水生物檢疫檢驗(yàn)員年度評審考核試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分。每題只有一個(gè)正確答案，請將正確選項(xiàng)字母填在括號內(nèi)）1.根據(jù)《進(jìn)境水生動(dòng)物檢疫管理辦法》，下列哪類水生動(dòng)物在入境時(shí)必須隨附輸出國官方簽發(fā)的動(dòng)物健康證書？A.觀賞用錦鯉B.冷凍帶魚段C.鹽漬魷魚筒D.干制海帶答案：A2.某口岸現(xiàn)場查驗(yàn)發(fā)現(xiàn)一批進(jìn)口活龍蝦體表出現(xiàn)白斑、甲殼潰瘍，鏡檢見大量絲狀細(xì)菌，初步判定最可能的病原是：A.白斑綜合征病毒（WSSV）B.哈維氏弧菌（V.harveyi）C.螯蝦瘟真菌（Aphanomycesastaci）D.壞死性肝胰腺炎細(xì)菌（NHPB）答案：B3.依據(jù)OIE《水生動(dòng)物衛(wèi)生法典》，對“無特定病原（SPF）種群”進(jìn)行認(rèn)證時(shí)，必須連續(xù)監(jiān)測的最短周期為：A.6個(gè)月B.12個(gè)月C.18個(gè)月D.24個(gè)月答案：D4.在PCR檢測中，若陽性對照未出現(xiàn)預(yù)期條帶，而陰性對照出現(xiàn)非特異條帶，最可能的原因是：A.模板DNA降解B.引物二聚體污染C.Taq酶失活D.電泳緩沖液污染答案：B5.對進(jìn)境活鮑實(shí)施隔離檢疫時(shí)，官方要求的最低隔離期是：A.7天B.14天C.21天D.30天答案：C6.下列哪項(xiàng)不是進(jìn)口冷凍水生動(dòng)物產(chǎn)品必須標(biāo)注的強(qiáng)制性內(nèi)容：A.捕撈區(qū)域B.生產(chǎn)批次C.保質(zhì)期D.捕撈船長姓名答案：D7.采用TCBS平板分離副溶血性弧菌時(shí)，最適培養(yǎng)溫度為：A.15℃B.25℃C.37℃D.42℃答案：C8.某批進(jìn)口冷凍南美白對蝦檢出硝基呋喃代謝物AOZ3.2μg/kg，根據(jù)我國限量標(biāo)準(zhǔn)，判定為：A.合格B.復(fù)檢C.不合格D.監(jiān)管放行答案：C9.在魚類傳染性造血器官壞死?。↖HN）病毒分離試驗(yàn)中，最敏感的細(xì)胞系是：A.EPCB.CHSE214C.FHMD.RTG2答案：B10.對進(jìn)境活水生動(dòng)物實(shí)施臨床檢查時(shí)，若發(fā)現(xiàn)魚體旋轉(zhuǎn)游泳、急游后突然靜止，應(yīng)首先排查：A.病毒性神經(jīng)壞死?。╒NN）B.細(xì)菌性敗血癥C.寄生蟲鰓病D.水體氨氮中毒答案：A11.依據(jù)《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法實(shí)施條例》，對擅自調(diào)離檢疫隔離場所的行為，可處以：A.1000元以下罰款B.3000元以上3萬元以下罰款C.5萬元以上10萬元以下罰款D.吊銷許可證答案：B12.對一批出口錦鯉實(shí)施皰疹病毒（CyHV2）熒光PCR檢測，若Ct值≤32且擴(kuò)增曲線呈典型S型，則判定為：A.陰性B.可疑C.陽性D.需重復(fù)采樣答案：C13.在采樣統(tǒng)計(jì)中，若要求檢出率≥95%，預(yù)期感染率2%，則最小采樣量（95%置信水平）約為：A.30尾B.60尾C.90尾D.150尾答案：D14.下列關(guān)于“水生動(dòng)物疫病區(qū)域化”描述正確的是：A.僅適用于出口國B.無需OIE認(rèn)可C.可降低貿(mào)易壁壘D.以省為單位即可答案：C15.對進(jìn)境活牡蠣實(shí)施麻痹性貝類毒素（PSP）檢測，采用小鼠生物法，若一只20g小鼠在5min內(nèi)死亡，則PSP含量約為：A.200MU/100gB.400MU/100gC.600MU/100gD.800MU/100g答案：B16.在魚類鏈球菌病爆發(fā)調(diào)查中，最可靠的溯源分子標(biāo)記是：A.16SrRNAB.sodA基因C.cps基因簇D.recA基因答案：C17.對進(jìn)口冷凍三文魚實(shí)施冷鏈查驗(yàn)時(shí)，若現(xiàn)場記錄顯示貨艙溫度12℃持續(xù)2h，應(yīng)：A.直接放行B.限期整改C.退貨或銷毀D.降低等級銷售答案：C18.依據(jù)《動(dòng)物檢疫管理辦法》，進(jìn)境水生動(dòng)物隔離檢疫期間，官方獸醫(yī)巡查頻率不得低于：A.每日1次B.每2日1次C.每周2次D.每周1次答案：A19.對蝦白斑綜合征病毒（WSSV）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測中，常用的內(nèi)參基因是：A.βactinB.18SrRNAC.EF1αD.RPL8答案：A20.在進(jìn)境水生動(dòng)物檢疫證書中，必須注明的“運(yùn)輸途中死亡率”上限為：A.1%B.2%C.5%D.10%答案：B21.下列哪項(xiàng)不是OIE規(guī)定必須通報(bào)的水生動(dòng)物疫?。篈.鯉春病毒血癥（SVC）B.傳染性皮下及造血器官壞死?。↖HHNV）C.對蝦黃頭?。╕HD）D.魚虱病答案：D22.對出口金魚實(shí)施檢疫時(shí)，發(fā)現(xiàn)魚體體表有白點(diǎn)、鏡檢見圓形蟲體，具4核，應(yīng)判定為：A.多子小瓜蟲（Ichthyophthiriusmultifiliis）B.車輪蟲（Trichodinaspp.）C.斜管蟲（Chilodonellaspp.）D.指環(huán)蟲（Dactylogyrusspp.）答案：A23.在采樣過程中，若需檢測病毒性病原，組織樣品保存液最佳pH為：A.4.5B.6.0C.7.4D.9.0答案：C24.對進(jìn)口冷凍墨魚進(jìn)行感官檢驗(yàn)，若發(fā)現(xiàn)體表嚴(yán)重褐變、氨味強(qiáng)烈，揮發(fā)性鹽基氮（TVBN）檢測值應(yīng)：A.≤15mg/100gB.≤25mg/100gC.≤35mg/100gD.＞35mg/100g答案：D25.依據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)鮮、凍動(dòng)物性水產(chǎn)品》（GB2733），組胺限量值為：A.10mg/100gB.20mg/100gC.30mg/100gD.50mg/100g答案：B26.對進(jìn)境活海參實(shí)施檢疫時(shí)，若發(fā)現(xiàn)體壁潰爛、排臟，應(yīng)首先采樣檢測：A.燦爛弧菌（V.splendidus）B.假單胞菌（Pseudomonasspp.）C.霉菌（Lagenidiumspp.）D.寄生蟲（Paravortexspp.）答案：A27.在PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)管理中，擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)相對樣品制備區(qū)的壓差應(yīng)為：A.正壓B.負(fù)壓C.等壓D.交替壓答案：B28.對出口羅非魚實(shí)施鏈球菌病監(jiān)測，若采用ELISA檢測血清抗體，判定陽性閾值為：A.P/N≥1.5B.P/N≥2.0C.P/N≥2.5D.P/N≥3.0答案：B29.在進(jìn)境水生動(dòng)物檢疫風(fēng)險(xiǎn)分析中，最常用的定量評估模型是：A.決策樹B.蒙特卡洛模擬C.德爾菲法D.故障樹答案：B30.對一批進(jìn)口冷凍鱈魚進(jìn)行標(biāo)簽審核，若標(biāo)注“捕撈日期20231345”，應(yīng)判定為：A.合格B.需整改C.不合格D.技術(shù)整改后放行答案：C二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分。每題有兩個(gè)或兩個(gè)以上正確答案，多選、少選、錯(cuò)選均不得分）31.下列哪些屬于OIE規(guī)定需通報(bào)的甲殼類疫?。篈.白斑綜合征（WSD）B.黃頭?。╕HD）C.桃拉綜合征（TS）D.傳染性皮下及造血器官壞死病（IHHNV）答案：ABCD32.對進(jìn)境活鮑魚實(shí)施檢疫時(shí)，需重點(diǎn)關(guān)注的致病微生物包括：A.燦爛弧菌B.鮑皰疹病毒（HaHV1）C.馬爾太蟲（Marteliaspp.）D.派琴蟲（Perkinsusspp.）答案：ABCD33.下列哪些情況會(huì)導(dǎo)致實(shí)時(shí)熒光PCR出現(xiàn)假陰性：A.引物探針降解B.模板DNA含抑制劑C.擴(kuò)增儀光源老化D.陰性對照污染答案：ABC34.對出口鰻魚實(shí)施檢疫時(shí)，需檢測的藥物殘留包括：A.孔雀石綠B.硝基呋喃C.氯霉素D.恩諾沙星答案：ABCD35.下列哪些屬于水生動(dòng)物檢疫現(xiàn)場快速檢測技術(shù)：A.膠體金免疫層析B.環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）C.便攜式熒光PCRD.酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT）答案：ABC36.在采樣方案設(shè)計(jì)中，影響樣品代表性的因素有：A.群體大小B.預(yù)期感染率C.檢測方法靈敏度D.運(yùn)輸溫度答案：ABC37.對進(jìn)口冷凍金槍魚進(jìn)行組胺檢測，需采用的前處理方法包括：A.三氯乙酸提取B.正己烷脫脂C.丹磺酰氯衍生D.固相萃取凈化答案：ACD38.下列哪些屬于水生動(dòng)物疫病區(qū)域化認(rèn)證的核心要素：A.生物安全隔離B.官方監(jiān)管體系C.監(jiān)測與surveillancD.公共財(cái)政補(bǔ)償答案：ABC39.對進(jìn)境活水生動(dòng)物實(shí)施臨床檢查時(shí)，需記錄的環(huán)境參數(shù)有：A.水溫B.溶解氧C.鹽度D.氨氮答案：ABCD40.在PCR檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中，屬于外部質(zhì)量評價(jià)（EQA）活動(dòng)的是：A.能力驗(yàn)證B.實(shí)驗(yàn)室間比對C.盲樣考核D.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)核查答案：ABC三、判斷題（每題1分，共10分。正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）41.白斑綜合征病毒（WSSV）可感染所有十足目甲殼類動(dòng)物。答案：√42.對進(jìn)口冷凍水產(chǎn)品進(jìn)行感官檢驗(yàn)時(shí)，若發(fā)現(xiàn)輕微干耗，可直接判定不合格。答案：×43.實(shí)時(shí)熒光PCR的Ct值與初始模板量呈線性負(fù)相關(guān)。答案：√44.OIE規(guī)定，水生動(dòng)物疫病監(jiān)測可完全依賴被動(dòng)監(jiān)測數(shù)據(jù)。答案：×45.對進(jìn)境活海參實(shí)施檢疫時(shí)，必須檢測麻痹性貝類毒素（PSP）。答案：×46.在PCR檢測中，使用UNG酶可有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物污染。答案：√47.對出口金魚實(shí)施檢疫時(shí)，發(fā)現(xiàn)指環(huán)蟲感染可直接放行，無需治療。答案：×48.冷凍水產(chǎn)品中心溫度必須≤18℃，任何時(shí)段均不允許波動(dòng)。答案：×49.依據(jù)我國法規(guī)，進(jìn)境水生動(dòng)物隔離檢疫期間，企業(yè)可擅自投喂藥物。答案：×50.采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）技術(shù)可在60min內(nèi)完成病原檢測。答案：√四、簡答題（每題8分，共40分）51.簡述進(jìn)境活龍蝦現(xiàn)場查驗(yàn)的關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng)。答案：（1）核查證書：核對輸出國官方健康證書真?zhèn)?、有效期、品種數(shù)量一致性；（2）包裝標(biāo)識：檢查包裝標(biāo)簽是否含學(xué)名、數(shù)量、養(yǎng)殖場編號、運(yùn)輸水溫記錄；（3）臨床檢查：觀察群體活力、體表潰瘍、斷肢率、死亡率，統(tǒng)計(jì)運(yùn)輸死亡率；（4）環(huán)境參數(shù)：現(xiàn)場測定水溫、鹽度、溶解氧、氨氮，記錄異常；（5）采樣：按2%比例隨機(jī)采樣，優(yōu)先選病態(tài)個(gè)體，分別取血淋巴、鰓、肝胰腺；（6）快速檢測：現(xiàn)場使用膠體金試紙條檢測哈維氏弧菌；（7）封存：發(fā)現(xiàn)異常立即封存，通知實(shí)驗(yàn)室優(yōu)先檢測，24h內(nèi)出具初篩結(jié)果；（8）生物安全：采樣工具一用一消毒，廢棄物121℃高壓滅菌20min。52.簡述對蝦白斑綜合征病毒（WSSV）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測出現(xiàn)假陽性的常見原因及糾正措施。答案：原因：①擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染；②試劑交叉污染；③陽性對照溢出；④采樣工具污染。糾正：①實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格三區(qū)劃分，擴(kuò)增區(qū)負(fù)壓；②使用UNGdUTP防污染體系；③陽性對照獨(dú)立通風(fēng)櫥加樣，低拷貝；④采樣剪刀75%酒精擦拭后火焰灼燒；⑤定期紫外線照射+10%次氯酸擦拭；⑥設(shè)置空白對照、提取陰性對照，Ct＞35方可接受。53.簡述冷凍水產(chǎn)品組胺形成機(jī)理及控制措施。答案：機(jī)理：捕獲后細(xì)菌（摩根氏菌、腸桿菌等）分泌組氨酸脫羧酶，將游離組氨酸轉(zhuǎn)化為組胺，溫度＞7℃時(shí)迅速升高。控制：①船上立即18℃速凍，中心溫度≤18℃；②冷鏈不間斷，艙溫記錄儀每30min記錄；③捕撈后4h內(nèi)入凍；④添加冰衣隔絕氧；⑤運(yùn)輸船配備備用制冷機(jī)；⑥到岸后優(yōu)先查驗(yàn)，TVBN、組胺快速檢測，超標(biāo)即退運(yùn)。54.簡述水生動(dòng)物疫病區(qū)域化認(rèn)證的技術(shù)流程。答案：①區(qū)域界定：GIS繪制地理屏障、水系、養(yǎng)殖場分布；②風(fēng)險(xiǎn)評估：識別病原、宿主、傳播途徑，蒙特卡洛模型量化；③生物安全：設(shè)置隔離緩沖帶、消毒通道、野生宿主控制；④監(jiān)測體系：主動(dòng)+被動(dòng)監(jiān)測，每年至少兩次隨機(jī)采樣，覆蓋率100%；⑤官方監(jiān)管：官方獸醫(yī)簽字，建立追溯數(shù)據(jù)庫；⑥應(yīng)急計(jì)劃：陽性場撲殺消毒封鎖，48h內(nèi)上報(bào)；⑦OIE申請：提交dossier，專家現(xiàn)場評審；⑧維護(hù)：年度復(fù)審，一旦失控取消資格。55.簡述進(jìn)境活水生動(dòng)物隔離檢疫期間死亡動(dòng)物的無害化處理程序。答案：①立即死亡2h內(nèi)通知官方獸醫(yī)；②拍照取證：記錄體表病變、死亡時(shí)間、池號；③采樣：無菌取肝、腎、脾，50%甘油PBS保存，4℃送檢；④封存：尸體雙層生物袋密封，貼警示標(biāo)識；⑤運(yùn)輸：專用密封桶，車輛不滲漏，路線固定；⑥處理：121℃高壓滅菌90min后送垃圾焚燒廠，或深坑石灰消毒掩埋，深度≥2m；⑦記錄：填寫《檢疫死亡處理記錄表》，保存3年；⑧溯源：結(jié)合實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，調(diào)整檢疫措施。五、案例分析題（每題20分，共40分）56.【案例】2024年3月，某口岸入境一批加拿大活象拔蚌（Panopeaabrupta），共4800只，總重9600kg，分8箱，運(yùn)輸水溫4℃，運(yùn)輸時(shí)間18h?，F(xiàn)場查驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：（1）箱內(nèi)泡沫冰袋破損，實(shí)測水溫8℃；（2）死亡個(gè)體360只，死亡率7.5%；（3）隨機(jī)抽樣30只，其中15只外套膜邊緣出現(xiàn)褐色潰瘍，鏡檢見大量桿狀細(xì)菌，革蘭氏陰性；（4）熒光PCR檢測，副溶血性弧菌陽性率60%，WSSV陰性；（5）輸出國證書未標(biāo)注運(yùn)輸溫度要求。問題：①依據(jù)法規(guī)，對該批貨物提出處理意見并說明理由；②撰寫現(xiàn)場查驗(yàn)記錄要點(diǎn)；③設(shè)計(jì)下一步實(shí)驗(yàn)室檢測與風(fēng)險(xiǎn)管控方案。答案：①處理意見：不合格，整批退運(yùn)或銷毀。理由：死亡率7.5%＞2%，運(yùn)輸溫控失控導(dǎo)致品質(zhì)下降；副溶血性弧菌60%陽性，存在食品安全風(fēng)險(xiǎn)；證書未標(biāo)注溫度，不符合《進(jìn)境水生動(dòng)物檢疫管理辦法》第16條。②查驗(yàn)記錄：a.基本情況：時(shí)間、地點(diǎn)、運(yùn)輸工具、貨主；b.感官：群體活力低、褐色潰瘍、死亡360只；c.環(huán)境：水溫8℃、鹽度32‰、溶解氧6mg/L；d.采樣：30只，編號LB20240301~30，分裝無菌袋；e.初篩：副溶血性弧菌陽性18/30；f.照片：死亡個(gè)體、潰瘍灶、溫度記錄屏；g.簽字：官方獸醫(yī)、貨主、運(yùn)輸代理三方確認(rèn)。③方案：a.擴(kuò)大采樣：再抽60只，測副溶血性弧菌毒力基因（tdh/trh）；b.藥敏試驗(yàn)：選擇14種抗生素，指導(dǎo)必要時(shí)用藥；c.毒素檢測：ELISA測TDH溶血素；d.風(fēng)險(xiǎn)溝通：通報(bào)加拿大官方，暫停該養(yǎng)殖場出口注冊；e.追溯：核查同一航班前3批貨物，啟動(dòng)回溯檢測；f.消毒：車輛、暫養(yǎng)池用200ppm次氯酸，作用30min；g.評估：召開專家會(huì)，決定是否暫停加拿大活貝進(jìn)口。57.【案例】2024年5月，某省出口養(yǎng)殖場擬向歐盟出口SPF級南美白對蝦苗（PL15），數(shù)量200萬尾。官方抽樣檢測：