，在該項(xiàng)設(shè)計(jì)中，選取其作為工程菌株使用。1.2黑曲霉工程菌株發(fā)酵生產(chǎn)木聚糖酶1.1.1菌種活化采用平板劃線法將菌種接種于PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)中，事先在平板底部做好記號(hào)，于30℃、220r/min的條件下培養(yǎng)24h，等到看到培養(yǎng)液渾濁時(shí)，說明成功長出微生物單菌落，此時(shí)通過電子顯微鏡觀察有無雜菌污染，若并未出現(xiàn)異常情況，則種子活化效果較好，可以進(jìn)行下一步操作。1.1.2一級(jí)種子培養(yǎng)將上述經(jīng)過活化的種液通過滅菌鋼瓶轉(zhuǎn)移接入一級(jí)種子罐中。培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌40min，表壓為100Kpa，于30℃培養(yǎng)18h。種子培養(yǎng)液的構(gòu)成如下：玉米粉60g/L；玉米漿20g/L；麩皮40g/L；MgSO41g/L;（NH4）2SO45g/L;KH2PO43g/L;聚乙二醇20000.5g/LPH5.20；1.1.3二級(jí)種子培養(yǎng)將上述一級(jí)種子罐培養(yǎng)出來的種子液接入裝有更多培養(yǎng)液的二級(jí)種子罐中，同樣采用高壓蒸汽滅菌法于100Kpa表壓下滅菌2min,之后將種液立即冷卻至30℃左右，在此溫度下培養(yǎng)6h。當(dāng)觀察到整個(gè)表面孢子著色均勻，表現(xiàn)出成熟特征的顏色時(shí)，進(jìn)行若干步擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)量為10-15倍，仍舊在30℃下進(jìn)行培養(yǎng)。1.1.4發(fā)酵罐發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng)后，為了在發(fā)酵罐上連續(xù)穩(wěn)定運(yùn)行，采用低濃度補(bǔ)料發(fā)酵工藝，發(fā)酵罐發(fā)酵周期內(nèi)的控制工藝參數(shù)如下：eq\o\ac(○,1).，溶氧以上，通風(fēng)比,轉(zhuǎn)速,30h開始補(bǔ)料，初始補(bǔ)料比；eq\o\ac(○,2).h，菌絲量以上，還原糖，溶氧，通風(fēng)，轉(zhuǎn)速,、料比；eq\o\ac(○,3).h，菌絲量，還原糖,溶氧以上，通風(fēng)比左右，轉(zhuǎn)速,補(bǔ)料比；eq\o\ac(○,4).，菌絲量左右，還原糖，溶氧，通風(fēng)比左右，轉(zhuǎn)速，補(bǔ)料比；1.3發(fā)酵液后處理獲得木聚糖酶1.3.1板框壓濾因?yàn)槟揪厶敲赋墒彀l(fā)酵醪殘?zhí)堑停l(fā)酵醪溫度升高有限，故采用隔膜壓濾機(jī)能夠很好地實(shí)現(xiàn)固液分離效率較好，且具有耐壓高、耐腐蝕好、維修方便、安全可靠等優(yōu)點(diǎn)，冶金、燃?xì)?、造紙、焦化、制藥、食品、釀造、精?xì)化工等行業(yè)客戶的首選。1.3.2噴霧干燥工廠車間干燥方法有很多種，例如自然干燥、烘房干燥、氣流干燥等，噴霧干燥就是氣流干燥方法的一種，是流態(tài)化技術(shù)用于浸出液干燥的一種較好的方法，而經(jīng)過板框壓濾得到的粗酶液，是浸出液的一種，效果較好，故可采用這種方式對(duì)粗酶液進(jìn)行干燥。在噴霧干燥塔中，直接將粗酶液噴霧于干燥器內(nèi)使之與熱空氣發(fā)生冷熱交換，將水分快速汽化，從而獲得固體顆粒狀和粉狀產(chǎn)品。1.3.3篩分分級(jí)和包裝本發(fā)酵車間生產(chǎn)的木聚糖酶產(chǎn)品主要是以酶制劑形式，售賣給飼料工業(yè)工廠，經(jīng)過噴霧干燥后得到的粗產(chǎn)品，經(jīng)過篩分設(shè)備（振動(dòng)篩）篩分分級(jí)后，隨機(jī)選取產(chǎn)品送入質(zhì)檢科檢驗(yàn)，將合格產(chǎn)品送入包裝車間包裝。根據(jù)GB7300·401-2019，所生產(chǎn)的木聚糖酶固體產(chǎn)品要保證粒度均勻，流散性好，無發(fā)霉變質(zhì)，無異味，有特殊發(fā)酵氣味。而對(duì)于液體劑型，保證無異味，有特殊發(fā)酵氣味即可。1.4工藝流程空氣氣空氣氣空氣壓縮機(jī)空氣過濾系統(tǒng)分過濾器種子瓶斜面孢子搖瓶培