2025年實驗室生物安全試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共20題，40分）1.依據《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2022），BSL-3實驗室的核心工作間與相鄰區(qū)域的壓差應不低于（）A.-10PaB.-20PaC.-30PaD.-40Pa2.處理含有高致病性病原微生物的樣本時，必須使用的個人防護裝備組合是（）A.普通工作服+一次性手套B.防滲隔離衣+雙層手套+護目鏡C.正壓防護服+N95口罩D.實驗服+乳膠手套+面屏3.關于實驗室銳器管理，錯誤的操作是（）A.使用后立即放入防穿刺銳器盒B.重復使用的銳器需先高壓滅菌再清洗C.手持銳器時避免與他人并行D.用手直接分離使用過的針頭與注射器4.生物安全實驗室的雙扉高壓滅菌器應滿足（）A.僅需內側門與核心工作間連通B.兩側門可同時開啟C.具備溫度、壓力、時間監(jiān)控及記錄功能D.滅菌后物品可直接傳入清潔區(qū)5.進行細胞培養(yǎng)操作時，若培養(yǎng)瓶意外跌落破裂，正確的應急處置流程是（）A.立即用紙巾擦拭→噴灑75%酒精→報告主管B.用一次性吸水材料覆蓋→噴灑0.5%次氯酸鈉→靜置10分鐘→清理→消毒臺面C.直接用掃帚清理碎片→用含酶清潔劑擦拭→紫外線照射30分鐘D.穿戴普通手套收集碎片→放入醫(yī)療垃圾桶→通風30分鐘6.運輸第二類病原微生物樣本時，不需要提供的文件是（）A.樣本接收單位的《高致病性病原微生物實驗室資格證書》B.運輸容器的壓力蒸汽滅菌證明C.省級衛(wèi)生行政部門的準運批準文件D.樣本包裝符合UN2814標準的證明7.實驗室生物安全手冊中“三級屏障”指的是（）A.個人防護裝備、實驗室設施、環(huán)境監(jiān)控B.實驗操作規(guī)范、設備防護、建筑結構C.個體防護、實驗室設計、社區(qū)防護D.生物安全柜、高壓滅菌器、通風系統(tǒng)8.關于實驗室氣溶膠控制，錯誤的措施是（）A.離心時使用密封轉頭和帶蓋離心管B.開啟凍干樣本管前先平衡壓力C.用移液槍反復吹打混勻樣本D.超聲破碎時在生物安全柜內進行9.某BSL-2實驗室擬開展新型冠狀病毒（滅活）研究，需額外滿足的條件是（）A.核心工作間與走廊壓差不低于-15PaB.配備Ⅱ級B2型生物安全柜C.實驗人員需完成高致病性病原微生物相關培訓D.安裝獨立的空氣凈化系統(tǒng)10.實驗室醫(yī)療廢棄物分類中，不屬于感染性廢物的是（）A.用過的細胞培養(yǎng)基B.廢棄的實驗動物墊料C.帶血的紗布D.破損的玻璃培養(yǎng)皿11.進行動物實驗時，對實驗動物的生物安全管理不包括（）A.實驗前進行健康檢查B.運輸時使用專用容器C.實驗后實施安樂死并規(guī)范處理D.實驗過程中不限制動物活動范圍12.生物安全實驗室的消防設計應優(yōu)先考慮（）A.快速滅火B(yǎng).防止火勢蔓延導致的氣溶膠擴散C.保護實驗設備D.保障人員逃生13.關于實驗室菌種管理，正確的做法是（）A.菌種接收后直接放入普通冰箱保存B.領用菌種只需實驗員自行登記C.高致病性菌種需雙人雙鎖管理D.廢棄菌種可與普通垃圾一起處理14.進行PCR擴增時，若發(fā)現擴增儀故障導致樣本暴露，應首先（）A.關閉擴增儀電源B.穿戴防護裝備后清理現場C.報告實驗室負責人D.用紫外線照射故障設備15.實驗室生物安全培訓的重點內容不包括（）A.本實驗室涉及的病原微生物特性B.應急演練流程C.實驗數據統(tǒng)計方法D.個人防護裝備的正確使用16.關于實驗室通風系統(tǒng)，錯誤的要求是（）A.新風應來自清潔區(qū)域B.排風需經高效過濾器（HEPA）處理C.可與其他實驗室共用排風管道D.系統(tǒng)故障時應自動關閉實驗室入口17.處理朊病毒污染的器械時，正確的消毒方法是（）A.121℃高壓滅菌30分鐘B.浸泡于1mol/L氫氧化鈉溶液1小時C.75%酒精擦拭3次D.紫外線照射60分鐘18.實驗室生物安全自查的頻率應為（）A.每月1次B.每季度1次C.每半年1次D.每年1次19.進行動物解剖時，不正確的操作是（）A.在生物安全柜內進行B.解剖工具使用后立即浸泡于消毒液C.解剖過程中避免濺灑D.解剖后的動物尸體直接放入普通垃圾袋20.實驗室發(fā)生病原微生物泄露事件后，啟動應急預案的第一步驟是（）A.疏散無關人員B.封鎖污染區(qū)域C.評估泄露風險等級D.穿戴防護裝備進行處置二、判斷題（每題1分，共10題，10分）1.BSL-1實驗室可處理所有已知無致病性的微生物。（）2.實驗室入口處需標注當前工作的病原微生物名稱、生物安全等級及負責人信息。（）3.為提高效率，實驗過程中可將個人物品（如手機）帶入核心工作間。（）4.生物安全柜內操作時，手臂應快速進出以減少污染風險。（）5.實驗室廢水需經消毒處理達到《醫(yī)療機構水污染物排放標準》后排放。（）6.實驗動物的籠具可與普通實驗器械共用清洗設備。（）7.高致病性病原微生物實驗活動結束后，需保存樣本至少2年備查。（）8.實驗室生物安全委員會應至少包含微生物學、設備管理和法律方面的專家。（）9.為節(jié)約成本，一次性防護裝備（如手套）可清洗后重復使用。（）10.實驗室發(fā)生疑似感染事件時，應立即對相關人員進行醫(yī)學觀察并記錄暴露細節(jié)。（）三、簡答題（每題8分，共5題，40分）1.簡述BSL-2實驗室與BSL-3實驗室在設施要求上的主要區(qū)別。2.列舉實驗室個人防護裝備（PPE）的選擇原則，并說明不同生物安全等級下的核心裝備差異。3.說明實驗室感染性廢棄物的分類標準及對應的處理方法（需至少列舉3類）。4.描述菌液溢灑（5ml含結核分枝桿菌的培養(yǎng)液）的應急處置流程（包括防護、消毒、記錄等環(huán)節(jié)）。5.分析實驗室生物安全培訓的關鍵要素，并說明如何評估培訓效果。四、案例分析題（10分）某高校BSL-2實驗室開展沙門氏菌（生物安全二級）實驗時，發(fā)生以下情況：實驗員張某未佩戴護目鏡，在生物安全柜外進行菌液移液操作，移液槍頭意外脫落導致約2ml菌液濺至實驗服和臺面。張某立即用紙巾擦拭臺面，將污染的實驗服放入普通洗衣機清洗。問題：指出上述操作中的錯誤，并提出正確的處置措施。參考答案一、單項選擇題1.D2.B3.D4.C5.B6.B7.C8.C9.C10.D11.D12.B13.C14.B15.C16.C17.B18.B19.D20.C二、判斷題1.√2.√3.×4.×5.√6.×7.√8.√9.×10.√三、簡答題1.主要區(qū)別：（1）氣流控制：BSL-2實驗室核心區(qū)與相鄰區(qū)域壓差≥-10Pa，BSL-3≥-30Pa；（2）防護設施：BSL-3需設緩沖間、獨立送排風系統(tǒng)（不循環(huán)）、雙扉高壓滅菌器；（3）人員防護：BSL-3必須使用Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜，實驗人員需穿戴正壓防護服或全面型呼吸防護器；（4）廢棄物處理：BSL-3的所有廢棄物需經雙扉高壓滅菌或化學消毒后傳出，BSL-2部分可在實驗室內處理后傳出。2.選擇原則：（1）匹配性：根據病原微生物危害等級、操作類型選擇防護級別；（2）密封性：關鍵部位（如手套與袖套、面部與面罩）需無泄漏；（3）舒適性：長時間操作時需考慮透氣性、靈活性；（4）合規(guī)性：符合國家標準（如GB24540-2009）。核心裝備差異：BSL-1：實驗服+手套；BSL-2：防滲隔離衣+雙層手套+護目鏡/面屏；BSL-3：正壓防護服+全面型呼吸防護器+一次性鞋套；BSL-4：獨立供氣正壓防護服（需連接生命支持系統(tǒng)）。3.分類及處理方法：（1）感染性廢物：含病原微生物的培養(yǎng)基、標本、實驗動物尸體等→高壓蒸汽滅菌（121℃，30分鐘）后按醫(yī)療廢物處理；（2）病理性廢物：實驗動物組織、器官→先化學固定（如10%福爾馬林），再高壓滅菌或焚燒；（3）損傷性廢物：針頭、玻璃碎片等→放入防穿刺銳器盒，高壓滅菌后交醫(yī)療廢物處理單位；（4）化學性廢物：廢棄的消毒液、試劑→分類收集（酸/堿/有機溶劑），交有資質的危廢處理公司。4.應急處置流程：（1）防護：立即停止操作，佩戴N95口罩、雙層手套、護目鏡、防滲隔離衣；（2）圍堵：用一次性吸水材料（如消毒紙巾）覆蓋溢灑區(qū)域，從外圍向中心噴灑0.5%次氯酸鈉（結核分枝桿菌需提高至2%），靜置30分鐘；（3）清理：用鑷子夾取污染材料放入感染性廢物袋，用蘸取消毒液的抹布擦拭臺面，重復3次；（4）消毒：對污染區(qū)域及周邊1米范圍再次噴灑消毒液，作用15分鐘；（5）記錄：填寫《生物安全事件記錄表》，包括時間、地點、菌種、溢灑量、處置過程及參與人員；（6）立即向實驗室負責人報告，24小時內提交詳細報告至生物安全委員會。5.關鍵要素：（1）針對性：結合實驗室實際（如涉及的病原微生物、操作類型）設計內容；（2）實操性：包含個人防護裝備穿戴、生物安全柜使用、應急演練等實踐環(huán)節(jié)；（3）更新性：定期補充最新法規(guī)（如《生物安全法》修訂內容）、新技術風險；（4）強制性：新員工上崗前必須完成培訓并考核合格。效果評估方法：（1）理論考核：閉卷考試（≥80分為合格）；（2）實操考核：現場模擬（如穿脫防護服、處理溢灑），由資深人員評分；（3）日常觀察：通過實驗室監(jiān)控、檢查記錄評估操作規(guī)范性；（4）事件回溯：分析近1年生物安全事件，評估培訓是否覆蓋風險點。四、案例分析題錯誤點：（1）未佩戴護目鏡：BSL-2實驗涉及菌液操作時，必須佩戴護目鏡/面屏防止濺入眼睛；（2）在生物安全柜外操作：沙門氏菌為BSL-2病原，菌液移液應在Ⅱ級生物安全柜內進行；（3）直接用紙巾擦拭：未先使用消毒液覆蓋，可能導致氣溶膠擴散；（4）污染實驗服放入普通洗衣機：應先高壓滅菌或浸泡于0.5%次氯酸鈉30分鐘后再清洗。正確處置措施：（1）立