微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃一、概述

微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃旨在通過(guò)系統(tǒng)性的監(jiān)測(cè)與評(píng)估，確保檢驗(yàn)環(huán)境符合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，防止交叉污染，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。本計(jì)劃涵蓋監(jiān)控范圍、方法、頻率及異常處理等內(nèi)容，適用于各類(lèi)微生物實(shí)驗(yàn)室。

二、監(jiān)控范圍與目標(biāo)

（一）監(jiān)控范圍

1.空氣質(zhì)量：包括實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域及超凈工作臺(tái)/生物安全柜內(nèi)的空氣微生物分布。

2.表面清潔度：對(duì)工作臺(tái)面、設(shè)備表面、實(shí)驗(yàn)器具等進(jìn)行微生物檢測(cè)。

3.水質(zhì)安全：對(duì)實(shí)驗(yàn)用水（如超純水、去離子水）的微生物指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)控。

4.人員操作：通過(guò)手部消毒效果等評(píng)估人為因素對(duì)環(huán)境的潛在影響。

（二）監(jiān)控目標(biāo)

1.確保空氣菌落數(shù)≤200CFU/皿（直徑90mm培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)48h）。

2.工作臺(tái)面等表面菌落數(shù)≤10CFU/cm2。

3.實(shí)驗(yàn)用水總菌落數(shù)≤100CFU/mL。

4.手部消毒后菌落數(shù)≤102CFU/cm2。

三、監(jiān)控方法與頻率

（一）空氣監(jiān)控

1.方法：采用撞擊法（如便攜式撞擊式空氣采樣器），將采樣皿在實(shí)驗(yàn)區(qū)域均勻布放，37℃培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每月至少檢測(cè)1次，高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如無(wú)菌操作間）可增加至每?jī)芍?次。

（二）表面清潔度監(jiān)控

1.方法：用無(wú)菌棉簽擦拭目標(biāo)表面（5cm×5cm），接種于TSA平板，37℃培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每次實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行檢測(cè)，每月進(jìn)行一次全面復(fù)查。

（三）水質(zhì)監(jiān)控

1.方法：取水樣1mL，接種于RBC或MAC平板，37℃培養(yǎng)24-48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每周檢測(cè)1次，若使用去離子水需增加至每日檢測(cè)。

（四）人員操作監(jiān)控

1.方法：使用快速手部消毒監(jiān)測(cè)紙巾或便攜式ATP檢測(cè)儀評(píng)估消毒效果。

2.頻率：每次實(shí)驗(yàn)前對(duì)操作人員進(jìn)行手部消毒檢測(cè)。

四、異常處理與糾正措施

（一）異常判定標(biāo)準(zhǔn)

1.空氣菌落數(shù)＞300CFU/皿。

2.表面菌落數(shù)＞20CFU/cm2。

3.水質(zhì)總菌落數(shù)＞150CFU/mL。

4.手部消毒檢測(cè)不合格。

（二）糾正措施

1.立即停止高風(fēng)險(xiǎn)操作，全面消毒環(huán)境（如使用70-75%酒精擦拭）。

2.分析污染源：若為設(shè)備問(wèn)題（如生物安全柜濾網(wǎng)失效），需更換并重新校驗(yàn)。

3.人員培訓(xùn)：加強(qiáng)手部消毒及無(wú)菌操作規(guī)范培訓(xùn)。

4.記錄與追蹤：將異常情況及整改措施記錄在案，每月回顧監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)。

五、記錄與報(bào)告

（一）記錄要求

1.使用標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)控表，記錄檢測(cè)時(shí)間、地點(diǎn)、方法、菌落數(shù)及處理措施。

2.保存所有培養(yǎng)皿照片及原始數(shù)據(jù)，保存期≥2年。

（二）報(bào)告制度

1.每月生成環(huán)境監(jiān)控匯總報(bào)告，包括各指標(biāo)合格率及趨勢(shì)分析。

2.異常事件需在24h內(nèi)上報(bào)至實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，并附整改方案。

六、計(jì)劃維護(hù)與更新

（一）定期評(píng)審

每年對(duì)監(jiān)控計(jì)劃進(jìn)行一次全面評(píng)審，根據(jù)實(shí)際數(shù)據(jù)調(diào)整監(jiān)控頻率或方法。

（二）更新條件

1.更換實(shí)驗(yàn)設(shè)備或試劑時(shí)。

2.出現(xiàn)持續(xù)性的微生物污染問(wèn)題時(shí)。

3.新增實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需額外環(huán)境要求時(shí)。

**一、概述**

微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃旨在通過(guò)系統(tǒng)性的監(jiān)測(cè)與評(píng)估，確保檢驗(yàn)環(huán)境符合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，防止交叉污染，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。本計(jì)劃涵蓋監(jiān)控范圍、方法、頻率及異常處理等內(nèi)容，適用于各類(lèi)微生物實(shí)驗(yàn)室。通過(guò)實(shí)施本計(jì)劃，可以識(shí)別和糾正潛在的環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn)，維持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的穩(wěn)定性和可控性，從而提升微生物檢測(cè)的整體質(zhì)量水平。

**二、監(jiān)控范圍與目標(biāo)**

（一）監(jiān)控范圍

1.空氣質(zhì)量：包括實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域（如準(zhǔn)備區(qū)、檢驗(yàn)區(qū)）及特定高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如超凈工作臺(tái)/生物安全柜內(nèi)、培養(yǎng)箱內(nèi)部）的空氣微生物分布。監(jiān)控目的是評(píng)估空氣中的浮游微生物數(shù)量和種類(lèi)，防止空氣傳播導(dǎo)致的污染。

(1)監(jiān)控點(diǎn)選擇：應(yīng)在代表性的區(qū)域布點(diǎn)，包括靠近門(mén)口、設(shè)備周?chē)⒐ぷ髋_(tái)面附近、以及生物安全柜進(jìn)風(fēng)口和出風(fēng)口附近。超凈工作臺(tái)內(nèi)部應(yīng)至少在操作區(qū)域中心布點(diǎn)。

(2)特殊區(qū)域：對(duì)于進(jìn)行空氣傳播風(fēng)險(xiǎn)較高的操作（如培養(yǎng)高致病性微生物）的區(qū)域，或培養(yǎng)箱內(nèi)部，應(yīng)增加監(jiān)控頻率或采用更敏感的監(jiān)測(cè)方法（如沉降法）。

2.表面清潔度：對(duì)進(jìn)入無(wú)菌區(qū)域前需消毒的物品表面（如移液器槍頭、接種環(huán)）、工作臺(tái)面、設(shè)備表面（如培養(yǎng)箱門(mén)把手、離心機(jī)轉(zhuǎn)子）、實(shí)驗(yàn)器具（如試管架、研缽）等進(jìn)行微生物檢測(cè)。監(jiān)控目的是確保表面無(wú)菌或符合潔凈要求，防止表面殘留微生物污染樣品。

(1)監(jiān)控對(duì)象：應(yīng)優(yōu)先監(jiān)控接觸樣品或培養(yǎng)基的表面，以及人員頻繁接觸的表面。

(2)樣本采集：使用無(wú)菌棉簽擦拭指定區(qū)域（通常為5cmx5cm），確保棉簽充分接觸表面。注意擦拭方向應(yīng)從清潔區(qū)向污染區(qū)進(jìn)行，避免二次污染。

3.水質(zhì)安全：對(duì)實(shí)驗(yàn)用水（如超純水、去離子水、純化水）的微生物指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)控。監(jiān)控目的是確保水作為溶劑或清洗介質(zhì)不會(huì)引入微生物污染。

(1)水質(zhì)類(lèi)型：需明確區(qū)分不同用途的水質(zhì)監(jiān)控，例如純化水用于配制培養(yǎng)基，超純水用于無(wú)菌操作或稀釋。

(2)監(jiān)控指標(biāo)：除總菌落數(shù)外，根據(jù)需要還可監(jiān)控特定微生物（如支原體）、內(nèi)毒素等指標(biāo)。

4.人員操作：通過(guò)手部消毒效果、著裝規(guī)范（如實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套使用情況）等評(píng)估人為因素對(duì)環(huán)境的潛在影響。監(jiān)控目的是減少由人員活動(dòng)引入的污染。

(1)手部監(jiān)控：可采用快速微生物檢測(cè)紙巾（SwabTest）或ATP熒光檢測(cè)儀進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速評(píng)估。紙巾檢測(cè)后需將棉簽接種于合適培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)。ATP檢測(cè)儀提供相對(duì)快速的結(jié)果，但需注意其檢測(cè)的是生物代謝活動(dòng)，而非活菌計(jì)數(shù)。

(2)著裝檢查：定期目視檢查人員是否按規(guī)定穿著實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩和手套，尤其是在進(jìn)入潔凈區(qū)域或進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)。

（二）監(jiān)控目標(biāo)

1.空氣質(zhì)量：根據(jù)ISO14644-1或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)定具體菌落數(shù)限值。例如，潔凈級(jí)實(shí)驗(yàn)室（如ISO5級(jí)）要求工作面水平≥0.5m高度處，空氣中的靜態(tài)菌落數(shù)≤35CFU/m3（直徑9cm培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)48h）。普通實(shí)驗(yàn)室（如ISO7級(jí)）可設(shè)定為≤200CFU/皿（靜態(tài)法）或≤20CFU/皿（撞擊法）。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)（如生物安全柜內(nèi)部）目標(biāo)可能更嚴(yán)格，如≤5CFU/皿。

2.表面清潔度：參照ISO14644-5標(biāo)準(zhǔn)，潔凈級(jí)表面（如工作臺(tái)面）菌落數(shù)≤1CFU/cm2，普通實(shí)驗(yàn)室≤10CFU/cm2。對(duì)于特定物品（如移液器槍頭套），可能需要更嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)（如≤1CFU/套）。

3.水質(zhì)安全：根據(jù)藥典（如USP、EP）或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，純化水總菌落數(shù)≤100CFU/mL，支原體陰性。超純水的要求可能更高。

4.人員操作：手部消毒后，單個(gè)手指接觸面積（1cm2）上的菌落數(shù)≤102CFU/cm2。目視檢查應(yīng)確保無(wú)可見(jiàn)污染（如毛發(fā)、飾品）。

**三、監(jiān)控方法與頻率**

（一）空氣監(jiān)控

1.方法：

(1)撞擊法（ImpingementMethod）：使用便攜式撞擊式空氣采樣器（如Rosenberg采樣器），在設(shè)定高度和位置，以恒定速度撞擊培養(yǎng)皿（如直徑90mm的TSA平板），使空氣中的微生物撞擊到培養(yǎng)基表面。采樣時(shí)間根據(jù)所需空氣體積和所需菌落數(shù)量確定（通常30-120秒）。

(2)沉降法（SettlingPlateMethod）：將打開(kāi)的培養(yǎng)皿放置在目標(biāo)區(qū)域，暴露一定時(shí)間（如30-45分鐘或4小時(shí)），讓微生物自然沉降到培養(yǎng)基上。此方法適用于評(píng)估較大區(qū)域的整體污染水平或特定區(qū)域的總菌落數(shù)。

(3)滾轉(zhuǎn)法（RollerImpingement）：使用特定設(shè)計(jì)的滾轉(zhuǎn)采樣頭，在表面滾動(dòng)采樣，適用于小范圍表面附近的空氣監(jiān)控。

選擇哪種方法取決于監(jiān)控目的（評(píng)估空氣濃度vs.總量）、區(qū)域大小和空氣流動(dòng)情況。對(duì)于生物安全柜內(nèi)部，撞擊法是首選。

2.頻率：

(1)實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域：每月至少進(jìn)行1次全面空氣監(jiān)控。高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如無(wú)菌操作間、培養(yǎng)室）可增加至每?jī)芍?次。

(2)特定設(shè)備（如生物安全柜）：每次使用前或定期（如每周）進(jìn)行內(nèi)部空氣粒子（包括微生物）監(jiān)測(cè)，確保其性能在可接受范圍內(nèi)。

(3)特定操作：在進(jìn)行關(guān)鍵或高風(fēng)險(xiǎn)操作（如無(wú)菌分裝、細(xì)胞培養(yǎng)）時(shí)，可在操作前后增加臨時(shí)監(jiān)控點(diǎn)。

（二）表面清潔度監(jiān)控

1.方法：

(1)棉簽涂抹法（SwabMethod）：最常用的方法。使用無(wú)菌棉簽蘸取生理鹽水或適當(dāng)緩沖液，按照S型或Z型模式在5cmx5cm的表面區(qū)域均勻涂抹至少10次，然后將棉簽在試管內(nèi)旋轉(zhuǎn)混勻，取適量菌液接種于合適平板（如TSA、MAC、沙氏平板等，根據(jù)預(yù)期污染類(lèi)型選擇）。37℃培養(yǎng)48-72h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

(2)碘伏棉簽法：使用特定配方的含碘伏棉簽擦拭表面，棉簽本身含有染料，可在培養(yǎng)基上顯色，便于計(jì)數(shù)單個(gè)菌落。

(3)ATP檢測(cè)儀：快速檢測(cè)表面微生物代謝活性。將檢測(cè)頭擦拭表面，儀器通過(guò)檢測(cè)ATP光強(qiáng)度給出相對(duì)潔凈度評(píng)分。此方法快速但無(wú)法區(qū)分死活菌，且結(jié)果受表面有機(jī)物影響。

2.頻率：

(1)工作臺(tái)面：每次實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行檢測(cè)。長(zhǎng)時(shí)間未使用或進(jìn)行清潔后，使用前也需檢測(cè)。

(2)設(shè)備表面：關(guān)鍵設(shè)備（如超凈工作臺(tái)、生物安全柜、培養(yǎng)箱門(mén)把手、離心機(jī)）每日檢查或每周至少檢測(cè)1次。

(3)實(shí)驗(yàn)器具：使用前（如移液器槍頭套、試管架）進(jìn)行檢測(cè)。特殊器具（如研缽）每次使用后檢測(cè)。

(4)全面復(fù)查：每月進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)室所有關(guān)鍵區(qū)域的表面清潔度隨機(jī)抽查或全面復(fù)查。

（三）水質(zhì)監(jiān)控

1.方法：

(1)直接接種法：取適量水樣（如1mL），直接接種于無(wú)菌平皿中的合適培養(yǎng)基（如RBC平板檢測(cè)總菌落數(shù)，MAC平板檢測(cè)腸道致病菌，MYP平板檢測(cè)支原體）。

(2)稀釋法：對(duì)于濁度較高的水樣，需進(jìn)行系列稀釋后接種，以獲得合適的菌落計(jì)數(shù)范圍。

(3)快速檢測(cè)方法：如使用試紙條或試劑盒進(jìn)行總菌落數(shù)、內(nèi)毒素或特定微生物（如大腸菌群）的快速檢測(cè)。此類(lèi)方法提供定性或半定量結(jié)果，適用于日?？焖俸Y查。

2.頻率：

(1)實(shí)驗(yàn)用水：每周至少檢測(cè)1次。若使用去離子水或純化水配制培養(yǎng)基，且水處理系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定，可適當(dāng)延長(zhǎng)檢測(cè)間隔，但需密切觀(guān)察是否有污染跡象。

(2)儲(chǔ)水設(shè)備：對(duì)儲(chǔ)水桶或儲(chǔ)罐，每月至少檢測(cè)1次。

(3)水處理系統(tǒng)：對(duì)反滲透系統(tǒng)等，應(yīng)按制造商建議或定期（如每季度）進(jìn)行性能監(jiān)測(cè)和樣品微生物檢測(cè)。

（四）人員操作監(jiān)控

1.方法：

(1)手部消毒效果檢測(cè)：

-紙巾檢測(cè)法：使用含有顯色指示劑或可培養(yǎng)微生物的專(zhuān)用紙巾。按壓手部后，觀(guān)察紙巾顏色變化或培養(yǎng)結(jié)果。

-ATP檢測(cè)儀：擦拭手部后，儀器檢測(cè)ATP水平，提供潔凈度評(píng)分。

-培養(yǎng)法：使用快速手部采樣棉簽，接種于選擇性培養(yǎng)基。

(2)著裝規(guī)范檢查：通過(guò)目視檢查人員是否正確穿戴實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套，以及有無(wú)佩戴飾品、化妝等可能引入污染的行為。

2.頻率：

(1)手部消毒檢測(cè)：每次進(jìn)行無(wú)菌操作前。對(duì)于高風(fēng)險(xiǎn)操作或操作者技能不熟練時(shí)，可在操作中途增加檢測(cè)。

(2)著裝檢查：每次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或特定區(qū)域時(shí)檢查?？山Y(jié)合手部消毒進(jìn)行。

**四、異常處理與糾正措施**

（一）異常判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)第二部分設(shè)定的監(jiān)控目標(biāo)，明確具體的異常閾值。例如：

1.空氣菌落數(shù)>300CFU/皿（靜態(tài)法）或>50CFU/皿（撞擊法）。

2.表面菌落數(shù)>20CFU/cm2。

3.水質(zhì)總菌落數(shù)>150CFU/mL。

4.手部消毒檢測(cè)不合格（如紙巾顯色弱、ATP評(píng)分低或培養(yǎng)法有菌落生長(zhǎng)）。

5.連續(xù)兩次或以上檢測(cè)超標(biāo)。

（二）糾正措施（需遵循由表及里、由簡(jiǎn)到繁的原則）

1.立即隔離與控制：

(1)立即停止在異常區(qū)域的所有高風(fēng)險(xiǎn)微生物操作。

(2)對(duì)受影響的樣品、培養(yǎng)基、設(shè)備進(jìn)行隔離，并進(jìn)行標(biāo)識(shí)。

(3)若懷疑人員是污染源，應(yīng)要求相關(guān)人員暫停操作并加強(qiáng)手部消毒和著裝檢查。

2.現(xiàn)場(chǎng)清潔與消毒：

(1)對(duì)異常區(qū)域進(jìn)行徹底清潔，必要時(shí)增加清潔頻次。使用合適的消毒劑（如70-75%酒精、含氯消毒劑等，根據(jù)目標(biāo)微生物選擇）進(jìn)行表面消毒，確保作用時(shí)間充分。

(2)清潔和消毒順序應(yīng)從相對(duì)清潔的區(qū)域向污染區(qū)域進(jìn)行。

3.分析污染源：

(1)回溯監(jiān)控結(jié)果，確認(rèn)污染發(fā)生的具體時(shí)間和地點(diǎn)。

(2)檢查相關(guān)操作記錄，分析可能的原因，如：

-個(gè)人操作不當(dāng)（如未洗手進(jìn)入潔凈區(qū)、說(shuō)話(huà)、未正確使用生物安全柜）。

-設(shè)備問(wèn)題（如生物安全柜氣流不足、濾網(wǎng)堵塞或污染、超凈工作臺(tái)高效濾網(wǎng)失效、培養(yǎng)箱門(mén)密封不嚴(yán)）。

-環(huán)境控制失效（如門(mén)窗開(kāi)關(guān)頻繁導(dǎo)致氣流擾動(dòng)、溫濕度控制不當(dāng)）。

-物料引入（如使用了受污染的試劑或耗材）。

4.實(shí)施糾正與預(yù)防措施：

(1)針對(duì)設(shè)備問(wèn)題：聯(lián)系設(shè)備維護(hù)人員檢查、維修或更換部件（如濾網(wǎng)）。重新校驗(yàn)設(shè)備性能（如生物安全柜的泄漏測(cè)試和風(fēng)量測(cè)定）。

(2)針對(duì)操作問(wèn)題：重新培訓(xùn)相關(guān)人員，強(qiáng)調(diào)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）的重要性，特別是手部衛(wèi)生、著裝規(guī)范、生物安全柜使用等。

(3)針對(duì)環(huán)境問(wèn)題：檢查并確保門(mén)窗、風(fēng)簾等設(shè)施完好，調(diào)整溫濕度至適宜范圍。

(4)針對(duì)物料問(wèn)題：評(píng)估并更換可疑的試劑或耗材供應(yīng)商，加強(qiáng)IncomingMaterial檢驗(yàn)。

5.重新驗(yàn)證與監(jiān)控：

(1)在采取糾正措施后，需進(jìn)行重新監(jiān)控，確認(rèn)污染問(wèn)題已解決。例如，在生物安全柜濾網(wǎng)更換后，需連續(xù)監(jiān)測(cè)幾次空氣指標(biāo)，確保穩(wěn)定達(dá)標(biāo)。

(2)增加異常區(qū)域的監(jiān)控頻率，直至連續(xù)多次檢測(cè)合格。

6.記錄與歸檔：

(1)詳細(xì)記錄異常情況、調(diào)查過(guò)程、采取的糾正措施、重新驗(yàn)證結(jié)果以及預(yù)防措施。

(2)將所有記錄納入實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系文件。

**五、記錄與報(bào)告**

（一）記錄要求

1.使用標(biāo)準(zhǔn)化的監(jiān)控記錄表單，確保信息完整、準(zhǔn)確、清晰。記錄表單應(yīng)至少包含以下信息：

(1)監(jiān)控日期與時(shí)間。

(2)監(jiān)控人員姓名與資質(zhì)。

(3)監(jiān)控地點(diǎn)（具體到區(qū)域、設(shè)備或操作點(diǎn)）。

(4)監(jiān)控項(xiàng)目（空氣、表面、水、手部等）。

(5)使用的采樣設(shè)備、培養(yǎng)基、試劑（批號(hào)）。

(6)具體的操作步驟。

(7.監(jiān)控結(jié)果（菌落數(shù)、ATP評(píng)分、顏色變化等）。

(8.與目標(biāo)值的比較及是否合格。

(9.異常情況描述及初步處理措施。

(10.糾正措施及完成情況（如適用）。

2.所有培養(yǎng)皿照片應(yīng)清晰顯示菌落形態(tài)和計(jì)數(shù)情況，與記錄表單編號(hào)對(duì)應(yīng)。

3.原始數(shù)據(jù)（如菌落計(jì)數(shù)、培養(yǎng)結(jié)果）需妥善保存，保存期通常為2年或更長(zhǎng)，以備追溯和審核。

4.記錄表單需簽字確認(rèn)，并按實(shí)驗(yàn)室規(guī)定進(jìn)行編號(hào)、歸檔。

（二）報(bào)告制度

1.月度/季度環(huán)境監(jiān)控匯總報(bào)告：

(1)匯總本時(shí)間段內(nèi)所有監(jiān)控項(xiàng)目的數(shù)據(jù)。

(2)統(tǒng)計(jì)各項(xiàng)目及各區(qū)域的合格率。

(3)繪制趨勢(shì)圖，展示環(huán)境狀況的變化。

(4)列出所有異常事件及其處理狀態(tài)。

(5)提出改進(jìn)建議或下一步監(jiān)控計(jì)劃。

2.異常事件報(bào)告：

(1)當(dāng)發(fā)生監(jiān)控結(jié)果超標(biāo)時(shí)，需在規(guī)定時(shí)間內(nèi)（如24小時(shí)內(nèi)）向上級(jí)管理人員或?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。

(2)報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括異常描述、初步分析、已采取的措施以及需要協(xié)調(diào)的資源。

3.年度審核報(bào)告：

(1)每年對(duì)全年環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃的有效性進(jìn)行總結(jié)評(píng)估。

(2)分析監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的整體趨勢(shì)，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制水平。

(3)根據(jù)評(píng)估結(jié)果，提出對(duì)監(jiān)控計(jì)劃、頻率、方法或標(biāo)準(zhǔn)的修訂建議。

**六、計(jì)劃維護(hù)與更新**

（一）定期評(píng)審

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)每年至少對(duì)微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃進(jìn)行一次正式評(píng)審。評(píng)審由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其授權(quán)的資深人員組織，可邀請(qǐng)質(zhì)量管理人員或技術(shù)專(zhuān)家參與。評(píng)審內(nèi)容包括：

1.檢查監(jiān)控計(jì)劃是否滿(mǎn)足當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)需求和技術(shù)水平。

2.評(píng)估監(jiān)控頻率是否適宜，是否需要根據(jù)實(shí)際污染風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行調(diào)整。

3.審核監(jiān)控方法是否仍然有效、可靠且具有成本效益。

4.回顧過(guò)去一年監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的趨勢(shì)，分析持續(xù)性或反復(fù)出現(xiàn)的問(wèn)題。

5.確認(rèn)記錄和報(bào)告流程是否順暢、符合要求。

（二）更新條件

計(jì)劃的更新應(yīng)基于評(píng)審結(jié)果，并在以下情況下進(jìn)行：

1.**實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)變更**：當(dāng)實(shí)驗(yàn)室新增、取消或改變檢測(cè)項(xiàng)目（特別是涉及不同生物安全等級(jí)或不同微生物類(lèi)型的項(xiàng)目）時(shí)，可能需要調(diào)整監(jiān)控范圍或方法。

2.**設(shè)備更新或改造**：更換或顯著改造關(guān)鍵設(shè)備（如安裝新的生物安全柜、升級(jí)水處理系統(tǒng)）后，需重新評(píng)估并可能調(diào)整針對(duì)該設(shè)備的監(jiān)控要求。

3.**環(huán)境條件改變**：實(shí)驗(yàn)室布局、人員流動(dòng)、溫濕度控制等環(huán)境條件發(fā)生顯著變化，可能影響污染風(fēng)險(xiǎn)，需重新評(píng)估監(jiān)控策略。

4.**出現(xiàn)持續(xù)性污染問(wèn)題**：若某區(qū)域或某種監(jiān)控指標(biāo)反復(fù)超標(biāo)，即使采取了措施仍無(wú)法解決，需深入調(diào)查根本原因，并可能修訂監(jiān)控計(jì)劃以加強(qiáng)監(jiān)控或改變監(jiān)控策略。

5.**引入新的監(jiān)控技術(shù)或標(biāo)準(zhǔn)**：若實(shí)驗(yàn)室有能力或有必要采用更先進(jìn)、更靈敏的監(jiān)控技術(shù)，或需要遵循更新的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)/指南，應(yīng)考慮更新監(jiān)控方法。

6.**內(nèi)部審核或管理評(píng)審發(fā)現(xiàn)**：內(nèi)部質(zhì)量體系審核或管理評(píng)審指出監(jiān)控計(jì)劃存在不足之處時(shí)，應(yīng)進(jìn)行修訂。

所有更新需經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)，并確保相關(guān)人員得到培訓(xùn)，更新后的計(jì)劃需立即實(shí)施。

一、概述

微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃旨在通過(guò)系統(tǒng)性的監(jiān)測(cè)與評(píng)估，確保檢驗(yàn)環(huán)境符合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，防止交叉污染，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。本計(jì)劃涵蓋監(jiān)控范圍、方法、頻率及異常處理等內(nèi)容，適用于各類(lèi)微生物實(shí)驗(yàn)室。

二、監(jiān)控范圍與目標(biāo)

（一）監(jiān)控范圍

1.空氣質(zhì)量：包括實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域及超凈工作臺(tái)/生物安全柜內(nèi)的空氣微生物分布。

2.表面清潔度：對(duì)工作臺(tái)面、設(shè)備表面、實(shí)驗(yàn)器具等進(jìn)行微生物檢測(cè)。

3.水質(zhì)安全：對(duì)實(shí)驗(yàn)用水（如超純水、去離子水）的微生物指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)控。

4.人員操作：通過(guò)手部消毒效果等評(píng)估人為因素對(duì)環(huán)境的潛在影響。

（二）監(jiān)控目標(biāo)

1.確?？諝饩鋽?shù)≤200CFU/皿（直徑90mm培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)48h）。

2.工作臺(tái)面等表面菌落數(shù)≤10CFU/cm2。

3.實(shí)驗(yàn)用水總菌落數(shù)≤100CFU/mL。

4.手部消毒后菌落數(shù)≤102CFU/cm2。

三、監(jiān)控方法與頻率

（一）空氣監(jiān)控

1.方法：采用撞擊法（如便攜式撞擊式空氣采樣器），將采樣皿在實(shí)驗(yàn)區(qū)域均勻布放，37℃培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每月至少檢測(cè)1次，高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如無(wú)菌操作間）可增加至每?jī)芍?次。

（二）表面清潔度監(jiān)控

1.方法：用無(wú)菌棉簽擦拭目標(biāo)表面（5cm×5cm），接種于TSA平板，37℃培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每次實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行檢測(cè)，每月進(jìn)行一次全面復(fù)查。

（三）水質(zhì)監(jiān)控

1.方法：取水樣1mL，接種于RBC或MAC平板，37℃培養(yǎng)24-48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.頻率：每周檢測(cè)1次，若使用去離子水需增加至每日檢測(cè)。

（四）人員操作監(jiān)控

1.方法：使用快速手部消毒監(jiān)測(cè)紙巾或便攜式ATP檢測(cè)儀評(píng)估消毒效果。

2.頻率：每次實(shí)驗(yàn)前對(duì)操作人員進(jìn)行手部消毒檢測(cè)。

四、異常處理與糾正措施

（一）異常判定標(biāo)準(zhǔn)

1.空氣菌落數(shù)＞300CFU/皿。

2.表面菌落數(shù)＞20CFU/cm2。

3.水質(zhì)總菌落數(shù)＞150CFU/mL。

4.手部消毒檢測(cè)不合格。

（二）糾正措施

1.立即停止高風(fēng)險(xiǎn)操作，全面消毒環(huán)境（如使用70-75%酒精擦拭）。

2.分析污染源：若為設(shè)備問(wèn)題（如生物安全柜濾網(wǎng)失效），需更換并重新校驗(yàn)。

3.人員培訓(xùn)：加強(qiáng)手部消毒及無(wú)菌操作規(guī)范培訓(xùn)。

4.記錄與追蹤：將異常情況及整改措施記錄在案，每月回顧監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)。

五、記錄與報(bào)告

（一）記錄要求

1.使用標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)控表，記錄檢測(cè)時(shí)間、地點(diǎn)、方法、菌落數(shù)及處理措施。

2.保存所有培養(yǎng)皿照片及原始數(shù)據(jù)，保存期≥2年。

（二）報(bào)告制度

1.每月生成環(huán)境監(jiān)控匯總報(bào)告，包括各指標(biāo)合格率及趨勢(shì)分析。

2.異常事件需在24h內(nèi)上報(bào)至實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，并附整改方案。

六、計(jì)劃維護(hù)與更新

（一）定期評(píng)審

每年對(duì)監(jiān)控計(jì)劃進(jìn)行一次全面評(píng)審，根據(jù)實(shí)際數(shù)據(jù)調(diào)整監(jiān)控頻率或方法。

（二）更新條件

1.更換實(shí)驗(yàn)設(shè)備或試劑時(shí)。

2.出現(xiàn)持續(xù)性的微生物污染問(wèn)題時(shí)。

3.新增實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需額外環(huán)境要求時(shí)。

**一、概述**

微生物檢驗(yàn)環(huán)境監(jiān)控計(jì)劃旨在通過(guò)系統(tǒng)性的監(jiān)測(cè)與評(píng)估，確保檢驗(yàn)環(huán)境符合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，防止交叉污染，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。本計(jì)劃涵蓋監(jiān)控范圍、方法、頻率及異常處理等內(nèi)容，適用于各類(lèi)微生物實(shí)驗(yàn)室。通過(guò)實(shí)施本計(jì)劃，可以識(shí)別和糾正潛在的環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn)，維持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的穩(wěn)定性和可控性，從而提升微生物檢測(cè)的整體質(zhì)量水平。

**二、監(jiān)控范圍與目標(biāo)**

（一）監(jiān)控范圍

1.空氣質(zhì)量：包括實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域（如準(zhǔn)備區(qū)、檢驗(yàn)區(qū)）及特定高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如超凈工作臺(tái)/生物安全柜內(nèi)、培養(yǎng)箱內(nèi)部）的空氣微生物分布。監(jiān)控目的是評(píng)估空氣中的浮游微生物數(shù)量和種類(lèi)，防止空氣傳播導(dǎo)致的污染。

(1)監(jiān)控點(diǎn)選擇：應(yīng)在代表性的區(qū)域布點(diǎn)，包括靠近門(mén)口、設(shè)備周?chē)⒐ぷ髋_(tái)面附近、以及生物安全柜進(jìn)風(fēng)口和出風(fēng)口附近。超凈工作臺(tái)內(nèi)部應(yīng)至少在操作區(qū)域中心布點(diǎn)。

(2)特殊區(qū)域：對(duì)于進(jìn)行空氣傳播風(fēng)險(xiǎn)較高的操作（如培養(yǎng)高致病性微生物）的區(qū)域，或培養(yǎng)箱內(nèi)部，應(yīng)增加監(jiān)控頻率或采用更敏感的監(jiān)測(cè)方法（如沉降法）。

2.表面清潔度：對(duì)進(jìn)入無(wú)菌區(qū)域前需消毒的物品表面（如移液器槍頭、接種環(huán)）、工作臺(tái)面、設(shè)備表面（如培養(yǎng)箱門(mén)把手、離心機(jī)轉(zhuǎn)子）、實(shí)驗(yàn)器具（如試管架、研缽）等進(jìn)行微生物檢測(cè)。監(jiān)控目的是確保表面無(wú)菌或符合潔凈要求，防止表面殘留微生物污染樣品。

(1)監(jiān)控對(duì)象：應(yīng)優(yōu)先監(jiān)控接觸樣品或培養(yǎng)基的表面，以及人員頻繁接觸的表面。

(2)樣本采集：使用無(wú)菌棉簽擦拭指定區(qū)域（通常為5cmx5cm），確保棉簽充分接觸表面。注意擦拭方向應(yīng)從清潔區(qū)向污染區(qū)進(jìn)行，避免二次污染。

3.水質(zhì)安全：對(duì)實(shí)驗(yàn)用水（如超純水、去離子水、純化水）的微生物指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)控。監(jiān)控目的是確保水作為溶劑或清洗介質(zhì)不會(huì)引入微生物污染。

(1)水質(zhì)類(lèi)型：需明確區(qū)分不同用途的水質(zhì)監(jiān)控，例如純化水用于配制培養(yǎng)基，超純水用于無(wú)菌操作或稀釋。

(2)監(jiān)控指標(biāo)：除總菌落數(shù)外，根據(jù)需要還可監(jiān)控特定微生物（如支原體）、內(nèi)毒素等指標(biāo)。

4.人員操作：通過(guò)手部消毒效果、著裝規(guī)范（如實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套使用情況）等評(píng)估人為因素對(duì)環(huán)境的潛在影響。監(jiān)控目的是減少由人員活動(dòng)引入的污染。

(1)手部監(jiān)控：可采用快速微生物檢測(cè)紙巾（SwabTest）或ATP熒光檢測(cè)儀進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速評(píng)估。紙巾檢測(cè)后需將棉簽接種于合適培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)。ATP檢測(cè)儀提供相對(duì)快速的結(jié)果，但需注意其檢測(cè)的是生物代謝活動(dòng)，而非活菌計(jì)數(shù)。

(2)著裝檢查：定期目視檢查人員是否按規(guī)定穿著實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩和手套，尤其是在進(jìn)入潔凈區(qū)域或進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)。

（二）監(jiān)控目標(biāo)

1.空氣質(zhì)量：根據(jù)ISO14644-1或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)定具體菌落數(shù)限值。例如，潔凈級(jí)實(shí)驗(yàn)室（如ISO5級(jí)）要求工作面水平≥0.5m高度處，空氣中的靜態(tài)菌落數(shù)≤35CFU/m3（直徑9cm培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)48h）。普通實(shí)驗(yàn)室（如ISO7級(jí)）可設(shè)定為≤200CFU/皿（靜態(tài)法）或≤20CFU/皿（撞擊法）。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)（如生物安全柜內(nèi)部）目標(biāo)可能更嚴(yán)格，如≤5CFU/皿。

2.表面清潔度：參照ISO14644-5標(biāo)準(zhǔn)，潔凈級(jí)表面（如工作臺(tái)面）菌落數(shù)≤1CFU/cm2，普通實(shí)驗(yàn)室≤10CFU/cm2。對(duì)于特定物品（如移液器槍頭套），可能需要更嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)（如≤1CFU/套）。

3.水質(zhì)安全：根據(jù)藥典（如USP、EP）或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，純化水總菌落數(shù)≤100CFU/mL，支原體陰性。超純水的要求可能更高。

4.人員操作：手部消毒后，單個(gè)手指接觸面積（1cm2）上的菌落數(shù)≤102CFU/cm2。目視檢查應(yīng)確保無(wú)可見(jiàn)污染（如毛發(fā)、飾品）。

**三、監(jiān)控方法與頻率**

（一）空氣監(jiān)控

1.方法：

(1)撞擊法（ImpingementMethod）：使用便攜式撞擊式空氣采樣器（如Rosenberg采樣器），在設(shè)定高度和位置，以恒定速度撞擊培養(yǎng)皿（如直徑90mm的TSA平板），使空氣中的微生物撞擊到培養(yǎng)基表面。采樣時(shí)間根據(jù)所需空氣體積和所需菌落數(shù)量確定（通常30-120秒）。

(2)沉降法（SettlingPlateMethod）：將打開(kāi)的培養(yǎng)皿放置在目標(biāo)區(qū)域，暴露一定時(shí)間（如30-45分鐘或4小時(shí)），讓微生物自然沉降到培養(yǎng)基上。此方法適用于評(píng)估較大區(qū)域的整體污染水平或特定區(qū)域的總菌落數(shù)。

(3)滾轉(zhuǎn)法（RollerImpingement）：使用特定設(shè)計(jì)的滾轉(zhuǎn)采樣頭，在表面滾動(dòng)采樣，適用于小范圍表面附近的空氣監(jiān)控。

選擇哪種方法取決于監(jiān)控目的（評(píng)估空氣濃度vs.總量）、區(qū)域大小和空氣流動(dòng)情況。對(duì)于生物安全柜內(nèi)部，撞擊法是首選。

2.頻率：

(1)實(shí)驗(yàn)室整體區(qū)域：每月至少進(jìn)行1次全面空氣監(jiān)控。高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域（如無(wú)菌操作間、培養(yǎng)室）可增加至每?jī)芍?次。

(2)特定設(shè)備（如生物安全柜）：每次使用前或定期（如每周）進(jìn)行內(nèi)部空氣粒子（包括微生物）監(jiān)測(cè)，確保其性能在可接受范圍內(nèi)。

(3)特定操作：在進(jìn)行關(guān)鍵或高風(fēng)險(xiǎn)操作（如無(wú)菌分裝、細(xì)胞培養(yǎng)）時(shí)，可在操作前后增加臨時(shí)監(jiān)控點(diǎn)。

（二）表面清潔度監(jiān)控

1.方法：

(1)棉簽涂抹法（SwabMethod）：最常用的方法。使用無(wú)菌棉簽蘸取生理鹽水或適當(dāng)緩沖液，按照S型或Z型模式在5cmx5cm的表面區(qū)域均勻涂抹至少10次，然后將棉簽在試管內(nèi)旋轉(zhuǎn)混勻，取適量菌液接種于合適平板（如TSA、MAC、沙氏平板等，根據(jù)預(yù)期污染類(lèi)型選擇）。37℃培養(yǎng)48-72h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

(2)碘伏棉簽法：使用特定配方的含碘伏棉簽擦拭表面，棉簽本身含有染料，可在培養(yǎng)基上顯色，便于計(jì)數(shù)單個(gè)菌落。

(3)ATP檢測(cè)儀：快速檢測(cè)表面微生物代謝活性。將檢測(cè)頭擦拭表面，儀器通過(guò)檢測(cè)ATP光強(qiáng)度給出相對(duì)潔凈度評(píng)分。此方法快速但無(wú)法區(qū)分死活菌，且結(jié)果受表面有機(jī)物影響。

2.頻率：

(1)工作臺(tái)面：每次實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行檢測(cè)。長(zhǎng)時(shí)間未使用或進(jìn)行清潔后，使用前也需檢測(cè)。

(2)設(shè)備表面：關(guān)鍵設(shè)備（如超凈工作臺(tái)、生物安全柜、培養(yǎng)箱門(mén)把手、離心機(jī)）每日檢查或每周至少檢測(cè)1次。

(3)實(shí)驗(yàn)器具：使用前（如移液器槍頭套、試管架）進(jìn)行檢測(cè)。特殊器具（如研缽）每次使用后檢測(cè)。

(4)全面復(fù)查：每月進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)室所有關(guān)鍵區(qū)域的表面清潔度隨機(jī)抽查或全面復(fù)查。

（三）水質(zhì)監(jiān)控

1.方法：

(1)直接接種法：取適量水樣（如1mL），直接接種于無(wú)菌平皿中的合適培養(yǎng)基（如RBC平板檢測(cè)總菌落數(shù)，MAC平板檢測(cè)腸道致病菌，MYP平板檢測(cè)支原體）。

(2)稀釋法：對(duì)于濁度較高的水樣，需進(jìn)行系列稀釋后接種，以獲得合適的菌落計(jì)數(shù)范圍。

(3)快速檢測(cè)方法：如使用試紙條或試劑盒進(jìn)行總菌落數(shù)、內(nèi)毒素或特定微生物（如大腸菌群）的快速檢測(cè)。此類(lèi)方法提供定性或半定量結(jié)果，適用于日常快速篩查。

2.頻率：

(1)實(shí)驗(yàn)用水：每周至少檢測(cè)1次。若使用去離子水或純化水配制培養(yǎng)基，且水處理系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定，可適當(dāng)延長(zhǎng)檢測(cè)間隔，但需密切觀(guān)察是否有污染跡象。

(2)儲(chǔ)水設(shè)備：對(duì)儲(chǔ)水桶或儲(chǔ)罐，每月至少檢測(cè)1次。

(3)水處理系統(tǒng)：對(duì)反滲透系統(tǒng)等，應(yīng)按制造商建議或定期（如每季度）進(jìn)行性能監(jiān)測(cè)和樣品微生物檢測(cè)。

（四）人員操作監(jiān)控

1.方法：

(1)手部消毒效果檢測(cè)：

-紙巾檢測(cè)法：使用含有顯色指示劑或可培養(yǎng)微生物的專(zhuān)用紙巾。按壓手部后，觀(guān)察紙巾顏色變化或培養(yǎng)結(jié)果。

-ATP檢測(cè)儀：擦拭手部后，儀器檢測(cè)ATP水平，提供潔凈度評(píng)分。

-培養(yǎng)法：使用快速手部采樣棉簽，接種于選擇性培養(yǎng)基。

(2)著裝規(guī)范檢查：通過(guò)目視檢查人員是否正確穿戴實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套，以及有無(wú)佩戴飾品、化妝等可能引入污染的行為。

2.頻率：

(1)手部消毒檢測(cè)：每次進(jìn)行無(wú)菌操作前。對(duì)于高風(fēng)險(xiǎn)操作或操作者技能不熟練時(shí)，可在操作中途增加檢測(cè)。

(2)著裝檢查：每次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或特定區(qū)域時(shí)檢查?？山Y(jié)合手部消毒進(jìn)行。

**四、異常處理與糾正措施**

（一）異常判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)第二部分設(shè)定的監(jiān)控目標(biāo)，明確具體的異常閾值。例如：

1.空氣菌落數(shù)>300CFU/皿（靜態(tài)法）或>50CFU/皿（撞擊法）。

2.表面菌落數(shù)>20CFU/cm2。

3.水質(zhì)總菌落數(shù)>150CFU/mL。

4.手部消毒檢測(cè)不合格（如紙巾顯色弱、ATP評(píng)分低或培養(yǎng)法有菌落生長(zhǎng)）。

5.連續(xù)兩次或以上檢測(cè)超標(biāo)。

（二）糾正措施（需遵循由表及里、由簡(jiǎn)到繁的原則）

1.立即隔離與控制：

(1)立即停止在異常區(qū)域的所有高風(fēng)險(xiǎn)微生物操作。

(2)對(duì)受影響的樣品、培養(yǎng)基、設(shè)備進(jìn)行隔離，并進(jìn)行標(biāo)識(shí)。

(3)若懷疑人員是污染源，應(yīng)要求相關(guān)人員暫停操作并加強(qiáng)手部消毒和著裝檢查。

2.現(xiàn)場(chǎng)清潔與消毒：

(1)對(duì)異常區(qū)域進(jìn)行徹底清潔，必要時(shí)增加清潔頻次。使用合適的消毒劑（如70-75%酒精、含氯消毒劑等，根據(jù)目標(biāo)微生物選擇）進(jìn)行表面消毒，確保作用時(shí)間充分。

(2)清潔和消毒順序應(yīng)從相對(duì)清潔的區(qū)域向污染區(qū)域進(jìn)行。

3.分析污染源：

(1)回溯監(jiān)控結(jié)果，確認(rèn)污染發(fā)生的具體時(shí)間和地點(diǎn)。

(2)檢查相關(guān)操作記錄，分析可能的原因，如：

-個(gè)人操作不當(dāng)（如未洗手進(jìn)入潔凈區(qū)、說(shuō)話(huà)、未正確使用生物安全柜）。

-設(shè)備問(wèn)題（如生物安全柜氣流不足、濾網(wǎng)堵塞或污染、超凈工作臺(tái)高效濾網(wǎng)失效、培養(yǎng)箱門(mén)密封不嚴(yán)）。

-環(huán)境控制失效（如門(mén)窗開(kāi)關(guān)頻繁導(dǎo)致氣流擾動(dòng)、溫濕度控制不當(dāng)）。

-物料引入（如使用了受污染的試劑或耗材）。

4.實(shí)施糾正與預(yù)防措施：

(1)針對(duì)設(shè)備問(wèn)題：聯(lián)系設(shè)備維護(hù)人員檢查、維修或更換部件（如濾網(wǎng)）。重新校驗(yàn)設(shè)備性能（如生物安全柜的泄漏測(cè)試和風(fēng)量測(cè)定）。

(2)針對(duì)操作問(wèn)題：重新培訓(xùn)相關(guān)人員，強(qiáng)調(diào)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）的重要性，特別是手部衛(wèi)生、著裝規(guī)范、生物安全柜使用等。

(3)針對(duì)環(huán)境問(wèn)題：檢查并確保門(mén)窗、風(fēng)簾等設(shè)施完好，調(diào)整溫濕度至適宜范圍。

(4)針對(duì)物料問(wèn)題：評(píng)估并更換可疑的試劑或耗材供應(yīng)商，加強(qiáng)IncomingMaterial檢驗(yàn)。

5.重新驗(yàn)證與監(jiān)控：

(1)在采取糾正措施后，需進(jìn)行重新監(jiān)控，確認(rèn)污染問(wèn)題已解決。例如，在生物安全柜濾網(wǎng)更換后，需連續(xù)監(jiān)測(cè)幾次空氣指標(biāo)，確保穩(wěn)定達(dá)標(biāo)。

(2)增加異常區(qū)域的監(jiān)控頻率，直至連續(xù)多次檢測(cè)合格。

6.記錄與歸檔：

(1)詳細(xì)記錄異常情況、調(diào)查過(guò)程、采取的糾正措施、重新驗(yàn)證結(jié)果以及預(yù)防措施。

(2)將所有記錄納入實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系文件。

**五、記錄與報(bào)告**

（一）記錄