ICS65.020.20

CCSB15

團體標(biāo)準(zhǔn)

T/HSPP0016—2024

含多肽微生物肥料

Polypeptide-containingmicrobialfertilizer

（發(fā)布稿）

2024-04-30發(fā)布2024-05-30實施

T/HSPP0016-2024

目次

前言..............................................................................1

1范圍...........................................................................2

2規(guī)范性引用文件..................................................................2

3術(shù)語與定義......................................................................3

4技術(shù)要求........................................................................3

5測定方法........................................................................4

6檢測判定規(guī)則....................................................................6

7取樣...........................................................................7

8標(biāo)識和質(zhì)量證明書...............................................................8

9包裝、運輸與貯存...............................................................9

附錄A.....................................................................................................................................................10

T/HSPP0016-2024

,■1l.X■

刖百

本文件按GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》

的規(guī)定起草。

本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由湖北茂盛生物有限公司提出。

本文件由湖北省植物保護學(xué)會歸口。

本文件起草單位：湖北茂盛生物有限公司、河南心連心化學(xué)工業(yè)集團股份有限公司、湖

北省黃麥嶺化工研究院有限公司、四川金象賽瑞化工股份有限公司、湖北宜化磷化工有限公

司、華強化工集團股份有限公司、湖北鄂中生態(tài)工程股份有限公司、湖北祥云（集團）化工

股份有限公司、湖北宜施壯農(nóng)業(yè)科技有限公司、武漢市沃農(nóng)肥業(yè)有限公司、云南農(nóng)家樂農(nóng)業(yè)

有限公司、湖南金葉眾望科技股份有限公司、沃達(dá)農(nóng)業(yè)科技股份有限公司、武漢光華時代生

物科技有限公司、湖北綠天地生物科技有限公司、武漢綠之緣生物科技有限公司、慕恩（廣

州）生物科技有限公司、湖北永壯生態(tài)科技有限公司、褻陽維恩生物科技有限公司、湖北盛

科生物工程有限公司、河南曹氏天正生物技術(shù)有限公司、濮陽縣大志同創(chuàng)農(nóng)業(yè)科技有限公司、

山西聯(lián)新生物科技有限公司。

本文件主要起草人：周義新、李偉、劉銳杰、張潔、梅亮賢、劉東偉、曾茂、陳剛、丁

天鵬、望鉞騫、郭衛(wèi)紅、汪波、常云、艾新帥、毛晨鵬、王靜、劉祖鋒、于慶梅、程艷、萬

國華、楊章福、張小卓、易百科、江濤、高波、段錦波、曾慶茁、宋巍、林昱曉、萬順、張

金蘭、張健、金漫、王科晶、張世柏、王瑞兆、盧劍、鄭文杰、范志剛、王強、曹智、米嬌

嬌、梁遠(yuǎn)亮、廉宏偉。

T/HSPP0016-2024

NY"1847微生物肥料生產(chǎn)菌株評定方法

NY/T1975水溶肥游離氨基酸的含最測定

NY"1978肥料汞、沖、鎘、鉛、銘、鍥含量的測定

HG/T2843化肥產(chǎn)品化學(xué)分析常用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑溶液和指示劑溶液

T/CPFIA0004多肽復(fù)合肥料

JJG1064氨基酸分析儀檢定規(guī)程

3術(shù)語與定義

下列定義及術(shù)語適用于本文件。

3.1多肽及來源Polypeptideanditssource

木文中對多肽、植物源多肽、動物源多肽、微生物代謝多肽定義與T/CPFIA0004《多

肽復(fù)合肥料》定義一致。

3.2功能菌Functionalbacteria

本文所指功能菌為具有固氮、解磷、解鉀等作用的菌種-

3.3含多肽微生物肥Polypeptide-containingmicrobialfertilizer

含多肽、中量元素、微量元素、微生物菌的肥料。

4技術(shù)要求

4.1外觀

產(chǎn)品可為粒狀、條狀或片狀產(chǎn)品，需無明顯可見的機械雜質(zhì)，也可為液體。

4.2技術(shù)指標(biāo)

表1含多肽微生物肥料技術(shù)指標(biāo)（固體型）

項目限量指標(biāo)

總養(yǎng)分(N+P2O5+K2O),%>30

中微量元素，%>0.1

3

T/HSPP0016-2024

含有效活菌數(shù)億/g>1

含水率■%<30

多肽含量?%>0.2

雜菌率?%<30

pH值5.5-8.5

保質(zhì)期，月>6

表2含多肽微生物肥料技術(shù)指標(biāo)（液體型）

項目限量指標(biāo)

總養(yǎng)分(N+P2O5+K2O)，g/L<25

含有效活菌數(shù),億/mL>0.5

多肽含量，g/L>2

pH值5.5-S.5

雜菌率,%<15

保質(zhì)期，月>3

4.3無害化指標(biāo)

表3無害化指標(biāo)

項目限量指標(biāo)

蛔蟲卵死亡率,%>95

糞大腸菌群數(shù)，個/g（mL）<100

珅（As）（以烘干基計），mg/kg<15

鎘（Cd）（以烘干基計），mg/kg<3

鉛（Pb）（以烘干基計），mg/kg<50

珞（Cr）（以烘干基計），mg/kg<150

汞（Hg）（以烘干基計），mg/kg<2

5測定方法

5.1一般規(guī)定

除外觀與顆粒外，均需做兩份料平行測定。本文所用試劑、溶劑和水。在未注明明確規(guī)格

與配制方法時，均應(yīng)符合HG/T2843相關(guān)規(guī)定。

5.2外觀

采用目測法測定，產(chǎn)品外觀需無明顯雜質(zhì)。

4

T/HSPP0016-2024

5.3總氮含量的測定

按GB/T8571的規(guī)定試樣制備，按GB/T22923的規(guī)定執(zhí)行。

5.4總磷含量的測定

按GB/T857I的規(guī)定試樣制備，按GB/T22923的規(guī)定執(zhí)行。

5.5總鉀含量的測定

按GB/T8571的規(guī)定試樣制備，按GB“22923的規(guī)定執(zhí)行。

5.6鐵、鎰、銅、鋅、硼'鋁含量的測定

按GB/T8571的規(guī)定試樣制備，按GB/T14540的規(guī)定執(zhí)行檢測。

5.7鈣、鎂、硫含量的測定

按GB/T857I的規(guī)定試樣制備，按GBa19203規(guī)定執(zhí)行檢測。

5.8硅含量的測定

按GB/T8571的規(guī)定試樣制備，按GB/T17518規(guī)定執(zhí)行檢測。

5.9有效活菌數(shù)的測定

依照GB/T20287執(zhí)行，測定有效活菌數(shù)。

5.10氯含量的測定

按GB/T8571的規(guī)定試樣制備，按GB/T24890執(zhí)行檢測。

5.11蛔蟲死亡率的測定

依照GB“19524.2執(zhí)行測定。

5.12糞大腸菌群數(shù)的測定

5

T/HSPP0016-2024

按GB“19524.1的規(guī)定規(guī)定執(zhí)行檢測。

5.13多肽含量的檢測

依照附錄A執(zhí)行檢測。

5.14肥料碑、鎘、鉛、銘、汞、鑲測定

依照NY/T1978執(zhí)行測定。

6檢測判定規(guī)則

6』檢測類別及檢驗項目

產(chǎn)品檢驗分為出廠檢驗和形式檢驗?？傪B(yǎng)分含量、單一養(yǎng)分含量、多肽含量、水溶磷

占有效磷的百分率（適用時）、硝態(tài)氮含量（適用時）、水分、顆度、氯離子含量（適用

時）、中微量元素含量（適用時）為出廠檢驗項目。在出現(xiàn)以下情況時，需進行型式檢

驗：

1）正式生產(chǎn)后，如原材料、工藝有較大改變，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)時；

2）正常生產(chǎn)時，定期后累計到一定量后進行，縮二胭每六個月至少檢驗一次。有毒

有害物質(zhì)需每年至少檢測一次；

3）長期停產(chǎn)后恢復(fù)生產(chǎn)時；

4）政府監(jiān)督管理荒門剔除型式檢驗要求時。

6.2組批

產(chǎn)品按批檢測，以一天或兩天的產(chǎn)量為一批，最大批量為l500To

6.3結(jié)果判定

本文件中產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)合格判定，采用GB/T8170中的“修約值比較法”。

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)按本文件要求進行出廠檢驗和型式檢驗c檢驗項目全部符合文件要求時，

判該批產(chǎn)品合格。

6

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生產(chǎn)企業(yè)進行的出廠檢驗或型式檢驗結(jié)果中如有一項指標(biāo)不符合文件要求時，應(yīng)重新

自同批次兩倍量的包裝容器中采樣進行檢測，重檢結(jié)果若有?項不符合本文件要求，則判

斷該批次產(chǎn)品不合格。

7取樣

7.1合并樣品取樣

7.1.1袋裝產(chǎn)品

7.1.1.1依袋確樣

每批產(chǎn)品袋數(shù)不超過512袋時，按表3確定取樣袋數(shù)；每批產(chǎn)品總袋數(shù)超過＞12時,

按式（1）計算結(jié)果確定最少取樣袋數(shù)，如遇小數(shù)，則進為整數(shù)。

n=3xVN式（1）

式中：

n代表最少取樣個數(shù),

N代表每批樣總個數(shù),

表4最少取樣數(shù)量的碓定

每批產(chǎn)品總袋數(shù)（個）最少取樣袋數(shù)（個）每批產(chǎn)品總袋數(shù)（個）最少取樣袋數(shù)（個）

1-10全部182-21618

11-4911217-25419

50-6412255-2962()

65-8113297-34321

82-10114344-39422

102-12515395-45023

126-15116451-51224

152-18117--

7.1.1.2取樣方法及取樣規(guī)格

包裝規(guī)格不大于50kg時，按上表3或式（I）計算并確定取樣袋數(shù)，隨機抽取一定袋

數(shù)，用取樣器沿每袋最長對角線插入至3/4處取樣，每袋取樣數(shù)不少于100g,所有抽取袋數(shù)

樣需進行混合，單批樣采集總量應(yīng)不少于2kg。當(dāng)包裝規(guī)格大于50kg時，按表3或式

7

T/HSPP0016-2024

（1）計算并確定取樣袋數(shù)，隨機抽取一定袋數(shù)，用取樣器沿每袋垂直向下、向左、向右三

個方向，插入至3/4處取樣，每袋取樣數(shù)不少于300g,所有抽取袋數(shù)樣進行混合，單批樣采

集總量應(yīng)不少于2kgo

7.1.2散裝產(chǎn)品

按GB/T6679規(guī)定執(zhí)行。

7.2樣品縮分

將每袋采取的樣進行合并并均勻混合，用縮分器或人工四分法對混合樣縮分，混樣縮分

至1kg左右，再將其一分為二，分別分裝入干凈、干燥的具有磨口塞玻璃瓶或塑料瓶中，密

封并貼好標(biāo)簽，一份樣品用于檢測，另一份樣品作為留存用，保存時間應(yīng)在兩個月以上。標(biāo)

簽內(nèi)容需標(biāo)明產(chǎn)品公司名稱，產(chǎn)品名稱、產(chǎn)品批號、抽樣口期、地點及抽樣人姓名。

8標(biāo)識和質(zhì)量證明書

8.1含氯標(biāo)注

氯離子的質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于3.0%的產(chǎn)品，應(yīng)根據(jù)4.2要求的“氯離子的質(zhì)量分?jǐn)?shù)”，在包

裝容器的顯著位置用漢字明確標(biāo)注“含氯（低氯）”“含氯（中氯）”或“含氯（高氯）%

而

不是標(biāo)注“氯皿含C1”或等。標(biāo)明“含氯”的產(chǎn)品，包裝容器上不應(yīng)有忌氯作物的圖片，

不應(yīng)有“硫酸鉀（型）"硝酸鉀（型）"硫基”“硝硫基”等容易導(dǎo)致用戶誤認(rèn)為產(chǎn)品不含氯的

標(biāo)識。有“含氯（高氯）”標(biāo)識的產(chǎn)品應(yīng)在包裝容器上標(biāo)明“氯含量較高，使用不當(dāng)會對作物

和土壤造成傷害'’的瞥示語。

8.2產(chǎn)品包裝標(biāo)注

產(chǎn)品外包裝容器上應(yīng)有使用注意事項、警示語等。生產(chǎn)口期或批號、合格證、使用說

明等部分產(chǎn)品信息可使用易于識別的二維碼或條形碼標(biāo)注。每袋凈含量應(yīng)標(biāo)明單一數(shù)值，

如50kgo

8.3產(chǎn)品養(yǎng)分標(biāo)注

8

T/HSPP0016-2024

養(yǎng)分含量的標(biāo)注應(yīng)以總物料為基礎(chǔ)標(biāo)注，不得將包裝容器內(nèi)的物料拆分分別標(biāo)注。產(chǎn)品

8

T/HSPP0016-2024

中應(yīng)標(biāo)明主要組成成分，涉及增效物質(zhì)養(yǎng)分需要標(biāo)明具體作用。

8.4產(chǎn)品合格證標(biāo)注

每批檢驗合格的出廠產(chǎn)品應(yīng)附有質(zhì)量證明書，其內(nèi)容包括：生產(chǎn)企業(yè)名稱、地址、產(chǎn)

品名稱、批號或生產(chǎn)日期、總養(yǎng)分、配合式或主要養(yǎng)分含量、氯離子含量、縮二版含量、

本文件號和法律法規(guī)規(guī)定，

9包裝、運輸與貯存

產(chǎn)品用符合GB/T8569規(guī)定的材料進行包裝，包裝規(guī)格為1000kg、50kg、40kg、

25kg>20kg、10kg,每袋凈含量允許范圍分別為(1000±10)kg、(50±0.5)kg>(40±0.4)kg、

(25±0.25)kg、(20±0.2)kg、(10+0.1)kg,每批產(chǎn)品平均每袋凈含量不得低于50.0kg、

40.0kg>25.0kg、20.0kg.10.0kg。也可使用供需雙方合同約定的其他包裝規(guī)格。

在標(biāo)明的每袋凈含量范圍內(nèi)的產(chǎn)品中有添加物時，應(yīng)與原物料混合均勻，不應(yīng)以小包

裝形式放入包裝袋中。

在符合GB/T8569規(guī)定的前提下，宜使用經(jīng)濟實用型包裝。

產(chǎn)品應(yīng)貯存于陰涼干燥處，在運輸過程中應(yīng)防雨、防潮、防曬、防破裂.

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附錄A

微生物肥料中多肽含量的測定

A.I原理

試樣用IEC氨基酸分析法測定游離氨基酸總含量

試樣用三氯乙酸預(yù)處理，去除沉淀大分子蛋白質(zhì)，提取多肽氨基酸和游離氨基酸，然后

用鹽酸溶液全部水解得到酸溶蛋白，用【EC氨基酸分析法測定酸溶蛋白含量。

多肽即為酸溶蛋白含最與游離氨基酸總含量的差值,

A.2試劑

實驗用水應(yīng)符合GB/T6682中級用水的規(guī)格。使用試劑除特殊規(guī)定外，均為分析純。

A.2.1檸檬酸鈉（NasC6H5072H2。）。

A.2.2鹽酸（優(yōu)級純）。

A.2.3乙二胺四乙酸鈉溶液：IOg/L。

A.2.4鹽酸水解液（6mol/L）：將500mL鹽酸與500mL水混合，力口1g苯酚，混勻。

A.2.5氫氧化鈉溶液（lmol/L）:稱取氫氧化鈉40g于燒杯中，加水溶解，再定容至1000mL。

A.2.6磺基水楊酸溶液（50g/L）:稱取磺基水楊酸50g,水溶于燒杯后，定容至1000mL。

A.2.7三氯乙酸溶液（150g/L）：稱取150g三氯乙酸，加水溶解并定容至1000mL,混勻。

A.2.8檸檬酸鈉緩沖液|pH=2.2,c=0.2mol/L］：稱取19.6g檸檬酸鈉（A.2.1）,用700mL

水在燒杯中溶解，加入硫二甘醇5.0mL,苯酚1g,加入鹽酸16.5mL,用鹽酸（A24）與氫

氧化鈉（A25）調(diào)節(jié)pH至2.2后，用水定容1000mL尹過濾。

A.2.9氨基酸標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：天冬軟酸、蘇筑酸、絲氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨

酸、胱氨酸、綴氨酸、甲疏氨酸、異亮氨酸、亮基酸、酪氨酸、苯丙筑酸、賴氨酸、組氨酸

和精氨酸共17種氨基酸，各組分濃度均為2.5Nmol/mL.應(yīng)使用有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

A.2.10氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：準(zhǔn)確移取2mL的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（A.2.9）置于50mL容

量瓶中，以檸檬酸鈉緩沖溶液（A.2.8）定容，各氨基酸組分濃度為100nmol/mL,用安液分

裝密封，每支約1mL,在2C~8c下保存，有效期3個月。

A.2.H不同pH值和離子強度的檸檬酸鈉緩沖溶液與曲三酮溶液：按照儀器說明書配制或購

買。

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A.2.12液氮。

A.3儀器與設(shè)備

A.3.1天平：感量0.1mg和0.01mgo

A.3.2氨基酸自動分析儀：具備陽離子交換柱、的三酮柱后衍生裝置及570nm和440nm光

度檢測器。

A.3.3離心機：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

A.3.4真空泵。

A.3.5噴燈。

A.3.6恒溫干燥箱：溫度可達(dá)110℃±2℃。

A37旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或濃縮器：可在室溫至65℃間調(diào)溫，控溫精度±1℃,真空度可低至3.3x103

Pa(25mmHg)。

A.3.81000mL容量瓶

A.3.91000mL燒杯

A.4操作步驟

A.4.1試樣的制備

固體樣品經(jīng)過多次縮分后，取出約100g,將其迅速研磨至全部通過0.25mm孔徑篩，

混合均勻，置于潔凈、干噪容器中。

A.4.2酸溶蛋白試樣溶液的制備

稱取試樣5g,精確至0.001g,置于250mL具塞三角瓶中，在10℃?35c條件下，準(zhǔn)

確加入100mL三氯乙酸溶液,手動搖勻后,在150r/min振蕩30min。靜置10min,將上

層液倒入100mL離心管中，4000r/min離心5min,上清液作為試樣提取液，如上清液存在

漂浮物，需過濾后再使用，

使用移液槍或移液管吸取提取液2mL,置于20mL安甑或水解管中，加3mL純水，

再加入10mL鹽酸水解溶液。置液氮中冷凍，使用真空泵抽真空至7Pa仁5、］(尸m門Hg)

后用噴燈封口或充氮氣Imin后旋緊管蓋。將安甑或水解管放在110℃±2℃恒溫干燥箱中，

水解22h~24h。冷卻，混勻，開管，過濾，用移液管精確吸取適量的濾液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器

或濃縮器中，60c下抽真空蒸發(fā)至干，必要時，加少許水，重復(fù)蒸干1次~2次。加入5mL

檸檬酸鈉緩沖溶液復(fù)溶，搖勻，過濾或離心，上清液待上機測定。

T/HSPP0016-2024

注：當(dāng)試樣中含有金屬元素時，則在“冷卻，混勻，開管”后吸取水解液2mL,準(zhǔn)確加入

10g/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液（A.2.3）2mL,混勻，然后按“過濾，用移液管精確吸取適

量的濾液……上清液待上機測定”進行操作。

A.4.3游離態(tài)氨基酸試樣溶液的準(zhǔn)備

稱取試樣2g~l（）g（精確到0.001g）,置于25（）mL容量瓶中。充分溶解后，加水至刻

度，混勻，放置過夜后吸取上清液（或過濾后吸取濾液）2mL于10mL離心管或試管中，準(zhǔn)

去加入2mL磺基水楊酸溶液（A.2.6）,混勻，放置lh。準(zhǔn)確加入ImLEDTA-Na溶液（A23）,

加入鹽酸溶液（A.2.4）稀釋100倍后的溶液1mL,混勻，離心45min。取上清液1mL,蒸

干。結(jié)合儀器最佳檢測范圍，適量加入檸檬酸緩沖液。

A.4.4酸溶蛋白的測定

（1）將氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（A28）注入氨基酸分析儀，（2）以不同pH值和離子強度

的檸檬酸鈉緩沖溶液與苛三酮溶液（A.2.9）作為流動相和衍生劑，（3）按JJG1064氨基酸

分析儀檢定規(guī)程的要求，調(diào)整輸液系統(tǒng)、色譜柱、檢測器及整機性能相關(guān)指標(biāo)達(dá)到測定標(biāo)準(zhǔn)。

（4）注入制備好的試樣溶液（A.4.2）和相應(yīng)的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（A28）進行測定，每

5個樣品（即10個單樣）為一組，組間插入氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（A.2.8）進行校準(zhǔn)。以保

留時間定性