12026屆新高考生物沖刺復(fù)習(xí)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用溫故知新無細(xì)胞結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞真核細(xì)胞微生物類群病毒：新冠病毒等RNA病毒；

噬菌體等DNA病毒細(xì)菌：藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌等；放線菌：鏈霉菌等單細(xì)胞真菌：酵母菌、霉菌等；原生生物：草履蟲、衣藻等溫故知新3培養(yǎng)基的配置無菌技術(shù)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)為需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件確保其他微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來自然界實驗室1培養(yǎng)基的配制(1)概念:(2)作用:(3)類型:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。①

按物理性質(zhì)：②

按化學(xué)組成：③

按目的用途：(4)成分:液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基1培養(yǎng)基的配制固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基加入凝固劑（如瓊脂）分離、鑒定、計數(shù)和菌種保存等擴(kuò)大培養(yǎng)，工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。菌落一般單個微生物在培養(yǎng)基表面或內(nèi)部形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。①

按物理性質(zhì)：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。瓊脂是從紅藻中提取的多糖。瓊脂是一種脂質(zhì)。?1培養(yǎng)基的配制菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。細(xì)菌放線菌霉菌酵母菌1培養(yǎng)基的配制蔗糖（C12H22O11）10g硝酸鈉（NaNO3）3g磷酸氫二鉀（K2HPO4）1g硫酸鎂（MgSO4·7H2O）0.5g氯化鉀（KCl）0.5g硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O）0.01g瓊脂15～20g蒸餾水定容至1000mL查氏培養(yǎng)基（培養(yǎng)霉菌）牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000mL哪一種培養(yǎng)基的成分明確？②

按化學(xué)組成：合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基。1培養(yǎng)基的配制牛肉膏蛋白胨牛肉膏是采用新鮮牛肉經(jīng)過消化、過濾、濃縮而得到的一種棕黃色至棕褐色的膏狀物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黃色。蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑。一般用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動物蛋白（肉類）和植物蛋白（豆類）等兩種。1培養(yǎng)基的配制選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基③

按目的用途：選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基1培養(yǎng)基的配制+氨芐青霉素選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基+氨芐青霉素培養(yǎng)基沒有抗氨芐青霉素能力的菌落被淘汰怎樣選擇出抗氨芐青霉素能力的細(xì)菌?1培養(yǎng)基的配制+氨芐青霉素具有抗氨芐青霉素能力的菌落沒有氨芐青霉素抗性的細(xì)菌選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基+氨芐青霉素培養(yǎng)基沒有抗氨芐青霉素能力的菌落被淘汰怎樣選擇出抗氨芐青霉素能力的細(xì)菌?1培養(yǎng)基的配制劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)化學(xué)成分目的用途不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運動、分類鑒定微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型及用途1培養(yǎng)基的配制(1)概念:(2)作用:(3)類型:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。①

按物理性質(zhì)：②

按化學(xué)組成：③

按目的用途：(4)成分:主要營養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基1培養(yǎng)基的配制(4)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分:①基本成分：碳源、氮源、無機(jī)鹽、水碳源無機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-有機(jī)碳源：糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物功能：①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②有機(jī)碳既是碳源又是能源。氮源無機(jī)氮源：NH4＋、NO3-、NH3等有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等功能：主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝產(chǎn)物等。含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源。無機(jī)鹽功能：提供無機(jī)營養(yǎng)

調(diào)劑PH

維持滲透壓水功能：良好的溶劑

維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定1培養(yǎng)基的配制②

特殊條件：pH、O2和特殊營養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加

；培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)制

；培養(yǎng)細(xì)菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)制

；培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供

條件生長因子、氨基酸、維生素、堿基等“個性定制”(4)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分:維生素酸性中性或弱堿性無氧1培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基成分提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素蛋白胨10g碳源、氮源和維生素NaCl

5g無機(jī)鹽H2O定容至1000mL氫元素、氧元素牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（培養(yǎng)細(xì)菌）牛肉膏蛋白胨牛肉膏是采用新鮮牛肉經(jīng)過消化、過濾、濃縮而得到的一種棕黃色至棕褐色的膏狀物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黃色。蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑。一般用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動物蛋白（肉類）和植物蛋白（豆類）等兩種。(4)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分:1培養(yǎng)基的配制目的要明確：根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配置量；營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜；pH要適宜：細(xì)菌培養(yǎng)基呈中性或微堿性；霉菌培養(yǎng)基呈酸性。(5)培養(yǎng)基的配制原則:練習(xí)(2021山東)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色,乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯誤的是(

)A.甲菌屬于解脂菌B.實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力B練習(xí)(2021山東)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭，硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等,下列說法錯誤的是(

)A.乙菌的運動能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運動需選用液體培養(yǎng)基C.該實驗不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染B練習(xí)操作步驟:①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基Ⅰ中培養(yǎng),得到A、B菌液;②液體培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂,分別制成平板Ⅰ、Ⅱ,并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔?；卮鹣铝袉栴}。(1)實驗所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是______。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源,氮源在菌體內(nèi)可以參與合成_______________(答出2種即可)等生物大分子。

(2)步驟①中,在資源和空間不受限制的階段,若最初接種N0個A細(xì)菌,繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是___________。

(2022全國甲)某同學(xué)從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌,在此基礎(chǔ)上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力,并分析兩個菌株的其他生理功能。實驗所用的培養(yǎng)基成分如下。培養(yǎng)基Ⅰ:K2HPO4,MgSO4,NH4NO3,石油。培養(yǎng)基Ⅱ:K2HPO4,MgSO4,石油。石油蛋白質(zhì)、核酸N02n練習(xí)(3)為了比較A、B降解石油的能力,某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進(jìn)行實驗,結(jié)果如表所示(“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示無透明圈),推測該同學(xué)的實驗思路是

____________________________

_____________________________________。

菌株透明圈大小平板Ⅰ平板ⅡA+++++B++-(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤,根據(jù)上表所示實驗結(jié)果,治理石油污染應(yīng)選用的菌株是_______,理由是_______________________

_____________________________________。

取濃度、體積相同的A、B兩種菌液,將A菌液分別接種到平板Ⅰ、Ⅱ的甲孔內(nèi),將B菌液分別接種到平板Ⅰ、Ⅱ的乙孔內(nèi),置于適宜溫度下培養(yǎng)一段時間后觀察透明圈大小A

平板Ⅱ是一個缺氮但含有

石油的環(huán)境,只有A菌株能在平板Ⅱ上生長2無菌技術(shù)

獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染！2無菌技術(shù)是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。操作的空間、操作者的衣著和手用于培養(yǎng)微生物的器皿、接種用具和培養(yǎng)基-----與消毒最本質(zhì)區(qū)別消毒無菌技術(shù)滅菌是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。注意：避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品接觸為了避免周圍環(huán)境微生物污染，操作應(yīng)在超凈工作臺并在酒精燈火焰旁進(jìn)行。生物消毒法是指利用生物或其代謝物除去環(huán)境中部分微生物的方法。(1)概念應(yīng)用場景：概念：應(yīng)用場景：概念：2無菌技術(shù)(2)常用的消毒和滅菌方法a.煮沸消毒法：b.巴氏消毒法：c.化學(xué)藥劑消毒法：d.紫外線消毒法：①

消毒方法：100℃煮沸5～6min，可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。62～65℃下消毒30min或80～90℃處理30s～1min，適合一些不耐高溫的液體，如牛奶?？梢詺⑺琅Ｄ讨械慕^大多數(shù)微生物，并且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分。用70%酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前可用紫外線照射30min。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果。2無菌技術(shù)原理：高溫蒸汽破壞蛋白質(zhì)、核酸等結(jié)構(gòu)使其變性。優(yōu)點：操作簡便，效果可靠，可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體?；颈３峙囵B(yǎng)基的營養(yǎng)成分不被破壞。對象：培養(yǎng)基等注：使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后才能丟棄，以免污染環(huán)境。a.濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋(2)常用的消毒和滅菌方法②

滅菌方法：高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)100kPa、121℃下維持15～30min。2無菌技術(shù)原理：使微生物細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥等。對象：耐高溫，需保持干燥的物品，適用于

玻璃器皿(如試管、培養(yǎng)皿、吸管、注射器)

金屬器具(如針頭、鑷子、剪刀等)的滅菌。干熱滅菌箱內(nèi)160～170℃下加熱2～3h。干熱滅菌箱b.干熱滅菌：(2)常用的消毒和滅菌方法②

滅菌方法：2無菌技術(shù)酒精燈火焰灼燒原理：使微生物燃燒對象：接種工具如接種環(huán)、接種針，以及接種過程中的試管口或瓶口等易被污染部位。c.灼燒滅菌：(2)常用的消毒和滅菌方法②

滅菌方法：2無菌技術(shù)類型適用范圍操作方法消毒滅菌較為溫和理化方法，殺死部分微生物。強(qiáng)烈的理化方法，殺死所有微生物。煮沸消毒家庭餐具等生活用品100℃煮沸5～6min巴氏消毒牛奶等不耐高溫的液體62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化學(xué)藥劑生物活體（皮膚、傷口）、水源等擦拭等,如用70%酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源紫外線紫外線照射30min灼燒滅菌接種的金屬工具、接種時用的試管口或瓶口等直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒干熱滅菌耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等物品放入干熱滅菌箱,160～170℃加熱2～3h濕熱滅菌培養(yǎng)基及多種器材和物品高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100kPa,溫度121℃,15～30min接種室、接種箱，超凈工作臺（迅速徹底）常用的消毒、滅菌方法2無菌技術(shù)項目消毒滅菌作用強(qiáng)度較為____

的物理、化學(xué)因素消滅微生物的數(shù)量物體表面或內(nèi)部

微生物物體內(nèi)外的

微生物能否消滅芽孢、孢子消滅

芽孢能消滅

芽孢和孢子適用對象操作空間、操作者的衣著和手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等常用方法溫和強(qiáng)烈一部分所有比較：消毒與滅菌部分全部煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法濕熱滅菌、干熱滅菌灼燒滅菌2無菌技術(shù)無菌技術(shù)適用對象常用方法消毒日常用品煮沸消毒牛奶等不耐高溫的液體巴氏消毒酒精擦拭雙手氯氣消毒水源化學(xué)藥物消毒超凈工作臺接種室，接種箱紫外線消毒滅菌培養(yǎng)基濕熱滅菌玻璃器皿（培養(yǎng)皿等）干熱滅菌接種工具（涂布器接種環(huán)接種針等）灼燒滅菌2無菌技術(shù)(2022湖北)滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正確的是(

)A.動、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B.微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性,不能用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌D3微生物的純培養(yǎng)在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。(1)相關(guān)概念培養(yǎng)物：純培養(yǎng)物：純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。(2)純培養(yǎng)步驟配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)等純培養(yǎng)物都是菌落。?液體培養(yǎng)基也可用于純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)配置培養(yǎng)基：稱取去皮馬鈴薯200

g切塊，加水1000mL，煮爛，用紗布討濾，加20g________，15~20g_______用蒸餾水定容至1000mL。①制備培養(yǎng)基葡萄糖瓊脂(2)方法步驟：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)配置培養(yǎng)基：稱取去皮馬鈴薯200

g切塊，加水1000mL，煮爛，用紗布討濾，加20g________，15~20g_______用蒸餾水定容至1000mL。①制備培養(yǎng)基葡萄糖瓊脂(2)方法步驟：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)滅菌：配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中進(jìn)行___________滅菌；培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。高壓蒸汽3微生物的純培養(yǎng)配置培養(yǎng)基：稱取去皮馬鈴薯200

g切塊，加水1000mL，煮爛，用紗布討濾，加20g________，15~20g_______用蒸餾水定容至1000mL。①制備培養(yǎng)基葡萄糖瓊脂(2)方法步驟：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)滅菌：配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中進(jìn)行___________滅菌；培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。高壓蒸汽倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至____0C，在____________附近倒平板50酒精燈火焰3微生物的純培養(yǎng)待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰旁附近倒平板。倒平板的具體操作步驟如下。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。不要完全打開，且在酒精燈旁邊操作，以免雜菌污染培養(yǎng)基既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；又可以避免培養(yǎng)基中的水分較快地蒸發(fā)。瓊脂是一種多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時高于50℃會燙手，低于50℃時，若不及時操作，瓊脂會凝固。倒平板注意事項：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)問題思考與分析：問1.怎么確定所倒平板未被雜菌污染？空白對照；將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h～24h，觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。2.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。防止空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生?！咎骄俊嵺`】酵母菌的純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)②

接種和分離單個細(xì)胞微生物群單個菌落連續(xù)劃線稀釋分散生長繁殖(2)方法步驟：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)②

接種和分離平板劃線法①灼燒接種環(huán)，直至接種環(huán)金屬絲燒紅⑥將皿蓋打開一條縫隙，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃3-5條平行線，蓋上皿蓋。⑤試管口通過火焰，并塞上棉塞

②在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔出酵母菌培養(yǎng)液試管的棉塞③試管口通過火焰④在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。(2)方法步驟：【探究·實踐】酵母菌的純培養(yǎng)3微生物的純培養(yǎng)12345【平板劃線法注意事項】1.接種環(huán)只蘸一次菌液，但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次；2.劃線首尾不能相接；3.每次劃線前灼燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌；4.劃線操作結(jié)束后，仍需灼燒接種環(huán)。連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法3微生物的純培養(yǎng)

為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？

在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？殺死接種環(huán)上原有微生物取菌種前灼燒：每次劃線前灼燒：殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端，從而使每次劃線時菌種數(shù)目逐漸減少，直至得到單個細(xì)胞接種結(jié)束后灼燒：殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者問問題思考與分析：3微生物的純培養(yǎng)完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48h。劃3個平板（重復(fù)實驗）1個不劃線（空白對照）作對照，該培養(yǎng)皿無菌落說明培養(yǎng)基沒有污染.用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落皿底上平板劃線法可以對菌種進(jìn)行分離，不能對培養(yǎng)液中菌種進(jìn)行計數(shù)③

酵母菌培養(yǎng)(2)方法步驟：練習(xí)(2023浙江1月)某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌,進(jìn)行了如下實驗:取泡菜汁樣品,劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是(

)A.培養(yǎng)基pH需偏堿性B.泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C.需在無氧條件下培養(yǎng)D.分離得到的微生物均為乳酸菌C平板劃線法本身有逐步稀釋分散的效果。(3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是________。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_________________________________________

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