微生物檢驗操作規(guī)程模板設(shè)計一、概述

微生物檢驗操作規(guī)程模板設(shè)計旨在規(guī)范微生物檢驗流程，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。本模板涵蓋了檢驗前的準(zhǔn)備、樣本處理、培養(yǎng)基制備、接種操作、培養(yǎng)觀察、結(jié)果判讀及記錄等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，適用于各類微生物實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理。

二、檢驗前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境要求

1.檢驗環(huán)境應(yīng)保持潔凈，溫濕度控制在20℃-25℃、濕度50%-60%。

2.操作臺面需定期消毒，使用75%酒精或含氯消毒劑擦拭。

3.空氣流動應(yīng)單向，避免交叉污染。

（二）儀器與耗材準(zhǔn)備

1.主要儀器：高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、顯微鏡、天平、移液器等。

2.耗材：無菌培養(yǎng)基（如PCA、MAC瓊脂）、試管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)/針、無菌生理鹽水等。

3.所有耗材需經(jīng)滅菌處理，如高壓滅菌（121℃，15min）。

（三）人員準(zhǔn)備

1.操作人員需佩戴無菌手套、口罩、實驗服，必要時佩戴護(hù)目鏡。

2.嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范，操作前使用75%酒精手消毒液清潔雙手。

三、樣本處理

（一）樣本采集

1.根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇合適的采樣工具（如棉簽、拭子、無菌容器）。

2.避免污染，采樣部位應(yīng)清潔、無損傷。

3.樣本采集后應(yīng)立即放入無菌容器中。

（二）樣本處理方法

1.液體樣本：取1mL-5mL樣本加入9mL無菌生理鹽水中稀釋。

(1)直接接種：將樣本直接劃線接種于瓊脂平板。

(2)稀釋接種：梯度稀釋后涂布平板，提高分離效果。

2.固體樣本：

(1)表面擦拭：用無菌棉簽擦拭樣本表面后接種。

(2)組織樣本：剪取3mm×3mm組織塊，置于無菌生理鹽水中勻漿。

四、培養(yǎng)基制備與滅菌

（一）培養(yǎng)基配方

1.常用培養(yǎng)基：

-營養(yǎng)瓊脂（PCA）：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。

-麥康凱瓊脂（MAC）：乳糖10g、蔗糖10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。

2.配方調(diào)整：根據(jù)檢驗需求添加選擇性抑制劑（如伊紅美藍(lán)、膽鹽）。

（二）制備步驟

1.稱量：按配方稱量各成分，溶解于蒸餾水中。

2.分裝：將培養(yǎng)基分裝至試管或培養(yǎng)皿中，避免溢出。

3.滅菌：高壓滅菌（121℃，15min-20min），注意試管傾斜放置防結(jié)晶。

五、接種與培養(yǎng)

（一）接種操作

1.無菌操作：打開培養(yǎng)皿/試管蓋時，動作輕柔，避免暴露時間過長。

2.接種方法：

-線狀接種：用接種環(huán)沿平板表面畫線，每條線間隔≥5cm。

-點(diǎn)狀接種：用接種環(huán)蘸取樣本，在平板表面輕輕觸碰。

3.接種后立即蓋上皿蓋，避免污染。

（二）培養(yǎng)條件

1.溫度：需氧菌37℃培養(yǎng)18-24h，厭氧菌需厭氧環(huán)境（如CO2培養(yǎng)箱）。

2.濕度：保持培養(yǎng)基表面濕潤，避免水分蒸發(fā)。

3.培養(yǎng)頻率：定期檢查，典型菌落24-48h可見。

六、結(jié)果判讀與記錄

（一）菌落形態(tài)觀察

1.記錄菌落特征：大小、顏色、形狀、邊緣、透明度等。

2.異常菌落剔除：如霉斑、衛(wèi)星現(xiàn)象等非目標(biāo)菌落。

（二）生化鑒定（可選）

1.編號：挑取典型菌落，編號備用。

2.鑒定項目：革蘭染色、氧化酶試驗、糖發(fā)酵試驗等。

（三）數(shù)據(jù)記錄

1.建立檢驗記錄表，包含樣本編號、檢驗日期、菌落特征、鑒定結(jié)果等。

2.電子記錄需備份，紙質(zhì)記錄存檔至少3年。

七、注意事項

1.嚴(yán)格區(qū)分無菌區(qū)域與非無菌區(qū)域，避免交叉污染。

2.實驗結(jié)束后，所有廢棄物需高壓滅菌后處理。

3.定期校準(zhǔn)儀器，確保檢驗準(zhǔn)確性。

一、概述

微生物檢驗操作規(guī)程模板設(shè)計旨在規(guī)范微生物檢驗流程，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。本模板涵蓋了檢驗前的準(zhǔn)備、樣本處理、培養(yǎng)基制備、接種操作、培養(yǎng)觀察、結(jié)果判讀及記錄等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，適用于各類微生物實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理。通過標(biāo)準(zhǔn)化操作，可降低人為誤差，提高檢驗效率，并為后續(xù)的微生物學(xué)研究或產(chǎn)品控制提供可靠依據(jù)。本模板強(qiáng)調(diào)無菌操作、質(zhì)量控制及數(shù)據(jù)完整性，是實驗室日常工作的基礎(chǔ)性文件。

二、檢驗前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境要求

1.檢驗環(huán)境應(yīng)保持潔凈，溫濕度控制在20℃-25℃、濕度50%-60%。過高或過低的溫濕度會影響微生物生長及培養(yǎng)基性能。

2.操作臺面需定期消毒，使用75%酒精或含氯消毒劑擦拭。消毒后需等待30分鐘以上，確保消毒劑揮發(fā)。

3.空氣流動應(yīng)單向，避免交叉污染。潔凈實驗室應(yīng)配備超凈工作臺或生物安全柜，操作前需開啟30分鐘以上。

（二）儀器與耗材準(zhǔn)備

1.主要儀器：

-高壓滅菌鍋：用于滅菌培養(yǎng)基、器械等，需定期校準(zhǔn)壓力和時間參數(shù)。

-培養(yǎng)箱：需配備溫度控制器，定期檢定溫度均勻性。

-顯微鏡：用于菌落形態(tài)觀察和革蘭染色后菌體觀察，需清潔物鏡和目鏡。

-天平：用于精確稱量培養(yǎng)基成分，精度需達(dá)0.1g。

-移液器：用于精確移取液體，需定期校準(zhǔn)吸量和回吸穩(wěn)定性。

2.耗材：

-無菌培養(yǎng)基：如PCA（營養(yǎng)瓊脂）、MAC（麥康凱瓊脂）、血瓊脂等，需檢查生產(chǎn)日期和有效期。

-試管、培養(yǎng)皿：需滅菌后使用，避免破損或殘留水分。

-接種環(huán)/針：需火焰滅菌至紅熱，冷卻后使用，避免燙死微生物。

-無菌生理鹽水：需高壓滅菌，用于樣本稀釋和沖洗。

3.所有耗材需經(jīng)滅菌處理，如高壓滅菌（121℃，15min），并確保包裝完整無損。

（三）人員準(zhǔn)備

1.操作人員需佩戴無菌手套、口罩、實驗服，必要時佩戴護(hù)目鏡。

2.嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范，操作前使用75%酒精手消毒液清潔雙手，并避免觸摸面部和頭發(fā)。

3.操作人員需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，熟悉無菌操作技巧和應(yīng)急預(yù)案。

三、樣本處理

（一）樣本采集

1.根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇合適的采樣工具：

-液體樣本：使用無菌吸管或注射器抽取，避免混入雜質(zhì)。

-固體樣本：使用無菌拭子或剪刀采集表面樣本，避免深層組織污染。

2.采樣部位應(yīng)清潔、無損傷，避免污染。如皮膚樣本需先用75%酒精消毒，待干燥后再采樣。

3.樣本采集后應(yīng)立即放入無菌容器中，如無菌試管或培養(yǎng)皿，并標(biāo)注樣本類型和采集時間。

（二）樣本處理方法

1.液體樣本：

-直接接種：取1mL-5mL樣本直接劃線接種于瓊脂平板，適用于高濃度樣本。

-稀釋接種：梯度稀釋后涂布平板，提高分離效果。稀釋步驟如下：

(1)取1mL樣本加入9mL無菌生理鹽水中混勻，即為10^-1稀釋液。

(2)取10^-1稀釋液1mL加入9mL生理鹽水中，即為10^-2稀釋液。

(3)依次進(jìn)行10^-3、10^-4稀釋，直至菌落分離清晰。

2.固體樣本：

-表面擦拭：用無菌棉簽擦拭樣本表面后接種，適用于物體表面樣本。棉簽需在培養(yǎng)基表面輕輕滾動，避免擠壓。

-組織樣本：剪取3mm×3mm組織塊，置于無菌生理鹽水中勻漿，勻漿時間不超過1分鐘，避免細(xì)胞損傷。

四、培養(yǎng)基制備與滅菌

（一）培養(yǎng)基配方

1.常用培養(yǎng)基：

-營養(yǎng)瓊脂（PCA）：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。適用于通用菌落培養(yǎng)。

-麥康凱瓊脂（MAC）：乳糖10g、蔗糖10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。含膽鹽，用于選擇性培養(yǎng)腸桿菌科。

-血瓊脂：在PCA基礎(chǔ)上加入5%-10%羊血，用于快idious菌培養(yǎng)。

2.配方調(diào)整：根據(jù)檢驗需求添加選擇性抑制劑：

-伊紅美藍(lán)（EMB）：用于MAC，抑制革蘭氏陽性菌。

-膽鹽：用于MAC，抑制革蘭氏陽性菌。

-中性紅：用于MR-VP試驗，鑒別酵母菌。

（二）制備步驟

1.稱量：按配方稱量各成分，先溶解蛋白胨和牛肉浸膏，加熱至完全溶解。

2.分裝：將培養(yǎng)基分裝至試管或培養(yǎng)皿中，試管需傾斜放置防結(jié)晶。培養(yǎng)皿需裝滿，避免表面干燥。

3.滅菌：高壓滅菌（121℃，15min-20min），注意溫度和壓力曲線達(dá)標(biāo)。滅菌后培養(yǎng)基凝固，即可使用。

五、接種與培養(yǎng)

（一）接種操作

1.無菌操作：打開培養(yǎng)皿/試管蓋時，動作輕柔，避免暴露時間過長。如使用生物安全柜，需關(guān)閉中門操作。

2.接種方法：

-線狀接種：用接種環(huán)沿平板表面畫線，每條線間隔≥5cm，避免菌落重疊。

-點(diǎn)狀接種：用接種環(huán)蘸取樣本，在平板表面輕輕觸碰，形成單個菌落。

3.接種后立即蓋上皿蓋，避免污染，并標(biāo)注樣本編號和接種時間。

（二）培養(yǎng)條件

1.溫度：需氧菌37℃培養(yǎng)18-24h，厭氧菌需厭氧環(huán)境（如CO2培養(yǎng)箱或厭氧袋）。

2.濕度：保持培養(yǎng)基表面濕潤，避免水分蒸發(fā)?？杉由w無菌濕紗布或使用加濕器。

3.培養(yǎng)頻率：定期檢查，典型菌落24-48h可見。如培養(yǎng)時間過長，需觀察是否有污染。

六、結(jié)果判讀與記錄

（一）菌落形態(tài)觀察

1.記錄菌落特征：大小（1-3mm）、顏色（白色、黃色、粉色等）、形狀（圓形、不規(guī)則）、邊緣（光滑、鋸齒狀）、透明度（透明、渾濁）、表面（光滑、黏液狀）等。

2.異常菌落剔除：如霉斑、衛(wèi)星現(xiàn)象（抑菌環(huán)）、過度生長等非目標(biāo)菌落。

（二）生化鑒定（可選）

1.編號：挑取典型菌落，編號備用，如使用L棒編號。

2.鑒定項目：

-革蘭染色：區(qū)分革蘭氏陽性菌（紫色）和陰性菌（紅色）。

-氧化酶試驗：檢測細(xì)菌是否產(chǎn)氧化酶，如假單胞菌陽性。

-糖發(fā)酵試驗：檢測細(xì)菌對葡萄糖的代謝能力，如大腸桿菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

（三）數(shù)據(jù)記錄

1.建立檢驗記錄表，包含樣本編號、檢驗日期、菌落特征、鑒定結(jié)果等，確保記錄清晰、可追溯。

2.電子記錄需備份，紙質(zhì)記錄存檔至少3年，避免數(shù)據(jù)丟失。

七、注意事項

1.嚴(yán)格區(qū)分無菌區(qū)域與非無菌區(qū)域，避免交叉污染。如超凈工作臺內(nèi)操作時，避免頭部越過工作區(qū)域。

2.實驗結(jié)束后，所有廢棄物需高壓滅菌后處理，如培養(yǎng)基廢液需121℃滅菌30min。

3.定期校準(zhǔn)儀器，確保檢驗準(zhǔn)確性。如高壓滅菌鍋需每月做生物指示劑驗證。

4.如遇疑似致病菌，需加強(qiáng)個人防護(hù)，如佩戴N95口罩和雙層手套。

一、概述

微生物檢驗操作規(guī)程模板設(shè)計旨在規(guī)范微生物檢驗流程，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。本模板涵蓋了檢驗前的準(zhǔn)備、樣本處理、培養(yǎng)基制備、接種操作、培養(yǎng)觀察、結(jié)果判讀及記錄等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，適用于各類微生物實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理。

二、檢驗前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境要求

1.檢驗環(huán)境應(yīng)保持潔凈，溫濕度控制在20℃-25℃、濕度50%-60%。

2.操作臺面需定期消毒，使用75%酒精或含氯消毒劑擦拭。

3.空氣流動應(yīng)單向，避免交叉污染。

（二）儀器與耗材準(zhǔn)備

1.主要儀器：高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、顯微鏡、天平、移液器等。

2.耗材：無菌培養(yǎng)基（如PCA、MAC瓊脂）、試管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)/針、無菌生理鹽水等。

3.所有耗材需經(jīng)滅菌處理，如高壓滅菌（121℃，15min）。

（三）人員準(zhǔn)備

1.操作人員需佩戴無菌手套、口罩、實驗服，必要時佩戴護(hù)目鏡。

2.嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范，操作前使用75%酒精手消毒液清潔雙手。

三、樣本處理

（一）樣本采集

1.根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇合適的采樣工具（如棉簽、拭子、無菌容器）。

2.避免污染，采樣部位應(yīng)清潔、無損傷。

3.樣本采集后應(yīng)立即放入無菌容器中。

（二）樣本處理方法

1.液體樣本：取1mL-5mL樣本加入9mL無菌生理鹽水中稀釋。

(1)直接接種：將樣本直接劃線接種于瓊脂平板。

(2)稀釋接種：梯度稀釋后涂布平板，提高分離效果。

2.固體樣本：

(1)表面擦拭：用無菌棉簽擦拭樣本表面后接種。

(2)組織樣本：剪取3mm×3mm組織塊，置于無菌生理鹽水中勻漿。

四、培養(yǎng)基制備與滅菌

（一）培養(yǎng)基配方

1.常用培養(yǎng)基：

-營養(yǎng)瓊脂（PCA）：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。

-麥康凱瓊脂（MAC）：乳糖10g、蔗糖10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。

2.配方調(diào)整：根據(jù)檢驗需求添加選擇性抑制劑（如伊紅美藍(lán)、膽鹽）。

（二）制備步驟

1.稱量：按配方稱量各成分，溶解于蒸餾水中。

2.分裝：將培養(yǎng)基分裝至試管或培養(yǎng)皿中，避免溢出。

3.滅菌：高壓滅菌（121℃，15min-20min），注意試管傾斜放置防結(jié)晶。

五、接種與培養(yǎng)

（一）接種操作

1.無菌操作：打開培養(yǎng)皿/試管蓋時，動作輕柔，避免暴露時間過長。

2.接種方法：

-線狀接種：用接種環(huán)沿平板表面畫線，每條線間隔≥5cm。

-點(diǎn)狀接種：用接種環(huán)蘸取樣本，在平板表面輕輕觸碰。

3.接種后立即蓋上皿蓋，避免污染。

（二）培養(yǎng)條件

1.溫度：需氧菌37℃培養(yǎng)18-24h，厭氧菌需厭氧環(huán)境（如CO2培養(yǎng)箱）。

2.濕度：保持培養(yǎng)基表面濕潤，避免水分蒸發(fā)。

3.培養(yǎng)頻率：定期檢查，典型菌落24-48h可見。

六、結(jié)果判讀與記錄

（一）菌落形態(tài)觀察

1.記錄菌落特征：大小、顏色、形狀、邊緣、透明度等。

2.異常菌落剔除：如霉斑、衛(wèi)星現(xiàn)象等非目標(biāo)菌落。

（二）生化鑒定（可選）

1.編號：挑取典型菌落，編號備用。

2.鑒定項目：革蘭染色、氧化酶試驗、糖發(fā)酵試驗等。

（三）數(shù)據(jù)記錄

1.建立檢驗記錄表，包含樣本編號、檢驗日期、菌落特征、鑒定結(jié)果等。

2.電子記錄需備份，紙質(zhì)記錄存檔至少3年。

七、注意事項

1.嚴(yán)格區(qū)分無菌區(qū)域與非無菌區(qū)域，避免交叉污染。

2.實驗結(jié)束后，所有廢棄物需高壓滅菌后處理。

3.定期校準(zhǔn)儀器，確保檢驗準(zhǔn)確性。

一、概述

微生物檢驗操作規(guī)程模板設(shè)計旨在規(guī)范微生物檢驗流程，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。本模板涵蓋了檢驗前的準(zhǔn)備、樣本處理、培養(yǎng)基制備、接種操作、培養(yǎng)觀察、結(jié)果判讀及記錄等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，適用于各類微生物實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化管理。通過標(biāo)準(zhǔn)化操作，可降低人為誤差，提高檢驗效率，并為后續(xù)的微生物學(xué)研究或產(chǎn)品控制提供可靠依據(jù)。本模板強(qiáng)調(diào)無菌操作、質(zhì)量控制及數(shù)據(jù)完整性，是實驗室日常工作的基礎(chǔ)性文件。

二、檢驗前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境要求

1.檢驗環(huán)境應(yīng)保持潔凈，溫濕度控制在20℃-25℃、濕度50%-60%。過高或過低的溫濕度會影響微生物生長及培養(yǎng)基性能。

2.操作臺面需定期消毒，使用75%酒精或含氯消毒劑擦拭。消毒后需等待30分鐘以上，確保消毒劑揮發(fā)。

3.空氣流動應(yīng)單向，避免交叉污染。潔凈實驗室應(yīng)配備超凈工作臺或生物安全柜，操作前需開啟30分鐘以上。

（二）儀器與耗材準(zhǔn)備

1.主要儀器：

-高壓滅菌鍋：用于滅菌培養(yǎng)基、器械等，需定期校準(zhǔn)壓力和時間參數(shù)。

-培養(yǎng)箱：需配備溫度控制器，定期檢定溫度均勻性。

-顯微鏡：用于菌落形態(tài)觀察和革蘭染色后菌體觀察，需清潔物鏡和目鏡。

-天平：用于精確稱量培養(yǎng)基成分，精度需達(dá)0.1g。

-移液器：用于精確移取液體，需定期校準(zhǔn)吸量和回吸穩(wěn)定性。

2.耗材：

-無菌培養(yǎng)基：如PCA（營養(yǎng)瓊脂）、MAC（麥康凱瓊脂）、血瓊脂等，需檢查生產(chǎn)日期和有效期。

-試管、培養(yǎng)皿：需滅菌后使用，避免破損或殘留水分。

-接種環(huán)/針：需火焰滅菌至紅熱，冷卻后使用，避免燙死微生物。

-無菌生理鹽水：需高壓滅菌，用于樣本稀釋和沖洗。

3.所有耗材需經(jīng)滅菌處理，如高壓滅菌（121℃，15min），并確保包裝完整無損。

（三）人員準(zhǔn)備

1.操作人員需佩戴無菌手套、口罩、實驗服，必要時佩戴護(hù)目鏡。

2.嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范，操作前使用75%酒精手消毒液清潔雙手，并避免觸摸面部和頭發(fā)。

3.操作人員需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，熟悉無菌操作技巧和應(yīng)急預(yù)案。

三、樣本處理

（一）樣本采集

1.根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇合適的采樣工具：

-液體樣本：使用無菌吸管或注射器抽取，避免混入雜質(zhì)。

-固體樣本：使用無菌拭子或剪刀采集表面樣本，避免深層組織污染。

2.采樣部位應(yīng)清潔、無損傷，避免污染。如皮膚樣本需先用75%酒精消毒，待干燥后再采樣。

3.樣本采集后應(yīng)立即放入無菌容器中，如無菌試管或培養(yǎng)皿，并標(biāo)注樣本類型和采集時間。

（二）樣本處理方法

1.液體樣本：

-直接接種：取1mL-5mL樣本直接劃線接種于瓊脂平板，適用于高濃度樣本。

-稀釋接種：梯度稀釋后涂布平板，提高分離效果。稀釋步驟如下：

(1)取1mL樣本加入9mL無菌生理鹽水中混勻，即為10^-1稀釋液。

(2)取10^-1稀釋液1mL加入9mL生理鹽水中，即為10^-2稀釋液。

(3)依次進(jìn)行10^-3、10^-4稀釋，直至菌落分離清晰。

2.固體樣本：

-表面擦拭：用無菌棉簽擦拭樣本表面后接種，適用于物體表面樣本。棉簽需在培養(yǎng)基表面輕輕滾動，避免擠壓。

-組織樣本：剪取3mm×3mm組織塊，置于無菌生理鹽水中勻漿，勻漿時間不超過1分鐘，避免細(xì)胞損傷。

四、培養(yǎng)基制備與滅菌

（一）培養(yǎng)基配方

1.常用培養(yǎng)基：

-營養(yǎng)瓊脂（PCA）：蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。適用于通用菌落培養(yǎng)。

-麥康凱瓊脂（MAC）：乳糖10g、蔗糖10g、牛肉浸膏3g、瓊脂15g，加蒸餾水1000mL。含膽鹽，用于選擇性培養(yǎng)腸桿菌科。

-血瓊脂：在PCA基礎(chǔ)上加入5%-10%羊血，用于快idious菌培養(yǎng)。

2.配方調(diào)整：根據(jù)檢驗需求添加選擇性抑制劑：

-伊紅美藍(lán)（EMB）：用于MAC，抑制革蘭氏陽性菌。

-膽鹽：用于MAC，抑制革蘭氏陽性菌。

-中性紅：用于MR-VP試驗，鑒別酵母菌。

（二）制備步驟

1.稱量：按配方稱量各成分，先溶解蛋白胨和牛肉浸膏，加熱至完全溶解。

2.分裝：將培養(yǎng)基分裝至試管或培養(yǎng)皿中，試管需傾斜放置防結(jié)晶。培養(yǎng)皿需裝滿，避免表面干燥。

3.滅菌：高壓滅菌（121℃，15min-20min），注意溫度和壓力曲線達(dá)標(biāo)。滅菌后培養(yǎng)基凝固，即可使用。

五、接種與培養(yǎng)

（一）接種操作

1.無菌操作：打開培養(yǎng)皿/試管