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《GB/T14926.1-2001實驗動物
沙門菌檢測方法》(2026年)深度解析目錄溯源與定位:GB/T14926.1-2001為何是實驗動物沙門菌檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”?專家視角剖析其核心價值增菌培養(yǎng)的“
門道”:不同增菌液如何適配不同樣品?標(biāo)準(zhǔn)配方與培養(yǎng)條件的優(yōu)化策略生化鑒定的核心邏輯:哪些生化反應(yīng)是沙門菌的“身份標(biāo)識”?標(biāo)準(zhǔn)判定依據(jù)與結(jié)果解讀結(jié)果判定與報告規(guī)范:如何精準(zhǔn)解讀檢測數(shù)據(jù)并形成權(quán)威報告?標(biāo)準(zhǔn)要求與行業(yè)實操銜接標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用場景拓展:從科研到生產(chǎn)如何落地?不同領(lǐng)域?qū)嵅侔咐c適配技巧深度剖析檢測前關(guān)鍵鋪墊:樣品采集與處理如何決定結(jié)果準(zhǔn)確性?標(biāo)準(zhǔn)流程與實操要點深度剖析分離培養(yǎng)的精準(zhǔn)把控:選擇性培養(yǎng)基如何篩選目標(biāo)菌?菌落識別要點與常見誤區(qū)規(guī)避血清學(xué)鑒定的關(guān)鍵環(huán)節(jié):抗原抗體反應(yīng)如何鎖定沙門菌血清型?標(biāo)準(zhǔn)操作與結(jié)果驗證方法質(zhì)量控制體系構(gòu)建:如何確保檢測全程可靠?標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)控要點與未來質(zhì)控趨勢預(yù)測標(biāo)準(zhǔn)迭代與發(fā)展:GB/T14926.1-2001如何適配未來檢測技術(shù)?升級方向與行業(yè)需求對源與定位:GB/T14926.1-2001為何是實驗動物沙門菌檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”?專家視角剖析其核心價值標(biāo)準(zhǔn)制定的背景與行業(yè)需求:沙門菌污染為何倒逼檢測標(biāo)準(zhǔn)出臺?實驗動物沙門菌感染易引發(fā)群體性疾病,影響實驗結(jié)果準(zhǔn)確性,甚至導(dǎo)致科研數(shù)據(jù)失效。2001年前,行業(yè)檢測方法雜亂,結(jié)果可比性差。該標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)勢而生,整合當(dāng)時先進(jìn)技術(shù)與實踐經(jīng)驗,統(tǒng)一檢測流程,解決行業(yè)痛點,為實驗動物質(zhì)量管控提供核心依據(jù)。(二)標(biāo)準(zhǔn)的體系定位:在實驗動物檢測標(biāo)準(zhǔn)體系中處于何種核心地位?GB/T14926系列是實驗動物微生物檢測的核心標(biāo)準(zhǔn),第1部分聚焦沙門菌這一高致病性高污染風(fēng)險菌。其與《實驗動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測》等標(biāo)準(zhǔn)銜接,構(gòu)成“檢測方法-等級判定”完整體系,是實驗動物質(zhì)量評價的關(guān)鍵技術(shù)支撐,也是行業(yè)準(zhǔn)入科研驗收的必循依據(jù)。(三)核心價值解析:為何能成為多年來的“金標(biāo)準(zhǔn)”?專家視角解讀從專家視角看,其核心價值在于“精準(zhǔn)性穩(wěn)定性普適性”。精準(zhǔn)性體現(xiàn)在多環(huán)節(jié)質(zhì)控確保檢出率與特異性;穩(wěn)定性源于標(biāo)準(zhǔn)化流程減少人為誤差;普適性適配不同實驗動物品種與樣品類型。多年實踐驗證,其結(jié)果可靠,成為國內(nèi)外同行認(rèn)可的權(quán)威方法,奠定“金標(biāo)準(zhǔn)”地位。12與國際標(biāo)準(zhǔn)的銜接:如何兼顧本土需求與國際兼容性?01標(biāo)準(zhǔn)制定時參考ISOOIE相關(guān)方法,核心技術(shù)指標(biāo)與國際接軌,確保出口實驗動物檢測結(jié)果互認(rèn)。同時結(jié)合我國實驗動物養(yǎng)殖模式常見沙門菌血清型特點,優(yōu)化樣品處理與培養(yǎng)基選擇,如針對嚙齒類動物糞便樣品調(diào)整增菌時間,兼顧國際兼容性與本土實操性。02檢測前關(guān)鍵鋪墊:樣品采集與處理如何決定結(jié)果準(zhǔn)確性?標(biāo)準(zhǔn)流程與實操要點深度剖析樣品采集的基本原則:代表性與無菌性如何雙重保障?標(biāo)準(zhǔn)要求解讀標(biāo)準(zhǔn)明確采集需遵循“隨機(jī)抽樣分層取樣”原則,確保樣品代表群體質(zhì)量。無菌性要求使用滅菌容器,采樣工具滅菌后一次性使用。如嚙齒類動物需采集糞便或盲腸內(nèi)容物,每群隨機(jī)取10%個體,至少30只,避免單一取樣導(dǎo)致漏檢,從源頭保障結(jié)果可靠性。(二)不同實驗動物的采樣技巧:嚙齒類兔類犬類等如何差異化操作?針對不同動物特性差異化采樣:嚙齒類用無菌棉簽取新鮮糞便或安樂死后取盲腸內(nèi)容物;兔類采直腸拭子或糞便,采樣前需清潔肛門周圍;犬類采糞便或腸道內(nèi)容物,確保樣品量不少于5g。標(biāo)準(zhǔn)細(xì)化每種動物采樣部位工具與量,避免因采樣不當(dāng)導(dǎo)致假陰性。(三)樣品保存與運(yùn)輸規(guī)范:如何避免運(yùn)輸過程中沙門菌失活?標(biāo)準(zhǔn)要求樣品采集后4℃冷藏保存,24小時內(nèi)送檢。運(yùn)輸時用保溫箱加冰袋,確保溫度穩(wěn)定在0-4℃,避免反復(fù)凍融。需標(biāo)注樣品信息采集時間,密封防止交叉污染。實操中若超時送檢,需加增菌液暫存,防止沙門菌因環(huán)境變化失活影響檢測結(jié)果。樣品前處理的核心步驟:均質(zhì)化稀釋等如何按標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行?A樣品前處理關(guān)鍵為均質(zhì)化與梯度稀釋。固體樣品如糞便加無菌生理鹽水制成1:10懸液,用均質(zhì)器均質(zhì)2分鐘;液體樣品直接梯度稀釋。標(biāo)準(zhǔn)要求稀釋操作嚴(yán)格無菌,稀釋液現(xiàn)配現(xiàn)用。均質(zhì)化確保沙門菌均勻分布,稀釋則適配后續(xù)培養(yǎng)濃度,避免菌量過多或過少導(dǎo)致誤判。B增菌培養(yǎng)的“門道”:不同增菌液如何適配不同樣品?標(biāo)準(zhǔn)配方與培養(yǎng)條件的優(yōu)化策略增菌培養(yǎng)的核心目的:為何是檢測沙門菌的“關(guān)鍵前置步”?01實驗動物樣品中沙門菌可能含量極低,且混有大量雜菌。增菌培養(yǎng)通過特定培養(yǎng)基選擇性促進(jìn)沙門菌生長,抑制雜菌繁殖,提升目標(biāo)菌濃度,為后續(xù)分離培養(yǎng)提供充足菌源。若省略或操作不當(dāng),易因菌量不足導(dǎo)致假陰性,是保障檢出率的核心環(huán)節(jié)。02(二)標(biāo)準(zhǔn)推薦增菌液解析:緩沖蛋白胨水四硫磺酸鈉煌綠增菌液等特性對比標(biāo)準(zhǔn)推薦兩步增菌:前增菌用緩沖蛋白胨水,營養(yǎng)豐富適配多種樣品,溫和復(fù)蘇受損沙門菌;選擇性增菌用四硫磺酸鈉煌綠增菌液,煌綠抑制革蘭氏陽性菌,四硫磺酸鈉抑制雜菌,靶向富集沙門菌。二者搭配形成“復(fù)蘇-富集”鏈條,適配不同污染程度樣品。(三)不同樣品的增菌液選擇:糞便組織飲水等如何適配?實操案例糞便樣品雜菌多,用“緩沖蛋白胨水+四硫磺酸鈉煌綠增菌液”兩步增菌;組織樣品如肝臟,先均質(zhì)后用緩沖蛋白胨水前增菌,再轉(zhuǎn)選擇性增菌液;飲水樣品菌量少,可直接用緩沖蛋白胨水增菌后轉(zhuǎn)選擇性增菌。某養(yǎng)殖場糞便檢測案例中,該搭配使檢出率提升30%。培養(yǎng)條件的精準(zhǔn)控制:溫度時間通氣等如何影響增菌效果?標(biāo)準(zhǔn)要求前增菌37℃培養(yǎng)18-24小時,選擇性增菌42℃培養(yǎng)18-24小時。37℃適配沙門菌復(fù)蘇,42℃增強(qiáng)選擇性。需保證培養(yǎng)箱溫度均勻,通氣良好,避免密閉導(dǎo)致厭氧環(huán)境抑制沙門菌生長。實操中若溫度波動±1℃,需延長培養(yǎng)2-4小時,確保增菌充分。分離培養(yǎng)的精準(zhǔn)把控:選擇性培養(yǎng)基如何篩選目標(biāo)菌?菌落識別要點與常見誤區(qū)規(guī)避選擇性培養(yǎng)基的篩選原理:如何從雜菌中“鎖定”沙門菌?選擇性培養(yǎng)基通過添加抑制劑與指示劑實現(xiàn)篩選。如SS瓊脂含膽鹽抑制革蘭氏陽性菌,枸櫞酸鹽抑制大腸埃希菌,中性紅為指示劑,沙門菌不發(fā)酵乳糖呈無色菌落,周圍有黑色硫化物沉淀,通過菌落形態(tài)與顏色差異從雜菌中快速識別目標(biāo)菌。12(二)標(biāo)準(zhǔn)推薦培養(yǎng)基對比:SS瓊脂HE瓊脂麥康凱瓊脂等適用場景標(biāo)準(zhǔn)推薦SS瓊脂為首選,適配多數(shù)樣品,菌落特征典型;HE瓊脂含蔗糖,可區(qū)分不發(fā)酵蔗糖的沙門菌與發(fā)酵蔗糖的雜菌,適合復(fù)雜樣品;麥康凱瓊脂選擇性稍弱,可作為輔助驗證。如檢測含大量發(fā)酵菌的糞便樣品,用SS+HE瓊脂組合,提升篩選準(zhǔn)確性。(三)菌落形態(tài)識別要點:沙門菌的“典型特征”有哪些?標(biāo)準(zhǔn)判定依據(jù)01標(biāo)準(zhǔn)明確沙門菌在SS瓊脂上為無色半透明圓形菌落,直徑2-3mm,部分菌株因產(chǎn)硫化氫呈中心黑色;在HE瓊脂上為藍(lán)綠色或無色,中心黑色。需結(jié)合菌落大小顏色邊緣形態(tài)綜合判斷,排除類似形態(tài)的變形桿菌等雜菌,必要時挑取多個菌落驗證。02常見操作誤區(qū)規(guī)避:如何避免漏檢或誤判?專家實操建議01常見誤區(qū):挑取菌落數(shù)量不足未觀察到中心黑色菌落即判定陰性。專家建議每塊平板挑取3-5個疑似菌落;對無色無黑色菌落,若邊緣整齊半透明,也需挑取驗證。此外,培養(yǎng)基需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免存放過久導(dǎo)致抑制劑失效,出現(xiàn)雜菌過度生長掩蓋目標(biāo)菌。02生化鑒定的核心邏輯:哪些生化反應(yīng)是沙門菌的“身份標(biāo)識”?標(biāo)準(zhǔn)判定依據(jù)與結(jié)果解讀生化鑒定的科學(xué)原理:如何通過代謝特性區(qū)分沙門菌與其他菌?不同細(xì)菌代謝酶系不同,對營養(yǎng)物質(zhì)的分解能力存在差異。生化鑒定通過檢測細(xì)菌對糖類醇類氨基酸等的分解產(chǎn)物(如酸氣體硫化氫),形成獨特生化譜。沙門菌具特定代謝特性,如不發(fā)酵乳糖發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣產(chǎn)硫化氫等,據(jù)此與其他腸道菌區(qū)分。12(二)核心生化反應(yīng)指標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的必檢項目有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定必檢項目:葡萄糖發(fā)酵(產(chǎn)酸產(chǎn)氣)乳糖發(fā)酵(陰性)蔗糖發(fā)酵(陰性)硫化氫產(chǎn)生(陽性)靛基質(zhì)試驗(陰性)尿素酶試驗(陰性)。每項反應(yīng)結(jié)果需與標(biāo)準(zhǔn)生化譜比對,若核心指標(biāo)一致,可初步判定為沙門菌;若某項不符,需補(bǔ)充驗證試驗。(三)生化鑒定試劑盒的使用規(guī)范:如何適配標(biāo)準(zhǔn)要求?操作要點01使用試劑盒需選擇符合標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品,按說明書接種菌液,37℃培養(yǎng)18-24小時。操作時確保菌液濃度適宜,避免過濃導(dǎo)致假陽性;加試劑時精準(zhǔn)定量,如靛基質(zhì)試驗需加Kovac試劑0.5ml。試劑盒結(jié)果需與傳統(tǒng)生化管對比驗證,確保一致性,避免試劑盒質(zhì)量問題導(dǎo)致誤判。02異常結(jié)果處理:生化反應(yīng)不典型時如何進(jìn)一步驗證?若出現(xiàn)生化反應(yīng)不典型(如部分菌株不產(chǎn)硫化氫),需補(bǔ)充動力試驗枸櫞酸鹽利用試驗等附加項目。同時挑取菌株進(jìn)行純培養(yǎng)后重新鑒定,排除污染或操作誤差。必要時采用分子生物學(xué)方法(如16SrRNA測序)輔助判定,確保鑒定結(jié)果準(zhǔn)確,符合標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)謹(jǐn)性要求。血清學(xué)鑒定的關(guān)鍵環(huán)節(jié):抗原抗體反應(yīng)如何鎖定沙門菌血清型?標(biāo)準(zhǔn)操作與結(jié)果驗證方法血清學(xué)鑒定的核心原理:抗原抗體特異性結(jié)合如何實現(xiàn)精準(zhǔn)分型?沙門菌表面含O抗原(脂多糖)與H抗原(鞭毛蛋白),不同血清型抗原不同。血清學(xué)鑒定利用已知抗血清與菌株抗原特異性結(jié)合,通過凝集反應(yīng)判定血清型。如O抗血清與O抗原結(jié)合出現(xiàn)顆粒狀凝集,H抗血清與H抗原結(jié)合出現(xiàn)絮狀凝集,據(jù)此鎖定具體血清型。(二)標(biāo)準(zhǔn)抗血清的選擇與使用:O抗血清H抗血清如何搭配使用?01標(biāo)準(zhǔn)要求使用經(jīng)國家認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)抗血清,先做O抗原鑒定,用多價O抗血清篩選,再用單價O抗血清定型;后做H抗原鑒定,分第1相和第2相H抗血清檢測。如檢測到O4抗原H:i和H:1,2抗原,可判定為鼠傷寒沙門菌??寡逍柙谟行趦?nèi)使用,使用前搖勻,避免沉淀影響結(jié)果。020102(三)凝集試驗操作規(guī)范:玻片凝集與試管凝集如何按標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行?玻片凝集:取菌苔與抗血清在玻片上混勻,1分鐘內(nèi)出現(xiàn)明顯凝集為陽性;試管凝集:倍比稀釋抗血清加菌液,37℃孵育24小時,判定凝集效價。標(biāo)準(zhǔn)要求做陰性對照(生理鹽水+菌液)和陽性對照(標(biāo)準(zhǔn)菌株+抗血清),避免非特異性凝集導(dǎo)致誤判。操作時菌量適中,避免過多導(dǎo)致假陽性。血清型鑒定結(jié)果解讀:如何判斷是否為常見致病血清型?臨床意義01結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)血清型分型結(jié)果,對照常見致病血清型表(如鼠傷寒腸炎沙門菌等)。若為致病血清型,提示實驗動物存在感染風(fēng)險,需追溯污染源并淘汰陽性個體;若為非致病血清型,需結(jié)合實驗?zāi)康呐袛嗍欠裼绊憣嶒?。結(jié)果需記錄血清型全稱,為后續(xù)防控提供依據(jù)。02結(jié)果判定與報告規(guī)范:如何精準(zhǔn)解讀檢測數(shù)據(jù)并形成權(quán)威報告?標(biāo)準(zhǔn)要求與行業(yè)實操銜接結(jié)果判定的層級邏輯:從增菌分離到鑒定如何逐步確認(rèn)?標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)01按“增菌→分離→生化→血清學(xué)”層級判定:增菌液渾濁提示可能有菌生長;分離到疑似菌落為初步陽性;生化反應(yīng)符合沙門菌譜為生化陽性;血清學(xué)凝集陽性為最終陽性。任一環(huán)節(jié)陰性需重新操作,確保無漏檢。標(biāo)準(zhǔn)明確只有全環(huán)節(jié)陽性方可判定為沙門菌陽性,保障結(jié)果嚴(yán)謹(jǐn)。02(二)陽性結(jié)果的確認(rèn)流程:如何避免假陽性?多重驗證方法1陽性結(jié)果需多重驗證:重新挑取菌落做生化鑒定,確保反應(yīng)一致;換用不同批次抗血清做血清學(xué)鑒定;必要時做分子生物學(xué)檢測(如PCR擴(kuò)增沙門菌特異性基因)。同時排查操作污染,如培養(yǎng)基試劑是否無菌,操作環(huán)境是否符合要求,排除外源污染導(dǎo)致的假陽性。2(三)陰性結(jié)果的判定條件:需滿足哪些前提才能確認(rèn)陰性?注意事項01判定陰性需滿足:樣品采集符合代表性要求,增菌培養(yǎng)條件達(dá)標(biāo),分離時挑取足夠疑似菌落,生化與血清學(xué)鑒定均陰性。需注明樣品采集時間數(shù)量檢測環(huán)節(jié)參數(shù),若樣品處理不當(dāng)(如超時送檢),需在報告中說明,提示結(jié)果可能存在偏差,避免絕對化表述。02檢測報告的規(guī)范撰寫:應(yīng)包含哪些核心要素?與行業(yè)管理要求銜接報告需含檢測依據(jù)(GB/T14926.1-2001)樣品信息檢測方法各環(huán)節(jié)結(jié)果最終判定檢測日期檢測人員及審核人員簽字。核心要素需與實驗動物質(zhì)量合格證辦理科研項目驗收等管理要求銜接,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可追溯。報告需加蓋檢測機(jī)構(gòu)公章,具備法律效力。質(zhì)量控制體系構(gòu)建:如何確保檢測全程可靠?標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)控要點與未來質(zhì)控趨勢預(yù)測人員質(zhì)控:檢測人員需具備哪些資質(zhì)?能力驗證與培訓(xùn)要求標(biāo)準(zhǔn)要求檢測人員需經(jīng)專業(yè)培訓(xùn),掌握微生物檢測基礎(chǔ)技能與標(biāo)準(zhǔn)流程,持相關(guān)資質(zhì)證書上崗。每年需參加能力驗證(如CNAS組織的比對試驗),確保檢測能力達(dá)標(biāo)。定期開展內(nèi)部培訓(xùn),更新技術(shù)知識,如新型檢測方法血清型識別等,提升人員專業(yè)素養(yǎng)。(二)設(shè)備與試劑質(zhì)控:培養(yǎng)箱移液器培養(yǎng)基等如何校準(zhǔn)與驗證?設(shè)備需定期校準(zhǔn):培養(yǎng)箱每年校準(zhǔn)溫度,移液器每半年校準(zhǔn)精度,滅菌器每月做生物監(jiān)測(用嗜熱脂肪桿菌芽孢驗證)。試劑需驗證:培養(yǎng)基配制后做無菌試驗與性能驗證(用標(biāo)準(zhǔn)菌株檢測檢出率),抗血清做效價測定。所有質(zhì)控記錄需存檔,確??勺匪?。(三)陽性與陰性對照設(shè)置:標(biāo)準(zhǔn)要求的對照體系如何構(gòu)建?作用解析A全程設(shè)置對照:增菌時設(shè)空白對照(僅增菌液)排除污染,陽性對照(標(biāo)準(zhǔn)沙門菌菌株)驗證增菌效果;分離培養(yǎng)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)菌株對照,確認(rèn)培養(yǎng)基選擇性;生化與血清學(xué)鑒定設(shè)陰陽性對照,驗證試劑有效性。對照異常時需停止檢測,排查問題后重新操作,保障檢測可靠性。B未來質(zhì)控趨勢預(yù)測:智能化與數(shù)字化如何賦能質(zhì)控體系?發(fā)展方向未來質(zhì)控將向智能化發(fā)展:智能培養(yǎng)箱自動記錄溫度并預(yù)警,數(shù)字化移液器自動記錄加樣量;建立質(zhì)控數(shù)據(jù)庫,整合設(shè)備校準(zhǔn)試劑驗證能力驗證數(shù)據(jù),實現(xiàn)全程追溯。同時引入AI圖像識別技術(shù),自動識別菌落形態(tài),減少人為誤差,提升質(zhì)控效率與精準(zhǔn)度。標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用場景拓展:從科研到生產(chǎn)如何落地?不同領(lǐng)域?qū)嵅侔咐c適配技巧深度剖析科研實驗室場景:如何適配動物實驗的精準(zhǔn)檢測需求?實操案例A科研實驗室需精準(zhǔn)檢測確保實驗動物質(zhì)量,保障數(shù)據(jù)可靠。某藥理研究實驗室檢測大鼠沙門菌時,按標(biāo)準(zhǔn)采集盲腸內(nèi)容物,采用“兩步增菌+SS瓊脂分離+生化鑒定”流程,檢出陽性個體后及時淘汰,避免其影響藥物代謝實驗結(jié)果。適配技巧:增加樣品重復(fù)檢測次數(shù),提升數(shù)據(jù)可信度。B(二)實驗動物生產(chǎn)企業(yè)場景:如何滿足批量檢測與質(zhì)量管控需求?A生產(chǎn)企業(yè)需批量檢測提高效率,同時嚴(yán)控質(zhì)量。某嚙齒類動物養(yǎng)殖企業(yè)采用“隨機(jī)抽樣+批量增菌”模式,每批次抽樣50只,混合樣品前增菌后分離,陽性再單只復(fù)檢。適配技巧:優(yōu)化采樣流程,用自動化均質(zhì)器處理樣品,縮短前處理時間,滿足批量檢測需求,同時符合標(biāo)準(zhǔn)要求。B(三)動物檢疫與監(jiān)管場景:如何實現(xiàn)快速篩查與精準(zhǔn)判定?監(jiān)管要點檢疫監(jiān)管需快速篩查可疑樣品,精準(zhǔn)判定。某海關(guān)對進(jìn)口實驗猴檢測時,先采用標(biāo)準(zhǔn)中的增菌-分離流程快速篩查,疑似陽性后立即做血清學(xué)鑒定與PCR驗證,24小時內(nèi)出具結(jié)果。監(jiān)管要點:嚴(yán)格核查檢測報告的標(biāo)準(zhǔn)符合性,對陽性批次追溯來源,防止不合格動物流入市場。不同場景的適配技巧:如何在效率與標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)謹(jǐn)性間平衡?01批量場景如生產(chǎn)企業(yè),可采用混合樣品檢測初篩,陽性再單樣復(fù)核;精準(zhǔn)場景如科研實驗室,需單樣單獨檢測,增加重復(fù)次數(shù);快速場景如檢疫,可搭配快速增菌液(縮短至12小時),但需用標(biāo)準(zhǔn)方法驗證。核
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