ICS11.120.01

CCSC00

14

山西省地方標準

DB14/T3468—2025

制藥企業(yè)質量控制微生物實驗室消毒滅菌

技術要求

2025-07-10發(fā)布2025-10-10實施

山西省市場監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB14/T3468—2025

目次

前言..................................................................................II

1范圍................................................................................1

2規(guī)范性引用文件......................................................................1

3術語和定義..........................................................................1

4基本要求............................................................................1

5消毒................................................................................2

6滅菌................................................................................2

7含菌溢撒物處理......................................................................3

8記錄................................................................................3

附錄A（資料性）微生物實驗室常用消毒劑................................................4

附錄B（資料性）微生物實驗室常用消毒滅菌方法..........................................5

參考文獻...............................................................................7

I

DB14/T3468—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由山西省藥品監(jiān)督管理局提出、組織實施和監(jiān)督實施。

山西省市場監(jiān)督管理局對本文件的組織實施情況進行監(jiān)督檢查。

本文件由山西省藥品質量管理標準化技術委員會（SXS/TC32）歸口。

本文件起草單位：山西省檢驗檢測中心（山西省標準計量技術研究院）、山西錦爍生物醫(yī)藥科技有

限公司。

本文件主要起草人：曲萍、張倩、劉建軍、崔小芳、張璇、甘雨鑫、成曉英、李鵬飛、田小鵬、雷

嵐芬、武瑞杰、鄧自新、羅晉萍、王春芳。

II

DB14/T3468—2025

制藥企業(yè)質量控制微生物實驗室消毒滅菌技術要求

1范圍

本文件規(guī)定了制藥企業(yè)微生物實驗室的環(huán)境、儀器設備、實驗器皿、培養(yǎng)基、個人防護用品及污染

廢棄物等的消毒滅菌要求。

本文件適用于制藥企業(yè)微生物實驗室的消毒滅菌。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

中華人民共和國藥典

藥品生產質量管理規(guī)范

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

消毒

用物理或化學方法殺滅或清除物體表面或空氣中的微生物。

3.2

消毒劑

應用在物體表面或空氣中殺滅或清除微生物的化學試劑。

3.3

滅菌

用物理或化學方法將物品中活的微生物殺滅或除去，使其殘存活微生物的概率下降至預期的無菌保

證水平。

3.4

滅菌劑

殺滅或除去物品中活的微生物使其達到無菌要求的化學試劑。

4基本要求

4.1微生物檢驗應在符合《中華人民共和國藥典》要求的環(huán)境中進行。微生物實驗室的布局應充分考

慮實驗設備安裝、良好微生物實驗室操作規(guī)范和實驗室安全的要求。

4.2微生物實驗室應包括潔凈區(qū)和生物安全控制區(qū)，生物安全控制區(qū)應配備滿足要求的生物安全柜。

潔凈區(qū)按照《中華人民共和國藥典》要求進行日常監(jiān)測和定期監(jiān)測。潔凈區(qū)的空氣過濾系統應定期維護

和更換，紫外線燈應根據紫外線強度檢測結果或其使用壽命參數及時更換燈管，做好相關記錄。

1

DB14/T3468—2025

4.3微生物實驗室應對消毒滅菌程序進行驗證并制定標準操作規(guī)程，常用消毒劑和消毒滅菌方法見附

錄A和附錄B。微生物實驗室應定期監(jiān)測消毒滅菌效果。

4.4微生物實驗室配置的儀器設備應能滿足微生物檢驗工作的需要。關鍵儀器設備應定期進行檢定校

準；高壓蒸汽滅菌器按國家有關規(guī)定管理并定期檢驗，陽性高壓蒸汽滅菌器應獨立配備；儀器設備脫離

實驗室或檢修后，恢復使用前應重新確認其性能符合要求。

4.5關鍵儀器設備的使用和日常監(jiān)控應有記錄。應對培養(yǎng)箱、冰箱、超低溫冰箱、高壓蒸汽滅菌器的

關鍵參數(如溫度、壓力）進行連續(xù)觀測和記錄；應定期對超凈工作臺、生物安全柜進行監(jiān)測。

4.6應定期對儀器設備進行維護和性能驗證，并記錄。容易污染微生物的儀器設備應定期清潔和消毒；

超凈工作臺單次使用最高時長應經過驗證；滅菌設備應定期使用生物指示劑檢查滅菌效果，指示劑放在

不易達到滅菌的部位。

4.7從事微生物檢驗工作的人員（以下統稱檢驗人員）應具備微生物學或相近專業(yè)知識的教育背景。

檢驗人員應經過相關培訓，培訓內容包括實驗技術、儀器操作、質量管理、生物安全和衛(wèi)生等。

4.8非簡單壓力容器操作人員應持有特種設備作業(yè)人員證書。

4.9應對檢驗人員進行健康管理，并建立健康檔案。檢驗人員上崗前應進行健康檢查且以后每年至少

進行一次健康檢查。

4.10微生物實驗室僅限經批準的人員進入。任何進入潔凈區(qū)的人員均應按照規(guī)定更衣，無菌衣的選材、

式樣及穿戴方式應符合《藥品生產質量管理規(guī)范》的要求。進入潔凈區(qū)時不應化妝和佩帶飾物。

5消毒

5.1超凈工作臺

5.1.1實驗開始前，開啟超凈工作臺紫外線燈和風機進行自凈。

5.1.2實驗結束后，用適宜消毒劑擦拭臺面及可能污染的死角，紫外線照射。

5.2潔凈區(qū)

5.2.1實驗開始前，開啟空氣凈化系統進行自凈。

5.2.2實驗結束后，用適宜消毒劑擦拭臺面及地面，保持空氣凈化系統繼續(xù)運行進行自凈。

5.2.3潔凈區(qū)應定期進行全面消毒。

5.2.4如果潔凈區(qū)被污染或浮游菌、沉降菌、表面微生物的監(jiān)測結果超標，應立即進行全面消毒。

5.3培養(yǎng)箱

5.3.1應定期對培養(yǎng)箱進行消毒，消毒周期視使用頻率而定。

5.3.2應選用對培養(yǎng)箱內壁無腐蝕且易揮發(fā)無殘留的消毒劑。

5.3.3使用適宜消毒劑全面擦拭培養(yǎng)箱內壁，通風使消毒劑揮散。

5.3.4配有紫外線燈或具有高溫消毒功能的培養(yǎng)箱，可定期進行紫外線消毒或高溫消毒。

5.4樣品

用適宜消毒劑對直接接觸樣品的包裝表面進行消毒。

6滅菌

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DB14/T3468—2025

6.1無菌檢查用隔離系統

6.1.1無菌檢查用隔離系統（以下統稱隔離系統）采用汽相滅菌法對內部環(huán)境進行滅菌。

6.1.2隔離系統每次實驗前后應進行清潔。清潔劑應具有良好清潔效果，不腐蝕材質，殘留對無菌檢

查無不利影響。清潔工具采用無塵材料。清潔程度以達到肉眼可見的干凈、干燥為宜。

6.1.3滅菌程序開始前，應對進入隔離系統艙內的樣品及其他物品表面進行預清潔。

6.1.4滅菌劑通過有效過濾后進入隔離系統內，滅菌結束后對滅菌劑進行排空，監(jiān)測艙內滅菌劑的濃

度，其殘留量不應影響無菌檢查的結果。

6.2實驗物品

6.2.1實驗物品常用的滅菌方法為濕熱滅菌法、干熱滅菌法、灼燒滅菌法和過濾除菌法，已滅菌物品

應有明顯的滅菌標識。

6.2.2培養(yǎng)基、試劑、試液等均應采用經驗證的配制和滅菌程序滅菌。熱不穩(wěn)定組分應過濾除菌后加

入已滅菌的培養(yǎng)基中，液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后加入，固體培養(yǎng)基冷卻至45℃～50℃時加入，邊加邊

振搖使混合均勻。

6.2.3培養(yǎng)基配制后應及時滅菌。培養(yǎng)基體積不宜超過容器容積的2/3。培養(yǎng)基滅菌完成后及時移出滅

菌器，涼至室溫后在已驗證的條件下貯藏，遵循先入先出原則。

6.2.4反復使用的無菌衣、口罩、帽子等應定期清洗、滅菌并烘干。

6.2.5玻璃器皿、陶瓷器皿可采用濕熱滅菌法或干熱滅菌法，濕熱滅菌后應烘干。帶有膠塞的玻璃器

皿采用濕熱滅菌法。

6.2.6金屬接種環(huán)（針）灼燒滅菌后應先冷卻再接種。在生物安全柜內應使用專用滅菌設備（如紅外

線接種環(huán)滅菌器）對金屬接種環(huán)（針）進行滅菌，或使用市售已滅菌的一次性接種環(huán)（針）。

6.2.7菌種及帶有工作菌液的物品均應進行高壓蒸汽滅菌（121℃，30min）。

7含菌溢撒物處理

7.1含菌液體溢撒時，應立即覆蓋含適宜消毒劑的紗布（或紙巾等），作用經驗證的時間后，小心將

其收集到專用消毒袋（如一次性醫(yī)療廢物包裝袋）中，破碎的玻璃或銳器夾至耐扎容器中，用含消毒劑

的新紗布（或紙巾等）將溢撒區(qū)域擦凈，最后將收集物高壓蒸汽滅菌（121℃，30min）處理。

7.2工作衣帽等受到菌液污染時，應馬上脫去，放入專用消毒袋中系緊，高壓蒸汽滅菌（121℃，30min）

處理后洗滌。

7.3溢撒物中含有霉菌，擦拭溢撒液后，應對整個空間進行消毒處理。

8記錄

消毒滅菌記錄應包括但不限于以下內容：

——消毒滅菌物品名稱；

——消毒滅菌日期；

——消毒滅菌人員；

——消毒滅菌方法；

——消毒滅菌具體參數，包括消毒劑名稱、消毒劑配制方法、滅菌壓力、滅菌溫度、滅菌時間、

滅菌指示劑狀態(tài)等。

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A

A

附錄A

（資料性）

微生物實驗室常用消毒劑

A.1常用消毒劑：

A.1.1氧化劑：如過氧化氫、過氧乙酸、次氯酸鈉等。

A.1.2醇類：如異丙醇、乙醇等。

A.1.3酚類：如苯酚等。

A.1.4表面活性劑：如苯扎氯銨、苯扎溴銨、芐索氯銨、鹽酸烷基二氨基乙基甘氨酸等。

A.1.5雙胍類：如葡萄糖酸氯己定等。

以上各類消毒劑的典型濃度見《中華人民共和國藥典》，其他消毒劑或濃度，經確認安全有效也可

使用。

A.2消毒劑生產規(guī)范、原料清單及禁限用物質、衛(wèi)生要求、腐蝕性評價、安全性毒理學評價等均應符

合現行國家標準。

A.3當使用消毒劑控制微生物時，應根據環(huán)境和微生物等實際情況開展試驗，進行效力評估，試驗方

法按《中華人民共和國藥典》執(zhí)行，并制定消毒操作規(guī)范。

A.4應定期更換消毒劑的品種以防止產生耐受菌株，一般一個月更換一次。

A.5對所用消毒劑的微生物污染狀況應進行監(jiān)測，并在確認的有效期內使用。

A.6A級和B級潔凈區(qū)應使用無菌的或經無菌處理的消毒劑。

A.7濃縮型消毒劑可用適宜的稀釋劑稀釋至實際使用濃度，稀釋后的消毒劑效期及貯藏條件應驗證。

A.8使用消毒劑時還應考慮以下內容：

a)消毒劑的殺菌譜；

b)材料對消毒劑的兼容性；

c)有機物存在時對消毒效力的影響；

d)消毒劑的揮發(fā)；

e)消毒劑對人體（安全）的影響；

f)廢棄物處理便易性（中和、滅活）；

g)廢棄物對環(huán)境的影響等。

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B

B

附錄B

（資料性）

微生物實驗室常用消毒滅菌方法

B.1微生物實驗室常用消毒滅菌方法見表B.1。

表B.1微生物實驗室常用消毒滅菌方法

消毒滅菌方法適用范圍使用方法注意事項

a)應保持紫外線燈表面清潔，每周用75%乙醇布巾

擦拭一次，燈管表面有灰塵、油污等時，應隨時

擦拭；

b)應使待消毒物品表面充分暴露于紫外線；

c)消毒紙張、織物等粗糙表面時，應適當延長照

紫外線燈消毒物體表面消毒。近距離照射。

射時間，且兩面均應受到照射；

d)紫外線光源不應直接照射到人；

e)定期測定紫外線燈的紫外線強度，一旦降到要

求的強度以下或其累積使用時間超過有效壽命

時，應及時更換燈管。

擦拭、噴灑或

物體表面消毒。擦拭、噴灑或浸泡。消毒劑的濃度和消毒時間應進行驗證。

浸泡消毒

a)空氣消毒應在封閉空間、室內無人狀態(tài)下進行；

b)消毒結束后，密閉室內臭氧氣體殘留量應≤

0.16mg/m3；

使用臭氧空氣消毒器按照

c)臭氧為強氧化劑，使用時對多種物品有損壞，

臭氧消毒室內空氣消毒。經過驗證的消毒程序進行

包括使銅片出現綠色銹斑，橡膠老化、變色、彈

消毒。

性降低，織物漂白褪色等；

d)多種因素可影響臭氧的殺菌作用，包括溫度、

相對濕度、有機物、pH等，使用時應加以控制。

薰蒸或噴霧消a)消毒時室內不可有人；

室內空氣消毒。用消毒劑薰蒸或噴霧消毒。

毒b)甲醛因有致癌作用不宜用于空氣消毒。

使用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌時應注意：

a)高壓蒸汽滅菌器的具體操作步驟、常規(guī)保養(yǎng)和

a)使用高壓蒸汽滅菌器進檢查措施應嚴格按照要求執(zhí)行；

耐高溫高濕物品行滅菌，滅菌條件視待滅菌b)包裝材料應允許物品內部空氣的排出和蒸汽的

的滅菌，如容器、物品的要求而定，最常使用透入；

濕熱滅菌法培養(yǎng)基、試劑試的滅菌條件為115℃，c)待滅菌包裝與容器不宜過大、過緊，每個外包

液、膠塞、無菌衣、20min；121℃，15min；裝上均應貼化學指示物，滅菌包每大包內和難滅

菌種等。121℃，30min；菌部位的包內放置化學指示物，滅菌完成后觀察

b)加熱煮沸。指示物的變色情況，未達到或有疑點者，不應作

為無菌包裝使用；

d)滅菌物品不宜過多且應留有空隙；

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DB14/T3468—2025

e)液體體積不宜超過容器容積的三分之二；

f)不能用于凡士林等油類和粉劑的滅菌。

使用干熱滅菌器進行滅菌時應注意：

a)滅菌時滅菌物品不應與滅菌器內腔底部及四壁

接觸，滅菌后溫度降至40℃以下再開啟滅菌器柜

門，防止炸裂；

耐熱、不耐濕、蒸a)使用干熱滅菌器進行滅

b)滅菌物品包裝不宜過大，體積不宜超過

汽或氣體不能穿菌，滅菌參數一般為：

10cm×10cm×20cm，油劑、粉劑的厚度不宜超過

透物品的滅菌，如160℃～170℃，120min；

0.6cm；

干熱滅菌法玻璃器具、金屬容170℃～180℃，60min；

c)裝載高度不應超過滅菌器內腔高度的三分之

器、陶瓷制品、纖b)用紅外線接種環(huán)滅菌器

二，物品間不宜堆放過密，應留有一定的空隙；

維制品、液狀石蠟對接種環(huán)、接種針等進行滅

d)設置滅菌溫度應充分考慮滅菌物品對溫度的耐

等。菌。

受力，紙張和棉織物的滅菌溫度不應高于170℃，

否則容易焦化；

e)待滅菌物品滅菌前應充分洗凈，防止造成滅菌

失敗或污物炭化。

a)待滅菌物品應進行清潔并保持干燥；

b)滅菌時應最大限度地暴露表面，確保滅菌效果；

c)可使用某種合適的、高抗性的生物指示劑來驗

通過分布在空氣中的滅菌證，生物指示劑應重點放在滅菌劑濃度較低的地

密閉空間的內表劑殺滅微生物，常用的滅菌方，隔離系統內物品和設備滿載時應用更多的生

汽相滅菌法

面滅菌。劑包括過氧化氫、過氧乙酸物指示劑進行試驗；

等。d)在表面滅菌完成后，應通入潔凈氣流將滅菌劑

排出，艙內滅菌劑殘留量不應影響實驗結果；

e)滅菌劑在排出過程中可采用催化分解裝置，注

意評估滅菌劑排出過程的安全性。

a)酒精燈中酒精裝量不應超過三分之二；