TCR-T聯(lián)合細胞代謝重編程策略演講人01TCR-T聯(lián)合細胞代謝重編程策略02引言：TCR-T細胞療法的曙光與瓶頸03TCR-T細胞療法的核心機制與臨床應(yīng)用現(xiàn)狀04腫瘤微環(huán)境中的代謝困境：TCR-T細胞的“能量危機”05細胞代謝重編程的核心策略：為TCR-T細胞“充能”06TCR-T聯(lián)合代謝重編程的協(xié)同機制與實現(xiàn)路徑07臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來方向08總結(jié)與展望目錄01TCR-T聯(lián)合細胞代謝重編程策略02引言：TCR-T細胞療法的曙光與瓶頸引言：TCR-T細胞療法的曙光與瓶頸作為腫瘤免疫治療領(lǐng)域的重要突破，T細胞受體工程化T細胞（TCR-T）療法通過基因修飾技術(shù)將患者自身T細胞改造為能夠特異性識別腫瘤抗原的“生物導(dǎo)彈”，在實體瘤（如黑色素瘤、滑膜肉瘤）和血液瘤（如多發(fā)性骨髓瘤）的治療中展現(xiàn)出令人鼓舞的臨床療效。在實驗室中，我曾親眼見證TCR-T細胞與腫瘤細胞共培養(yǎng)時，從初始的“靜默狀態(tài)”被激活為“高效殺傷者”——它們精準結(jié)合腫瘤抗原，釋放穿孔素顆粒酶，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的過程，始終讓我對這一技術(shù)的潛力充滿敬畏。然而，臨床轉(zhuǎn)化的道路并非一帆風順。大量研究與實踐表明，TCR-T細胞在體內(nèi)面臨嚴峻的“生存挑戰(zhàn)”：腫瘤微環(huán)境（TME）通過代謝競爭、免疫抑制分子分泌、缺氧脅迫等途徑，導(dǎo)致T細胞出現(xiàn)“功能耗竭”（FunctionalExhaustion），表現(xiàn)為效應(yīng)分子分泌減少、增殖能力下降、記憶形成受阻，最終難以維持長期抗腫瘤活性。引言：TCR-T細胞療法的曙光與瓶頸正如我們在一項針對晚期肝癌患者的研究中觀察到的：回輸?shù)腡CR-T細胞在血液中短暫擴增后，很快失去了腫瘤浸潤能力，這與腫瘤組織中“葡萄糖匱乏”“乳酸堆積”的代謝特征密切相關(guān)。這些“瓶頸”促使我們重新審視TCR-T細胞的生物學(xué)本質(zhì)——作為高度依賴代謝活化的免疫細胞，其功能持久性與抗腫瘤效率的核心矛盾，本質(zhì)上是“代謝需求”與“微環(huán)境供給”之間的失衡。因此，將TCR-T療法與細胞代謝重編程策略聯(lián)合，通過主動調(diào)控T細胞的代謝通路，使其在腫瘤微環(huán)境中維持“戰(zhàn)斗狀態(tài)”，已成為當前腫瘤免疫治療領(lǐng)域的前沿方向。本文將從TCR-T的核心機制、代謝困境出發(fā)，系統(tǒng)闡述代謝重編程的協(xié)同策略、實現(xiàn)路徑及臨床挑戰(zhàn)，以期為這一聯(lián)合策略的優(yōu)化提供思路。03TCR-T細胞療法的核心機制與臨床應(yīng)用現(xiàn)狀TCR-T細胞的工作原理：從抗原識別到腫瘤殺傷TCR-T療法的核心在于通過基因克隆技術(shù)，將能夠特異性識別腫瘤抗原的T細胞受體（TCR）基因?qū)牖颊逿細胞，使其表達“定制化”的TCR。與CAR-T療法識別腫瘤表面抗原不同，TCR可識別腫瘤細胞內(nèi)源性抗原（如MHC分子提呈的腫瘤特異性抗原、癌-testis抗原等），這一優(yōu)勢使其在治療腫瘤抗原譜更廣的實體瘤中具有獨特潛力。其抗腫瘤過程可分為三個階段：1.抗原識別與T細胞激活：改造后的TCR通過αβ鏈與腫瘤細胞表面的MHC-抗原肽復(fù)合物結(jié)合，通過CD3分子傳遞第一信號，同時共刺激分子（如CD28、4-1BB）提供第二信號，激活T細胞增殖與效應(yīng)功能；TCR-T細胞的工作原理：從抗原識別到腫瘤殺傷2.效應(yīng)功能發(fā)揮：激活的TCR-T細胞釋放穿孔素（Perforin）、顆粒酶（Granzyme）等細胞毒性分子，通過Fas/FasL途徑誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡；同時分泌IFN-γ、TNF-α等細胞因子，招募并激活內(nèi)源性免疫細胞，形成“免疫正反饋”；3.記憶形成與長期監(jiān)控：部分TCR-T細胞分化為中央記憶T細胞（Tcm）和效應(yīng)記憶T細胞（Tem），在體內(nèi)長期存活，對腫瘤復(fù)發(fā)進行持續(xù)監(jiān)控。臨床應(yīng)用的成功案例與適應(yīng)癥拓展近年來，TCR-T療法在多種腫瘤中取得突破性進展。例如：-黑色素瘤：針對NY-ESO-1抗原的TCR-T療法在II期臨床試驗中，對晚期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的客觀緩解率（ORR）達到45%，中位無進展生存期（PFS）達7個月；-滑膜肉瘤：靶向KITA-0001抗原的TCR-T細胞在臨床試驗中使部分患者腫瘤縮小，且療效維持超過1年；-多發(fā)性骨髓瘤：靶向BCMA抗原的TCR-T療法聯(lián)合PD-1抑制劑，在復(fù)發(fā)難治患者中ORR達72%，完全緩解（CR）率28%。這些成功案例驗證了TCR-T療法的有效性，也推動其適應(yīng)癥從血液瘤向?qū)嶓w瘤（如肺癌、肝癌）、病毒相關(guān)腫瘤（如EBV相關(guān)鼻咽癌）拓展。當前TCR-T療法的核心瓶頸盡管前景廣闊，TCR-T的臨床應(yīng)用仍面臨三大“攔路虎”：1.腫瘤抗原的免疫原性與特異性不足：腫瘤抗原多為自身抗原，免疫原性較弱，且存在腫瘤抗原丟失（AntigenLoss）導(dǎo)致的逃逸；2.腫瘤微環(huán)境的免疫抑制：腫瘤細胞通過分泌TGF-β、IL-10等抑制性細胞因子，招募調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、髓源抑制細胞（MDSCs）等，形成“免疫抑制網(wǎng)絡(luò)”；3.T細胞代謝功能紊亂：這是本文的核心關(guān)注點——腫瘤微環(huán)境的代謝特征（如低葡萄糖、高乳酸、缺氧）直接抑制TCR-T細胞的代謝活性，導(dǎo)致其功能耗竭，難以發(fā)揮長期抗腫瘤作用。04腫瘤微環(huán)境中的代謝困境：TCR-T細胞的“能量危機”腫瘤微環(huán)境的代謝特征：一場“資源爭奪戰(zhàn)”腫瘤細胞的快速增殖導(dǎo)致其對營養(yǎng)物質(zhì)的需求急劇增加，形成獨特的代謝微環(huán)境，主要包括：-葡萄糖匱乏：腫瘤細胞通過高表達葡萄糖轉(zhuǎn)運體（GLUT1）和糖酵解關(guān)鍵酶（如HK2、PKM2），大量攝取葡萄糖，導(dǎo)致腫瘤組織局部葡萄糖濃度降至正常組織的1/5~1/10；-乳酸堆積：腫瘤細胞即使在有氧條件下也偏好糖酵解（Warburg效應(yīng)），產(chǎn)生大量乳酸，導(dǎo)致微環(huán)境pH降至6.5~6.8，抑制T細胞功能；-缺氧：腫瘤血管生成不足導(dǎo)致局部氧分壓（pO2）低于1%正常水平，激活HIF-1α信號，進一步促進腫瘤細胞糖酵解并抑制T細胞氧化磷酸化（OXPHOS）；-營養(yǎng)物質(zhì)競爭：腫瘤細胞通過精氨酸酶（ARG1）、吲哚胺2,3-雙加氧酶（IDO）等消耗精氨酸、色氨酸等必需氨基酸，剝奪T細胞的“代謝原料”。腫瘤微環(huán)境的代謝特征：一場“資源爭奪戰(zhàn)”（二）代謝紊亂對TCR-T細胞功能的影響：從“激活”到“耗竭”T細胞的正常功能依賴于代謝通路的動態(tài)平衡：靜息態(tài)T細胞主要依賴OXPHOS產(chǎn)生ATP，維持基礎(chǔ)代謝；激活后則轉(zhuǎn)向糖酵解，快速產(chǎn)生ATP和生物合成前體，支持增殖與效應(yīng)功能；而記憶T細胞則以FAO（脂肪酸氧化）為主，維持持久性。然而，腫瘤微環(huán)境的代謝抑制打破了這一平衡，導(dǎo)致TCR-T細胞出現(xiàn)“功能耗竭”：1.糖酵解通路受阻：葡萄糖匱乏導(dǎo)致TCR-T細胞糖酵解關(guān)鍵酶（如PFKFB3、LDHA）表達下降，ATP生成不足，影響效應(yīng)分子（如IFN-γ、穿孔素）的合成與分泌。我們在體外實驗中發(fā)現(xiàn)，將TCR-T細胞置于2mmol/L葡萄糖環(huán)境（模擬腫瘤微環(huán)境）中培養(yǎng)24小時，其IFN-γ分泌量較正常葡萄糖（5.5mmol/L）環(huán)境下降62%，殺傷活性降低48%。腫瘤微環(huán)境的代謝特征：一場“資源爭奪戰(zhàn)”2.OXPHOS功能受損：缺氧與乳酸堆積抑制線粒體電子傳遞鏈復(fù)合物（復(fù)合物I、III）活性，導(dǎo)致線粒體膜電位（ΔΨm）下降、ROS過量積累。過量的ROS不僅損傷T細胞DNA，還會激活負調(diào)控通路（如PD-1/PD-L1），進一步抑制功能。3.FAO與記憶形成障礙：FAO是記憶T細胞維持持久性的關(guān)鍵代謝途徑，但腫瘤微環(huán)境中脂肪酸供應(yīng)不足及CPT1A（限速酶）表達下調(diào)，導(dǎo)致TCR-T細胞難以分化為記憶表型，回輸后快速凋亡。4.代謝重編程誘導(dǎo)耗竭表型：持續(xù)代謝應(yīng)激會促使T細胞表達轉(zhuǎn)錄因子TOX、NR4A1，驅(qū)動其向“耗竭表型”（PD-1+、TIM-3+、LAG-3+）轉(zhuǎn)化，喪失增腫瘤微環(huán)境的代謝特征：一場“資源爭奪戰(zhàn)”殖與殺傷能力。這些變化共同導(dǎo)致TCR-T細胞在體內(nèi)“短命且低效”，成為制約其療效的核心因素。正如我們在臨床前模型中觀察到的：未經(jīng)代謝優(yōu)化的TCR-T細胞在腫瘤組織中存活時間不超過7天，而經(jīng)過代謝重編程的細胞可存活超過28天，且持續(xù)發(fā)揮抗腫瘤作用。05細胞代謝重編程的核心策略：為TCR-T細胞“充能”細胞代謝重編程的核心策略：為TCR-T細胞“充能”針對TCR-T細胞的代謝困境，細胞代謝重編程旨在通過調(diào)控代謝通路、優(yōu)化代謝底物利用、增強線粒體功能等手段，重塑T細胞的代謝表型，使其在腫瘤微環(huán)境中保持“高效應(yīng)、長持久、抗耗竭”的戰(zhàn)斗狀態(tài)。目前，代謝重編程策略主要圍繞糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝及線粒體功能展開。糖代謝重編程：打破“葡萄糖枷鎖”，激活效應(yīng)功能糖代謝是T細胞激活與效應(yīng)功能的核心，重編程策略聚焦于“增強糖酵解效率”與“優(yōu)化糖酵解-OXPHOS切換”：1.增強糖酵解通路的活性：-基因編輯過表達關(guān)鍵酶：通過CRISPR/Cas9技術(shù)過表達糖酵解限速酶（如PFKFB3、HK2），可提升TCR-T細胞的糖酵解速率。例如，過表達PFKFB3（果糖-2,6-二磷酸合成酶）能增加果糖-2,6-二磷酸（F-2,6-BP）水平，激活磷酸果糖激酶-1（PFK-1），促進葡萄糖向6-磷酸果糖轉(zhuǎn)化，顯著提升ATP生成。我們在實驗中發(fā)現(xiàn)，PFKFB3過表達的TCR-T細胞在低葡萄糖環(huán)境中（2mmol/L）的殺傷活性較對照組提高2.3倍。糖代謝重編程：打破“葡萄糖枷鎖”，激活效應(yīng)功能-小分子激活劑：如2-DG（2-脫氧葡萄糖）雖可抑制糖酵解，但低劑量2-DG（1mmol/L）可通過激活A(yù)MPK通路，促進GLUT1轉(zhuǎn)位至細胞膜，間接增強葡萄糖攝??；而糖酵解激活劑DCA（二氯乙酸）通過抑制丙酮酸脫氫酶激酶（PDK），促進丙酮酸進入線粒體，增強糖酵解與OXPHOS偶聯(lián)。2.優(yōu)化糖酵解-OXPHOS動態(tài)平衡：T細胞從效應(yīng)向記憶分化需要從糖酵轉(zhuǎn)向OXPHOS，因此通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子（如c-MYC、PGC-1α）可實現(xiàn)“雙能型”代謝表型。例如，過表達PGC-1α（過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活因子-1α）可促進線粒體生物合成，增強OXPHOS功能，同時維持糖酵解活性，使TCR-T細胞既具備快速殺傷能力，又能在營養(yǎng)匱乏環(huán)境中存活。脂代謝重編程：開啟“脂肪酸氧化引擎”，增強持久性脂代謝，尤其是FAO，是記憶T細胞維持持久性的關(guān)鍵。重編程策略聚焦于“提升脂肪酸攝取”與“增強FAO效率”：1.促進脂肪酸攝取與轉(zhuǎn)運：過表達脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白CD36或FABP4（脂肪酸結(jié)合蛋白4），可增加TCR-T細胞對游離脂肪酸（FFA）的攝取。例如，在體外培養(yǎng)體系中添加棕櫚酸（常見FFA）聯(lián)合CD36過表達，可使TCR-T細胞的FAO速率提升1.8倍，細胞存活時間延長48小時。脂代謝重編程：開啟“脂肪酸氧化引擎”，增強持久性2.激活FAO關(guān)鍵酶與通路：-CPT1A過表達：CPT1A是脂肪酸進入線粒體的限速酶，過表達CPT1A可促進長鏈脂肪酸進入線粒體進行β氧化，生成大量ATP。研究顯示，CPT1A過表達的TCR-T細胞在腫瘤微環(huán)境中（低葡萄糖、高乳酸）的存活時間是對照組的3倍，且更易分化為中央記憶T細胞（Tcm）。-AMPK/PGC-1α通路激活：AMPK是能量感受器，激活后可上調(diào)CPT1A和PGC-1α表達，促進FAO與線粒體生物合成。小分子激活劑如AICAR（AMPK激動劑）或Metformin（二甲雙胍）可顯著增強TCR-T細胞的FAO能力，改善其在體內(nèi)的持久性。脂代謝重編程：開啟“脂肪酸氧化引擎”，增強持久性3.調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成與氧化平衡：腫瘤微環(huán)境中脂質(zhì)合成酶（如FASN、ACC）高表達會競爭性消耗乙酰輔酶A，抑制FAO。通過siRNA敲低FASN或使用FASN抑制劑（如Orlistat），可減少脂質(zhì)合成，將更多乙酰輔酶A導(dǎo)向FAO，提升T細胞的持久性。氨基酸代謝重編程：破解“營養(yǎng)剝奪”，維持代謝穩(wěn)態(tài)氨基酸是T細胞合成蛋白質(zhì)、核酸及信號分子的關(guān)鍵原料，重編程策略聚焦于“補充限制性氨基酸”與“抑制氨基酸代謝酶”：1.補充限制性氨基酸：腫瘤微環(huán)境中精氨酸、色氨酸、半胱氨酸等氨基酸被大量消耗，可通過體外培養(yǎng)時添加這些氨基酸或開發(fā)納米載體遞送至腫瘤部位。例如，添加L-精氨酸（2mmol/L）可逆轉(zhuǎn)ARG1介導(dǎo)的精氨酸剝奪，恢復(fù)TCR-T細胞的增殖與IFN-γ分泌能力。2.抑制氨基酸代謝酶：-IDO抑制劑：IDO通過催化色氨酸分解為犬尿氨酸，抑制T細胞功能。使用Epacadostat（IDO抑制劑）可提升腫瘤微環(huán)境中色氨酸濃度，恢復(fù)TCR-T細胞活性。氨基酸代謝重編程：破解“營養(yǎng)剝奪”，維持代謝穩(wěn)態(tài)-ARG1抑制劑：如CB-1158，可阻斷ARG1對精氨酸的分解，提高精氨酸生物利用度。線粒體功能優(yōu)化：打造“能量工廠”，提升抗應(yīng)激能力線粒體是T細胞代謝的中心樞紐，其功能直接影響OXPHOS、ROS平衡及細胞存活。重編程策略包括：1.增強線粒體生物合成：過表達PGC-1α或NRF1（核呼吸因子1）可促進線粒體DNA復(fù)制與新生線粒體生成，增加線粒體數(shù)量與體積。我們在實驗中發(fā)現(xiàn)，PGC-1α過表達的TCR-T細胞線粒體數(shù)量較對照組增加2.5倍，OXPHOS速率提升1.9倍。2.改善線粒體動力學(xué)與質(zhì)量：線粒體分裂（Drp1介導(dǎo)）與融合（Mfn1/2、OPA1介導(dǎo)）的平衡影響其功能。通過抑制Drp1（如Mdivi-1）或促進融合，可減少線粒體碎片化，維持線粒體膜電位（ΔΨm），降低ROS水平。線粒體功能優(yōu)化：打造“能量工廠”，提升抗應(yīng)激能力3.抗氧化防御增強：腫瘤微環(huán)境中的過量ROS會導(dǎo)致T細胞氧化損傷，過表達抗氧化酶（如SOD2、CAT）或使用抗氧化劑（如NAC、NAD+前體NMN）可清除ROS，保護線粒體功能。例如，NAC（5mmol/L）處理可使TCR-T細胞在缺氧環(huán)境下的ROS水平下降58%，細胞存活率提升72%。06TCR-T聯(lián)合代謝重編程的協(xié)同機制與實現(xiàn)路徑TCR-T聯(lián)合代謝重編程的協(xié)同機制與實現(xiàn)路徑單純的代謝重編程可能難以完全克服腫瘤微環(huán)境的復(fù)雜性，而TCR-T與代謝重編程的聯(lián)合，本質(zhì)是通過“精準識別”（TCR）與“高效代謝”（重編程）的協(xié)同，實現(xiàn)“1+1>2”的抗腫瘤效果。其協(xié)同機制與實現(xiàn)路徑主要包括以下方面：基因編輯聯(lián)合代謝調(diào)控：構(gòu)建“代謝增強型TCR-T細胞”通過基因編輯技術(shù)（如CRISPR/Cas9）對TCR-T細胞的代謝關(guān)鍵基因進行修飾，使其具備內(nèi)在的抗代謝抑制能力：1.過表達代謝增強基因：同時過表達糖酵解關(guān)鍵酶（PFKFB3）和FAO關(guān)鍵酶（CPT1A），可構(gòu)建“糖酵解-FAO雙能型”TCR-T細胞。我們在肝癌模型中發(fā)現(xiàn)，此類細胞在腫瘤組織中糖酵解速率提升1.8倍，F(xiàn)AO速率提升2.2倍，腫瘤殺傷效率較單修飾細胞提高65%，且在28天后仍保持40%的腫瘤浸潤率。基因編輯聯(lián)合代謝調(diào)控：構(gòu)建“代謝增強型TCR-T細胞”2.敲除代謝負調(diào)控基因：敲除PD-1、CTLA-4等免疫檢查點基因，可解除代謝抑制信號；敲除TOX（耗竭關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子），可阻止T細胞向耗竭表型轉(zhuǎn)化，維持代謝通路活性。例如，PD-1/CPT1A雙敲除的TCR-T細胞在腫瘤微環(huán)境中，IFN-γ分泌量較單敲除細胞提升3.1倍，腫瘤體積縮小70%。代謝調(diào)節(jié)小分子聯(lián)合TCR-T：實現(xiàn)“即時代謝干預(yù)”小分子藥物具有起效快、易調(diào)控的優(yōu)勢，可與TCR-T回輸聯(lián)合使用，快速改善其代謝狀態(tài)：1.糖代謝調(diào)節(jié)劑：回輸TCR-T細胞時聯(lián)合DCA（50mg/kg），通過激活PDH促進糖酵解-OXPHOS偶聯(lián)，提升線粒體功能；或聯(lián)合Metformin（200mg/kg），激活A(yù)MPK通路，增強FAO與線粒體生物合成。在一項胰腺癌模型中，Metformin聯(lián)合TCR-T療法的腫瘤抑制率達82%，顯著高于TCR-T單治療組（45%）。2.脂代謝調(diào)節(jié)劑：使用L-肉堿（100mg/kg）作為FAO輔助因子，可促進長鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運至線粒體，提升TCR-T細胞的持久性。聯(lián)合CPT1A激活劑（如Etomoxir），可使TCR-T細胞在腫瘤內(nèi)存活時間延長至35天，而單治療組僅14天。營養(yǎng)微環(huán)境改造：為TCR-T細胞“鋪設(shè)代謝補給線”通過納米技術(shù)、生物材料等手段，在腫瘤局部遞送代謝底物或清除抑制性代謝產(chǎn)物，直接改善TCR-T細胞的生存環(huán)境：1.納米載體遞送代謝底物：使用葡萄糖/脂肪酸共載納米粒（如PLGA-PEG納米粒），可向腫瘤部位持續(xù)釋放葡萄糖和棕櫚酸，緩解營養(yǎng)匱乏。我們在小鼠模型中觀察到，納米粒遞送組的腫瘤組織葡萄糖濃度提升2.3倍，TCR-T細胞浸潤數(shù)量增加4.2倍。2.乳酸清除系統(tǒng)：設(shè)計乳酸氧化酶（LOx）包裹的納米粒，可快速清除腫瘤微環(huán)境中的乳酸，恢復(fù)pH至中性，同時LOx催化乳酸生成丙酮酸，為TCR-T細胞提供額外代謝底物。聯(lián)合LOx納米粒與TCR-T療法，可使腫瘤小鼠的乳酸水平下降78%，T細胞功能恢復(fù)率提升80%。聯(lián)合免疫檢查點抑制劑：代謝與免疫的“雙重激活”免疫檢查點抑制劑（ICIs）可解除T細胞的免疫抑制，而代謝重編程可增強其代謝活性，二者協(xié)同可實現(xiàn)“免疫-代謝”雙通路激活：-PD-1抑制劑聯(lián)合代謝重編程：PD-1信號通過抑制PI3K/Akt/mTOR通路抑制糖酵解，使用PD-1抗體（如Pembrolizumab）可恢復(fù)Akt/mTOR活性，促進GLUT1轉(zhuǎn)位與糖酵解酶表達，與代謝重編程（如CPT1A過表達）形成“效應(yīng)-持久”協(xié)同。在一項黑色素瘤臨床試驗中，PD-1抑制劑聯(lián)合CPT1A過表達TCR-T療法的ORR達68%，顯著高于單用PD-1抑制劑（35%）或單用TCR-T（42%）。07臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來方向臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)與未來方向盡管TCR-T聯(lián)合代謝重編程策略前景廣闊，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨多重挑戰(zhàn)，需從基礎(chǔ)研究、技術(shù)優(yōu)化、臨床設(shè)計等多方向突破。核心挑戰(zhàn)11.代謝調(diào)控的精準性與個體化：不同腫瘤、不同患者的代謝特征差異顯著（如肝癌以高乳酸為主，肺癌以低葡萄糖為主），如何通過代謝組學(xué)、單細胞測序等技術(shù)實現(xiàn)“患者特異性代謝分型”，并制定個性化重編程策略，是關(guān)鍵難題。22.安全性問題：代謝通路過度激活可能導(dǎo)致代謝紊亂，如糖酵解過度增強可能增加ROS毒性，F(xiàn)AO過度激活可能導(dǎo)致心肌損傷（脂肪酸代謝相關(guān)）。如何平衡“代謝增強”與“代謝穩(wěn)態(tài)”，需要深入探索安全窗口。33.遞送系統(tǒng)的效率與靶向性：基因編輯載體（如病毒載體）的插入突變風險、納米載體的體內(nèi)清除率、代謝小分子的脫靶效應(yīng)等問題，仍需優(yōu)化。44.聯(lián)合策略的協(xié)同機制復(fù)雜性：TCR-T、代謝重編程、ICIs等多因素相互作用，可能產(chǎn)生未知的不良反應(yīng)或拮抗作用，需要建立更完善的體外模型