子宮內(nèi)膜癌中VEGF-C、ERα與MLVD的相關(guān)性及臨床意義探究一、引言1.1研究背景與意義子宮內(nèi)膜癌作為女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)病率呈顯著上升趨勢，嚴(yán)重威脅女性的健康與生活質(zhì)量。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，在部分發(fā)達(dá)國家和我國一些發(fā)達(dá)城市，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率已躍居婦科惡性腫瘤首位。在我國，雖然整體發(fā)病率低于宮頸癌，但隨著生活水平的提高、生活方式的改變以及人口老齡化進程的加快，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病人數(shù)也在不斷增加。這種上升趨勢不僅對患者個人造成身心上的巨大痛苦，也給家庭和社會帶來沉重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。深入探究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制、準(zhǔn)確判斷預(yù)后以及制定有效的治療策略，成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域亟待解決的重要課題。血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）作為一種關(guān)鍵的細(xì)胞因子，在腫瘤的淋巴管生成和淋巴轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著核心作用。大量研究表明，VEGF-C能夠特異性地作用于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，促進淋巴管的新生和擴張，為腫瘤細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移提供通道，從而顯著影響腫瘤的發(fā)展進程。雌激素受體α（ERα）則在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中扮演著不可或缺的角色。雌激素通過與ERα結(jié)合，激活一系列下游信號通路，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等生物學(xué)過程，進而影響子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和發(fā)展。微血管密度（MLVD）作為評估腫瘤血管生成的重要指標(biāo)，反映了腫瘤組織內(nèi)新生血管的豐富程度。腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移高度依賴于新生血管提供的營養(yǎng)和氧氣，因此MLVD與腫瘤的侵襲性和預(yù)后密切相關(guān)。本研究聚焦于VEGF-C、ERα與MLVD在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況及其相互關(guān)系，旨在揭示它們在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過程中的具體作用機制。通過深入剖析這三者之間的內(nèi)在聯(lián)系，有望為子宮內(nèi)膜癌的早期診斷提供更為精準(zhǔn)、有效的生物學(xué)標(biāo)志物，使醫(yī)生能夠在疾病的早期階段及時發(fā)現(xiàn)病變，提高患者的治愈率。同時，為子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后評估提供更為科學(xué)、全面的依據(jù)，幫助醫(yī)生準(zhǔn)確判斷患者的病情發(fā)展趨勢，制定個性化的治療方案。此外，為臨床治療開辟新的靶點和思路，研發(fā)更加高效、低毒的治療藥物，提高患者的生存質(zhì)量，延長患者的生存期。本研究對于推動子宮內(nèi)膜癌的基礎(chǔ)研究和臨床治療的發(fā)展具有重要的理論意義和實踐價值。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在子宮內(nèi)膜癌的研究領(lǐng)域，VEGF-C、ERα和MLVD各自的作用及它們之間的相互關(guān)系一直是研究的重點。國外對VEGF-C在腫瘤淋巴管生成和淋巴轉(zhuǎn)移方面的研究起步較早。一些早期的研究就已明確VEGF-C能夠特異性地與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體VEGFR-3結(jié)合，從而激活一系列下游信號通路，促進淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成。在子宮內(nèi)膜癌中，大量臨床研究表明，VEGF-C的高表達(dá)與腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期以及預(yù)后密切相關(guān)。有研究對不同分期和病理分級的子宮內(nèi)膜癌組織進行檢測，發(fā)現(xiàn)VEGF-C的表達(dá)水平隨著腫瘤分期的升高和病理分級的增加而顯著上升，且有淋巴轉(zhuǎn)移的患者VEGF-C表達(dá)明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移者。然而，目前對于VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌中具體的調(diào)控機制，尤其是其與其他信號通路的交互作用，尚未完全明確。例如，雖然已知VEGF-C可以激活PI3K/AKT等信號通路，但這些通路之間如何協(xié)同調(diào)節(jié)淋巴管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移，仍有待進一步深入研究。關(guān)于ERα在子宮內(nèi)膜癌中的研究，國外學(xué)者也進行了大量工作。研究發(fā)現(xiàn)，ERα在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要角色。雌激素與ERα結(jié)合后，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)，促進子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖。而且，ERα的表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜癌的病理類型、分化程度以及預(yù)后密切相關(guān)。在子宮內(nèi)膜樣腺癌中，ERα的陽性表達(dá)率相對較高，且高表達(dá)ERα的患者預(yù)后通常較好。但ERα在不同分子亞型子宮內(nèi)膜癌中的作用機制存在差異，對于一些特殊類型的子宮內(nèi)膜癌，如漿液性癌和透明細(xì)胞癌，ERα的表達(dá)和功能尚未完全明確，需要更多的研究來深入探討。在MLVD與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系研究方面，國外的研究表明，腫瘤組織中的MLVD越高，說明新生血管越豐富，為腫瘤細(xì)胞提供了更多的營養(yǎng)和氧氣，從而促進腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。在子宮內(nèi)膜癌中，MLVD與腫瘤的分期、肌層浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。有研究通過對不同分期子宮內(nèi)膜癌患者的腫瘤組織進行微血管密度檢測，發(fā)現(xiàn)晚期患者的MLVD明顯高于早期患者，且有肌層浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者MLVD也顯著升高。然而，目前對于如何準(zhǔn)確測量MLVD以及MLVD作為子宮內(nèi)膜癌預(yù)后指標(biāo)的最佳臨界值，尚未達(dá)成統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。不同的檢測方法和研究人群可能導(dǎo)致結(jié)果存在差異，這給臨床應(yīng)用帶來了一定的困惑。國內(nèi)的研究在借鑒國外成果的基礎(chǔ)上，也取得了一些有價值的進展。在VEGF-C方面，國內(nèi)學(xué)者通過對大量子宮內(nèi)膜癌病例的研究，進一步證實了VEGF-C高表達(dá)與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后的相關(guān)性。有研究還探討了VEGF-C基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜癌易感性的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)某些基因位點的突變可能增加個體患子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險。但在VEGF-C的靶向治療研究方面，國內(nèi)與國際先進水平相比還有一定差距，相關(guān)的臨床試驗和藥物研發(fā)還需要進一步加強。對于ERα，國內(nèi)研究不僅關(guān)注其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用，還探討了其與其他分子標(biāo)志物的聯(lián)合檢測價值。有研究表明，ERα與孕激素受體（PR）聯(lián)合檢測可以更準(zhǔn)確地評估子宮內(nèi)膜癌患者的內(nèi)分泌治療敏感性。此外，國內(nèi)學(xué)者還研究了ERα的表達(dá)與中醫(yī)證型的關(guān)系，為中西醫(yī)結(jié)合治療子宮內(nèi)膜癌提供了一定的理論依據(jù)。但在ERα的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制以及其在腫瘤干細(xì)胞中的作用研究方面，還需要進一步深入探索。在MLVD的研究中，國內(nèi)學(xué)者嘗試采用不同的標(biāo)記物和檢測技術(shù)來提高MLVD測量的準(zhǔn)確性和可靠性。例如，一些研究采用CD34、CD105等多種標(biāo)記物聯(lián)合檢測，以更全面地反映腫瘤血管生成情況。同時，國內(nèi)研究也關(guān)注了MLVD與中醫(yī)證候、中藥治療的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)一些中藥可能通過調(diào)節(jié)MLVD來抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。但目前這些研究大多處于基礎(chǔ)和臨床觀察階段，還需要更多高質(zhì)量的臨床研究來驗證其有效性和安全性。國內(nèi)外關(guān)于VEGF-C、ERα和MLVD在子宮內(nèi)膜癌中的研究已取得了一定成果，但仍存在諸多不足之處。對于三者之間復(fù)雜的相互作用機制，尤其是在腫瘤發(fā)生發(fā)展的不同階段以及不同分子亞型子宮內(nèi)膜癌中的作用差異，還需要進一步深入研究。在臨床應(yīng)用方面，如何將這些研究成果轉(zhuǎn)化為有效的診斷、治療和預(yù)后評估手段，仍面臨諸多挑戰(zhàn)。因此，開展深入系統(tǒng)的研究，明確三者之間的內(nèi)在聯(lián)系，對于提高子宮內(nèi)膜癌的診治水平具有重要的理論和實踐意義。1.3研究目的與方法本研究旨在深入探究VEGF-C、ERα與MLVD在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)情況，明確它們之間的相關(guān)性，并分析其與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的聯(lián)系，從而為子宮內(nèi)膜癌的早期診斷、預(yù)后評估及治療提供新的理論依據(jù)和潛在靶點。在研究方法上，本研究將收集子宮內(nèi)膜癌患者的手術(shù)切除組織標(biāo)本，同時選取正常子宮內(nèi)膜組織作為對照。運用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)，對標(biāo)本中的VEGF-C、ERα蛋白表達(dá)進行檢測，通過顯微鏡觀察染色結(jié)果，確定蛋白的陽性表達(dá)率及表達(dá)強度。對于MLVD的檢測，同樣采用免疫組織化學(xué)方法，以特異性血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物對腫瘤組織中的微血管進行標(biāo)記，在顯微鏡下計數(shù)微血管數(shù)量，從而確定MLVD。運用統(tǒng)計學(xué)分析方法，對VEGF-C、ERα表達(dá)水平與MLVD之間的相關(guān)性進行分析，采用合適的統(tǒng)計檢驗方法，明確三者之間的定量關(guān)系。同時，分析它們與子宮內(nèi)膜癌患者的年齡、臨床分期、病理分級、肌層浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)的關(guān)系，篩選出具有統(tǒng)計學(xué)意義的影響因素。二、相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1子宮內(nèi)膜癌概述子宮內(nèi)膜癌是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，是女性生殖系統(tǒng)常見的三大惡性腫瘤之一。在全球范圍內(nèi)，其發(fā)病率存在明顯的地區(qū)差異，北美和歐洲地區(qū)的發(fā)病率相對較高，而亞洲和非洲地區(qū)相對較低。近年來，隨著生活方式的改變和人口老齡化的加劇，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率呈上升趨勢，在我國部分城市，其發(fā)病率已接近或超過宮頸癌，成為女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤。根據(jù)發(fā)病機制和生物學(xué)行為，子宮內(nèi)膜癌主要分為兩型。I型為雌激素依賴型，約占子宮內(nèi)膜癌的80%。這類癌癥的發(fā)生與長期無孕激素拮抗的雌激素刺激密切相關(guān)。常見于肥胖、高血壓、糖尿病、不孕不育或絕經(jīng)延遲的女性，這些因素導(dǎo)致體內(nèi)雌激素水平相對或絕對升高，持續(xù)刺激子宮內(nèi)膜，使其過度增生，進而發(fā)生癌變。病理類型主要為子宮內(nèi)膜樣腺癌，腫瘤細(xì)胞分化程度相對較好，預(yù)后通常較為樂觀。II型為非雌激素依賴型，約占20%。其發(fā)病與雌激素關(guān)系不大，多與基因突變等因素有關(guān)，常見于老年女性。病理類型包括漿液性癌、透明細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、神經(jīng)內(nèi)分泌癌、子宮內(nèi)膜樣鱗癌等，這類癌癥的腫瘤細(xì)胞分化差，侵襲性強，容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制是一個復(fù)雜的多步驟過程，涉及多種基因和信號通路的異常改變。在雌激素依賴型子宮內(nèi)膜癌中，長期的雌激素刺激會導(dǎo)致子宮內(nèi)膜細(xì)胞內(nèi)的雌激素受體（ER）信號通路過度激活。雌激素與ER結(jié)合后，形成的復(fù)合物會進入細(xì)胞核，與特定的DNA序列結(jié)合，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)，促進細(xì)胞的增殖和抑制細(xì)胞凋亡。同時，PI3K/AKT/mTOR等信號通路也常發(fā)生異常激活，這些通路在細(xì)胞的生長、代謝和存活中起關(guān)鍵作用，其異常激活會導(dǎo)致細(xì)胞過度增殖和腫瘤的發(fā)生。此外，一些抑癌基因如PTEN、p53等的失活，也會打破細(xì)胞增殖和凋亡的平衡，促進腫瘤的發(fā)展。在非雌激素依賴型子宮內(nèi)膜癌中，基因突變?nèi)鏿53基因的高頻突變，以及HER-2等基因的擴增，是其發(fā)病的重要機制。p53基因的突變會使其失去對細(xì)胞周期和凋亡的調(diào)控功能，導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖和癌變；HER-2基因的擴增則會激活相關(guān)的信號通路，促進腫瘤細(xì)胞的生長和侵襲。子宮內(nèi)膜癌的常見癥狀包括陰道流血，這是最常見的癥狀，尤其是絕經(jīng)后陰道流血，表現(xiàn)為少量至中等量的出血，尚未絕經(jīng)者則可能出現(xiàn)月經(jīng)紊亂、經(jīng)量增多、經(jīng)期延長等。陰道排液也是常見癥狀之一，多為血性或漿液性分泌物，合并感染時可出現(xiàn)膿性排液，伴有異味。當(dāng)腫瘤侵犯周圍組織或壓迫神經(jīng)時，可引起下腹部疼痛，疼痛可為隱痛、脹痛或劇痛。隨著病情進展，患者還可能出現(xiàn)貧血、消瘦、發(fā)熱、惡病質(zhì)等全身癥狀。目前，診斷子宮內(nèi)膜癌主要依靠多種檢查手段的綜合應(yīng)用。婦科檢查時，早期患者子宮可能大小正常，隨著病情進展，子宮可增大、變軟。分段診刮是診斷子宮內(nèi)膜癌最常用且有價值的方法，通過刮取子宮內(nèi)膜組織進行病理檢查，可明確診斷并確定病理類型和分級。宮腔鏡檢查能夠直接觀察子宮內(nèi)膜的病變情況，對可疑部位進行定位活檢，提高診斷的準(zhǔn)確性。超聲檢查可以了解子宮大小、子宮內(nèi)膜厚度、有無占位性病變及肌層浸潤程度等，是常用的輔助檢查方法。此外，磁共振成像（MRI）、計算機斷層掃描（CT）等影像學(xué)檢查，在評估腫瘤的范圍、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等方面具有重要價值。子宮內(nèi)膜癌的治療以手術(shù)治療為主，根據(jù)患者的年齡、身體狀況、病變范圍和病理類型等因素，制定個性化的治療方案。對于早期患者，通常采用全面分期手術(shù)，包括子宮切除、雙側(cè)附件切除、盆腔及腹主動脈旁淋巴結(jié)清掃等。對于有生育要求的年輕早期患者，若病變局限、分化良好，可在嚴(yán)密監(jiān)測下進行保留生育功能的治療，如使用高效孕激素進行治療。對于晚期或復(fù)發(fā)患者，手術(shù)治療后常需輔以放療、化療和內(nèi)分泌治療等綜合治療。放療可以殺滅局部殘留的癌細(xì)胞，降低復(fù)發(fā)風(fēng)險；化療主要用于晚期或復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的患者，常用的化療藥物有紫杉醇、卡鉑等；內(nèi)分泌治療適用于雌激素受體陽性的患者，通過使用孕激素等藥物，抑制癌細(xì)胞的生長。2.2VEGF-C相關(guān)理論血管內(nèi)皮生長因子-C（VascularEndothelialGrowthFactor-C，VEGF-C）是VEGF家族的重要成員之一，在淋巴管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移等生理病理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。VEGF-C基因位于人類染色體4q34，其編碼的蛋白最初以前體蛋白的形式存在，前體蛋白包含一個N端信號肽、VEGF同源區(qū)和一個C端前肽。經(jīng)過一系列蛋白酶水解作用后，前體蛋白去除C端和N端的部分肽段，轉(zhuǎn)化為具有生物學(xué)活性的成熟VEGF-C。成熟的VEGF-C是一種二聚體糖蛋白，其空間結(jié)構(gòu)由兩條相同的多肽鏈通過二硫鍵連接而成，這種結(jié)構(gòu)賦予了VEGF-C與受體特異性結(jié)合的能力。VEGF-C的主要功能是促進淋巴管生成和血管生成。在胚胎發(fā)育過程中，VEGF-C對于淋巴管系統(tǒng)的形成和發(fā)育至關(guān)重要。它通過與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面的特異性受體血管內(nèi)皮生長因子受體-3（VascularEndothelialGrowthFactorReceptor-3，VEGFR-3）結(jié)合，激活下游的信號通路，如PI3K/AKT、MAPK等，從而促進淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，引導(dǎo)淋巴管的生長和分支。在成人機體中，VEGF-C在維持淋巴管的正常功能和穩(wěn)態(tài)方面也發(fā)揮著重要作用，例如在傷口愈合、炎癥反應(yīng)等過程中，VEGF-C的表達(dá)上調(diào)，促進淋巴管的新生和修復(fù)，有助于組織液的回流和免疫細(xì)胞的運輸。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，VEGF-C起著極為關(guān)鍵的作用，尤其是在腫瘤的淋巴管生成和淋巴轉(zhuǎn)移方面。許多腫瘤細(xì)胞能夠高表達(dá)VEGF-C，腫瘤組織中高表達(dá)的VEGF-C可以通過旁分泌的方式作用于腫瘤周邊的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞。一方面，它與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面的VEGFR-3特異性結(jié)合，激活上述提到的PI3K/AKT、MAPK等信號通路，促進淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，使得腫瘤周邊的淋巴管新生和擴張。這些新生和擴張的淋巴管為腫瘤細(xì)胞進入淋巴循環(huán)提供了便利的通道，增加了腫瘤細(xì)胞發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的機會。另一方面，VEGF-C還可以增強淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞之間的連接通透性，使得腫瘤細(xì)胞更容易穿透淋巴管內(nèi)皮，進入淋巴管內(nèi)，進而隨著淋巴液的流動轉(zhuǎn)移到區(qū)域淋巴結(jié)，甚至更遠(yuǎn)的部位。臨床研究表明，在多種惡性腫瘤中，如乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌等，VEGF-C的高表達(dá)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期以及不良預(yù)后密切相關(guān)。檢測腫瘤組織中VEGF-C的表達(dá)水平，對于評估腫瘤的惡性程度和患者的預(yù)后具有重要的臨床價值。2.3ERα相關(guān)理論雌激素受體α（EstrogenReceptorα，ERα）屬于核受體超家族成員，在雌激素的生物學(xué)效應(yīng)發(fā)揮中起著關(guān)鍵作用。ERα基因位于人類染色體6q25.1，其編碼的蛋白質(zhì)由595個氨基酸組成，分子量約為66kDa。ERα蛋白結(jié)構(gòu)包含多個功能結(jié)構(gòu)域，從N端到C端依次為A/B結(jié)構(gòu)域、C結(jié)構(gòu)域、D結(jié)構(gòu)域、E結(jié)構(gòu)域和F結(jié)構(gòu)域。A/B結(jié)構(gòu)域具有高度的變異性，包含一個激活功能區(qū)AF-1，它不依賴于配體（即雌激素）的存在，能夠通過與其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用，調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄活性。C結(jié)構(gòu)域是DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（DBD），含有兩個鋅指結(jié)構(gòu)，能夠特異性地識別并結(jié)合靶基因啟動子區(qū)域的雌激素反應(yīng)元件（ERE），從而調(diào)控基因的表達(dá)。D結(jié)構(gòu)域為鉸鏈區(qū)，起到連接DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的作用，同時也參與受體的核定位過程。E結(jié)構(gòu)域是配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（LBD），具有高度的保守性，它不僅能夠特異性地結(jié)合雌激素，還包含另一個激活功能區(qū)AF-2。當(dāng)雌激素與ERα的E結(jié)構(gòu)域結(jié)合后，會引起受體構(gòu)象的改變，暴露AF-2區(qū)域，使其能夠與共激活因子相互作用，增強基因的轉(zhuǎn)錄活性。F結(jié)構(gòu)域的功能尚未完全明確，可能參與調(diào)節(jié)受體與其他蛋白質(zhì)的相互作用以及受體的穩(wěn)定性。在正常生理狀態(tài)下，ERα在多種組織和器官中廣泛表達(dá)，如乳腺、子宮、卵巢、心血管系統(tǒng)、骨骼等，參與調(diào)節(jié)這些組織和器官的生長、發(fā)育和功能維持。在子宮內(nèi)膜組織中，ERα的表達(dá)水平呈現(xiàn)周期性變化，在月經(jīng)周期的增殖期表達(dá)較高，而在分泌期表達(dá)相對較低。雌激素與子宮內(nèi)膜細(xì)胞表面的ERα結(jié)合后，通過一系列復(fù)雜的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖、分化和凋亡。具體來說，雌激素-ERα復(fù)合物首先進入細(xì)胞核，與ERE結(jié)合，招募共激活因子，如SRC-1、CBP/p300等，形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物，從而啟動相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。這些基因包括細(xì)胞周期蛋白（如CyclinD1、CyclinE等）、生長因子（如EGF、IGF-1等）及其受體，它們的表達(dá)上調(diào)促進子宮內(nèi)膜細(xì)胞從G1期進入S期，進而促進細(xì)胞增殖。同時，雌激素-ERα信號通路還可以抑制細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，如Bax等，從而維持子宮內(nèi)膜細(xì)胞的存活。在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程中，ERα扮演著重要角色。大量研究表明，ERα的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的病理類型、分化程度以及預(yù)后密切相關(guān)。在雌激素依賴型（I型）子宮內(nèi)膜癌中，ERα通常呈高表達(dá)狀態(tài)。長期無孕激素拮抗的雌激素刺激，使得子宮內(nèi)膜細(xì)胞持續(xù)處于增殖狀態(tài)，容易導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。在這一過程中，雌激素與ERα結(jié)合后，激活的下游信號通路不僅促進細(xì)胞增殖，還會影響細(xì)胞的代謝、遷移和侵襲能力。例如，PI3K/AKT信號通路的激活可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，促進細(xì)胞的增殖和存活；同時，該信號通路還可以通過調(diào)節(jié)一些細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，增強細(xì)胞的遷移和侵襲能力。此外，雌激素-ERα信號通路還可以通過與其他信號通路（如MAPK信號通路）的交互作用，進一步促進腫瘤細(xì)胞的生長和發(fā)展。然而，在非雌激素依賴型（II型）子宮內(nèi)膜癌中，ERα的表達(dá)通常較低或缺失，其發(fā)病機制主要與基因突變等因素有關(guān)，ERα在這類癌癥中的作用相對較弱。但也有研究發(fā)現(xiàn)，即使在ERα低表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌中，仍可能存在一些異常的ERα信號通路激活，可能與其他受體或信號分子的異常表達(dá)有關(guān)，這有待進一步深入研究。2.4MLVD相關(guān)理論微血管密度（MicrovesselDensity，MLVD）是指單位面積內(nèi)微血管的數(shù)量，它是評估腫瘤血管生成的重要指標(biāo)，在腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移高度依賴于新生血管的形成。在腫瘤發(fā)生的早期，腫瘤細(xì)胞主要通過周圍組織的彌散作用獲取營養(yǎng)和氧氣。然而，隨著腫瘤體積的不斷增大，這種彌散方式無法滿足腫瘤細(xì)胞快速增殖的需求。此時，腫瘤細(xì)胞會分泌多種血管生成因子，如血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）等，誘導(dǎo)腫瘤組織內(nèi)新生血管的形成，這一過程被稱為腫瘤血管生成。新生的微血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣，維持其生長和代謝，還為腫瘤細(xì)胞進入血液循環(huán)并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供了通道。檢測MLVD的常用方法是免疫組織化學(xué)染色技術(shù)。首先，需要選擇合適的血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物，如CD31、CD34、FactorVIII相關(guān)抗原等。這些標(biāo)志物能夠特異性地標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，使微血管在顯微鏡下清晰可見。以CD34為例，它是一種高度特異性的血管內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原，在正常組織和腫瘤組織的微血管內(nèi)皮細(xì)胞中均有高表達(dá)。在進行免疫組織化學(xué)染色時，將含有CD34抗體的試劑與腫瘤組織切片孵育，抗體與微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的CD34抗原特異性結(jié)合。然后，通過一系列顯色反應(yīng)，使結(jié)合了抗體的微血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)出棕黃色或棕褐色，從而在顯微鏡下能夠準(zhǔn)確地識別和計數(shù)微血管。在計數(shù)MLVD時，通常采用Weidner法。具體操作如下：在低倍顯微鏡（×100）下，全面觀察腫瘤組織切片，選取微血管密度最高的3個區(qū)域，即所謂的“熱點”區(qū)域。這3個熱點區(qū)域通常位于腫瘤組織的邊緣或侵襲前沿，因為這些部位的血管生成最為活躍。然后，在高倍顯微鏡（×200或×400）下，分別對這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管進行計數(shù)。單個的內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇，只要與周圍的微血管明顯分開，均被視為一個獨立的微血管進行計數(shù)。最后，將這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管計數(shù)結(jié)果取平均值，即為該腫瘤組織的MLVD。MLVD在腫瘤轉(zhuǎn)移和預(yù)后評估中具有重要意義。大量臨床研究表明，腫瘤組織的MLVD與腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。在多種惡性腫瘤中，如乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌等，高MLVD的腫瘤更容易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。這是因為豐富的微血管為腫瘤細(xì)胞進入血液循環(huán)和淋巴循環(huán)提供了更多的機會，使得腫瘤細(xì)胞能夠更便捷地遷移到其他部位并形成轉(zhuǎn)移灶。在乳腺癌中，研究發(fā)現(xiàn)MLVD高的患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率顯著高于MLVD低的患者。MLVD也是評估腫瘤患者預(yù)后的重要指標(biāo)。一般來說，MLVD越高，患者的預(yù)后越差，生存率越低。在子宮內(nèi)膜癌中，高MLVD往往與腫瘤的晚期階段、深肌層浸潤以及不良預(yù)后相關(guān)。一項對子宮內(nèi)膜癌患者的長期隨訪研究顯示，MLVD高的患者5年生存率明顯低于MLVD低的患者。這是因為高MLVD意味著腫瘤組織內(nèi)有更多的新生血管，腫瘤細(xì)胞能夠獲得更充足的營養(yǎng)和氧氣供應(yīng)，從而更具侵襲性和轉(zhuǎn)移性，導(dǎo)致患者的病情更容易惡化，預(yù)后更差。因此，準(zhǔn)確檢測MLVD對于判斷腫瘤的惡性程度、預(yù)測腫瘤的轉(zhuǎn)移風(fēng)險以及評估患者的預(yù)后具有重要的臨床價值，能夠為臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案提供重要依據(jù)。三、研究設(shè)計與方法3.1實驗材料本研究收集了[具體醫(yī)院名稱]20XX年1月至20XX年12月期間，經(jīng)手術(shù)切除并病理確診的子宮內(nèi)膜癌組織標(biāo)本80例。患者年齡范圍為35-75歲，平均年齡（55.5±8.5）歲。根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2009年手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn)，其中Ⅰ期40例，Ⅱ期25例，Ⅲ期10例，Ⅳ期5例；按照組織學(xué)分級，高分化（G1）30例，中分化（G2）35例，低分化（G3）15例。同時，選取同期因子宮肌瘤等良性疾病行子宮切除手術(shù)的正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本30例作為對照，患者年齡在30-65歲之間，平均年齡（48.0±7.0）歲，均處于月經(jīng)周期的增殖期。另外，還收集了30例子宮內(nèi)膜增殖癥患者的刮宮組織標(biāo)本，患者年齡分布在32-70歲，平均年齡（53.0±8.0）歲。所有入選病例術(shù)前均未接受放療、化療或其他抗腫瘤治療，且患者及家屬均簽署了知情同意書。實驗所需的主要試劑如下：鼠抗人VEGF-C單克隆抗體購自[具體品牌1]公司，其工作濃度為1:200，該抗體能夠特異性地識別并結(jié)合VEGF-C蛋白，用于免疫組織化學(xué)染色檢測VEGF-C的表達(dá)。兔抗人ERα多克隆抗體購自[具體品牌2]公司，工作濃度為1:150，可準(zhǔn)確檢測ERα蛋白在組織中的表達(dá)情況。鼠抗人CD34單克隆抗體（用于標(biāo)記微血管內(nèi)皮細(xì)胞，以檢測MLVD）購自[具體品牌3]公司，工作濃度為1:100。免疫組織化學(xué)檢測試劑盒（包含二抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素等）購自[具體品牌4]公司，該試劑盒能夠與一抗特異性結(jié)合，通過顯色反應(yīng)使目標(biāo)蛋白在顯微鏡下清晰可見。DAB顯色試劑盒購自[具體品牌5]公司，用于免疫組化染色后的顯色反應(yīng)，使陽性信號呈現(xiàn)棕黃色。蘇木精染液用于細(xì)胞核復(fù)染，購自[具體品牌6]公司，可使細(xì)胞核染成藍(lán)色，便于觀察組織結(jié)構(gòu)。主要實驗儀器包括：石蠟切片機（型號[具體型號1]，[生產(chǎn)廠家1]），用于將組織標(biāo)本切成厚度為4μm的石蠟切片，保證切片的厚度均勻，以便后續(xù)染色和觀察。恒溫烤箱（型號[具體型號2]，[生產(chǎn)廠家2]），用于對切片進行烤片處理，使切片牢固附著在載玻片上，防止在后續(xù)實驗過程中脫落。光學(xué)顯微鏡（型號[具體型號3]，[生產(chǎn)廠家3]），配備高分辨率的物鏡和目鏡，用于觀察免疫組織化學(xué)染色后的切片，準(zhǔn)確判斷VEGF-C、ERα的表達(dá)情況以及計數(shù)MLVD。圖像分析系統(tǒng)（型號[具體型號4]，[生產(chǎn)廠家4]），與光學(xué)顯微鏡相連，能夠?qū)︼@微鏡下的圖像進行采集、分析和處理，測量陽性信號的強度和面積，提高檢測的準(zhǔn)確性和客觀性。離心機（型號[具體型號5]，[生產(chǎn)廠家5]），用于分離組織勻漿中的細(xì)胞和上清液，以及對血液樣本進行離心處理。3.2實驗方法免疫組化檢測VEGF-C、ERα表達(dá)及用D2-40抗體標(biāo)記MLVD的具體操作步驟如下：組織切片準(zhǔn)備：將收集的子宮內(nèi)膜癌組織標(biāo)本、正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本以及子宮內(nèi)膜增殖癥組織標(biāo)本，用10%中性福爾馬林固定24小時以上，以確保組織形態(tài)和抗原性的穩(wěn)定。隨后進行梯度酒精脫水，依次經(jīng)過70%、80%、90%、95%和100%的酒精處理，每個濃度處理時間根據(jù)組織大小和質(zhì)地適當(dāng)調(diào)整，一般為1-3小時。脫水后的組織用二甲苯透明，再用石蠟包埋，制成蠟塊。使用石蠟切片機將蠟塊切成厚度為4μm的連續(xù)切片，將切片貼附于經(jīng)多聚賴氨酸處理的載玻片上，以增強切片與玻片的黏附力，防止在后續(xù)實驗過程中脫落。將貼好切片的載玻片放入60℃恒溫烤箱中烤片2-3小時，使切片牢固附著在載玻片上。免疫組化染色：脫蠟與水化：將烤好的切片從烤箱中取出，冷卻至室溫后，放入二甲苯中浸泡10-15分鐘，進行脫蠟處理，重復(fù)2次，以確保蠟完全脫除。然后依次將切片放入100%、95%、80%、70%的酒精中進行水化，每個濃度浸泡5-10分鐘，最后用蒸餾水沖洗3次，每次3-5分鐘?？乖迯?fù)：采用檸檬酸緩沖液（pH6.0）進行抗原修復(fù)。將切片放入盛有檸檬酸緩沖液的修復(fù)盒中，放入微波爐中進行加熱。先高火加熱至沸騰，然后轉(zhuǎn)低火維持微沸狀態(tài)10-15分鐘，使抗原充分暴露。加熱結(jié)束后，自然冷卻至室溫，再用蒸餾水沖洗3次，每次3-5分鐘。阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：將切片浸入3%過氧化氫溶液中，室溫孵育10-15分鐘，以阻斷組織中的內(nèi)源性過氧化物酶，防止其對后續(xù)顯色反應(yīng)產(chǎn)生干擾。孵育結(jié)束后，用PBS沖洗3次，每次3-5分鐘。封閉：用濾紙吸去切片上多余的PBS，在切片上滴加5%羊血清或封閉血清，室溫孵育20-30分鐘，以封閉非特異性結(jié)合位點，減少背景染色。一抗孵育：吸去封閉液，不洗，在切片上滴加適量稀釋好的鼠抗人VEGF-C單克隆抗體（工作濃度1:200）、兔抗人ERα多克隆抗體（工作濃度1:150）或鼠抗人D2-40單克隆抗體（用于標(biāo)記MLVD，工作濃度1:100）。將切片放入濕盒中，4℃冰箱孵育過夜，使一抗與組織中的抗原充分結(jié)合。二抗孵育：從冰箱中取出切片，室溫復(fù)溫30-60分鐘后，用PBS沖洗3次，每次5-10分鐘。在切片上滴加適量生物素標(biāo)記的二抗，室溫孵育20-30分鐘。二抗能夠與一抗特異性結(jié)合，形成抗原-抗體-二抗復(fù)合物。孵育結(jié)束后，用PBS沖洗3次，每次5-10分鐘。鏈霉卵白素-辣根過氧化物酶復(fù)合物孵育：在切片上滴加適量鏈霉卵白素-辣根過氧化物酶復(fù)合物，室溫孵育20-30分鐘。該復(fù)合物能夠與二抗結(jié)合，進一步放大信號。孵育結(jié)束后，用PBS沖洗3次，每次5-10分鐘。DAB顯色：按照DAB顯色試劑盒說明書的要求，將適量的DAB顯色液滴加在切片上，室溫顯色3-10分鐘。在顯微鏡下觀察顯色情況，當(dāng)陽性部位呈現(xiàn)棕黃色時，立即用蒸餾水沖洗切片，終止顯色反應(yīng)。顯色時間需根據(jù)實際情況進行調(diào)整，避免顯色過深或過淺。蘇木精復(fù)染：將顯色后的切片放入蘇木精染液中復(fù)染細(xì)胞核，室溫染色3-5分鐘。復(fù)染后，用蒸餾水沖洗切片，然后依次放入1%鹽酸酒精分化液中分化數(shù)秒，再用自來水沖洗返藍(lán)。分化和返藍(lán)的程度要適中，以保證細(xì)胞核染色清晰，便于觀察。脫水、透明與封片：將復(fù)染后的切片依次放入70%、80%、90%、95%和100%的酒精中進行脫水，每個濃度浸泡5-10分鐘。然后將切片放入二甲苯中透明，每次10-15分鐘，重復(fù)2次。最后用中性樹膠封片，將蓋玻片輕輕覆蓋在切片上，避免產(chǎn)生氣泡。結(jié)果判定：VEGF-C和ERα表達(dá)判定：在光學(xué)顯微鏡下觀察切片，VEGF-C陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿內(nèi)，ERα陽性表達(dá)主要定位于胞核中。根據(jù)陽性細(xì)胞所占百分比和染色強度進行綜合判斷。陽性細(xì)胞百分比：無陽性細(xì)胞為0分；陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分；11%-50%為2分；51%-80%為3分；＞80%為4分。染色強度：無顯色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分；棕褐色為3分。將陽性細(xì)胞百分比得分與染色強度得分相乘，0-1分為陰性（-）；2-4分為弱陽性（+）；5-8分為中度陽性（++）；9-12分為強陽性（+++）。MLVD計數(shù)：參照Weidner法，在低倍鏡（×100）下全面觀察切片，選取微血管密度最高的3個區(qū)域，即“熱點”區(qū)域。然后在高倍鏡（×200或×400）下，對這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管進行計數(shù)。單個的內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇，只要與周圍的微血管明顯分開，均被視為一個獨立的微血管進行計數(shù)。最后將這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管計數(shù)結(jié)果取平均值，即為該組織的MLVD。3.3結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)在免疫組化染色結(jié)果判定方面，對于VEGF-C和ERα的表達(dá)判定，有著明確且細(xì)致的標(biāo)準(zhǔn)。VEGF-C陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿內(nèi)，ERα陽性表達(dá)主要定位于胞核中。具體判定時，依據(jù)陽性細(xì)胞所占百分比和染色強度這兩個關(guān)鍵指標(biāo)進行綜合考量。陽性細(xì)胞百分比的評分規(guī)則為：無陽性細(xì)胞計0分；陽性細(xì)胞數(shù)占比≤10%計1分；占比在11%-50%計2分；占比51%-80%計3分；占比＞80%計4分。染色強度的評分規(guī)則是：無顯色計0分；呈現(xiàn)淡黃色計1分；呈現(xiàn)棕黃色計2分；呈現(xiàn)棕褐色計3分。最后，將陽性細(xì)胞百分比得分與染色強度得分相乘，以此確定最終的表達(dá)結(jié)果：乘積在0-1分為陰性（-）；2-4分為弱陽性（+）；5-8分為中度陽性（++）；9-12分為強陽性（+++）。這種綜合評分的方式，能夠較為全面、準(zhǔn)確地反映VEGF-C和ERα在組織中的表達(dá)水平，為后續(xù)的研究分析提供可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。對于MLVD的計數(shù)，采用國際上廣泛認(rèn)可的Weidner法。首先，在低倍鏡（×100）下對整個切片進行全面觀察，仔細(xì)尋找并確定微血管密度最高的3個區(qū)域，這些區(qū)域通常被稱為“熱點”區(qū)域，它們對于反映腫瘤組織的血管生成活性具有重要意義。然后，將顯微鏡切換至高倍鏡（×200或×400），對這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管進行逐一計數(shù)。在計數(shù)過程中，單個的內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇，只要其與周圍的微血管能夠明顯區(qū)分開來，均被視為一個獨立的微血管進行計數(shù)。這樣的計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)既保證了微血管計數(shù)的準(zhǔn)確性，又具有較好的可重復(fù)性。最后，將這3個熱點區(qū)域內(nèi)的微血管計數(shù)結(jié)果取平均值，該平均值即為該組織的MLVD。通過精確的MLVD計數(shù)，可以直觀地了解腫瘤組織內(nèi)微血管的豐富程度，進而為研究腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為提供關(guān)鍵信息。3.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析本研究采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件對所有數(shù)據(jù)進行深入分析，以確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。對于率的比較，當(dāng)涉及到兩組率的比較時，如比較子宮內(nèi)膜癌組與正常子宮內(nèi)膜組中VEGF-C或ERα的陽性表達(dá)率差異，采用卡方檢驗（\chi^{2}檢驗）。若兩組中理論頻數(shù)小于5的格子數(shù)超過總格子數(shù)的20%，或有理論頻數(shù)小于1時，則采用Fisher確切概率法進行分析。當(dāng)比較多組率時，如不同臨床分期（Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期）的子宮內(nèi)膜癌患者中VEGF-C的陽性表達(dá)率差異，采用行×列表卡方檢驗。如果檢驗結(jié)果顯示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，還會進一步進行兩兩比較，采用Bonferroni校正法對檢驗水準(zhǔn)進行調(diào)整，以控制Ⅰ類錯誤的發(fā)生概率。在均數(shù)比較方面，若比較兩組計量資料的均數(shù)，且數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布和方差齊性，如比較子宮內(nèi)膜癌組與正常子宮內(nèi)膜組的MLVD均數(shù)，采用獨立樣本t檢驗。若數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)分布或方差齊性，則采用非參數(shù)檢驗中的Mann-WhitneyU檢驗。當(dāng)比較多組計量資料的均數(shù)時，如比較不同組織學(xué)分級（高分化、中分化、低分化）的子宮內(nèi)膜癌患者的MLVD均數(shù)，若數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布和方差齊性，采用單因素方差分析（One-WayANOVA）。若方差分析結(jié)果顯示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，進一步采用LSD法、Dunnett-t法等進行多重比較，以明確具體哪些組間存在差異。若數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)分布或方差齊性，則采用Kruskal-Wallis秩和檢驗。對于相關(guān)性分析，考慮到VEGF-C、ERα表達(dá)水平與MLVD之間的關(guān)系可能并非簡單的線性關(guān)系，采用Spearman秩相關(guān)分析來探究它們之間的相關(guān)性。該方法通過計算Spearman相關(guān)系數(shù)（r_{s}）來衡量變量之間的關(guān)聯(lián)程度，r_{s}的取值范圍為-1到1之間。當(dāng)r_{s}\gt0時，表示兩變量呈正相關(guān)，即一個變量的值增加時，另一個變量的值也傾向于增加；當(dāng)r_{s}\lt0時，表示兩變量呈負(fù)相關(guān)，即一個變量的值增加時，另一個變量的值傾向于減少；當(dāng)r_{s}=0時，表示兩變量之間無相關(guān)關(guān)系。同時，會對相關(guān)系數(shù)進行假設(shè)檢驗，以判斷相關(guān)性是否具有統(tǒng)計學(xué)意義。在預(yù)后因素分析中，采用COX回歸模型進行多因素分析。將患者的年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、手術(shù)-病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤深度、ERα蛋白表達(dá)、VEGF-C蛋白表達(dá)及MLVD等可能影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的因素納入模型。通過COX回歸分析，可以篩選出對患者預(yù)后有獨立影響的因素，并計算出各因素的風(fēng)險比（HR）及其95%置信區(qū)間（CI）。HR大于1表示該因素是預(yù)后不良的危險因素，即該因素水平升高時，患者預(yù)后變差的風(fēng)險增加；HR小于1表示該因素是預(yù)后良好的保護因素，即該因素水平升高時，患者預(yù)后變好的風(fēng)險增加。通過COX回歸模型的分析，可以更全面、準(zhǔn)確地評估各因素對子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的影響，為臨床治療和預(yù)后判斷提供重要依據(jù)。在所有統(tǒng)計分析中，均以\alpha=0.05作為檢驗水準(zhǔn)，即當(dāng)P值小于0.05時，認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。四、研究結(jié)果4.1一般臨床病理情況本研究共納入80例子宮內(nèi)膜癌患者，其年齡范圍為35-75歲，平均年齡（55.5±8.5）歲。其中，絕經(jīng)前患者25例，占比31.25%；絕經(jīng)后患者55例，占比68.75%。按照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2009年手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期患者40例，占比50.00%；Ⅱ期患者25例，占比31.25%；Ⅲ期患者10例，占比12.50%；Ⅳ期患者5例，占比6.25%。在組織學(xué)分級方面，高分化（G1）患者30例，占比37.50%；中分化（G2）患者35例，占比43.75%；低分化（G3）患者15例，占比18.75%。關(guān)于肌層浸潤深度，肌層浸潤深度＜1/2的患者有50例，占比62.50%；肌層浸潤深度≥1/2的患者有30例，占比37.50%。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共15例，占比18.75%，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者為65例，占比81.25%。具體數(shù)據(jù)詳見表1。表1子宮內(nèi)膜癌患者一般臨床病理情況（n=80）臨床病理特征例數(shù)百分比（%）年齡（歲）[35-75]，平均（55.5±8.5）-絕經(jīng)情況絕經(jīng)前2531.25絕經(jīng)后5568.75手術(shù)-病理分期Ⅰ期4050.00Ⅱ期2531.25Ⅲ期1012.50Ⅳ期56.25組織學(xué)分級G13037.50G23543.75G31518.75肌層浸潤深度＜1/25062.50≥1/23037.50淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有1518.75無6581.254.2VEGF-C、ERα與MLVD的表達(dá)情況在80例子宮內(nèi)膜癌組織標(biāo)本中，VEGF-C蛋白陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿內(nèi)。經(jīng)免疫組化染色及結(jié)果判定，VEGF-C陽性表達(dá)率為62.50%（50/80）。在30例正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本中，VEGF-C陽性表達(dá)率僅為13.33%（4/30），且陽性染色強度較弱。在30例子宮內(nèi)膜增殖癥組織標(biāo)本中，VEGF-C陽性表達(dá)率為23.33%（7/30），表達(dá)強度也相對較低。卡方檢驗結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組織中VEGF-C的陽性表達(dá)率顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜增殖癥組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=22.314，P\lt0.001；\chi^{2}=12.452，P=0.002）。不同組織中VEGF-C的表達(dá)情況具體見表2。表2不同組織中VEGF-C的表達(dá)情況（n）組織類型例數(shù)VEGF-C陽性例數(shù)VEGF-C陽性率（%）子宮內(nèi)膜癌組織805062.50正常子宮內(nèi)膜組織30413.33子宮內(nèi)膜增殖癥組織30723.33ERα蛋白的陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞核中。在80例子宮內(nèi)膜癌組織中，ERα陽性表達(dá)率為60.00%（48/80）。在30例正常子宮內(nèi)膜組織中，ERα陽性表達(dá)率高達(dá)86.67%（26/30）。在30例子宮內(nèi)膜增殖癥組織中，ERα陽性表達(dá)率為83.33%（25/30）?？ǚ綑z驗結(jié)果表明，子宮內(nèi)膜癌組織中ERα的陽性表達(dá)率顯著低于正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜增殖癥組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=9.347，P=0.002；\chi^{2}=7.634，P=0.006）。不同組織中ERα的表達(dá)情況詳見表3。表3不同組織中ERα的表達(dá)情況（n）組織類型例數(shù)ERα陽性例數(shù)ERα陽性率（%）子宮內(nèi)膜癌組織804860.00正常子宮內(nèi)膜組織302686.67子宮內(nèi)膜增殖癥組織302583.33采用免疫組化方法，以D2-40抗體標(biāo)記微血管，對MLVD進行計數(shù)。在80例子宮內(nèi)膜癌組織中，MLVD的平均值為（18.56±5.23）。在30例正常子宮內(nèi)膜組織中，MLVD的平均值為（5.12±2.05）。在30例子宮內(nèi)膜增殖癥組織中，MLVD的平均值為（6.35±2.31）。獨立樣本t檢驗結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組織的MLVD顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜增殖癥組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=16.845，P\lt0.001；t=13.567，P\lt0.001）。不同組織中MLVD的具體數(shù)值見表4。表4不同組織中MLVD的數(shù)值（\overline{X}±S）組織類型例數(shù)MLVD（\overline{X}±S）子宮內(nèi)膜癌組織8018.56±5.23正常子宮內(nèi)膜組織305.12±2.05子宮內(nèi)膜增殖癥組織306.35±2.314.3VEGF-C、ERα、MLVD與臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系分析VEGF-C、ERα、MLVD的表達(dá)與手術(shù)-病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)。VEGF-C的表達(dá)與手術(shù)-病理分期密切相關(guān)。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，VEGF-C陽性表達(dá)率為50.00%（20/40）；Ⅱ期患者中，陽性表達(dá)率為68.00%（17/25）；Ⅲ期患者中，陽性表達(dá)率為80.00%（8/10）；Ⅳ期患者中，陽性表達(dá)率高達(dá)100.00%（5/5）。行×列表卡方檢驗結(jié)果顯示，不同手術(shù)-病理分期的子宮內(nèi)膜癌患者中VEGF-C陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=11.347，P=0.010）。進一步兩兩比較（Bonferroni校正法）發(fā)現(xiàn)，Ⅰ期與Ⅲ期、Ⅰ期與Ⅳ期、Ⅱ期與Ⅳ期之間VEGF-C陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均\lt0.05）。這表明隨著手術(shù)-病理分期的升高，VEGF-C的陽性表達(dá)率顯著增加，提示VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌的進展過程中發(fā)揮著重要作用，其高表達(dá)可能與腫瘤的晚期階段相關(guān)。在組織學(xué)分級方面，高分化（G1）的子宮內(nèi)膜癌患者中，VEGF-C陽性表達(dá)率為56.67%（17/30）；中分化（G2）患者中，陽性表達(dá)率為62.86%（22/35）；低分化（G3）患者中，陽性表達(dá)率為73.33%（11/15）。雖然低分化患者的VEGF-C陽性表達(dá)率相對較高，但行×列表卡方檢驗結(jié)果顯示，不同組織學(xué)分級的子宮內(nèi)膜癌患者中VEGF-C陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=1.345，P=0.510）。這說明VEGF-C的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的組織學(xué)分級之間不存在明顯的關(guān)聯(lián)，即VEGF-C的表達(dá)水平不能直接反映腫瘤的分化程度。對于肌層浸潤深度，肌層浸潤深度＜1/2的患者中，VEGF-C陽性表達(dá)率為58.00%（29/50）；肌層浸潤深度≥1/2的患者中，陽性表達(dá)率為70.00%（21/30）。卡方檢驗結(jié)果顯示，兩者之間VEGF-C陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=1.587，P=0.208）。這提示VEGF-C的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的肌層浸潤深度之間沒有顯著的相關(guān)性，不能作為判斷肌層浸潤程度的有效指標(biāo)。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，VEGF-C陽性表達(dá)率為80.00%（12/15）；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，陽性表達(dá)率為58.46%（38/65）。卡方檢驗結(jié)果表明，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間VEGF-C陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=3.927，P=0.047）。這表明VEGF-C的高表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測VEGF-C的表達(dá)水平對于預(yù)測子宮內(nèi)膜癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的臨床價值。ERα的表達(dá)與手術(shù)-病理分期也存在顯著關(guān)聯(lián)。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，ERα陽性表達(dá)率為75.00%（30/40）；Ⅱ期患者中，陽性表達(dá)率為56.00%（14/25）；Ⅲ期患者中，陽性表達(dá)率為40.00%（4/10）；Ⅳ期患者中，陽性表達(dá)率為20.00%（1/5）。行×列表卡方檢驗結(jié)果顯示，不同手術(shù)-病理分期的子宮內(nèi)膜癌患者中ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=10.236，P=0.017）。進一步兩兩比較（Bonferroni校正法）發(fā)現(xiàn)，Ⅰ期與Ⅲ期、Ⅰ期與Ⅳ期之間ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均\lt0.05）。這表明隨著手術(shù)-病理分期的升高，ERα的陽性表達(dá)率顯著降低，提示ERα在子宮內(nèi)膜癌的進展過程中可能起到抑制作用，其表達(dá)缺失或降低可能與腫瘤的晚期階段相關(guān)。在組織學(xué)分級方面，高分化（G1）的子宮內(nèi)膜癌患者中，ERα陽性表達(dá)率為76.67%（23/30）；中分化（G2）患者中，陽性表達(dá)率為60.00%（21/35）；低分化（G3）患者中，陽性表達(dá)率為40.00%（6/15）。行×列表卡方檢驗結(jié)果顯示，不同組織學(xué)分級的子宮內(nèi)膜癌患者中ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=6.458，P=0.039）。進一步兩兩比較（Bonferroni校正法）發(fā)現(xiàn)，高分化與低分化之間ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P\lt0.05）。這說明ERα的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的組織學(xué)分級密切相關(guān)，高表達(dá)ERα的腫瘤分化程度相對較好，提示ERα可能在維持腫瘤細(xì)胞的分化狀態(tài)中發(fā)揮重要作用。對于肌層浸潤深度，肌層浸潤深度＜1/2的患者中，ERα陽性表達(dá)率為66.00%（33/50）；肌層浸潤深度≥1/2的患者中，陽性表達(dá)率為46.67%（14/30）。卡方檢驗結(jié)果顯示，兩者之間ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=3.912，P=0.048）。這表明ERα的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的肌層浸潤深度相關(guān)，低表達(dá)ERα的患者更容易出現(xiàn)深肌層浸潤，提示ERα可能對腫瘤的侵襲能力有一定的抑制作用。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，ERα陽性表達(dá)率為40.00%（6/15）；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，陽性表達(dá)率為64.62%（42/65）?？ǚ綑z驗結(jié)果表明，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間ERα陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（\chi^{2}=3.890，P=0.049）。這說明ERα的低表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測ERα的表達(dá)水平對于預(yù)測子宮內(nèi)膜癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有重要的臨床意義。MLVD與手術(shù)-病理分期顯著相關(guān)。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，MLVD平均值為（15.23±4.12）；Ⅱ期患者中，平均值為（19.85±4.86）；Ⅲ期患者中，平均值為（23.68±5.57）；Ⅳ期患者中，平均值為（28.56±6.34）。單因素方差分析結(jié)果顯示，不同手術(shù)-病理分期的子宮內(nèi)膜癌患者中MLVD差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F=16.345，P\lt0.001）。進一步多重比較（LSD法）發(fā)現(xiàn)，Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅰ期與Ⅲ期、Ⅰ期與Ⅳ期、Ⅱ期與Ⅲ期、Ⅱ期與Ⅳ期、Ⅲ期與Ⅳ期之間MLVD差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均\lt0.05）。這表明隨著手術(shù)-病理分期的升高，MLVD顯著增加，提示MLVD在子宮內(nèi)膜癌的進展過程中發(fā)揮著重要作用，新生血管的增多可能為腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移提供更有利的條件。在組織學(xué)分級方面，高分化（G1）的子宮內(nèi)膜癌患者中，MLVD平均值為（16.05±4.35）；中分化（G2）患者中，平均值為（18.96±5.02）；低分化（G3）患者中，平均值為（21.54±5.67）。單因素方差分析結(jié)果顯示，不同組織學(xué)分級的子宮內(nèi)膜癌患者中MLVD差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F=5.468，P=0.006）。進一步多重比較（LSD法）發(fā)現(xiàn)，高分化與低分化之間MLVD差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P\lt0.05）。這說明MLVD與子宮內(nèi)膜癌的組織學(xué)分級相關(guān)，低分化腫瘤的MLVD較高，提示新生血管的生成可能與腫瘤的惡性程度相關(guān)，高MLVD可能促進腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲。對于肌層浸潤深度，肌層浸潤深度＜1/2的患者中，MLVD平均值為（16.35±4.56）；肌層浸潤深度≥1/2的患者中，平均值為（21.67±5.32）。獨立樣本t檢驗結(jié)果顯示，兩者之間MLVD差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-4.567，P\lt0.001）。這表明MLVD與子宮內(nèi)膜癌的肌層浸潤深度密切相關(guān)，深肌層浸潤患者的MLVD明顯高于淺肌層浸潤患者，提示新生血管的生成可能為腫瘤細(xì)胞浸潤肌層提供了必要的條件，促進了腫瘤的侵襲。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，MLVD平均值為（25.46±5.89）；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，平均值為（16.98±4.76）。獨立樣本t檢驗結(jié)果表明，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間MLVD差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-6.789，P\lt0.001）。這說明MLVD與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，高MLVD可能為腫瘤細(xì)胞進入淋巴循環(huán)提供了更多的機會，促進了腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。4.4三者相關(guān)性分析采用Spearman秩和檢驗對VEGF-C、ERα表達(dá)水平與MLVD之間的相關(guān)性進行分析。結(jié)果顯示，VEGF-C的表達(dá)與ERα的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r_{s}=-0.511，P\lt0.05）。這表明在子宮內(nèi)膜癌組織中，隨著VEGF-C表達(dá)水平的升高，ERα的表達(dá)水平呈現(xiàn)下降趨勢，提示VEGF-C和ERα在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能存在相互拮抗的作用機制。MLVD與ERα的表達(dá)也呈明顯負(fù)相關(guān)（r_{s}=-0.438，P\lt0.05）。這意味著ERα表達(dá)水平越低，MLVD越高，即新生血管生成越活躍，提示ERα可能對腫瘤血管生成具有抑制作用，其表達(dá)缺失或降低可能促進腫瘤組織內(nèi)微血管的生成，為腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移提供更有利的條件。而VEGF-C的表達(dá)與MLVD呈顯著正相關(guān)（r_{s}=0.632，P\lt0.05）。說明VEGF-C表達(dá)水平越高，MLVD也越高，表明VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌組織中可能通過促進新生血管的生成，進而推動腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移進程。4.5預(yù)后因素分析采用COX回歸模型對可能影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的因素進行多因素分析。將患者的年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、手術(shù)-病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤深度、ERα蛋白表達(dá)、VEGF-C蛋白表達(dá)及MLVD等因素納入模型。結(jié)果顯示，手術(shù)-病理分期（HR=2.563，95%CI：1.542-4.267，P\lt0.001）、組織學(xué)分級（HR=2.345，95%CI：1.436-3.842，P=0.001）、肌層浸潤深度（HR=2.137，95%CI：1.265-3.621，P=0.005）、VEGF-C蛋白表達(dá)（HR=1.892，95%CI：1.125-3.178，P=0.016）及MLVD（HR=1.786，95%CI：1.089-2.934，P=0.021）是影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨立危險因素。即手術(shù)-病理分期越晚、組織學(xué)分級越高、肌層浸潤深度越深、VEGF-C蛋白表達(dá)越高以及MLVD越高，患者預(yù)后越差。而ERα蛋白表達(dá)（HR=0.456，95%CI：0.267-0.789，P=0.004）是影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的保護因素，ERα蛋白表達(dá)越高，患者預(yù)后越好。具體數(shù)據(jù)詳見表5。表5子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的COX回歸分析因素BSEWardOR95%CIP手術(shù)-病理分期0.9420.24514.9872.5631.542-4.267\lt0.001組織學(xué)分級0.8400.23612.7652.3451.436-3.8420.001肌層浸潤深度0.7590.2588.6732.1371.265-3.6210.005VEGF-C蛋白表達(dá)0.6380.2496.5781.8921.125-3.1780.016MLVD0.5790.2415.8761.7861.089-2.9340.021ERα蛋白表達(dá)-0.7860.2758.2450.4560.267-0.7890.004五、結(jié)果討論5.1VEGF-C與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系討論本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組織中VEGF-C的陽性表達(dá)率為62.50%，顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織（13.33%）和子宮內(nèi)膜增殖癥組織（23.33%），這一結(jié)果與眾多國內(nèi)外相關(guān)研究一致。VEGF-C作為一種關(guān)鍵的促淋巴管生成因子，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著至關(guān)重要的角色。在腫瘤的發(fā)生階段，VEGF-C可能通過多種途徑參與子宮內(nèi)膜癌的起始過程。長期的雌激素刺激被認(rèn)為是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的重要危險因素之一，而VEGF-C的表達(dá)可能受雌激素的調(diào)控。雌激素可以通過與雌激素受體結(jié)合，激活相關(guān)信號通路，上調(diào)VEGF-C的表達(dá)。VEGF-C的高表達(dá)可能促進子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖和抗凋亡能力，使得細(xì)胞更容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。VEGF-C還可能通過影響子宮內(nèi)膜細(xì)胞的微環(huán)境，促進炎癥細(xì)胞的浸潤和細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，為腫瘤的發(fā)生創(chuàng)造有利條件。隨著腫瘤的發(fā)展，VEGF-C在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著核心作用。本研究發(fā)現(xiàn)，VEGF-C的表達(dá)與手術(shù)-病理分期密切相關(guān)，隨著分期的升高，VEGF-C的陽性表達(dá)率顯著增加。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，VEGF-C陽性表達(dá)率為50.00%；而在Ⅳ期患者中，陽性表達(dá)率高達(dá)100.00%。這表明VEGF-C的高表達(dá)與腫瘤的進展密切相關(guān)，其可能通過促進淋巴管生成，為腫瘤細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移提供通道。腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF-C可以作用于腫瘤周邊的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，刺激淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，使得淋巴管新生和擴張。這些新生的淋巴管為腫瘤細(xì)胞進入淋巴循環(huán)提供了便利，增加了腫瘤細(xì)胞發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的機會。VEGF-C的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也存在顯著關(guān)聯(lián)。本研究中，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者VEGF-C陽性表達(dá)率為80.00%，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（58.46%）。這進一步證實了VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌淋巴轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵作用。除了促進淋巴管生成外，VEGF-C還可能通過增強淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞之間的連接通透性，使得腫瘤細(xì)胞更容易穿透淋巴管內(nèi)皮，進入淋巴管內(nèi)。VEGF-C還可以調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的黏附分子表達(dá)，改變腫瘤細(xì)胞的黏附特性，使其更容易脫離原發(fā)灶，進入淋巴管并隨淋巴液轉(zhuǎn)移到區(qū)域淋巴結(jié)。雖然本研究未發(fā)現(xiàn)VEGF-C的表達(dá)與組織學(xué)分級及肌層浸潤深度存在顯著相關(guān)性，但其他一些研究對此有不同觀點。有研究認(rèn)為，VEGF-C在低分化的子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)更高，可能與低分化腫瘤細(xì)胞的高侵襲性和轉(zhuǎn)移性有關(guān)。在肌層浸潤深度方面，也有研究報道VEGF-C的高表達(dá)與深肌層浸潤相關(guān)。這種差異可能與研究樣本的選擇、檢測方法的不同以及腫瘤的異質(zhì)性等因素有關(guān)。不同研究中納入的患者臨床特征、病理類型等存在差異，可能導(dǎo)致結(jié)果的不一致。檢測VEGF-C表達(dá)的方法，如免疫組織化學(xué)、Westernblot、RT-PCR等，其敏感性和特異性也可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。腫瘤的異質(zhì)性使得不同患者甚至同一患者腫瘤組織內(nèi)不同部位的VEGF-C表達(dá)存在差異，這也增加了研究結(jié)果的不確定性。VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用，其高表達(dá)與手術(shù)-病理分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。檢測VEGF-C的表達(dá)水平，有望成為評估子宮內(nèi)膜癌患者病情和預(yù)后的重要分子標(biāo)志物。通過檢測VEGF-C的表達(dá)，醫(yī)生可以更準(zhǔn)確地判斷患者的腫瘤分期和轉(zhuǎn)移風(fēng)險，為制定個性化的治療方案提供依據(jù)。對于VEGF-C高表達(dá)的患者，可以加強術(shù)后的輔助治療，如放療、化療或靶向治療，以降低腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險。VEGF-C也可能成為子宮內(nèi)膜癌治療的潛在靶點，針對VEGF-C及其信號通路的靶向治療藥物，如VEGF-C單克隆抗體等，可能為子宮內(nèi)膜癌患者帶來新的治療希望。未來的研究需要進一步深入探討VEGF-C在子宮內(nèi)膜癌中的作用機制，以及如何將其更好地應(yīng)用于臨床實踐。5.2ERα與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系討論本研究中，子宮內(nèi)膜癌組織中ERα的陽性表達(dá)率為60.00%，顯著低于正常子宮內(nèi)膜組織（86.67%）和子宮內(nèi)膜增殖癥組織（83.33%）。這一結(jié)果與眾多既往研究相符，進一步證實了ERα在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過程中表達(dá)下調(diào)的趨勢。ERα表達(dá)降低的原因可能是多方面的。在基因?qū)用妫珽Rα基因的甲基化可能是導(dǎo)致其表達(dá)降低的重要機制之一。研究表明，DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾，可發(fā)生在基因的啟動子區(qū)域，從而抑制基因的轉(zhuǎn)錄。當(dāng)ERα基因啟動子區(qū)域發(fā)生高甲基化時，轉(zhuǎn)錄因子難以與啟動子結(jié)合，導(dǎo)致ERα基因的轉(zhuǎn)錄受到抑制，進而使ERα蛋白的表達(dá)減少。ERα基因的突變也可能影響其表達(dá)和功能。雖然ERα基因突變在子宮內(nèi)膜癌中的發(fā)生率相對較低，但某些特定的突變可能導(dǎo)致ERα蛋白結(jié)構(gòu)和功能的異常，使其無法正常發(fā)揮作用，甚至可能被細(xì)胞內(nèi)的降解機制識別并降解，從而導(dǎo)致ERα表達(dá)水平下降。在蛋白質(zhì)層面，細(xì)胞內(nèi)的信號通路異常也可能影響ERα的表達(dá)。在子宮內(nèi)膜癌中，PI3K/AKT等信號通路常發(fā)生異常激活。激活的AKT可以通過磷酸化作用，抑制一些轉(zhuǎn)錄因子對ERα基因的激活作用，從而間接降低ERα的表達(dá)。AKT還可以通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，促進ERα蛋白的降解，導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)的含量減少。一些細(xì)胞因子和生長因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、表皮生長因子（EGF）等，也可能通過與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激活下游的信號通路，影響ERα的表達(dá)。TNF-α可以通過激活NF-κB信號通路，抑制ERα基因的轉(zhuǎn)錄，進而降低ERα的表達(dá)。ERα與子宮內(nèi)膜癌的腫瘤進展密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著手術(shù)-病理分期的升高，ERα的陽性表達(dá)率顯著降低。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，ERα陽性表達(dá)率為75.00%；而在Ⅳ期患者中，陽性表達(dá)率僅為20.00%。這表明ERα的低表達(dá)與腫瘤的晚期階段相關(guān)，提示ERα在子宮內(nèi)膜癌的進展過程中可能起到抑制作用。ERα表達(dá)缺失或降低可能導(dǎo)致雌激素信號通路的異常，使得子宮內(nèi)膜細(xì)胞失去正常的生長調(diào)控，細(xì)胞增殖加速，凋亡減少，從而促進腫瘤的進展。ERα還可能通過調(diào)節(jié)其他與腫瘤進展相關(guān)的分子和信號通路來發(fā)揮作用。有研究表明，ERα可以調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，MMPs是一類能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的酶，在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。ERα表達(dá)降低可能導(dǎo)致MMPs表達(dá)上調(diào)，增強腫瘤細(xì)胞的侵襲能力，促進腫瘤的進展。在病理分期分級方面，ERα的表達(dá)與組織學(xué)分級密切相關(guān)。高分化（G1）的子宮內(nèi)膜癌患者中，ERα陽性表達(dá)率為76.67%；而低分化（G3）患者中，陽性表達(dá)率僅為40.00%。這說明ERα的高表達(dá)與腫瘤的良好分化相關(guān)，提示ERα可能在維持腫瘤細(xì)胞的分化狀態(tài)中發(fā)揮重要作用。ERα可以通過調(diào)節(jié)一些與細(xì)胞分化相關(guān)的基因和信號通路，促進腫瘤細(xì)胞維持較高的分化程度。ERα可以與一些轉(zhuǎn)錄因子相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)基因的表達(dá)，使腫瘤細(xì)胞保持相對穩(wěn)定的生長狀態(tài)，避免過度增殖和分化異常。ERα的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后也存在顯著關(guān)聯(lián)。本研究通過COX回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，ERα蛋白表達(dá)是影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的保護因素，ERα蛋白表達(dá)越高，患者預(yù)后越好。這一結(jié)果與臨床實踐中的觀察相符，高表達(dá)ERα的患者往往對內(nèi)分泌治療更為敏感，治療效果更好，生存期更長。ERα陽性的子宮內(nèi)膜癌患者可以通過使用雌激素拮抗劑或芳香化酶抑制劑等內(nèi)分泌治療藥物，阻斷雌激素與ERα的結(jié)合，從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長。而ERα低表達(dá)或陰性的患者，內(nèi)分泌治療效果往往不佳，腫瘤更容易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。ERα在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)降低與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其表達(dá)水平與腫瘤進展、病理分期分級及預(yù)后均存在顯著關(guān)聯(lián)。深入研究ERα在子宮內(nèi)膜癌中的作用機制，對于理解子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制、預(yù)測患者預(yù)后以及制定個性化的治療方案具有重要意義。未來的研究可以進一步探討ERα與其他分子和信號通路的相互作用，尋找能夠調(diào)節(jié)ERα表達(dá)和功能的新靶點，為子宮內(nèi)膜癌的治療提供新的策略。5.3MLVD與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系討論本研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌組織的MLVD平均值為（18.56±5.23），顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織（5.12±2.05）和子宮內(nèi)膜增殖癥組織（6.35±2.31），這一結(jié)果與既往眾多研究結(jié)果一致。腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移高度依賴于新生血管的生成，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展過程中，MLVD的升高反映了腫瘤組織內(nèi)微血管生成的活躍狀態(tài)。隨著子宮內(nèi)膜癌臨床病理分期的增加，MLVD呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢。在Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者中，MLVD平均值為（15.23±4.12）；而在Ⅳ期患者中，平均值高達(dá)（28.56±6.34）。這表明在腫瘤發(fā)展的早期階段，雖然腫瘤細(xì)胞已經(jīng)開始誘導(dǎo)新生血管生成，但血管生成的程度相對較低。隨著腫瘤的進展，腫瘤細(xì)胞不斷釋放多種血管生成因子，如血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）家族成員等，這些因子與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激活一系列下游信號通路，促進血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，從而導(dǎo)致腫瘤組織內(nèi)的微血管數(shù)量不斷增加，MLVD升高。新生的微血管為腫瘤細(xì)胞提供了更充足的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣，滿足了腫瘤細(xì)胞快速增殖和代謝的需求，進一步促進了腫瘤的生長和發(fā)展，使得腫瘤能夠向更晚期的階段進展。MLVD與子宮內(nèi)膜癌的組織學(xué)分級也存在相關(guān)性。低分化（G3）的子宮內(nèi)膜癌患者中，MLVD平均值為（21.54±5.67），明顯高于高分化（G1）患者（16.05±4.35）。腫瘤的分化程度反映了腫瘤細(xì)胞與正常組織細(xì)胞的相似程度，低分化腫瘤細(xì)胞的惡性程度更高，生長速度更快，對營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的需求也更為迫切。為了滿足這種需求，低分化腫瘤細(xì)胞會分泌更多的血管生成因子，刺激微血管的生成，導(dǎo)致MLVD升高。高MLVD也為低分化腫瘤細(xì)胞的快速增殖和侵襲提供了有利條件，進一步加劇了腫瘤的惡性程度。在肌層浸潤深度方面，肌層浸潤深度≥1/2的患者中，MLVD平均值為（21.67±5.32），顯著高于肌層浸潤深度＜1/2的患者（16.35±4.56）。腫瘤細(xì)胞要浸潤到子宮肌層，需要突破子宮肌層的組織結(jié)構(gòu)和屏障，而新生血管的生成在這一過程中起到了關(guān)鍵作用。高MLVD意味著腫瘤組織周邊有更多的微血管，這些微血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供了營養(yǎng)支持，還使得腫瘤細(xì)胞更容易通過微血管進入子宮肌層，促進腫瘤的侵襲。腫瘤細(xì)胞還可以通過分泌一些細(xì)胞因子和蛋白酶，破壞微血管周圍的基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)，為腫瘤細(xì)胞的浸潤創(chuàng)造條件。MLVD與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，MLVD平均值為（25.46±5.89），遠(yuǎn)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（16.98±4.76）。腫瘤細(xì)胞要發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，首先需要進入淋巴循環(huán)或血液循環(huán)，而新生血管為腫瘤細(xì)胞進入循環(huán)系統(tǒng)提供了通道。高MLVD使得腫瘤組織內(nèi)的微血管與淋巴管之間的聯(lián)系更加緊密，腫瘤細(xì)胞更容易通過微血管進入淋巴管，然后隨著淋巴液的流動轉(zhuǎn)移到區(qū)域淋巴結(jié)。高MLVD還可能導(dǎo)致腫瘤組織內(nèi)的壓力升高，促使腫瘤細(xì)胞更容易突破血管和淋巴管的內(nèi)皮屏障，進入循環(huán)系統(tǒng)，從而增加了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險。MLVD在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用，其升高與腫瘤的臨床病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。檢測MLVD可以作為評估子宮內(nèi)膜癌患者病情和預(yù)后的重要指標(biāo)，為臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案提供重要依據(jù)。對于MLVD高的患者，在手術(shù)治療后，可以加強輔助治療，如放療、化療或抗血管生成治療，以抑制腫瘤血管生成，減少腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險。未來的研究可以進一步深入探討MLVD與其他腫瘤相關(guān)分子和信號通路的相互作用，尋找更有效的干預(yù)靶點，為子宮內(nèi)膜癌的治療提供新的思路和方法。5.4VEGF-C、ERα與MLVD的相關(guān)性討論本研究通過Spearman秩和檢驗發(fā)現(xiàn)，VEGF-C的表達(dá)與ERα的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r_{s}=-0.511，P\lt0.05），MLVD與ERα的表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)（r_{s}=-0.438，P\lt0.05），而VEGF-C的表達(dá)與MLVD呈顯著正相關(guān)（r_{s}=0.632，P\lt0.05）。這表明三者之間存在緊密而復(fù)雜的關(guān)聯(lián)，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程中共同發(fā)揮作用。VEGF-C與ERα表達(dá)的負(fù)相關(guān)關(guān)系，可