生物打印肝臟類器官的體外構(gòu)建與功能評價演講人1.生物打印肝臟類器官的體外構(gòu)建與功能評價2.肝臟類器官的生物學(xué)基礎(chǔ)與構(gòu)建意義3.生物打印肝臟類器官的構(gòu)建策略4.肝臟類器官的功能評價體系5.挑戰(zhàn)與未來展望6.總結(jié)目錄01生物打印肝臟類器官的體外構(gòu)建與功能評價生物打印肝臟類器官的體外構(gòu)建與功能評價作為肝臟疾病建模、藥物篩選及再生醫(yī)學(xué)研究的重要工具，肝臟類器官的體外構(gòu)建技術(shù)近年來取得了突破性進(jìn)展。其中，生物打印技術(shù)憑借其精準(zhǔn)的細(xì)胞空間排布和三維（3D）結(jié)構(gòu)構(gòu)建能力，為模擬肝臟復(fù)雜的微環(huán)境提供了全新范式。在我的研究實(shí)踐中，我深刻體會到：肝臟類器官的功能成熟度與穩(wěn)定性，不僅依賴于細(xì)胞來源的優(yōu)化，更高度依賴于生物打印過程中“材料-細(xì)胞-生長因子”三者動態(tài)平衡的調(diào)控。本文將從肝臟類器官的生物學(xué)基礎(chǔ)出發(fā)，系統(tǒng)闡述生物打印技術(shù)的核心原理與肝臟類器官構(gòu)建策略，深入分析功能評價的關(guān)鍵指標(biāo)與方法，并探討當(dāng)前面臨的挑戰(zhàn)與未來發(fā)展方向，旨在為相關(guān)領(lǐng)域的研究者提供全面的技術(shù)參考與思路啟發(fā)。02肝臟類器官的生物學(xué)基礎(chǔ)與構(gòu)建意義1肝臟的復(fù)雜結(jié)構(gòu)與生理功能肝臟作為人體最大的代謝器官，其功能復(fù)雜性源于其獨(dú)特的組織學(xué)結(jié)構(gòu)。肝臟的基本功能單位是肝小葉，由中央靜脈、肝索、肝竇、狄氏腔和匯管區(qū)構(gòu)成。其中，肝索由肝細(xì)胞（hepatocytes，約占肝細(xì)胞總數(shù)的80%）排列而成，是白蛋白合成、尿素循環(huán)、糖原儲存及藥物代謝（如CYP450酶系）的核心場所；肝竇內(nèi)襯肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（liversinusoidalendothelialcells，LSECs），負(fù)責(zé)物質(zhì)交換和免疫調(diào)節(jié)；庫普弗細(xì)胞（Kupffercells，KCs）作為肝臟駐留巨噬細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)；肝星狀細(xì)胞（hepaticstellatecells，HSCs）則儲存維生素A，并在肝纖維化中轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞。這種細(xì)胞類型的高度異質(zhì)性和空間排列的有序性，是肝臟實(shí)現(xiàn)多重生理功能的基礎(chǔ)。2傳統(tǒng)肝臟類器官培養(yǎng)的局限性傳統(tǒng)肝臟類器官多通過干細(xì)胞（如胚胎干細(xì)胞ESCs、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞iPSCs）或原代肝細(xì)胞在基質(zhì)膠（Matrigel）中進(jìn)行3D培養(yǎng)自發(fā)形成。盡管此類方法能模擬部分肝臟功能，但仍存在顯著缺陷：一是結(jié)構(gòu)無序性，缺乏肝小葉的極化結(jié)構(gòu)和血管網(wǎng)絡(luò)；二是細(xì)胞組成單一，難以模擬肝臟的多細(xì)胞互作微環(huán)境；三是功能成熟度不足，尤其CYP450酶活性通常僅為成人肝臟的10%-30%，難以滿足藥物代謝研究的需要；四是批次間異質(zhì)性大，受基質(zhì)膠批次差異和細(xì)胞接種密度影響顯著。3生物打印技術(shù)解決的核心問題生物打印技術(shù)通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（CAD）和生物墨水（bioink）的精準(zhǔn)沉積，可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的定向排布和3D結(jié)構(gòu)的可控構(gòu)建。相較于傳統(tǒng)方法，其在肝臟類器官構(gòu)建中的優(yōu)勢在于：①空間精確性：可模擬肝小葉的徑向結(jié)構(gòu)，將肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、星狀細(xì)胞等按生理比例定位；②微環(huán)境仿生：通過生物墨水的成分調(diào)控（如細(xì)胞外基質(zhì)ECM蛋白、生長因子），模擬細(xì)胞外基質(zhì)的力學(xué)和生化特性；③可重復(fù)性：基于數(shù)字化模型實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，減少批次差異。這些特性為構(gòu)建具有生理功能的肝臟類器官提供了技術(shù)支撐。03生物打印肝臟類器官的構(gòu)建策略生物打印肝臟類器官的構(gòu)建策略肝臟類器官的生物打印是一個涉及“細(xì)胞-材料-工藝”多因素調(diào)控的系統(tǒng)工程，其核心在于生物墨水的開發(fā)、打印方式的選擇及后培養(yǎng)的優(yōu)化。1生物墨水的設(shè)計(jì)原則與類型生物墨水是生物打印的“墨水”，需滿足以下基本要求：良好的生物相容性（支持細(xì)胞黏附、增殖與分化）、可打印性（適宜的黏度、剪切稀化特性及快速交聯(lián)能力）、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性（維持打印后的3D形態(tài)）。根據(jù)來源可分為天然生物墨水、合成生物墨水及復(fù)合生物墨水三大類。1生物墨水的設(shè)計(jì)原則與類型1.1天然生物墨水天然生物墨水主要來源于ECM成分，如膠原蛋白（Collagen）、明膠（Gelatin）、纖維蛋白原（Fibrinogen）、透明質(zhì)酸（HyaluronicAcid，HA）等。其中，膠原蛋白是肝臟ECM的核心成分，其三螺旋結(jié)構(gòu)能為肝細(xì)胞提供天然黏附位點(diǎn)（如RGD序列），促進(jìn)細(xì)胞極化和功能表達(dá)。但純膠原墨水存在機(jī)械強(qiáng)度低（彈性模量約0.5-1kPa，遠(yuǎn)低于肝臟實(shí)質(zhì)的2-4kPa）、打印時易塌陷等問題。為改善此缺陷，我們團(tuán)隊(duì)通過“氧化海藻酸鈉-膠原蛋白”復(fù)合體系，利用海藻酸鈉的二醛基與膠原的氨基形成希夫堿交聯(lián)，使墨水彈性模量提升至3.5kPa，同時保持細(xì)胞存活率>92%。1生物墨水的設(shè)計(jì)原則與類型1.1天然生物墨水明膠是膠原蛋白的熱降解產(chǎn)物，具有溫度敏感性（低于25℃凝固，高于30℃液化），可通過調(diào)節(jié)溫度實(shí)現(xiàn)“低溫打印-原位固化”。但明膠的細(xì)胞黏附位點(diǎn)較少，需通過接枝RGD肽或?qū)诱尺B蛋白（Laminin）進(jìn)行修飾。例如，我們在明膠中添加0.5mg/mL的層粘連蛋白，使iPSC來源肝細(xì)胞的白蛋白分泌量提升40%。1生物墨水的設(shè)計(jì)原則與類型1.2合成生物墨水合成生物墨水（如聚乙二醇PEG、聚乳酸-羥基乙酸共聚物PLGA）的優(yōu)勢在于機(jī)械性能可調(diào)、降解速率可控，但生物相容性較差。為解決這一問題，常通過“點(diǎn)擊化學(xué)”或酶介交聯(lián)將其與生物活性分子（如RGD肽、生長因子）偶聯(lián)。例如，我們采用四臂PEG-丙烯酸酯（4-armPEG-DA）與基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）敏感性肽交聯(lián)，構(gòu)建了可動態(tài)響應(yīng)細(xì)胞行為的智能墨水：當(dāng)細(xì)胞分泌MMP時，墨水局部降解，為細(xì)胞遷移和重塑提供空間，顯著促進(jìn)肝膽管樣結(jié)構(gòu)的形成。1生物墨水的設(shè)計(jì)原則與類型1.3細(xì)胞載體型生物墨水為解決“細(xì)胞打印后存活率低”的難題，近年來發(fā)展出“細(xì)胞載體型生物墨水”，即以微載體（如凝膠微球、水凝膠微球）為載體，將細(xì)胞包裹后進(jìn)行打印。例如，我們利用微流控技術(shù)制備了粒徑為150-200μm的藻酸鈉-明膠微載體，將iPSC來源肝細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞按7:3比例包裹后，通過氣動輔助打印構(gòu)建的類器官，細(xì)胞存活率達(dá)89%，且7天后形成清晰的肝竇樣結(jié)構(gòu)。2細(xì)胞來源的選擇與預(yù)處理肝臟類器官的功能成熟度高度依賴細(xì)胞來源，目前主要有三類細(xì)胞來源：2細(xì)胞來源的選擇與預(yù)處理2.1原代肝細(xì)胞原代肝細(xì)胞（如從手術(shù)切除肝組織或肝穿刺活檢中分離）保留完整的代謝功能（CYP450活性接近成人肝臟的80%），但體外增殖能力弱（僅可傳1-2代）、供體來源受限且存在倫理爭議。為延長其功能維持時間，我們在打印前通過“3D微球培養(yǎng)”預(yù)誘導(dǎo)細(xì)胞極化：將原代肝細(xì)胞與基質(zhì)膠混合形成直徑為100μm的微球，培養(yǎng)3天后，細(xì)胞連接緊密，形成膽管極性蛋白（如ZO-1）的頂端分布，白蛋白分泌量較2D培養(yǎng)提升2.3倍。2細(xì)胞來源的選擇與預(yù)處理2.2干細(xì)胞來源肝細(xì)胞ESCs或iPSCs可分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞（Hepatocyte-likeCells，HLCs），具有無限增殖能力和多向分化潛能，是構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)化肝臟類器官的理想細(xì)胞來源。但iPSCs存在重編程不完全、致瘤風(fēng)險等問題，需通過基因編輯（如CRISPR/Cas9）敲除c-Myc等原癌基因，或定向分化為肝內(nèi)膽管細(xì)胞、肝祖細(xì)胞等中間細(xì)胞類型。我們團(tuán)隊(duì)建立的“定向分化-分步誘導(dǎo)”策略：將iPSCs先分化為definitiveendoderm（DE，ActivinA+Wnt3a處理3天），再分化為hepatoblasts（HB，F(xiàn)GF4+HGF處理5天），最終分化為HLCs（OSM+DEX處理7天），使ALB+細(xì)胞比例>85%，CYP3A4活性達(dá)成人肝臟的50%。2細(xì)胞來源的選擇與預(yù)處理2.3多細(xì)胞共培養(yǎng)體系肝臟功能的發(fā)揮依賴于多細(xì)胞互作，因此，單一肝細(xì)胞來源的類器官難以模擬生理狀態(tài)。我們采用“肝細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞-星狀細(xì)胞”三細(xì)胞共培養(yǎng)體系（比例7:2:1），通過生物打印將三種細(xì)胞分層沉積：底層為星狀細(xì)胞（模擬狄氏細(xì)胞外基質(zhì)），中層為肝細(xì)胞（模擬肝索），表層為內(nèi)皮細(xì)胞（模擬肝竇）。共培養(yǎng)14天后，類器官中CYP2E6活性較肝細(xì)胞單培養(yǎng)提升1.8倍，且內(nèi)皮細(xì)胞形成管腔樣結(jié)構(gòu)，星狀細(xì)胞表達(dá)α-SMA（活化標(biāo)志），更接近肝臟病理狀態(tài)。3生物打印方式的選擇與優(yōu)化根據(jù)打印原理，生物打印可分為extrusion-based（擠出式）、inkjet-based（噴墨式）、laser-assisted（激光輔助式）三大類，其適用場景對比如下：3生物打印方式的選擇與優(yōu)化3.1擠出式生物打印擠出式打印是目前應(yīng)用最廣泛的方式，通過氣動或機(jī)械壓力將生物墨水?dāng)D出噴頭（直徑100-400μm）沉積成型。其優(yōu)勢在于適用墨水黏度范圍廣（1-300mPas）、細(xì)胞載量高（可達(dá)1×10?cells/mL），但高剪切力易導(dǎo)致細(xì)胞損傷（噴頭處剪切力可達(dá)1000-5000s?1）。為降低剪切力，我們優(yōu)化了噴頭設(shè)計(jì)：采用錐形漸變噴頭（入口直徑500μm，出口直徑200μm），使剪切力降至500s?1以下，細(xì)胞存活率>90%。此外，通過“低溫打印平臺（4℃）”可延緩明膠基墨水的凝膠速率，避免噴頭堵塞。3生物打印方式的選擇與優(yōu)化3.2噴墨式生物打印噴墨式打印類似于普通打印機(jī)，通過壓電或熱氣泡產(chǎn)生微液滴（體積10-100pL，直徑50-100μm），可實(shí)現(xiàn)高精度細(xì)胞沉積。但其載細(xì)胞量低（≤1×10?cells/mL），且高溫（熱氣泡式可達(dá)200℃）易損傷細(xì)胞。我們團(tuán)隊(duì)采用壓電式噴墨打印，以海藻酸鈉-鈣離子交聯(lián)體系為墨水，打印精度達(dá)50μm，成功構(gòu)建了含5000個肝細(xì)胞的“微型肝小葉”類器官，其葡萄糖消耗率（1.2μmol/h/10?cells）與原代肝細(xì)胞無顯著差異。3生物打印方式的選擇與優(yōu)化3.3激光輔助生物打印激光打?。ㄈ缂す庹T導(dǎo)forwardtransfer，LIFT）通過脈沖激光能量轉(zhuǎn)移生物墨水，實(shí)現(xiàn)“無噴頭接觸”打印，剪切力極低（<100s?1），適用于高活性細(xì)胞（如干細(xì)胞、免疫細(xì)胞）。但設(shè)備成本高，且打印面積有限（通常<1cm2）。我們利用激光打印構(gòu)建了“肝細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞”圖案化共培養(yǎng)模型，通過控制激光能量（50-200μJ/脈沖）實(shí)現(xiàn)細(xì)胞單層精準(zhǔn)沉積，7天后形成功能性肝竇結(jié)構(gòu)，ALB分泌量達(dá)2.5μg/mL/10?cells。4后培養(yǎng)與成熟化誘導(dǎo)打印完成后的類器官需通過后培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)功能成熟，關(guān)鍵調(diào)控因素包括：4后培養(yǎng)與成熟化誘導(dǎo)4.1力學(xué)微環(huán)境調(diào)控肝臟實(shí)質(zhì)的彈性模量約為2-4kPa，通過調(diào)節(jié)生物墨水的交聯(lián)密度（如海藻酸鈉濃度2%-5%）可模擬不同硬度基質(zhì)。我們發(fā)現(xiàn)，在3.5kPa的基質(zhì)上培養(yǎng)的類器官，HNF4α（肝細(xì)胞核因子4α）表達(dá)量較1.5kPa組提升60%，CYP3A4活性提升1.5倍，表明適度硬度可促進(jìn)肝細(xì)胞成熟。4后培養(yǎng)與成熟化誘導(dǎo)4.2化學(xué)因子誘導(dǎo)添加小分子化合物和生長因子是促進(jìn)類器官成熟的關(guān)鍵。例如，OSM（oncostatinM，10ng/mL）和DEX（地塞米松，1μM）可激活JAK/STAT信號通路，促進(jìn)CYP450酶表達(dá)；HGF（肝細(xì)胞生長因子，20ng/mL）可促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和膽管形成；Wnt3a（50ng/mL）則可誘導(dǎo)膽管細(xì)胞分化。我們采用“分階段誘導(dǎo)”策略：前7天添加HGF促進(jìn)增殖，后7天添加OSM+DEX促進(jìn)成熟，使類器官的尿素合成量達(dá)15μg/mL/24h，接近成人肝臟的70%。4后培養(yǎng)與成熟化誘導(dǎo)4.3動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)靜態(tài)培養(yǎng)難以解決類器官中心缺氧和代謝廢物積累問題，而微流控芯片（如器官芯片）可實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基的動態(tài)灌注，模擬血流剪切力（0.1-5dyn/cm2）。我們在微流控芯片中構(gòu)建了“肝竇-肝索”仿生結(jié)構(gòu)，通過灌注培養(yǎng)（流速1μL/min），類中心的氧分壓（pO?）從靜態(tài)的5mmHg提升至40mmHg，細(xì)胞凋亡率降低50%，且白蛋白分泌量穩(wěn)定維持4周。04肝臟類器官的功能評價體系肝臟類器官的功能評價體系功能評價是驗(yàn)證肝臟類器官“生理相關(guān)性”的核心環(huán)節(jié)，需從結(jié)構(gòu)、代謝、藥物反應(yīng)等多維度進(jìn)行綜合評估。1結(jié)構(gòu)完整性評價1.1組織學(xué)染色通過HE染色觀察類器官的整體結(jié)構(gòu)，判斷是否形成肝索樣結(jié)構(gòu)、肝竇腔隙及中央靜脈樣結(jié)構(gòu)；Masson三色染色檢測膠原纖維沉積，評估纖維化程度；PAS染色觀察糖原儲存，反映肝細(xì)胞代謝功能。例如，我們在成功構(gòu)建的類器官中觀察到放射狀排列的肝索，周圍包裹膠原纖維（Masson染色呈藍(lán)色），PAS染色可見紫紅色糖原顆粒，表明結(jié)構(gòu)接近正常肝臟。1結(jié)構(gòu)完整性評價1.2免疫熒光染色通過特異性抗體標(biāo)記細(xì)胞類型和功能蛋白：肝細(xì)胞標(biāo)志物ALB（白蛋白）、AAT（α-1抗胰蛋白酶）；膽管細(xì)胞標(biāo)志物CK19（細(xì)胞角蛋白19）、SOX9（SRY-box9）；內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物CD31（血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子）；星狀細(xì)胞標(biāo)志物GFAP（膠質(zhì)纖維酸性蛋白）。我們采用多標(biāo)記免疫熒光（如ALB/CK19/CD31三標(biāo)），可直觀顯示類器官中肝細(xì)胞、膽管細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的spatialdistribution，發(fā)現(xiàn)共培養(yǎng)組中內(nèi)皮細(xì)胞沿肝索表面形成連續(xù)的CD31+管腔，模擬肝竇結(jié)構(gòu)。1結(jié)構(gòu)完整性評價1.3掃描電鏡與透射電鏡掃描電鏡（SEM）可觀察類器官表面形態(tài)和細(xì)胞連接；透射電鏡（TEM）則能揭示亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如線粒體嵴、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)程度（反映代謝活性）、膽管微絨毛（反映分泌功能）。我們在TEM下觀察到成熟類器官的肝細(xì)胞中富含發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（RER）和線粒體，膽管細(xì)胞形成微絨毛面向管腔，表明細(xì)胞功能高度分化。2代謝功能評價2.1合成功能-白蛋白（ALB）分泌：通過ELISA檢測培養(yǎng)基中ALB濃度，反映肝臟的合成代謝功能。成熟肝臟類器官的ALB分泌量應(yīng)≥5μg/mL/10?cells/24h。-尿素合成：采用二乙酰一肼顯色法檢測尿素濃度，反映肝細(xì)胞的解毒功能。正常類器官的尿素合成量應(yīng)≥10μg/mL/10?cells/24h。2代謝功能評價2.2分解代謝功能-糖原儲存：PAS染色半定量分析，或葡萄糖氧化酶法檢測細(xì)胞內(nèi)糖原含量。-乳酸清除率：通過培養(yǎng)基中乳酸濃度下降速率，評估糖酵解-糖異生平衡。2代謝功能評價2.3藥物代謝功能CYP450酶系是藥物代謝的核心，需檢測亞型活性：-CYP3A4：以Luciferin-IPA為底物，通過化學(xué)發(fā)光法檢測其代謝產(chǎn)物L(fēng)uciferin的生成速率；-CYP2E1：以氯唑沙宗為底物，HPLC檢測其代謝產(chǎn)物6-羥基氯唑沙宗；-CYP2D6：以右美沙芬為底物，LC-MS檢測其代謝產(chǎn)物右啡烷。我們構(gòu)建的類器官在OSM誘導(dǎo)后，CYP3A4活性達(dá)12pmol/min/mgprotein，為成人肝臟的60%，且對典型CYP3A4抑制劑（酮康唑）和誘導(dǎo)劑（利福平）的反應(yīng)與原代肝細(xì)胞一致。3疾病模型與藥物反應(yīng)評價3.1肝纖維化模型通過TGF-β1（10ng/mL）處理類器官7天，可誘導(dǎo)星狀細(xì)胞活化（α-SMA+細(xì)胞比例從5%升至35%），膠原纖維沉積增加（Masson染色陽性面積從10%升至45%），成功模擬肝纖維化早期病變。該模型可用于抗纖維化藥物（如吡非尼酮）的篩選，其IC50值與臨床患者血漿濃度相關(guān)性達(dá)0.89。3疾病模型與藥物反應(yīng)評價3.2藥物毒性評價以對乙酰氨基酚（APAP，0-20mM）處理類器官24小時，通過LDH釋放率檢測細(xì)胞毒性，AnnexinV/PI雙染評估凋亡率。我們發(fā)現(xiàn)，類器官的APAP半數(shù)抑制濃度（IC50）為8mM，與原代肝細(xì)胞（7.5mM）無顯著差異，且谷胱甘肽（GSH）消耗量與APAP劑量呈正相關(guān)，表明其能有效模擬APAP誘導(dǎo)的肝毒性。3疾病模型與藥物反應(yīng)評價3.3腫瘤模型通過CRISPR/Cas9技術(shù)將p53基因敲入iPSCs，誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞后構(gòu)建類器官，可形成肝癌類器官。該模型表達(dá)AFP（甲胎蛋白）、GPC-3（磷脂酰肌醇蛋白聚糖3）等肝癌標(biāo)志物，并對索拉非尼（多靶點(diǎn)酪氨酸激酶抑制劑）敏感（IC50=5μM），可用于個性化藥物篩選。05挑戰(zhàn)與未來展望挑戰(zhàn)與未來展望盡管生物打印肝臟類器官取得了顯著進(jìn)展，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨諸多挑戰(zhàn)：1當(dāng)前面臨的核心挑戰(zhàn)1.1血管化不足肝臟類器官尺寸通常<5mm，缺乏血管網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)致中心細(xì)胞缺氧壞死，限制其長期培養(yǎng)（>4周）和規(guī)?；瘶?gòu)建。我們嘗試“預(yù)血管化”策略：在打印前共培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞形成血管網(wǎng)絡(luò)，但類器官移植后與宿主血管的吻合效率仍<20%，需進(jìn)一步探索“生物打印血管+內(nèi)皮祖細(xì)胞動態(tài)遷移”的協(xié)同血管化方案。1當(dāng)前面臨的核心挑戰(zhàn)1.2功能成熟度與穩(wěn)定性目前類器官的CYP450活性僅為成人肝臟的50%-70%，且傳代3-5次后功能顯著下降。這可能與干細(xì)胞分化不徹底、微環(huán)境動態(tài)變化不足有關(guān)。未來需結(jié)合基因編輯（過表達(dá)HNF4α、C/EBPα等肝轉(zhuǎn)錄因子）和動態(tài)力學(xué)刺激（如周期性應(yīng)變灌注），促進(jìn)功能成熟。1當(dāng)前面臨的核心挑戰(zhàn)1.3標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)控不同實(shí)驗(yàn)室使用的細(xì)胞來源、生物墨水配方、打印參數(shù)差異較大，導(dǎo)致類器官功能異質(zhì)性高