2025年大學(xué)生物（微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共30分）答題要求：本卷共10小題，每小題3分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.以下關(guān)于微生物培養(yǎng)基的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的天然培養(yǎng)基B.選擇培養(yǎng)基可用于篩選特定的微生物C.固體培養(yǎng)基常用于微生物的分離和鑒定D.培養(yǎng)基中必須含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水，無(wú)需添加生長(zhǎng)因子2.高壓蒸汽滅菌法通常在什么條件下進(jìn)行（）A.100℃，15分鐘B.121℃，15-30分鐘C.160℃，2小時(shí)D.180℃，30分鐘3.接種環(huán)常用的滅菌方法是（）A.干熱滅菌B.高壓蒸汽滅菌C.灼燒滅菌D.化學(xué)藥劑滅菌4.平板劃線法分離微生物時(shí)，以下操作正確的是（）A.每次劃線前都需灼燒接種環(huán)B.劃線時(shí)要快速用力，劃破培養(yǎng)基表面C.只需要在第一區(qū)域劃線，后續(xù)區(qū)域無(wú)需再劃線D.劃線結(jié)束后，接種環(huán)無(wú)需滅菌5.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，適宜的pH范圍一般是（）A.4.0-6.0B.6.5-7.5C.7.5-8.5D.8.5-9.56.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，防止雜菌污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)不包括（）A.培養(yǎng)基滅菌B.接種環(huán)境消毒C.操作人員無(wú)菌操作D.培養(yǎng)溫度控制7.以下哪種微生物適合在厭氧條件下培養(yǎng)（）A.大腸桿菌B.醋酸菌C.乳酸菌D.酵母菌8.測(cè)定微生物數(shù)量的方法不包括（）A.平板計(jì)數(shù)法B.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法C.比濁法D.重量法9.以下關(guān)于微生物生長(zhǎng)曲線的說(shuō)法，正確的是（）A.調(diào)整期微生物代謝活躍，體積增長(zhǎng)較快B.對(duì)數(shù)期微生物數(shù)量呈指數(shù)增長(zhǎng)，代謝產(chǎn)物積累最多C.穩(wěn)定期微生物出生率與死亡率基本相等D.衰亡期微生物大量繁殖，數(shù)量急劇上升10.用于鑒定細(xì)菌是否產(chǎn)生某種酶的培養(yǎng)基是（）A.基礎(chǔ)培養(yǎng)基B.鑒別培養(yǎng)基C.加富培養(yǎng)基D.選擇培養(yǎng)基第II卷（非選擇題共70分）（總共4題，每題10分，答題要求：請(qǐng)簡(jiǎn)要回答問(wèn)題，表述準(zhǔn)確清晰）1.簡(jiǎn)述配制培養(yǎng)基的一般步驟。2.微生物接種的方法有哪些？各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？3.如何進(jìn)行微生物培養(yǎng)的無(wú)菌操作？4.分析微生物生長(zhǎng)曲線各階段的特點(diǎn)及影響因素。（總共2題，每題15分，答題要求：根據(jù)所給材料，結(jié)合所學(xué)知識(shí)進(jìn)行分析解答，觀點(diǎn)明確，邏輯清晰）材料：在進(jìn)行微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，某同學(xué)按照常規(guī)方法配制了培養(yǎng)基，滅菌后接種了大腸桿菌。在培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面出現(xiàn)了多種不同形態(tài)的菌落。1.請(qǐng)分析出現(xiàn)多種不同形態(tài)菌落的可能原因。2.針對(duì)這種情況，該同學(xué)應(yīng)該采取哪些措施來(lái)解決？材料：某實(shí)驗(yàn)室要培養(yǎng)一種對(duì)氧氣敏感的厭氧菌。1.設(shè)計(jì)一個(gè)適合該厭氧菌培養(yǎng)的方案，包括培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)條件的設(shè)置等。2.如何檢測(cè)培養(yǎng)過(guò)程中該厭氧菌的生長(zhǎng)情況？答案：1.D2.B3.C4.A5.B6.D7.C8.D9.C10.B1.配制培養(yǎng)基的一般步驟：計(jì)算所需各種成分的用量；稱量，準(zhǔn)確稱取各種成分；溶化，將稱好的成分放入適當(dāng)容器，加入適量蒸餾水，加熱溶解；調(diào)pH，根據(jù)要求用酸堿調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；過(guò)濾，去除不溶性雜質(zhì)；分裝，將培養(yǎng)基分裝到合適的容器中；滅菌，采用合適的滅菌方法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。2.微生物接種的方法及優(yōu)缺點(diǎn)：平板劃線法，優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，能使微生物在培養(yǎng)基表面分散生長(zhǎng)，便于觀察和分離單個(gè)菌落；缺點(diǎn)是不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。稀釋涂布平板法，優(yōu)點(diǎn)是可以計(jì)數(shù)，能得到單菌落；缺點(diǎn)是操作相對(duì)復(fù)雜。穿刺接種法，用于半固體培養(yǎng)基，可觀察微生物的運(yùn)動(dòng)等特性。3.進(jìn)行微生物培養(yǎng)無(wú)菌操作：實(shí)驗(yàn)前，對(duì)操作空間進(jìn)行清潔和消毒；操作人員穿戴工作服、口罩、帽子等，洗手消毒；所用儀器、培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌處理。接種時(shí)，在酒精燈火焰旁操作，接種環(huán)等接種工具灼燒滅菌后使用；打開(kāi)培養(yǎng)皿等容器時(shí)，盡量減少開(kāi)口時(shí)間和面積。培養(yǎng)過(guò)程中，保持培養(yǎng)環(huán)境的清潔，定期檢查培養(yǎng)物是否被污染。4.微生物生長(zhǎng)曲線各階段特點(diǎn)及影響因素：調(diào)整期，微生物適應(yīng)新環(huán)境，代謝活躍，體積增長(zhǎng)較快，影響因素有接種量、培養(yǎng)基成分等。對(duì)數(shù)期，微生物數(shù)量呈指數(shù)增長(zhǎng)，代謝旺盛，個(gè)體形態(tài)和生理特性穩(wěn)定，影響因素有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度、pH等。穩(wěn)定期，微生物出生率與死亡率基本相等，活菌數(shù)保持相對(duì)穩(wěn)定，代謝產(chǎn)物積累，影響因素有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗、有害代謝產(chǎn)物積累等。衰亡期，微生物大量死亡，數(shù)量急劇下降，影響因素有環(huán)境惡化等。材料題1：出現(xiàn)多種不同形態(tài)菌落的可能原因：培養(yǎng)基滅菌不徹底，殘留有其他微生物；接種過(guò)程中受到污染，如接種環(huán)境不清潔、接種工具未徹底滅菌等；菌種不純，本身含有多種微生物。解決措施：重新配制培養(yǎng)基并嚴(yán)格滅菌；對(duì)接種環(huán)境進(jìn)行更徹底的消毒，對(duì)接種工具進(jìn)行充分灼燒滅菌；重新分離和純化菌種，確保使用純凈的菌種進(jìn)行培養(yǎng)。材料題2：適合該厭氧菌培養(yǎng)的方案：選擇不含氧氣或氧氣含量極低的培養(yǎng)基，如皰肉培養(yǎng)基。培養(yǎng)條件設(shè)置為無(wú)氧環(huán)境，可采用厭氧培養(yǎng)箱或在培養(yǎng)基表面覆蓋凡士林等隔絕