2025四川大學(xué)華西第二醫(yī)院西部婦幼醫(yī)學(xué)研究院心臟細胞命運決定實驗室科研助理招聘備考試卷【附答案】一、單項選擇題（每題1分，共20分）1.以下哪種細胞是心臟發(fā)育過程中的關(guān)鍵前體細胞？A.神經(jīng)干細胞B.心肌前體細胞C.表皮干細胞D.造血干細胞答案：B分析：心肌前體細胞可分化為心肌細胞等，是心臟發(fā)育關(guān)鍵前體細胞，神經(jīng)、表皮、造血干細胞與心臟發(fā)育無直接關(guān)鍵聯(lián)系。2.心臟細胞命運決定過程中，Notch信號通路主要調(diào)控的是？A.細胞增殖B.細胞凋亡C.細胞分化D.細胞遷移答案：C分析：Notch信號通路在心臟細胞命運決定中主要調(diào)控細胞分化，對增殖、凋亡、遷移也有影響但非主要作用。3.下列哪種基因敲除可能導(dǎo)致心臟發(fā)育異常？A.GATA4B.P53C.BRCA1D.Rb答案：A分析：GATA4基因?qū)π呐K發(fā)育至關(guān)重要，敲除會致心臟發(fā)育異常，P53主要與腫瘤抑制等有關(guān)，BRCA1與乳腺癌相關(guān)，Rb與細胞周期調(diào)控有關(guān)。4.細胞培養(yǎng)時，常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是？A.DMEMB.PBSC.FBSD.Trypsin答案：A分析：DMEM是常用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，PBS是緩沖液，F(xiàn)BS是胎牛血清用于補充營養(yǎng)，Trypsin是消化細胞的酶。5.實時熒光定量PCR技術(shù)中，用于定量的指標是？A.Ct值B.OD值C.吸光度D.熒光強度答案：A分析：Ct值是實時熒光定量PCR用于定量的指標，OD值用于測核酸蛋白濃度，吸光度是廣義概念，熒光強度受多種因素影響不直接用于定量。6.蛋白質(zhì)免疫印跡實驗中，轉(zhuǎn)膜的目的是？A.使蛋白質(zhì)固定在膜上B.使蛋白質(zhì)變性C.使蛋白質(zhì)復(fù)性D.使蛋白質(zhì)水解答案：A分析：轉(zhuǎn)膜是將SDSPAGE分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移并固定到膜上，便于后續(xù)抗體結(jié)合檢測，不是為了變性、復(fù)性或水解。7.心臟細胞命運決定研究中，常用的模式生物是？A.果蠅B.斑馬魚C.線蟲D.酵母答案：B分析：斑馬魚心臟發(fā)育與人類有一定相似性，是心臟細胞命運決定研究常用模式生物，果蠅、線蟲、酵母在心臟研究中應(yīng)用相對較少。8.細胞周期中，DNA合成發(fā)生在哪個時期？A.G1期B.S期C.G2期D.M期答案：B分析：S期進行DNA合成，G1期為DNA合成做準備，G2期為細胞分裂做準備，M期是細胞分裂期。9.以下哪種技術(shù)可用于檢測細胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用？A.免疫共沉淀B.流式細胞術(shù)C.免疫組化D.原位雜交答案：A分析：免疫共沉淀可利用抗體沉淀目標蛋白及與之相互作用的蛋白，流式細胞術(shù)用于細胞計數(shù)和分析，免疫組化用于組織細胞中蛋白定位，原位雜交檢測核酸。10.心臟細胞命運決定過程中，Wnt信號通路激活會促進？A.心肌細胞增殖B.心肌細胞凋亡C.心肌細胞分化D.心肌細胞衰老答案：C分析：Wnt信號通路激活在心臟細胞命運決定中促進心肌細胞分化，對增殖、凋亡、衰老也有影響但促進分化是主要作用。11.基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9中，Cas9蛋白的作用是？A.識別靶序列B.切割DNAC.結(jié)合DNAD.轉(zhuǎn)錄激活答案：B分析：Cas9蛋白在CRISPR/Cas9技術(shù)中起切割DNA作用，sgRNA識別靶序列，結(jié)合DNA是多種蛋白功能，轉(zhuǎn)錄激活不是Cas9主要作用。12.細胞培養(yǎng)時，防止微生物污染常用的抗生素是？A.青霉素鏈霉素B.慶大霉素C.卡那霉素D.四環(huán)素答案：A分析：青霉素鏈霉素是細胞培養(yǎng)常用防止微生物污染的抗生素，慶大、卡那、四環(huán)素也有抗菌作用但不是最常用。13.蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，常用的分離技術(shù)是？A.雙向電泳B.離子交換色譜C.凝膠過濾色譜D.親和色譜答案：A分析：雙向電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)常用分離技術(shù)，可按等電點和分子量分離大量蛋白質(zhì)，其他色譜技術(shù)也用于分離但不是蛋白質(zhì)組學(xué)主要分離方法。14.心臟細胞命運決定研究中，研究細胞間通訊常用的方法是？A.熒光共振能量轉(zhuǎn)移B.膜片鉗技術(shù)C.單細胞測序D.基因芯片答案：A分析：熒光共振能量轉(zhuǎn)移可檢測細胞間分子相互作用和通訊，膜片鉗測離子通道，單細胞測序分析細胞異質(zhì)性，基因芯片檢測基因表達。15.以下哪種細胞因子對心臟細胞生長有促進作用？A.VEGFB.TNFαC.IFNγD.IL6答案：A分析：VEGF可促進血管生成和細胞生長，對心臟細胞生長有促進作用，TNFα、IFNγ、IL6多與免疫炎癥相關(guān)。16.細胞凋亡的特征性形態(tài)學(xué)變化是？A.細胞腫脹B.染色質(zhì)邊集C.線粒體腫脹D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張答案：B分析：染色質(zhì)邊集是細胞凋亡特征性形態(tài)學(xué)變化，細胞腫脹、線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張是細胞壞死表現(xiàn)。17.免疫熒光實驗中，二抗的作用是？A.特異性結(jié)合抗原B.增強熒光信號C.標記一抗D.固定細胞答案：C分析：二抗結(jié)合一抗并帶有熒光標記，起到標記一抗作用，一抗特異性結(jié)合抗原，增強熒光信號不是主要作用，固定細胞用固定劑。18.心臟細胞命運決定過程中，表觀遺傳修飾主要影響？A.基因轉(zhuǎn)錄B.基因翻譯C.蛋白質(zhì)折疊D.蛋白質(zhì)降解答案：A分析：表觀遺傳修飾如DNA甲基化、組蛋白修飾等主要影響基因轉(zhuǎn)錄，對翻譯、折疊、降解也有間接影響但非主要。19.細胞培養(yǎng)的適宜溫度一般是？A.25℃B.30℃C.37℃D.42℃答案：C分析：人體細胞培養(yǎng)適宜溫度一般是37℃，25℃、30℃不利于細胞生長，42℃可能導(dǎo)致細胞損傷。20.以下哪種實驗技術(shù)可用于檢測基因表達水平的整體變化？A.基因表達譜芯片B.原位雜交C.免疫組化D.蛋白質(zhì)免疫印跡答案：A分析：基因表達譜芯片可同時檢測大量基因表達水平整體變化，原位雜交檢測特定基因位置，免疫組化和蛋白免疫印跡檢測蛋白。二、多項選擇題（每題2分，共10分）1.心臟細胞命運決定受以下哪些因素影響？A.基因調(diào)控B.信號通路C.細胞微環(huán)境D.表觀遺傳修飾答案：ABCD分析：基因調(diào)控決定細胞基本特性，信號通路傳遞信息調(diào)控細胞行為，細胞微環(huán)境提供生長信號，表觀遺傳修飾影響基因表達，都影響心臟細胞命運決定。2.以下哪些技術(shù)可用于心臟細胞的鑒定？A.免疫熒光B.流式細胞術(shù)C.實時熒光定量PCRD.蛋白質(zhì)免疫印跡答案：ABCD分析：免疫熒光可標記細胞特定蛋白進行鑒定，流式細胞術(shù)分析細胞表面標志物，實時熒光定量PCR檢測特征基因表達，蛋白免疫印跡檢測特征蛋白。3.細胞培養(yǎng)過程中，需要注意的事項有？A.無菌操作B.合適的培養(yǎng)基和血清C.定期更換培養(yǎng)基D.控制細胞密度答案：ABCD分析：無菌操作防止污染，合適培養(yǎng)基和血清提供營養(yǎng)，定期換培養(yǎng)基維持營養(yǎng)和pH，控制細胞密度保證細胞正常生長。4.基因編輯技術(shù)的應(yīng)用包括？A.疾病模型構(gòu)建B.基因治療C.藥物研發(fā)D.作物改良答案：ABCD分析：基因編輯可構(gòu)建疾病模型研究發(fā)病機制，用于基因治療糾正缺陷基因，輔助藥物研發(fā)篩選靶點，也用于作物改良提高品質(zhì)。5.心臟細胞命運決定研究中，常用的分子生物學(xué)技術(shù)有？A.PCRB.蛋白質(zhì)免疫印跡C.基因克隆D.核酸測序答案：ABCD分析：PCR用于擴增基因，蛋白免疫印跡檢測蛋白，基因克隆獲取目的基因，核酸測序分析基因序列，都是常用技術(shù)。三、判斷題（每題1分，共10分）1.心臟細胞命運決定是一個不可逆的過程。（×）分析：在一定條件下，心臟細胞命運可發(fā)生改變，并非完全不可逆。2.細胞培養(yǎng)時，血清濃度越高越好。（×）分析：血清濃度過高可能含有害物質(zhì)且增加成本，需合適濃度。3.實時熒光定量PCR可以絕對定量基因表達水平。（√）分析：通過標準曲線等方法可實現(xiàn)絕對定量。4.蛋白質(zhì)免疫印跡實驗中，一抗和二抗可以同時加入。（×）分析：應(yīng)先加一抗結(jié)合抗原，洗滌后再加二抗結(jié)合一抗。5.斑馬魚心臟發(fā)育過程與人類完全相同。（×）分析：有相似性但并非完全相同。6.基因編輯技術(shù)只能用于動物研究。（×）分析：還可用于植物、微生物等研究及基因治療等。7.細胞凋亡和細胞壞死的機制相同。（×）分析：凋亡是程序性死亡，壞死是意外死亡，機制不同。8.免疫熒光實驗中，熒光強度越強說明抗原含量越高。（√）分析：一般情況下，熒光強度與抗原含量正相關(guān)。9.表觀遺傳修飾不會改變DNA序列。（√）分析：表觀遺傳修飾如甲基化等不改變DNA序列。10.細胞周期中，M期時間最長。（×）分析：G1期時間相對較長，M期較短。四、簡答題（每題10分，共20分）1.簡述心臟細胞命運決定的主要調(diào)控機制。答：心臟細胞命運決定受多種因素調(diào)控。基因調(diào)控方面，特定轉(zhuǎn)錄因子如GATA4、Nkx2.5等在心臟發(fā)育不同階段表達，決定細胞向心臟細胞分化。信號通路如Notch、Wnt、BMP等參與其中，Notch調(diào)控細胞分化，Wnt促進心肌細胞分化，BMP參與心臟早期發(fā)育。細胞微環(huán)境提供生長因子、細胞外基質(zhì)等信號，影響細胞命運。表觀遺傳修飾如DNA甲基化、組蛋白修飾改變基因表達，在心臟細胞命運決定中起重要作用。2.請說明蛋白質(zhì)免疫印跡實驗的基本步驟。答：基本步驟如下：樣本制備，提取細胞或組織中的蛋白質(zhì)；SDSPAGE電泳，根據(jù)蛋白質(zhì)分子量分離；轉(zhuǎn)膜，將電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上；封閉，用封閉液封閉膜上非特異性結(jié)合位點；一抗孵育，加入特異性一抗與目標蛋白結(jié)合；洗滌，去除未結(jié)合一抗；二抗孵育，加入標記的二抗結(jié)合一抗；洗滌，去除未結(jié)合二抗；顯色或發(fā)光檢測，通過化學(xué)發(fā)光或顯色劑顯示目標蛋白條帶。五、論述題（每題20分，共40分）1.論述基因編輯技術(shù)在心臟細胞命運決定研究中的應(yīng)用及前景。答：基因編輯技術(shù)如CRISPR/Cas9在心臟細胞命運決定研究中有重要應(yīng)用。在疾病模型構(gòu)建方面，可通過編輯特定基因模擬心臟疾病相關(guān)基因突變，研究疾病發(fā)生機制和細胞命運改變。如敲除與心臟發(fā)育相關(guān)基因，觀察心臟細胞發(fā)育異常情況。在基因功能研究上，可敲除或編輯基因，分析其對心臟細胞命運決定的影響，確定關(guān)鍵基因和信號通路。在基因治療探索中，有望糾正導(dǎo)致心臟疾病的基因突變，使異常心臟細胞恢復(fù)正常命運。前景廣闊，可深入揭示心臟細胞命運決定的分子機制，為心臟疾病治療提供新靶點和策略。結(jié)合干細胞技術(shù)，可精準調(diào)控干細胞向心臟細胞分化，用于心臟組織工程和再生醫(yī)學(xué)。但也面臨脫靶效應(yīng)、倫理等問題，需進一步研究解決。2.結(jié)合實際，談?wù)勅绾巫龊眯呐K細胞培養(yǎng)工作。答：做好心臟細胞培養(yǎng)工作需多方面注意。無菌操作是關(guān)鍵，操作前對實驗臺、器械等嚴格消毒，在超凈工作臺內(nèi)操作，避免微生物污染。選擇合適培