細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)制備的管理程老師2023.11.24內(nèi)容提要法規(guī)要求及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估管理計(jì)劃安排與各要素梳理細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)的放行管理保存和領(lǐng)用管理12342程老師2023.11.241、法規(guī)要求及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估管理3細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量管理相關(guān)法規(guī)4序號(hào)標(biāo)題發(fā)布時(shí)間1《中國(guó)藥典》三部

生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制20202疫苗生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)的技術(shù)審評(píng)一般原則20083ICH

Q5A來源于人或動(dòng)物細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)19994ICH

Q5D用于生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)的來源和鑒定19975WHO_TRS_878

疫苗生產(chǎn)用動(dòng)物源基質(zhì)要求-附錄11998細(xì)胞庫(kù)相關(guān)法規(guī)5《中國(guó)藥典》2020年版三部通則：生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制用于生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞系/株均須通過全面檢定,須具有如下相應(yīng)資料,并經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)。細(xì)胞庫(kù)的建立可為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞。細(xì)胞建庫(kù)應(yīng)在符合中國(guó)現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的條件下制備。細(xì)胞庫(kù)相關(guān)法規(guī)6ICH

Q5A來源于人或動(dòng)物細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)來源于細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的一個(gè)共同特點(diǎn)是存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)，病毒可通過多種途徑進(jìn)入MCB，例如：1）

從受感染動(dòng)物制備的細(xì)胞系；2）

使用病毒建立細(xì)胞系；3）

使用受污染的生物試劑如動(dòng)物血清組分；4）

細(xì)胞操作過程中受到的污染這種污染可能產(chǎn)生嚴(yán)重的臨床后果。有關(guān)這些產(chǎn)品病毒污染的安全性，只有通過實(shí)行如下的病毒測(cè)試計(jì)劃并在生產(chǎn)過程中對(duì)病毒的去除或滅活作用進(jìn)行評(píng)估，才可能得到確實(shí)的保證。細(xì)胞庫(kù)相關(guān)法規(guī)7ICH

Q5D用于生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)的來源和鑒定避免被污染的細(xì)胞基質(zhì)(或細(xì)胞庫(kù))用于生產(chǎn)是十分重要的，否則，由于受污染的細(xì)胞庫(kù)不能使用，必須重新生產(chǎn)細(xì)胞庫(kù)，這將延誤產(chǎn)品上市或開發(fā)的時(shí)機(jī)。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到?jīng)]有哪一種細(xì)胞庫(kù)檢測(cè)方案能檢測(cè)出所有可能潛在的污染；因此，只有在細(xì)胞建庫(kù)期間采取預(yù)防措施，才是確保細(xì)胞不被污染，為生產(chǎn)提供可靠的細(xì)胞基質(zhì)。細(xì)胞庫(kù)的注冊(cè)要求8序號(hào)項(xiàng)目檢查內(nèi)容1原始細(xì)胞來源合法性1、原始細(xì)胞來源機(jī)構(gòu)、來源歷史資料、細(xì)胞株培養(yǎng)的歷史資料；2、細(xì)胞株鑒定報(bào)告、質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告、遺傳穩(wěn)定性報(bào)告等。3、細(xì)胞株的采購(gòu)、運(yùn)輸、入境等環(huán)節(jié)。2細(xì)胞庫(kù)制備及檢定合規(guī)性1、細(xì)胞庫(kù)制備的關(guān)鍵設(shè)施和設(shè)備2、細(xì)胞庫(kù)制備的關(guān)鍵原輔料？是否可追溯（包括供貨協(xié)議、發(fā)票、檢驗(yàn)合格報(bào)告書、購(gòu)入時(shí)間、領(lǐng)用記錄、使用臺(tái)賬等）3、細(xì)胞庫(kù)制備（過程、規(guī)模）、檢定和傳代穩(wěn)定性研究，還包括生產(chǎn)終末細(xì)胞和高限代次細(xì)胞的檢定3細(xì)胞庫(kù)的管理合規(guī)性1、細(xì)胞入庫(kù)、出庫(kù)、銷毀等環(huán)節(jié)的記錄可追溯性和管理流程合規(guī)性細(xì)胞庫(kù)目標(biāo)概況目標(biāo)產(chǎn)品概況（QTPPs）無菌試驗(yàn)成活率生長(zhǎng)特性同一性鑒別試驗(yàn)成瘤或致瘤性無外源因子穩(wěn)定性傳代穩(wěn)定性、儲(chǔ)存穩(wěn)定性細(xì)菌，真菌、分枝桿菌凍存復(fù)蘇達(dá)80%以上存活率、

形態(tài)學(xué)、

增殖曲線、倍增時(shí)間前、中、后三段細(xì)胞管中細(xì)胞按生長(zhǎng)特性要求檢測(cè)鑒別細(xì)胞株是該細(xì)胞株無成瘤或致瘤性無外源因子細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)細(xì)胞污染（無菌或外源因子）細(xì)胞傳代不穩(wěn)定、鑒別試驗(yàn)不合格、成瘤或致瘤、生長(zhǎng)特性異常同一性不達(dá)標(biāo)細(xì)胞成活率不達(dá)標(biāo)人：資質(zhì)、培訓(xùn)

機(jī)：設(shè)備清潔驗(yàn)證料:

QA

放行環(huán)：空調(diào)凈化系統(tǒng)驗(yàn)證、EMP監(jiān)測(cè)法：按SOP操作、按無菌要求操作凍存工藝：凍存工藝驗(yàn)證凍存過程：降溫曲線是否一致凍存條件：穩(wěn)定，有監(jiān)測(cè)混勻均一性收獲細(xì)胞重懸混勻均一分裝可能的失敗模式分析操作導(dǎo)致失敗操作熟練的人員，培訓(xùn)合格，工藝參數(shù)符合工藝要求細(xì)胞穩(wěn)定性不合格10原始細(xì)胞系/株、細(xì)胞代次、細(xì)胞傳代過程細(xì)胞傳代過程、凍存過程、凍存條件、細(xì)胞庫(kù)管理批號(hào)問題可能的原因預(yù)防和糾偏措施T06-202303XF002細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，用培養(yǎng)液吹打混勻細(xì)胞過程中，細(xì)胞濺出來混勻吹打力度太大，不輕柔檢查和調(diào)試移液器，輕柔吹打混勻細(xì)胞T06-202304XJ003細(xì)胞污染開口操作太多，無菌操作經(jīng)驗(yàn)不足盡可能減少開口操作，無菌操作多訓(xùn)練，關(guān)鍵操作有經(jīng)驗(yàn)者進(jìn)行操作T06-202304XJ004準(zhǔn)備的器具出現(xiàn)破損準(zhǔn)備器具時(shí)未仔細(xì)檢查準(zhǔn)備器具時(shí)仔細(xì)檢查核對(duì)，增加備件……T06-202305XD005離心后倒上清液時(shí)倒掉細(xì)胞倒上清液時(shí)動(dòng)作太快，未把握好傾斜度倒上清液的動(dòng)作輕柔小心T06-202305XD006細(xì)胞存活率不達(dá)標(biāo)細(xì)胞凍存液不穩(wěn)定選擇穩(wěn)定的細(xì)胞凍存液和做好凍存工藝驗(yàn)證T06-202306XD009收獲細(xì)胞量不均一分裝過程中細(xì)胞沉降，混勻不均一分裝過程中，細(xì)胞混勻工藝驗(yàn)證T06-202306XD0011標(biāo)簽出錯(cuò)標(biāo)簽設(shè)計(jì)出現(xiàn)錯(cuò)誤標(biāo)簽設(shè)計(jì)未核對(duì)確認(rèn)T06-202306XD0015貼簽出錯(cuò)，瓶號(hào)和支數(shù)不一致手工貼簽，最后的簽發(fā)多了未控制好簽的管理做好發(fā)簽和貼簽的管理，控制好數(shù)量……11收集先前出現(xiàn)過的問題項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施細(xì)胞株來源1.選擇的細(xì)胞株不適合或者是夕陽(yáng)產(chǎn)品，注冊(cè)會(huì)被淘汰；選擇合適的細(xì)胞株2.細(xì)胞株的來源歷史資料不全、來源證明資料不全，無法追溯，注冊(cè)需要發(fā)補(bǔ)或不被通過；檢查和及時(shí)完善細(xì)胞株來源資料3.來源于非國(guó)家/國(guó)際細(xì)胞保藏單位或非發(fā)明人，注冊(cè)不被接受來源于國(guó)家/國(guó)際細(xì)胞保藏單位的細(xì)胞系/株12細(xì)胞庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施細(xì)胞庫(kù)制備1.建庫(kù)的人員操作不可靠、培訓(xùn)不到位，導(dǎo)致建庫(kù)失?。徊僮髑芭嘤?xùn)，操作中出現(xiàn)問題或風(fēng)險(xiǎn)及時(shí)培訓(xùn)2.建庫(kù)的原材料質(zhì)量不可靠，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)建庫(kù)用到的原材料進(jìn)行評(píng)估管理，對(duì)關(guān)鍵原材料按GMP要求管理3.建庫(kù)的設(shè)施設(shè)備不可靠，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)建庫(kù)用的設(shè)施設(shè)備進(jìn)行評(píng)估管理，對(duì)關(guān)鍵設(shè)施設(shè)備進(jìn)行驗(yàn)證4.操作環(huán)境不能滿足要求，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行清潔消毒，并對(duì)空調(diào)凈化系統(tǒng)驗(yàn)證環(huán)境監(jiān)測(cè)5.建庫(kù)的SOP撰寫不能有效地指導(dǎo)操作，記錄設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)不完整；相關(guān)文件經(jīng)各相關(guān)方審核批準(zhǔn)通過6.建庫(kù)的工藝不穩(wěn)定，不可靠，會(huì)導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；建庫(kù)工藝驗(yàn)證，確保出現(xiàn)的問題能找到原因7.建庫(kù)過程中，可能會(huì)發(fā)生基因突變、染色體異常，影響細(xì)胞的穩(wěn)定性和可靠性；按照驗(yàn)證的工藝操作，細(xì)胞穩(wěn)定性檢測(cè)、終末代次超高代次相關(guān)檢測(cè)13細(xì)胞庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施細(xì)胞庫(kù)檢定1.檢定的項(xiàng)目不全面，導(dǎo)致不合格的細(xì)胞庫(kù)進(jìn)入后續(xù)的應(yīng)用環(huán)節(jié)；根據(jù)先驗(yàn)知識(shí)和法規(guī)指南設(shè)計(jì)檢定項(xiàng)目，特有的可通過評(píng)估增加2.檢定的標(biāo)準(zhǔn)不嚴(yán)格，導(dǎo)致不合格的細(xì)胞庫(kù)進(jìn)入后續(xù)的應(yīng)用環(huán)節(jié)；根據(jù)先驗(yàn)知識(shí)和法規(guī)指南設(shè)計(jì)檢定的標(biāo)準(zhǔn)3.檢測(cè)的方法不可靠，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可靠；檢測(cè)的方法經(jīng)過驗(yàn)證和確認(rèn)的方法4.取樣不科學(xué)或沒有依據(jù)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可靠；取樣按照法規(guī)或指南的要求進(jìn)行，按照已有的取樣操作規(guī)范進(jìn)行細(xì)胞庫(kù)儲(chǔ)存與保管1.細(xì)胞庫(kù)標(biāo)識(shí)不清，保管不到位，無權(quán)限限制，導(dǎo)致細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量和數(shù)量受影響的風(fēng)險(xiǎn)；細(xì)胞庫(kù)設(shè)置雙人雙鎖權(quán)限管理，定置、標(biāo)識(shí)清楚2.細(xì)胞庫(kù)領(lǐng)用或進(jìn)出出差錯(cuò)或混淆，導(dǎo)致風(fēng)險(xiǎn)；細(xì)胞庫(kù)臺(tái)賬嚴(yán)格管理3.細(xì)胞庫(kù)保管溫度無監(jiān)控，保存溫度超標(biāo)，導(dǎo)致細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量和穩(wěn)定性受影響；細(xì)胞庫(kù)液氮添加管理、溫度報(bào)警、溫度記錄14細(xì)胞庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估毒種庫(kù)的分類15生物制品用的菌種和毒種，按其在生物制品生產(chǎn)、檢定過程中用途的不同，可分為四類：1.生產(chǎn)用的菌種和毒種2.工具菌種和毒種3.檢定用的菌種和毒種4.標(biāo)準(zhǔn)菌株/毒株以及參考菌株/毒株毒種庫(kù)的法規(guī)要求16《中國(guó)藥典》2020年版三部

通則：生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理及質(zhì)量控制生產(chǎn)和檢定用菌毒種，來源途徑應(yīng)合法，并經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)。生物制品生產(chǎn)用菌毒種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)，并應(yīng)盡量減少傳代次數(shù)，以降低發(fā)生遺傳變異的風(fēng)險(xiǎn)。原始種子應(yīng)驗(yàn)明其歷史、來源（包括重組工程菌毒種的構(gòu)建過程）和生物學(xué)特性。從原始種子傳代和擴(kuò)增后保存的為主種子批。從主種子批傳代和擴(kuò)增后保存的為工

作種子批，工作種子批用于生產(chǎn)產(chǎn)品。工作種子批的生物學(xué)特性應(yīng)與原始種子一致，每批主種子批和工作種子批均應(yīng)按各論要求保管、檢定和使用。由主種子批或工作種子批移出使用的菌毒種無論開瓶與否，均不得再返回貯存。生產(chǎn)過程中應(yīng)規(guī)定各級(jí)種子批允許傳代的代次，并經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)。菌毒種的傳代及檢定實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合國(guó)家生物安全的相關(guān)規(guī)定。毒種庫(kù)的法規(guī)要求17《中國(guó)藥典》2020年版三部人用疫苗總論建立種子批系統(tǒng)的目的旨在保證疫苗生產(chǎn)的一致性和連續(xù)性。應(yīng)建立主種子批/主細(xì)胞庫(kù)和工作種子批/工作細(xì)胞庫(kù)并規(guī)定使用的限定代次。種子批系統(tǒng)各種子批/細(xì)胞庫(kù)應(yīng)在符合中國(guó)現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的條件下建立和制備，并應(yīng)有詳細(xì)的記錄。主種子批/主細(xì)胞庫(kù)確定無外源因子污染時(shí)，來自該主種子批/主細(xì)胞庫(kù)的工作種子批/工作細(xì)胞庫(kù)只需排除制備工作種子批/工作細(xì)胞庫(kù)所需的材料和過程可能存在的外源因子污染的風(fēng)險(xiǎn)；如因主種子批/主細(xì)胞庫(kù)數(shù)量限制而無法進(jìn)行全面的外源因子檢查時(shí)，應(yīng)對(duì)工作種子批/工作細(xì)胞庫(kù)進(jìn)行全面檢定。序號(hào)項(xiàng)目檢查內(nèi)容1毒株來源合法性1、原始毒株來源機(jī)構(gòu)、來源歷史資料、毒株篩選、分離、鑒定和減毒培養(yǎng)等歷史資料；2、毒株鑒定報(bào)告、質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告、傳代穩(wěn)定性報(bào)告等。3、毒株的采購(gòu)、運(yùn)輸、入境等環(huán)節(jié)。2種子批制備及檢定合規(guī)性1、毒種庫(kù)制備的關(guān)鍵設(shè)施和設(shè)備2、毒種庫(kù)制備的關(guān)鍵原輔料？是否可追溯（包括供貨協(xié)議、發(fā)票、檢驗(yàn)合格報(bào)告書、購(gòu)入時(shí)間、領(lǐng)用記錄、使用臺(tái)賬等）3、毒種庫(kù)制備（過程、規(guī)模）、檢定和傳代穩(wěn)定性研究（包括質(zhì)量穩(wěn)定性和基因穩(wěn)定性研究資料，應(yīng)包括疫苗代次和超高代次，確定限傳代次）3毒種庫(kù)的管理合規(guī)性1、種子批入庫(kù)、出庫(kù)、銷毀等環(huán)節(jié)的記錄可追溯性和管理流程合規(guī)性毒種庫(kù)的注冊(cè)要求18批號(hào)問題可能的原因預(yù)防和糾偏措施……T06-202303DZ002病毒培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)染菌開口操作太多，無菌操作經(jīng)驗(yàn)不足盡可能減少開口操作，無菌操作多訓(xùn)練，關(guān)鍵操作有經(jīng)驗(yàn)者進(jìn)行操作T06-202304DZ003病毒培養(yǎng)時(shí)，設(shè)備故障設(shè)備長(zhǎng)時(shí)間使用，配件老化關(guān)鍵設(shè)備定期維修保養(yǎng)，及時(shí)更換老化配件T06-202304DZ004準(zhǔn)備的器具出現(xiàn)破損準(zhǔn)備器具時(shí)未仔細(xì)檢查準(zhǔn)備器具時(shí)仔細(xì)檢查核對(duì)，增加備件T06-202305DC005澄清純化過程中出現(xiàn)堵塞濾器載量不夠?qū)兓に囘M(jìn)行工藝研究以及耐受性驗(yàn)證T06-202305DC006病毒滴度未達(dá)到要求，回收率低工藝不穩(wěn)定，檢測(cè)誤差較大采用對(duì)比試驗(yàn)，對(duì)比檢測(cè)等方法進(jìn)行工藝研究，做好方法學(xué)驗(yàn)證、病毒培養(yǎng)收獲純化工藝驗(yàn)證T06-202306DF009病毒分裝時(shí)，手工分裝出現(xiàn)少數(shù)支污染分裝過程中開口較多，時(shí)間較長(zhǎng)容易操作污染分裝過程盡可能設(shè)計(jì)減少開口和操作時(shí)間，進(jìn)行分裝工藝模擬驗(yàn)證T06-202306DF0011標(biāo)簽出錯(cuò)標(biāo)簽設(shè)計(jì)出現(xiàn)錯(cuò)誤標(biāo)簽設(shè)計(jì)未核對(duì)確認(rèn)T06-202306DF0015貼簽出錯(cuò)，瓶號(hào)和支數(shù)不一致手工貼簽，最后的簽發(fā)多了未控制好簽的管理做好發(fā)簽和貼簽的管理，控制好數(shù)量……19收集先前出現(xiàn)過的問題毒種庫(kù)目標(biāo)概況目標(biāo)產(chǎn)品概況（QTPPs）鑒別試驗(yàn)病毒滴度外源因子檢查無菌試驗(yàn)同一性主要功能基因和遺傳標(biāo)志物測(cè)定全基因系列測(cè)定鑒別該毒種是該毒種符合毒種庫(kù)滴度要求無外源病毒因子細(xì)菌、真菌、支原體、分枝桿菌前、中、后三段毒種管的種子批按病毒滴度要求檢測(cè)基因是目標(biāo)基因與原始株毒種庫(kù)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)種子批污染（無菌或外源因子）毒株來源及毒株篩選或構(gòu)建風(fēng)險(xiǎn)同一性不達(dá)標(biāo)滴度或效價(jià)不達(dá)標(biāo)人：資質(zhì)、培訓(xùn)

機(jī)：設(shè)備清潔驗(yàn)證料: QA

放行環(huán)：空調(diào)凈化系統(tǒng)

驗(yàn)證、EMP監(jiān)測(cè)法：按SOP操作、按無菌要求操作毒株篩選和構(gòu)建：經(jīng)過檢驗(yàn)或確認(rèn)毒種傳代過程：工藝研究經(jīng)過確認(rèn)凍存條件：穩(wěn)定，有監(jiān)測(cè)混勻均一性收獲毒種重懸混勻均一分裝可能的失敗模式分析操作導(dǎo)致失敗操作熟練的人

員，培訓(xùn)合格，工藝參數(shù)符合

工藝要求穩(wěn)定性不合格21來源合規(guī)性；

毒株篩選或構(gòu)

建科學(xué)合邏輯、記錄完整傳代過程過程控制基因穩(wěn)定性檢測(cè)；儲(chǔ)存穩(wěn)定性試驗(yàn)項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施毒株來源1.選擇的毒株不適合或者是夕陽(yáng)產(chǎn)品，注冊(cè)會(huì)被淘汰；選擇合適的毒株2.毒株的來源歷史資料不全（例如引進(jìn)的代次、減毒或傳代歷史等）。、來源證明資料不全（可以委托中介購(gòu)買，

但需提供中介合同、發(fā)貨單等），無法追溯，注冊(cè)需要

發(fā)補(bǔ)或不被通過；檢查和及時(shí)完善毒株來源資料來源于非發(fā)明人或國(guó)家/國(guó)際菌毒種保藏機(jī)構(gòu)。（不能接受菌毒種的民間轉(zhuǎn)讓）來源于發(fā)明人或國(guó)家/國(guó)際菌毒種保藏機(jī)構(gòu)。分離菌毒種篩選和鑒定，沒有進(jìn)行系統(tǒng)性篩選，初篩和優(yōu)選。不同候選株免疫原性的比較，不同代次候選株免疫原性的比較，對(duì)不同地區(qū)毒株的中和試驗(yàn)（交叉中和試驗(yàn)），選擇保護(hù)譜廣的、保護(hù)性抗原序列無改變其他序列改變小的、滴度高的，作為生產(chǎn)用毒株，確定中和試驗(yàn)毒株。重組基因工程株，缺少構(gòu)建過程和篩選。缺少重組株的檢定，包括目的基因序列測(cè)定和分析、表達(dá)產(chǎn)物的活性分析、表達(dá)量分析、質(zhì)?？截悢?shù)、生物學(xué)特性等。檢查其構(gòu)建、篩選及檢定相關(guān)資料，確保完整科學(xué)符合預(yù)期要求。22毒種庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施毒種庫(kù)制備1.建庫(kù)的工藝不穩(wěn)定，不可靠，會(huì)導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；建庫(kù)工藝驗(yàn)證，確保出現(xiàn)的問題能找到原因2.建庫(kù)的原材料質(zhì)量不可靠，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)建庫(kù)用到的原材料進(jìn)行評(píng)估管理，對(duì)關(guān)鍵原材料按GMP要求管理3.建庫(kù)的設(shè)施設(shè)備不可靠，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)建庫(kù)用的設(shè)施設(shè)備進(jìn)行評(píng)估管理，對(duì)關(guān)鍵設(shè)施設(shè)備進(jìn)行驗(yàn)證4.操作環(huán)境不能滿足要求，導(dǎo)致建庫(kù)失敗的風(fēng)險(xiǎn)；對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行清潔消毒，并對(duì)空調(diào)凈化系統(tǒng)驗(yàn)證，環(huán)境監(jiān)測(cè)4.建庫(kù)的人員操作不可靠、培訓(xùn)不到位，導(dǎo)致建庫(kù)失??；操作前培訓(xùn)，操作中出現(xiàn)問題或風(fēng)險(xiǎn)及時(shí)培訓(xùn)5.建庫(kù)的SOP撰寫不能有效地指導(dǎo)操作，記錄設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)不完整；相關(guān)文件經(jīng)各相關(guān)方審核批準(zhǔn)通過6.建庫(kù)過程中，可能會(huì)發(fā)生基因突變，影響毒種的穩(wěn)定性和可靠性；按照驗(yàn)證的工藝操作，毒種基因穩(wěn)定性檢測(cè)、毒種代次、終末代次、超高代次相關(guān)檢測(cè)，與原始毒株比較分析23毒種庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目可能的風(fēng)險(xiǎn)擬采取的措施毒種庫(kù)檢定1.檢定的項(xiàng)目不全面，導(dǎo)致不合格的毒種庫(kù)進(jìn)入后續(xù)的應(yīng)用環(huán)節(jié)；根據(jù)先驗(yàn)知識(shí)和法規(guī)指南設(shè)計(jì)檢定項(xiàng)目，特有的可通過評(píng)估增加2.檢定的標(biāo)準(zhǔn)不嚴(yán)格，導(dǎo)致不合格的毒種庫(kù)進(jìn)入后續(xù)的應(yīng)用環(huán)節(jié)；根據(jù)先驗(yàn)知識(shí)和法規(guī)指南設(shè)計(jì)檢定的標(biāo)準(zhǔn)3.檢測(cè)的方法不可靠，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可靠；檢測(cè)的方法經(jīng)過關(guān)鍵項(xiàng)驗(yàn)證和確認(rèn)的方法4.取樣不科學(xué)或沒有依據(jù)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不可靠；取樣按照法規(guī)或指南的要求進(jìn)行，按照已有的取樣操作規(guī)范進(jìn)行毒種庫(kù)儲(chǔ)存與保管1.毒種庫(kù)標(biāo)識(shí)不清，保管不到位，無權(quán)限限制，導(dǎo)致毒種庫(kù)質(zhì)量和數(shù)量受影響的風(fēng)險(xiǎn)；毒種庫(kù)設(shè)置雙人雙鎖權(quán)限管理，定置、標(biāo)識(shí)清楚2.毒種庫(kù)領(lǐng)用或進(jìn)出出差錯(cuò)或混淆，導(dǎo)致風(fēng)險(xiǎn)；毒種庫(kù)臺(tái)賬嚴(yán)格管理3.毒種庫(kù)保管溫度無監(jiān)控，保存溫度超標(biāo)，導(dǎo)致毒種庫(kù)質(zhì)量和穩(wěn)定性受影響；毒種庫(kù)溫度報(bào)警、溫度記錄24毒種庫(kù)制備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估外源因子病毒污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估25步驟失敗模式導(dǎo)致不良嚴(yán)重性檢測(cè)性可能性風(fēng)險(xiǎn)因子措施：降低風(fēng)險(xiǎn)策略嚴(yán)重性檢測(cè)性可能性風(fēng)險(xiǎn)因子風(fēng)險(xiǎn)降低動(dòng)物源性材料選擇確定階段選擇的動(dòng)物源性材料帶有外源病毒因子的污染導(dǎo)致細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)被其他病毒因子的污染33218動(dòng)物源性材料采購(gòu)前，對(duì)動(dòng)物源性材料供應(yīng)商進(jìn)行資質(zhì)評(píng)價(jià)，確保供方為合法并有質(zhì)量保證的供應(yīng)商；嚴(yán)格對(duì)供應(yīng)商進(jìn)行審計(jì)，要求提供資質(zhì)合格證明。并與其簽訂采購(gòu)協(xié)議，明確規(guī)定動(dòng)物源性原材料檢疫的完整性和可追溯性；采購(gòu)過程必須嚴(yán)格執(zhí)行物料采購(gòu)的管理要求，應(yīng)有詳細(xì)的采購(gòu)信息記錄，并歸檔保存；嚴(yán)格遵守法規(guī)的要求，嚴(yán)禁從瘋牛病疫區(qū)國(guó)家購(gòu)買動(dòng)物源性原材料。32161.確認(rèn)使用的牛血清和豬胰酶的供應(yīng)商資質(zhì)合格并且為有質(zhì)量保證的合法供應(yīng)商。確認(rèn)牛血清來源于瘋牛病非疫區(qū)國(guó)家。一系列審計(jì)和采購(gòu)管理措施從源頭上保障動(dòng)物源性材料的質(zhì)量。動(dòng)物源性材料來公司到使用前檢驗(yàn)放行階段選擇的動(dòng)物源性材料廠家未進(jìn)行相關(guān)處理，來公司后未進(jìn)行檢驗(yàn)放行，導(dǎo)致有外源病毒因子的污染導(dǎo)致細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)被其他病毒因子的污染33218要求廠家進(jìn)行外源病毒滅活處理（輻照），并經(jīng)相關(guān)外源因子檢測(cè)（牛血清的廠家進(jìn)行牛源性的病毒因子檢測(cè)，豬胰酶進(jìn)行了豬源性病毒因子檢測(cè)，具體的參加廠家COA），并要求廠家提供其檢測(cè)資質(zhì)證明文件（COA）；每批動(dòng)物源性材料按照物料管理要求，經(jīng)本公司QC抽樣檢測(cè)，檢測(cè)合格，QA放行才能領(lǐng)用。3216對(duì)動(dòng)物源性材料本身通過輻照去除外源因子污染又加了一道保障；進(jìn)入公司使用前經(jīng)QC進(jìn)行檢測(cè)，QA放行可以發(fā)現(xiàn)和預(yù)防不合格的原材料進(jìn)入到使用階段外源因子病毒污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和控制26步驟失敗模式導(dǎo)

致

不良嚴(yán)重性檢測(cè)性可能性風(fēng)險(xiǎn)因子措施：降低風(fēng)險(xiǎn)策略嚴(yán)重性檢測(cè)性可能性風(fēng)險(xiǎn)因子風(fēng)險(xiǎn)降低細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)制備過程細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)制備過程中導(dǎo)致的外源因子的污染導(dǎo)致細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)被其他病毒因子的污染33218細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)在GMP條件下制備；操作人員均選擇有資質(zhì)且經(jīng)過培訓(xùn)合格才能進(jìn)行操作 ；制備的細(xì)胞主庫(kù)、工作庫(kù)、毒種庫(kù)的主種子批、工作種子批均進(jìn)行牛源、豬源及其他等多項(xiàng)外源因子檢測(cè)。3216細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)的制備在GMP條件下進(jìn)行，操作人員都是有經(jīng)驗(yàn)有資質(zhì)且培訓(xùn)合格的人員，環(huán)境都是潔凈區(qū)凈化系統(tǒng)環(huán)境監(jiān)測(cè)合格的條件下進(jìn)行的；制備后的細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)進(jìn)行全面的檢測(cè)，多重控制。2、計(jì)劃安排與各要素梳理27計(jì)劃安排細(xì)胞株和毒株篩選或購(gòu)買物料、設(shè)備、環(huán)境、人員、文件準(zhǔn)備細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)制備過程細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)檢測(cè)細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)的保存和管理審查細(xì)胞株和毒株來源合規(guī)性以及評(píng)估注冊(cè)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工藝可行性、關(guān)鍵物料、設(shè)備、環(huán)境、人員，進(jìn)行相應(yīng)的梳理、檢查和控制現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控；文件、記錄及時(shí)審查；中間過程控制；問題和風(fēng)險(xiǎn)及時(shí)糾偏和預(yù)防；取樣；送檢審核；現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控；文件、記錄及時(shí)審核；數(shù)據(jù)及時(shí)匯總分析；問題和風(fēng)

險(xiǎn)及時(shí)糾偏和預(yù)防； 管理流程及管理規(guī)程文件生效；定期監(jiān)控；問題和風(fēng)險(xiǎn)及時(shí)糾偏和預(yù)防。建庫(kù)計(jì)劃質(zhì)量計(jì)劃28細(xì)胞庫(kù)制備計(jì)劃29各要素梳理-物料30建庫(kù)用物料是否影響產(chǎn)品質(zhì)量……風(fēng)險(xiǎn)高低細(xì)胞培養(yǎng)基√高碳酸氫鈉√高谷氨酰胺√高胰酶√高……建庫(kù)用耗材是否直接接觸產(chǎn)品……細(xì)胞工廠√高T瓶√高……接收取樣入庫(kù)留樣放行檢驗(yàn)發(fā)放物流部庫(kù)管員：初驗(yàn)，合格后入庫(kù)QC取樣人：按照SOP取樣，貼取樣證物流部庫(kù)管員：入庫(kù)，交申驗(yàn)單QC檢驗(yàn)員：按照SOP檢驗(yàn)，出檢驗(yàn)報(bào)告QC檢驗(yàn)員：原輔料及內(nèi)包材留樣QA：按照物料放行審核內(nèi)容，對(duì)物料進(jìn)行審核，并填寫“物料審核放行單”，由質(zhì)量保證部經(jīng)理批準(zhǔn)放行。物流部庫(kù)管員：收到物料審核放行單后方可發(fā)放物料采購(gòu)物料管理流程物料清單設(shè)施設(shè)備系統(tǒng)影響評(píng)估31問題1.

是否與產(chǎn)品（如：空氣質(zhì)量）、產(chǎn)品接觸表面或工藝流直接接觸（如：溶液、內(nèi)包材）？2.

是否提供一種輔料，或是否生產(chǎn)（或直接接觸）某種與工藝接觸的成分、原料或溶劑（如：注射用水）？3.是否用于清潔，消毒或滅菌操作（如：純蒸汽）？4.

是否維護(hù)產(chǎn)品狀態(tài)（如：氮?dú)獯祾撸?.

是否產(chǎn)生數(shù)據(jù)，用于判定產(chǎn)品放行（如：電子批記錄系統(tǒng)，關(guān)鍵工藝參數(shù)圖表記錄儀，放行實(shí)驗(yàn)室儀器）？6.

是否是一個(gè)工藝控制系統(tǒng)（如：PLC

DCS）或包含一個(gè)可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的工藝控制系統(tǒng)，并且對(duì)控制系統(tǒng)的性能沒有獨(dú)立的驗(yàn)證系統(tǒng)？7.

是否用于建立或控制生產(chǎn)環(huán)境中的重要或關(guān)鍵工藝參數(shù)？8.系統(tǒng)是否支持一個(gè)直接影響系統(tǒng)但對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量無影響？1～7有1個(gè)為“是”：直接影響系統(tǒng)； 1～7為“否”而8為“是”：間接影響系統(tǒng)； 1～8為“否”：無影響系統(tǒng)。建庫(kù)用設(shè)施是否影響產(chǎn)品質(zhì)量……風(fēng)險(xiǎn)高低XX車間空調(diào)凈化系統(tǒng)√高XX車間水系統(tǒng)√高XX車間純蒸汽系統(tǒng)√高……建庫(kù)用設(shè)備是否影響產(chǎn)品質(zhì)量……脈動(dòng)高壓滅菌柜√高高速離心機(jī)√高生物反應(yīng)器√高……設(shè)施設(shè)備驗(yàn)證管理流程用戶需求說明URS設(shè)計(jì)說明FS/DS設(shè)計(jì)確認(rèn)DQ開發(fā)安裝確認(rèn)IQ運(yùn)行確認(rèn)OQ性能確認(rèn)PQ注：梳理出關(guān)鍵設(shè)備，首次驗(yàn)證按上述流程進(jìn)行；再確認(rèn)通過評(píng)估來確認(rèn)受影響的性能指標(biāo)滿足需求，可允許設(shè)施設(shè)備投入使用。32各要素梳理-設(shè)施設(shè)備設(shè)施設(shè)備清單調(diào)試（FAT/SAT）各要素梳理-文件清單建庫(kù)用文件擬定完成初稿時(shí)間負(fù)責(zé)人各崗位職責(zé)說明書2023/04/03XX細(xì)胞庫(kù)制備規(guī)程2023/04/03XX細(xì)胞庫(kù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2023/04/03XX細(xì)胞復(fù)蘇SOP和記錄2023/04/03XX細(xì)胞傳代培養(yǎng)SOP和記錄2023/04/03XX細(xì)胞凍存SOP和記錄2023/04/03XX相關(guān)溶液配制SOP和記錄2023/04/03XX相關(guān)設(shè)備操作使用SOP和記錄2023/04/03XX檢驗(yàn)方法操作SOP和記錄2023/04/03XX相關(guān)管理規(guī)程和小記錄2023/04/03XX……文件管理流程起草審核批準(zhǔn)**培訓(xùn)生效發(fā)放由文件起草人或其主管決定參加會(huì)審人員新文件在生效之日前各使用部門負(fù)責(zé)人必須組織培訓(xùn)并記錄修訂新版本文件生效同時(shí)，舊版本文件同時(shí)失效，失效的舊版本文件原件長(zhǎng)期保存，復(fù)印件收回銷毀33細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)的檔案管理34細(xì)胞庫(kù)/毒種庫(kù)應(yīng)在購(gòu)買或篩選構(gòu)建時(shí)開始收集、接收、整理相關(guān)來源資料，建立檔案，并保持對(duì)檔案的持續(xù)更新，檔案內(nèi)容包括但不限于：細(xì)胞庫(kù)/毒種庫(kù)來源證明資料、歷史來源資料（細(xì)胞株/毒株篩選構(gòu)建資料）；歷史檢測(cè)合格資料、基因序列背景資料、遺傳穩(wěn)定性資料；細(xì)胞株/毒株的采購(gòu)、運(yùn)輸、入境等環(huán)節(jié)的證明資料；傳代譜系圖；細(xì)胞庫(kù)/毒種庫(kù)制檢規(guī)程、操作規(guī)程、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；細(xì)胞庫(kù)/毒種庫(kù)制備記錄；細(xì)胞庫(kù)/毒種庫(kù)檢定記錄、傳代穩(wěn)定性、遺傳穩(wěn)定性檢查資料；保存、領(lǐng)用、銷毀臺(tái)賬；3、細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)放行管理35細(xì)胞庫(kù)和毒種庫(kù)的檢驗(yàn)管理2020

年

7

月國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布的《生物制品注冊(cè)分類及申報(bào)資料要求的通告（2020

年第43

號(hào)）》規(guī)定，在3.2.S.2.3提供生產(chǎn)用菌（毒）種種子批和生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)種子批中檢院或相關(guān)藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)認(rèn)可的第三方檢定機(jī)構(gòu)復(fù)核檢定報(bào)告；《中華人民共和國(guó)藥典（2020

版三部）》中的生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理及質(zhì)量控制章節(jié)、生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制章節(jié)、生物制品病毒安全性控制章節(jié)等分別對(duì)生物制品的檢定