第十單元生物技術(shù)與工程時(shí)間：75分鐘分值：100分一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每個(gè)小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1．酸筍是一種以新鮮竹筍為原料，發(fā)酵腌制而成的具有獨(dú)特發(fā)酵酸臭味的筍制品，是風(fēng)味食品螺頓粉的重要配料。下圖為利用乳酸菌，酵母菌、醋酸菌等微生物發(fā)酵制作酸筍的工藝流程圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．殺青、漂燙步驟是通過(guò)高溫滅菌避免雜菌污染B．可以通過(guò)誘變育種、基因工程育種等方法進(jìn)行菌種選擇和優(yōu)化C．醋酸菌能將酵母菌產(chǎn)生的乙醇氧化為醋酸，進(jìn)一步豐富酸筍的酸味層次D．發(fā)酵過(guò)程中要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可以利用顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)【答案】A【解析】A、在選材、清洗、切割后進(jìn)行殺青、漂燙，目的是給材料消毒，而不是滅菌，A錯(cuò)誤；B、在發(fā)酵工業(yè)中，常通過(guò)誘變育種（如紫外線、化學(xué)誘變）或基因工程改良菌種，提高產(chǎn)酸能力或耐受性，故該工藝流程中可以通過(guò)誘變育種、基因工程育種等方法進(jìn)行菌種選擇和優(yōu)化，B正確；C、參與酸筍發(fā)酵的微生物除了乳酸菌，還有酵母菌和醋酸菌，酵母菌將糖類(lèi)分解產(chǎn)生酒精（乙醇）和二氧化碳，醋酸菌將乙醇氧化為醋酸，進(jìn)一步豐富酸筍的酸味層次，C正確；D、發(fā)酵過(guò)程中要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量、產(chǎn)物的濃度等，以了解發(fā)酵的進(jìn)程，顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，D正確。故選A。2．研究人員對(duì)布氏田鼠盲腸中的纖維素分解菌進(jìn)行分離、鑒定，過(guò)程如圖。下列說(shuō)法正確的是（

）A．①②③應(yīng)在95%空氣和5%氧氣的氣體環(huán)境中倒置培養(yǎng)B．①②③中的培養(yǎng)基是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C．通過(guò)比較透明圈大小可知，甲、乙分解纖維素的能力相同D．若①②③菌落數(shù)分別為20、37、39，則內(nèi)容物中纖維素分解菌密度為1.6×107個(gè)/mL【答案】B【解析】A、分析題意，菌株是從盲腸中分離的厭氧細(xì)菌，故在平板培養(yǎng)時(shí)需置于厭氧環(huán)境中，A錯(cuò)誤；B、篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一碳源，B正確；C、需要根據(jù)菌落和透明圈之間的直徑作比較來(lái)判斷分解能力的大小，甲、乙分解纖維素的能力不相同，C錯(cuò)誤；D、若①②③菌落數(shù)分別為20（舍棄）、37、39，則平均菌落數(shù)是38，內(nèi)容物中纖維素分解菌密度為C/V×M=38/0.2×105=1.9×107個(gè)/mL，D錯(cuò)誤。故選B。3．發(fā)酵技術(shù)是指人們利用微生物的發(fā)酵作用，運(yùn)用一些技術(shù)手段控制發(fā)酵過(guò)程，從而進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品的技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．制作果醋時(shí)需要向發(fā)酵液中通入無(wú)菌空氣B．制作泡菜時(shí)加較多的鹽會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)C．腐乳發(fā)酵利用了毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶等D．發(fā)酵工程的目的是獲得微生物的各種代謝物【答案】D【解析】A、醋酸菌是好氧菌，制作果醋時(shí)需在有氧條件下進(jìn)行，因此需通入無(wú)菌空氣，A正確；B、制作泡菜時(shí)，鹽濃度過(guò)高會(huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖，導(dǎo)致產(chǎn)酸速率減慢，發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)，B正確；C、腐乳發(fā)酵過(guò)程中，毛霉分泌的蛋白酶和脂肪酶能將豆腐中的大分子物質(zhì)分解為小分子，C正確；D、發(fā)酵工程的目的是根據(jù)需求獲取微生物的代謝產(chǎn)物（如初級(jí)或次級(jí)代謝產(chǎn)物）或菌體本身（如單細(xì)胞蛋白），而非“各種代謝物”，D錯(cuò)誤。故選D。4．植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)，相關(guān)過(guò)程一般為無(wú)菌培養(yǎng)物的建立→培養(yǎng)物的增殖→生根培養(yǎng)→試管苗的移栽及鑒定。下列敘述正確的是（）A．使用的外植體要經(jīng)滅菌處理后，才可用于接種培養(yǎng)B．植物組織培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中要給予適宜強(qiáng)度的光照C．生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值高有利于芽的形成D．用某植株的細(xì)胞經(jīng)離體培養(yǎng)獲得幼苗，其性狀可能有差異【答案】D【解析】A、外植體需進(jìn)行消毒處理（如酒精和次氯酸鈉浸泡），而非滅菌（滅菌會(huì)殺死外植體細(xì)胞），A錯(cuò)誤；B、植物組織培養(yǎng)中，脫分化階段需避光，再分化和后續(xù)生長(zhǎng)階段需光照，并非整個(gè)過(guò)程都需要光照，B錯(cuò)誤；C、生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)，促進(jìn)根的分化；比值低時(shí)促進(jìn)芽的分化，C錯(cuò)誤；D、離體培養(yǎng)的細(xì)胞可能發(fā)生基因突變或染色體變異，導(dǎo)致再生植株性狀與原植株存在差異，D正確。故選D。5．黑脛病對(duì)甘藍(lán)型油菜的危害十分嚴(yán)重，黑芥能抗黑脛病，兩者不能直接雜交。為解決該問(wèn)題，科研人員通過(guò)下圖所示過(guò)程獲得抗病品系。據(jù)圖分析，下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．過(guò)程①需使用纖維素酶、果膠酶處理后將原生質(zhì)體放入清水中等待融合B．融合后的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功的標(biāo)志C．采取該技術(shù)篩選后的抗病植株均具備親本的所有優(yōu)良性狀D．黑芥與甘藍(lán)型油菜在自然狀態(tài)下不能進(jìn)行基因交流【答案】D【解析】A、過(guò)程①表示去除細(xì)胞壁的過(guò)程，可以用纖維素酶和果膠酶處理；原生質(zhì)體需放在等滲的無(wú)菌水中，防止細(xì)胞會(huì)吸水脹破，A錯(cuò)誤；B、融合后的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁是細(xì)胞融合成功的標(biāo)志，B錯(cuò)誤；C、黑芥的葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體經(jīng)X射線照射后發(fā)生部分染色體結(jié)構(gòu)破壞，因而最終獲得的抗病植株不具有完整的黑芥的遺傳信息，則不一定具有親本的所有優(yōu)良性狀，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)題意可知，黑芥與甘藍(lán)型油菜不能直接雜交，說(shuō)明兩者存在生殖隔離，自然狀態(tài)下不能進(jìn)行基因交流，D正確。故選D。6．人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白Ⅰ（cTnI）在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了如圖過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是（）A．用cTnI重復(fù)注射小鼠是為了刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的抗體B．誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶C．①過(guò)程篩選到的乙細(xì)胞都是能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞D．②過(guò)程需要向克隆化培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液加入cTnI進(jìn)行抗體檢測(cè)【答案】D【解析】A、用cTnI重復(fù)注射小鼠的目的是刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的能分泌抗cTnI抗體的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程常用的誘導(dǎo)方法有物理法（如離心、振動(dòng)、電激等）、化學(xué)法（如聚乙二醇）和生物法（如滅活的病毒），而胰蛋白酶或膠原蛋白酶的作用是分散動(dòng)物組織細(xì)胞，使其成為單個(gè)細(xì)胞，不是用于誘導(dǎo)細(xì)胞融合的，B錯(cuò)誤；C、①過(guò)程是第一次篩選，目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，但篩選到的乙細(xì)胞不都是能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)榈谝淮魏Y選只是去除了未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合的細(xì)胞（如BB細(xì)胞、瘤瘤細(xì)胞），得到的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)一步篩選才能確定是否能產(chǎn)生所需的抗體，C錯(cuò)誤；D、②過(guò)程是第二次篩選，即抗體檢測(cè)，需要向克隆化培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中加入cTnI進(jìn)行抗體檢測(cè)，目的是篩選出能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選D。7．自殺基因系統(tǒng)是指外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞后會(huì)表達(dá)相應(yīng)的酶，該酶可催化無(wú)毒的藥物前體轉(zhuǎn)化為有毒物質(zhì)，從而導(dǎo)致受體細(xì)胞被殺死。為探究外源基因TK與藥物更昔洛韋能否組成自殺基因系統(tǒng)，以肝癌細(xì)胞為受體細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（

）A．培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的過(guò)程中需定期更換培養(yǎng)液以保持無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境B．實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明外源基因TK與更昔洛韋可組成自殺基因系統(tǒng)C．本實(shí)驗(yàn)的自變量為肝癌細(xì)胞是否導(dǎo)入TK基因，其他變量是無(wú)關(guān)變量D．肝癌細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有接觸抑制，因而無(wú)需進(jìn)行傳代培養(yǎng)【答案】B【解析】A、定期更換動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液可以去除有毒的物質(zhì)，但不能保持無(wú)菌的環(huán)境，保持無(wú)菌的環(huán)境可以添加抗生素，A錯(cuò)誤；B、從圖中可以看出，添加更昔洛韋后，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)量明顯減少，而對(duì)照組變化不大，說(shuō)明外源基因TK與更昔洛韋可組成自殺基因系統(tǒng)，B正確；C、由題意和曲線圖可知，自變量有肝癌細(xì)胞是否導(dǎo)入TK基因、培養(yǎng)時(shí)間以及是否添加更昔洛韋，C錯(cuò)誤；D、肝癌細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)有接觸抑制，但受空間和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)限制，仍需要進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選B。8．嵌合體動(dòng)物是指由兩種或兩種以上具有不同遺傳特性的細(xì)胞組成的聚合胚發(fā)育而成的個(gè)體，下圖表示采用注射法獲得小鼠胚胎嵌合體（即黑白花仔鼠）的過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是（）A．黑白花仔鼠的任意一個(gè)細(xì)胞中同時(shí)含有黑鼠和白鼠的基因B．對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，通常取圖中②細(xì)胞進(jìn)行DNA分析C．乙過(guò)程的目的是讓黑色小鼠和白色小鼠的囊胚細(xì)胞進(jìn)行融合D．丁的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移【答案】D【解析】A、黑白花仔鼠為小鼠胚胎嵌合體，有的細(xì)胞含有黑鼠的基因，有的細(xì)胞含有白鼠的基因，不是同時(shí)含有黑鼠和白鼠的基因，A錯(cuò)誤；B、性別鑒定應(yīng)取滋養(yǎng)層細(xì)胞（圖中①），不是②內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，B錯(cuò)誤；C、乙過(guò)程是將黑色小鼠細(xì)胞注入白色小鼠囊胚，不是細(xì)胞融合，C錯(cuò)誤；D、丁是胚胎移植，實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境下空間位置轉(zhuǎn)移，D正確。故選D。9．科研人員利用兩種限制酶（EcoRI和NotI）處理基因載體，進(jìn)行電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．該基因載體最可能是環(huán)狀DNA分子B．電泳圖譜中DNA片段越大，距離起點(diǎn)越近C．該DNA分子上有2個(gè)EcoRI酶切位點(diǎn)D．EcoRI和NotI的切點(diǎn)之間最長(zhǎng)相距約9kb【答案】C【解析】A、由題圖可知，當(dāng)僅用NotI切割載體時(shí)，僅產(chǎn)生一種長(zhǎng)度的DNA片段（10kb），因此該載體最有可能為環(huán)狀DNA分子，A正確；B、在電泳中，DNA片段越大，遷移速度越慢，距離點(diǎn)樣孔（起點(diǎn)）越近；DNA片段越小，遷移速度越快，距離點(diǎn)樣孔越遠(yuǎn)，B正確；C、該基因載體是環(huán)狀DNA分子，由題圖可知，當(dāng)僅用EcoRI切割載體時(shí)，產(chǎn)生2種長(zhǎng)度的DNA片段：2kb和6kb，該載體DNA片段長(zhǎng)10kb，所以用EcoRI切割載體應(yīng)產(chǎn)生3個(gè)DNA片段：2個(gè)2kb和1個(gè)6kb，該DNA分子上有3個(gè)EcoRI酶切位點(diǎn)，C錯(cuò)誤；D、由題可知，兩種限制酶同時(shí)切割時(shí)則產(chǎn)生6kp、2kp和1kp3種長(zhǎng)度的DNA片段：1個(gè)6kb、1個(gè)2kb、2個(gè)1kb，所以?xún)煞N限制酶的酶切位點(diǎn)至少相距9kp，D正確。故選C。10．蛛絲蛋白是一種特殊纖維蛋白，具有強(qiáng)度高、韌性大等特點(diǎn)，在人工肌腱等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著誘人的應(yīng)用前景。下圖為蛛絲蛋白基因?qū)?yīng)的DNA片段結(jié)構(gòu)示意圖，其中1~4表示DNA上引物可能結(jié)合的位置，目前利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蜘蛛絲已取得成功。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．若用PCR技術(shù)獲取蛛絲蛋白基因，則設(shè)計(jì)的引物應(yīng)分別結(jié)合在2、3部位B．若從該DNA片段中直接獲取蛛絲蛋白基因，會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵C．若一個(gè)蛛絲蛋白基因擴(kuò)增了4次，則共消耗引物32個(gè)D．若受體細(xì)胞為大腸桿菌，則蛛絲蛋白的加工需要細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的參與【答案】A【解析】A、PCR的原理是DNA半保留復(fù)制，DNA復(fù)制時(shí)引物延伸子鏈的方向?yàn)?'→3',而子鏈和模板鏈反向平行，所以引物需要與模板鏈的3端結(jié)合，據(jù)此可知圖中與引物結(jié)合的部位是2、3，A正確；B、若從該DNA片段中直接獲取蛛絲蛋白基因，DNA每條鏈上會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵，共會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵，B錯(cuò)誤；C、利用PCR擴(kuò)增一個(gè)基因要加入2個(gè)引物，若一個(gè)蛛絲蛋白基因擴(kuò)增了4次，共獲得：24×2條鏈，除去親代基因的2條鏈上沒(méi)有引物，則消耗的引物數(shù)為24×22=30個(gè)，C錯(cuò)誤；D、大腸桿菌是原核生物，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)，D錯(cuò)誤。故選A。11．白僵菌是一種真菌，能寄生到松毛蟲(chóng)等農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)體內(nèi)致其死亡，但對(duì)環(huán)境和溫血?jiǎng)游锇踩珶o(wú)害，被廣泛用于害蟲(chóng)防治。由蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的Bt毒蛋白可以使多種害蟲(chóng)死亡。某研究小組嘗試使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將Bt基因轉(zhuǎn)入白僵菌中以加強(qiáng)白僵菌對(duì)害蟲(chóng)的防治效果。實(shí)驗(yàn)使用的Bt基因與Ti質(zhì)粒如下圖。下列敘述正確的是（

）A．為構(gòu)建基因表達(dá)載體應(yīng)用BamHI和NheI切割Bt基因和Ti質(zhì)粒B．采用轉(zhuǎn)基因白僵菌防治農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)對(duì)環(huán)境的污染較小，屬于化學(xué)防治C．培養(yǎng)含重組質(zhì)粒的白僵菌時(shí)，培養(yǎng)基上發(fā)綠色熒光的菌落即為目的菌D．除了對(duì)轉(zhuǎn)基因白僵菌進(jìn)行分子水平的檢測(cè)外，還應(yīng)對(duì)其進(jìn)行抗蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)【答案】D【解析】A、由圖可知，需將Bt基因整合到TDNA中，且不能破壞Bt基因，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體應(yīng)使用限制酶BamHI，切割Bt基因和Ti質(zhì)粒，再將二者進(jìn)行連接，若用BamHI和NheI切割Ti質(zhì)粒，會(huì)導(dǎo)致TDNA中終止子丟失，A錯(cuò)誤；B、采用轉(zhuǎn)基因白僵菌防治農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)對(duì)環(huán)境的污染較小，屬于生物防治，B錯(cuò)誤；C、構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，用BamHI切割質(zhì)粒時(shí)會(huì)破壞綠色熒光蛋白基因，因此含重組質(zhì)粒的白僵菌中不含綠色熒光蛋白基因，因此培養(yǎng)基上發(fā)綠色熒光的菌落不是導(dǎo)入重組DNA的目的菌，可能是導(dǎo)入空質(zhì)粒的菌體，C錯(cuò)誤；D、除了對(duì)轉(zhuǎn)基因白僵菌進(jìn)行分子水平的檢測(cè)外，還應(yīng)對(duì)其進(jìn)行抗蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)，在個(gè)體水平上檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物是否被賦予了目的基因所控制的性狀，D正確。12．胰島素用于治療糖尿病，但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長(zhǎng)時(shí)間才能進(jìn)入血液，進(jìn)入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響?？蒲腥藛T研制了速效胰島素，其生產(chǎn)過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．速效胰島素的生產(chǎn)需要用到蛋白質(zhì)工程和發(fā)酵工程B．大腸桿菌能轉(zhuǎn)錄、翻譯出新的胰島素，該胰島素能正常發(fā)揮作用C．除人工合成DNA外，還可以通過(guò)定點(diǎn)突變技術(shù)獲得目的基因D．可以用Ca2+處理的方法將新的胰島素基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌中【答案】B【解析】A、圖示的前半部分是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，后半部分是利用發(fā)酵工程生產(chǎn)速效胰島素的過(guò)程，A正確；B、大腸桿菌是原核生物，沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對(duì)胰島素原進(jìn)行加工，因此大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用，B錯(cuò)誤；C、基因定點(diǎn)突變是指按照特定的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換、重排等變異，除人工合成DNA外，還可以通過(guò)定點(diǎn)突變技術(shù)獲得目的基因，C正確；D、可以用Ca2+處理的方法可以將含有新的胰島素基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，D正確。故選B。13．生物技術(shù)是一把“雙刃劍”，在生物安全層面，基因編輯工具的濫用可能導(dǎo)致不可逆的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)；在倫理維度，技術(shù)的越界挑戰(zhàn)了人類(lèi)對(duì)生命本質(zhì)的認(rèn)知。面對(duì)這些挑戰(zhàn)，唯有將科學(xué)探索置于倫理與安全的共同基石之上，生物技術(shù)才能真正成為推動(dòng)人類(lèi)文明進(jìn)步的可持續(xù)力量。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．將α淀粉酶基因與目的基因一同轉(zhuǎn)入植物可防止基因污染B．我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽創(chuàng)新、推廣要慎重C．徹底禁止和銷(xiāo)毀生物武器是全世界愛(ài)好和平人民的共同期望D．生殖性克隆人與治療性克隆研究所面臨的倫理問(wèn)題完全相同【答案】D【解析】A、將α淀粉酶基因與目的基因一同轉(zhuǎn)入植物，可能通過(guò)該基因在花粉中的表達(dá)破壞花粉活性，阻止轉(zhuǎn)基因植物通過(guò)花粉傳播基因，從而減少基因污染，A正確；B、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是“研究上大膽創(chuàng)新，推廣上慎重”，強(qiáng)調(diào)科學(xué)研究與安全應(yīng)用并重，B正確；C、《禁止生物武器公約》明確要求禁止生物武器的研發(fā)、生產(chǎn)及儲(chǔ)存，徹底銷(xiāo)毀生物武器是全球共識(shí)，C正確；D、生殖性克隆涉及創(chuàng)造完整人類(lèi)個(gè)體的倫理爭(zhēng)議（如人權(quán)、身份問(wèn)題），而治療性克隆以獲取干細(xì)胞為目的，主要爭(zhēng)議在于胚胎的使用，兩者倫理問(wèn)題性質(zhì)不同，D錯(cuò)誤。故選D。14．科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)，定向刪除豬胚胎中控制特定器官發(fā)育的關(guān)鍵基因，使胚胎無(wú)法自主形成該器官。然后選取患者的體細(xì)胞通過(guò)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞，并將人類(lèi)iPS細(xì)胞注入已處理的豬的囊胚中形成人——?jiǎng)游锴逗象w胚胎。將該嵌合胚胎導(dǎo)入受體豬的子宮中，通過(guò)控制發(fā)育進(jìn)程可獲得相應(yīng)的器官。該項(xiàng)技術(shù)可為器官移植提供潛在供體。下列敘述或推測(cè)正確的是（）A．嵌合胚胎的獲得運(yùn)用了核移植技術(shù)B．應(yīng)該將iPS細(xì)胞注入豬囊胚的滋養(yǎng)層中C．通過(guò)該技術(shù)獲得的器官可能含有人和豬的基因D．該技術(shù)沒(méi)有沖擊現(xiàn)有的倫理道德，可大力推廣【答案】C【解析】A、核移植技術(shù)是將體細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞，而嵌合胚胎是將人類(lèi)iPS細(xì)胞注入豬囊胚，未涉及核移植，A錯(cuò)誤；B、應(yīng)該將人類(lèi)PS細(xì)胞注入豬囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中，而不是滋養(yǎng)層中，B錯(cuò)誤；C、由于是將人類(lèi)PS細(xì)胞注入豬囊胚形成嵌合胚胎，所以通過(guò)該技術(shù)獲得的器官可能含有人和豬的基因，C正確；D、人一動(dòng)物嵌合體胚胎技術(shù)涉及人類(lèi)細(xì)胞和動(dòng)物胚胎的結(jié)合，必然會(huì)存在社會(huì)倫理道德問(wèn)題，不能大力推廣，D錯(cuò)誤。故選C。15．某同學(xué)利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．該同學(xué)也可選擇豬血、香蕉為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA，但方法可能有所不同B．將洋蔥切碎加研磨液研磨、過(guò)濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中C．向含有DNA的粗提取液加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后攪拌幾分鐘后過(guò)濾，DNA主要存在于濾液中D．鑒定DNA時(shí)，需先將DNA溶解在2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺試劑并沸水浴加熱【答案】D【解析】A、豬的成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，DNA含量極少，無(wú)法有效提??；而香蕉為植物細(xì)胞，需破碎細(xì)胞壁，方法不同。但豬血中白細(xì)胞含細(xì)胞核，若處理得當(dāng)仍可提取，但高中實(shí)驗(yàn)中通常不選用豬血，A錯(cuò)誤；B、濾液靜置后，細(xì)胞碎片等雜質(zhì)沉淀，而DNA溶于高鹽溶液存在于上清液中，而非沉淀物中，B錯(cuò)誤；C、加入95%冷酒精后，DNA因溶解度降低而析出，應(yīng)存在于沉淀中，而非濾液，C錯(cuò)誤；D、鑒定DNA時(shí)需將DNA溶于2mol/LNaCl溶液，加入二苯胺試劑后沸水浴加熱顯藍(lán)色，D正確；故選D。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每個(gè)小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)是符合題目要求的。全部選對(duì)得3分，選對(duì)但不全得1分，選錯(cuò)得0分。16．噬菌體生物擴(kuò)增法是一種檢測(cè)樣本中有害菌數(shù)量的方法，原理是噬菌體能感染宿主細(xì)胞，進(jìn)入宿主細(xì)胞的噬菌體將不受殺病毒劑的滅活，在裂解宿主細(xì)胞后繼續(xù)在平板上感染周?chē)甘揪?，從而形成噬菌斑。現(xiàn)以該方法估算某樣本中有害菌的數(shù)量，操作步驟及結(jié)果如下。下列分析正確的是（）步驟實(shí)驗(yàn)組①將一定濃度的T2噬菌體懸液0.2mL與0.1mL待測(cè)水樣混合，保溫約5分鐘；②向懸液中加入0.2mL殺病毒劑和1.5mL無(wú)菌培養(yǎng)液；③將②所得培養(yǎng)液全部接種到長(zhǎng)滿(mǎn)指示菌的平板上，培養(yǎng)約24小時(shí)；④觀察并計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的透明噬菌斑數(shù)量。統(tǒng)計(jì)平均噬菌斑數(shù)量為73個(gè)A．實(shí)驗(yàn)中的指示菌，應(yīng)選擇對(duì)噬菌體敏感度高的菌種B．若①操作過(guò)程中保溫的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏小C．噬菌體懸液應(yīng)被充分稀釋?zhuān)员ＷC所有噬菌體都能侵染有害菌D．待測(cè)受污染水樣中的有害菌濃度約為730個(gè)/mL【答案】ABD【解析】A、噬菌體生物擴(kuò)增法的原理是噬菌體能感染宿主細(xì)胞，進(jìn)入宿主細(xì)胞的噬菌體將不受殺病毒劑的滅活，在裂解宿主細(xì)胞后繼續(xù)在平板上感染周?chē)甘揪?，從而形成噬菌斑，故?shí)驗(yàn)中的指示菌，應(yīng)選擇對(duì)噬菌體敏感度高的菌種，有利于噬菌體能感染宿主細(xì)胞，A正確；B、步驟①中，若保溫的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，部分大腸桿菌裂解，而裂解出的噬菌體被殺滅，使得最終的噬菌斑數(shù)量減少，即統(tǒng)計(jì)結(jié)果相比于實(shí)際結(jié)果偏小，B正確；C、噬菌體懸液不需要充分稀釋?zhuān)驗(yàn)閷?shí)驗(yàn)原理是每個(gè)細(xì)菌最多被一個(gè)噬菌體侵染形成噬菌斑，若充分稀釋可能導(dǎo)致噬菌體數(shù)量過(guò)少，不能充分侵染有害菌，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，C錯(cuò)誤；D、73個(gè)噬菌斑對(duì)應(yīng)的是0.1mL待測(cè)水樣中的活菌平均數(shù)，則待檢測(cè)受污染水樣中目標(biāo)菌的濃度約為73÷0.1=560個(gè)/mL，D正確。故選ABD。17．青蒿素是從黃花蒿中提取的次生代謝物。研究人員在對(duì)黃花蒿進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)愈傷組織中沒(méi)有青蒿素，而再分化形成的芽和苗中均能檢測(cè)到青蒿素。某研究小組構(gòu)建了黃花蒿細(xì)胞與BY2細(xì)胞（一種增殖能力很強(qiáng)的植物細(xì)胞）的雜種細(xì)胞，通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)大大提高了青蒿素的生產(chǎn)效率。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．愈傷組織再分化可以合成青蒿素，青蒿素是黃花蒿生長(zhǎng)所必需的B．雜種細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的過(guò)程中體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性C．再生出細(xì)胞壁的融合細(xì)胞需要篩選才可以用于大規(guī)模生產(chǎn)D．雜種細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)與誘導(dǎo)形成愈傷組織使用的培養(yǎng)基成分相同【答案】ABD【解析】A、愈傷組織再分化形成的芽和苗中可以合成青蒿素，青蒿素屬于次生代謝物，不是黃花蒿生長(zhǎng)所必需的，A錯(cuò)誤；B、雜種細(xì)胞大規(guī)模的培養(yǎng)過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞增殖，未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，B錯(cuò)誤；C、由于融合是隨機(jī)的，再生出細(xì)胞壁的融合細(xì)胞需要經(jīng)過(guò)篩選才能用于大規(guī)模生產(chǎn)，提高青蒿素的生產(chǎn)效率，C正確；D、雜種細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)需要的是液體培養(yǎng)基，誘導(dǎo)形成愈傷組織使用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，二者成分有區(qū)別，D錯(cuò)誤。故選ABD。18．科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得iPS細(xì)胞（多能干細(xì)胞），繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如圖。下列敘述正確的是（

）A．小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞的過(guò)程中形態(tài)結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變B．iPS細(xì)胞與內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞均具有發(fā)育的全能性C．上述三種不同體色的鼠中，只有黑鼠可以是雄鼠D．克隆鼠X的體色為黑色，培育過(guò)程中運(yùn)用了細(xì)胞核移植技術(shù)【答案】BC【解析】A、小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞的過(guò)程屬于細(xì)胞分化，細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生改變，但細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能會(huì)發(fā)生穩(wěn)定性差異，A錯(cuò)誤；B、iPS細(xì)胞（多能干細(xì)胞）與內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞都具有發(fā)育的全能性，都可以分化形成多種組織細(xì)胞，B正確；C、黑鼠是體細(xì)胞供體，提供細(xì)胞核，克隆鼠的遺傳特性由細(xì)胞核決定，灰鼠為胚胎移植的受體（代孕母鼠），只提供胚胎發(fā)育的場(chǎng)所，白鼠為重組囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞供體，上述三種不同體色的鼠中，只有黑鼠可以是雄鼠（因?yàn)榧?xì)胞核來(lái)自黑鼠，克隆鼠性別由黑鼠細(xì)胞核決定），C正確；D、克隆鼠X的體色由黑鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)決定，故體色為黑色；但該培育過(guò)程是通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得iPS細(xì)胞，繼而培育克隆鼠，未運(yùn)用細(xì)胞核移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選BC。19．干擾素是動(dòng)物細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，可用于對(duì)抗病毒的感染和癌癥，但體外保存相當(dāng)困難。如圖是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)生產(chǎn)干擾素的部分過(guò)程，獲得的基因DNA可導(dǎo)入大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，字母表示相關(guān)物質(zhì)，數(shù)字代表相關(guān)過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．a(chǎn)表示多肽鏈，b表示mRNA，步驟④需要用逆轉(zhuǎn)錄酶B．利用蛋白質(zhì)工程獲得的mRNA序列與動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)干擾素mRNA序列不一定相同C．①②③表示中心法則中遺傳信息流動(dòng)的部分過(guò)程D．用蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)干擾素所用的基因表達(dá)載體不需要啟動(dòng)子和終止子【答案】ACD【解析】A、分析圖可知，a表示多肽鏈，b表示mRNA，步驟④是直接通過(guò)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列合成基因DNA，不需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯(cuò)誤；B、密碼子具有簡(jiǎn)并性，一種氨基酸可能對(duì)應(yīng)幾種密碼子，所以由氨基酸序列得到的mRNA上的堿基序列不是唯一的，具有多樣性，B正確；C、①表示轉(zhuǎn)錄，②表示翻譯，③表示多肽鏈的加工過(guò)程，其中①②是中心法則中遺傳信息流動(dòng)的部分過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、基因表達(dá)載體必須包含啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，終止子是轉(zhuǎn)錄終止的信號(hào)，缺少啟動(dòng)子和終止子基因無(wú)法表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選ACD。20．治療性克隆的一般流程是把患者（供體）體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中形成重構(gòu)胚，再把重構(gòu)胚體外培養(yǎng)到囊胚，然后從中分離出ES細(xì)胞，并誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為所需的特定細(xì)胞類(lèi)型用于移植。下列說(shuō)法正確的是（）A．供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后還需誘導(dǎo)融合B．ES細(xì)胞在核遺傳上和供體細(xì)胞相同C．治療性克隆不會(huì)面臨倫理問(wèn)題D．治療性克隆可解決器官移植時(shí)的免疫排斥問(wèn)題【答案】ABD【解析】A、供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后，還需通過(guò)電融合法等誘導(dǎo)融合，使供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚，A正確；B、治療性克隆的ES細(xì)胞來(lái)源于供體細(xì)胞，在核遺傳上和供體細(xì)胞相同，B正確；C、治療性克隆會(huì)面臨倫理問(wèn)題，C錯(cuò)誤；D、治療性克隆的目的是培養(yǎng)出能夠用于醫(yī)學(xué)治療的供體器官，以解決目前臨床上存在的供體器官不足和移植后免疫排斥的問(wèn)題，D正確。故選ABD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21．（11分，除標(biāo)注外，每空2分）目前，我國(guó)正在普遍推行垃圾分類(lèi)制度，易腐垃圾（以廚余垃圾和餐飲垃圾為主）是我國(guó)城鄉(xiāng)生活垃圾的主要成分。從化學(xué)組成上看，廚余垃圾的主要成分包括纖維素、淀粉、脂肪和蛋白質(zhì)等。在實(shí)施城鄉(xiāng)生活垃圾分類(lèi)后，可利用生物技術(shù)對(duì)易腐垃圾就近就地處理?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了篩選能同時(shí)降解廚余垃圾中四種主要成分的微生物，某興趣小組提供了如下實(shí)驗(yàn)思路：首先將微生物樣品接種在以為唯一碳源的培養(yǎng)基上，篩選出纖維素分解菌；再將篩選出的纖維素分解菌接種到以為唯一碳源的培養(yǎng)基上，篩選出能同時(shí)降解纖維素和淀粉的菌種；以此類(lèi)推，最后篩選獲得能同時(shí)降解四種成分的微生物（假設(shè)為菌種A）。(2)雖然上述各種培養(yǎng)基的具體配方有所不同，但都須含有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)過(guò)程中，單個(gè)細(xì)胞在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種類(lèi)的微生物，原因是。(3)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)篩選獲得的菌種A能同時(shí)降解四種成分，是因?yàn)榫NA能合成水解相應(yīng)有機(jī)物的酶，因此廚余垃圾中的四種有機(jī)物經(jīng)菌種A徹底水解后可產(chǎn)生的產(chǎn)物有。利用菌種A就近就地處理廚余垃圾，在確定處理廚余垃圾的方案時(shí)，通常需要考慮的因素有?！敬鸢浮?1)纖維素淀粉(2)在一定的培養(yǎng)條件下，不同微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征/在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征（3分）(3)甘油、脂肪酸、葡萄糖和氨基酸處理環(huán)境的溫度、酸堿度等理化條件【解析】（1）篩選能分解某種物質(zhì)的微生物，應(yīng)以該種物質(zhì)為唯一碳源（或氮源），所以，需先將篩選出的纖維素分解菌接種到以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，再接種在以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上。（2）因?yàn)樵谝欢ǖ呐囵B(yǎng)條件下，不同微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，所以可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種類(lèi)的微生物。（3）經(jīng)篩選獲得的菌種A能同時(shí)降解四種成分，是因?yàn)榫NA能合成水解相應(yīng)有機(jī)物的酶，因此廚余垃圾中的四種有機(jī)物（纖維素、淀粉、脂肪和蛋白質(zhì)）經(jīng)菌種A徹底水解后可產(chǎn)生的產(chǎn)物有甘油、脂肪酸、葡萄糖和氨基酸。利用菌種A就近就地處理廚余垃圾，在確定處理廚余垃圾的方案時(shí)，通常需要考慮的因素有處理環(huán)境的溫度、酸堿度等理化條件。22．（11分，除標(biāo)注外，每空1分）和牛是世界公認(rèn)的高檔肉牛品種，其體形較小，肉質(zhì)鮮嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富。我國(guó)科研人員利用胚胎移植技術(shù)，按如圖所示流程操作，成功地批量培育了和牛這一優(yōu)良品種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)用激素處理，可使供體母牛超數(shù)排卵，過(guò)程①中產(chǎn)生的精子需要進(jìn)行處理后才具有與卵子受精的能力。(2)試管牛的培育需要的工程技術(shù)有和胚胎移植等。(3)題圖中移植的胚胎處于期，移入的胚胎能在代孕雌牛子宮中存活的生理基礎(chǔ)是；為培育子代雌性小牛，胚胎移植前要進(jìn)行性別鑒定，宜取細(xì)胞進(jìn)行DNA分析。(4)為提高胚胎利用效率，盡快獲得數(shù)量較多的子代和牛，圖中甲環(huán)節(jié)是對(duì)牛胚胎所做的處理，使用的技術(shù)稱(chēng)為，最終目的是；這一過(guò)程中，要特別注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分割，其原因是?！敬鸢浮?1)促性腺獲能(2)體外受精、早期胚胎培養(yǎng)(3)囊胚受體雌牛子宮對(duì)外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)滋養(yǎng)層(4)胚胎分割產(chǎn)生多個(gè)基因型相同的后代均等若不均等分割，將影響分割后胚胎的恢復(fù)和發(fā)育，比如含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)少的部分發(fā)育不良或不發(fā)育（2分）【解析】（1）用促性腺激素處理后，可使供體母牛一次性排出多個(gè)卵子，采集的精子往往需要經(jīng)過(guò)獲能處理后才具有與卵子受精的能力。（2）試管牛的培育需要體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。（3）題圖中移植的胚胎處于囊胚期；移入的胚胎能在受體雌牛子宮中存活，其生理基礎(chǔ)是代孕雌牛子宮對(duì)外來(lái)胚胎基本不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；另外，為培育雌性奶牛，胚胎移植前要進(jìn)行性別鑒定，宜取早期胚胎的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞將來(lái)會(huì)發(fā)育成胎兒的各種器官和組織，不宜取用。（4）為提高胚胎利用效率，盡快獲得數(shù)量較多的子代和牛，應(yīng)對(duì)胚胎進(jìn)行胚胎分割處理，此操作的最終目的是獲得多個(gè)基因型相同的后代。該處理過(guò)程需特別注意的是要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則將影響分割后胚胎的恢復(fù)和發(fā)育，比如含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)少的部分發(fā)育不良或不發(fā)育。23．（10分，除標(biāo)注外，每空1分）某些癌細(xì)胞表面有大量膜蛋白PDL1，PDL1能與T細(xì)胞表面的PD1結(jié)合，抑制T細(xì)胞的活化，使癌細(xì)胞實(shí)現(xiàn)免疫逃逸。臨床上可利用抗PD1的單克隆抗體進(jìn)行癌癥治療。制備過(guò)程如下：(1)單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了和的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到的雜交瘤細(xì)胞。(2)將（1）所得細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，一段時(shí)間后進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，檢測(cè)原理如圖1。在檢測(cè)時(shí)需要將PD1蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原，并加入待測(cè)樣本，樣本取自多孔板培養(yǎng)槽中的（填“細(xì)胞”或“上清液”）。加入酶標(biāo)抗體后一段時(shí)間，需要用洗滌劑將未與抗PD1抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去，原因是。(3)CD28是T細(xì)胞表面受體，PSMA為癌細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，T細(xì)胞的有效激活依賴(lài)于CD28在癌細(xì)胞與T細(xì)胞結(jié)合部位的聚集?？蒲腥藛T在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上，獲得了雙雜交瘤細(xì)胞以產(chǎn)生雙特異性抗體PSMA×CD28，可誘導(dǎo)T細(xì)胞定向殺傷腫瘤細(xì)胞，如圖2。①制備雙雜交瘤細(xì)胞過(guò)程：先將分別注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)其與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞，再誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合。成功融合的細(xì)胞稱(chēng)作雙雜交瘤細(xì)胞。②雙特異性抗體還可以攜帶抗腫瘤藥物應(yīng)用于腫瘤治療，其優(yōu)勢(shì)是。【答案】(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體(2)上清液待測(cè)液中即使沒(méi)有抗PD1抗體，游離的酶標(biāo)抗體也可以催化酶促反應(yīng)底物發(fā)生反應(yīng)而出現(xiàn)藍(lán)色，洗去游離的酶標(biāo)抗體可避免出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象（2分）(3)PSMA、CD28既能與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合，又能與抗腫瘤藥物特異性結(jié)合，從而降低了抗腫瘤藥物的副作用(提高了抗腫瘤藥物的靶向性）（3分）【解析】（1）單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)這兩項(xiàng)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)用于培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞以及雜交瘤細(xì)胞等，使其能夠生長(zhǎng)和增殖。用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞。（2）在檢測(cè)時(shí)需要將PD1蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原，并加入多孔板培養(yǎng)槽中的上清液（其中含有的是相應(yīng)的抗體），即待測(cè)樣本。加入酶標(biāo)抗體后一段時(shí)間，需要用洗滌劑將未與抗PD1抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗去，因?yàn)榧尤胂鄳?yīng)酶促反應(yīng)底物后，待測(cè)液中即使沒(méi)有抗PD1抗體，游離的酶標(biāo)抗體可以催化酶促反應(yīng)底物發(fā)生反應(yīng)而出現(xiàn)藍(lán)色，可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象。（3）①結(jié)合圖3可知，癌細(xì)胞表面的PSMA和T細(xì)胞表面CD28為相應(yīng)的抗原物質(zhì)，需要先將抗原物質(zhì)PSMA、CD28分別注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)其與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞，再誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合。成功融合的細(xì)胞會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細(xì)胞稱(chēng)作雙雜交瘤細(xì)胞。②雙特異性抗體還可以攜帶抗腫瘤藥物應(yīng)用于腫瘤治療，其表現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)為既能與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合，又能與抗腫瘤藥物特異性結(jié)合，從而降低了抗腫瘤藥物的副作用，同時(shí)也能提高藥效。24．（12分，每空2分）聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一類(lèi)在全球廣泛使用的聚酯型塑料，常用于一次性包裝及紡織品領(lǐng)域，它在極大地方便了人們的生產(chǎn)生活的同時(shí)，也產(chǎn)生了大量的固體垃圾，造成了塑料污染及資源浪費(fèi)問(wèn)題。已知磷脂酶可催化PET降解。為獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗(yàn)了2種方法?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)方法1：從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一種磷脂類(lèi)物質(zhì)）為唯一碳源制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中應(yīng)該還有（至少寫(xiě)出2種）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(2)方法2：采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼磷脂酶的基因，該技術(shù)還需要（至少寫(xiě)出2種）等“分子工具”。(3)除了上述2種方法，還可以通過(guò)技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物。(4)將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過(guò)觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能是?！敬鸢浮?1)選擇水、無(wú)機(jī)鹽、氮源(2)基因工程（或轉(zhuǎn)基因）限制酶、DNA連接酶、載體（或質(zhì)粒）(3)誘變育種(4)不同平板中培養(yǎng)基的量有差異以及平板內(nèi)和平板間培養(yǎng)基厚度不均勻【解析】（1）方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯為唯一碳源制備選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中只有能利用磷脂酰乙醇酯的微生物能生長(zhǎng)，其他微生物的生長(zhǎng)被抑制，進(jìn)而獲得篩選出所需要的微生物，為了提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中至少還應(yīng)該有水分、無(wú)機(jī)鹽和氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)還需要提供微生物生長(zhǎng)所需要的外界環(huán)境條件。（2）方法2采用基因工程技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼磷脂酶的基因，即目的基因外，該技術(shù)還需要限制酶、DNA連接酶和載體（或質(zhì)粒）等“分子工具”，進(jìn)而可以實(shí)現(xiàn)目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建。（3）除了上述2種方法之外，還可以通過(guò)誘變育種技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物，該該技術(shù)的原理是基因突變，由于基因突變具有不定向性，因而該技術(shù)具有盲目性。（4）將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過(guò)觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，即倒平板過(guò)程中沒(méi)有經(jīng)過(guò)定量檢測(cè)，且平板倒置的實(shí)際可能也會(huì)影響平板中培養(yǎng)基厚度的不同，因此不同平板中培養(yǎng)基量的差異以及平板內(nèi)培養(yǎng)基厚度不均勻以及平板間厚度不均勻都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷，因此可采用降解圈的直徑和菌落直徑的比值作為判斷依據(jù)。25．（11分，除標(biāo)注外，每空1分）某研究小組通過(guò)構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒1），然后通過(guò)重組質(zhì)粒2將ZRP4基因?qū)胨局仓?，培育轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)質(zhì)粒1中的P啟動(dòng)子僅能在植物細(xì)胞中持續(xù)發(fā)揮作用，Ω7基因能顯著增強(qiáng)P啟動(dòng)子的作用。啟動(dòng)子的作用是。含ZRP4基因的DNA片段如圖1所示。在構(gòu)建重組質(zhì)粒1之前，對(duì)ZRP4基因進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，PCR反應(yīng)中需要在緩沖液中添加酶。擴(kuò)增過(guò)程中，引物與ZRP4基因模板鏈的