《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》編制說(shuō)明工作簡(jiǎn)況立項(xiàng)情況燕麥（AvenasativaL.）是隸屬于禾本科燕麥族燕麥屬的一年生草本植物，具有營(yíng)養(yǎng)豐富、耐逆性強(qiáng)、適應(yīng)性廣、生育期短等特性，在世界多地種植較為廣泛。據(jù)聯(lián)合國(guó)最新統(tǒng)計(jì)，燕麥的產(chǎn)量和種植面積在全世界僅次于玉米、小麥、水稻、大麥、高粱，被認(rèn)為是世界“八大糧食作物之一”。燕麥草葉豐富、適口性好，且富含蛋白和礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分，是牛羊愛(ài)吃的優(yōu)良飼草，具備較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)燕麥大量依賴進(jìn)口，其主要原因之一是國(guó)內(nèi)新種質(zhì)創(chuàng)制方式單一，主要依賴野外采集、引進(jìn)、雜交，突破性種質(zhì)資源極少。因此，利用多種有效的育種方式創(chuàng)制新材料，加快推進(jìn)燕麥育種進(jìn)程和解析基因功能研究是目前我國(guó)燕麥育種亟需解決的問(wèn)題。誘變育種被證明是一種有效增加物種遺傳變異的方法，是能快速、高效創(chuàng)制大量可遺傳變異種質(zhì)資源最有效的育種技術(shù)。研究表明植物的誘變育種方法主要有物理誘變、化學(xué)誘變和生物誘變，目前，不少研究者已利用誘變方法在水稻、小麥、玉米、花生等作物中成功構(gòu)建突變體庫(kù)，并利用其中突變體材料，研究了大量的功能基因。因此，利用誘變方法構(gòu)建飼用燕麥誘變突變體庫(kù)，可在較短時(shí)間內(nèi)創(chuàng)制大量新的性狀變異材料，充分利用這些變異材料進(jìn)行相關(guān)研究，在一定程度上能夠廣泛改良飼用燕麥的農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)特性，對(duì)加快飼用燕麥育種進(jìn)程具有積極意義。精準(zhǔn)、高效的表型鑒定與篩選標(biāo)準(zhǔn)有利于評(píng)估突變體的遺傳多樣性和穩(wěn)定性，還可以全面且系統(tǒng)地分析和篩選誘變?nèi)后w中的優(yōu)良突變體，篩選出具有潛在育種和研究?jī)r(jià)值的種質(zhì)，為育種工作提供可靠的遺傳基礎(chǔ)。然而，我國(guó)至今尚無(wú)制定飼用燕麥誘變突變體表型鑒定方面的標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)程。為加速我國(guó)飼用燕麥誘變育種發(fā)展，創(chuàng)制更多優(yōu)異新種質(zhì)，培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)新品種滿足飼用燕麥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需要，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所“抗逆牧草育種與利用”團(tuán)隊(duì)根據(jù)國(guó)家農(nóng)業(yè)重大科技項(xiàng)目“飼用燕麥……誘變”（保密項(xiàng)目）研究?jī)?nèi)容，特起草本技術(shù)規(guī)程。實(shí)施和推廣本規(guī)程構(gòu)建飼用燕麥誘變突變體表型鑒定與篩選體系，可以實(shí)現(xiàn)飼用燕麥突變體表型鑒定科學(xué)化、精準(zhǔn)化，為燕麥育種提供依據(jù)。提出單位：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所歸口單位：內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)起草單位：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所、西北農(nóng)林科技大學(xué)、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)起草人：楊紅善、崔光欣、吳芳、段慧榮、王亞芳、張?zhí)N薇、陳軍、朱新強(qiáng)、路遠(yuǎn)、張茜、許蕾、王勇、宋標(biāo)、李玉雯、張靜、楊倩倩。制定標(biāo)準(zhǔn)的目的和意義燕麥?zhǔn)且荒晟瘫究萍Z飼兼用作物，其產(chǎn)量高、粗蛋白含量高、抗逆性強(qiáng)，具有適口性好、消化率高等優(yōu)點(diǎn)，是牲畜最理想，最經(jīng)濟(jì)的飼草之一。長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)燕麥大量依賴進(jìn)口，其主要原因是國(guó)內(nèi)燕麥缺乏突破性新品種、種質(zhì)資源較為匱乏。燕麥為異源六倍體，具有高度復(fù)雜的遺傳背景，通過(guò)常規(guī)育種育成一個(gè)新品種需要育種家們長(zhǎng)達(dá)10年連續(xù)種植并對(duì)表型進(jìn)行追蹤觀察，最終形成品種，此育種方式技術(shù)單一、效率低、周期長(zhǎng)，難以滿足育種新要求。另一方面，我國(guó)燕麥基因功能研究進(jìn)程仍較為落后，因此，種質(zhì)創(chuàng)新是飼用燕麥育種的發(fā)展方向，急需采用新技術(shù)或改進(jìn)原有技術(shù)來(lái)創(chuàng)制燕麥新種質(zhì)，挖掘優(yōu)異育種材料，培育優(yōu)良新品種。相對(duì)于常規(guī)育種方法，誘變育種具有十分明顯的優(yōu)勢(shì)，可為育種工作者提供豐富的種質(zhì)資源和遺傳變異。誘變育種的優(yōu)點(diǎn)：①誘變操作方法簡(jiǎn)單，便于實(shí)施和操作；②誘變頻率顯著提高，提供更多變異進(jìn)行篩選；③縮短育種周期，可在較短時(shí)間內(nèi)培育出優(yōu)勢(shì)品種；④豐富遺傳變異范疇，可獲得更多在自然變異中難以獲取的優(yōu)良性狀，擴(kuò)大突變體資源庫(kù)；⑤克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，拓寬生物材料遺傳背景。植物誘變育種方法主要有物理誘變、化學(xué)誘變和生物誘變，其中物理誘變包括空間誘變、離子束輻射、中子輻射、射線輻射、UV-B輻射等；化學(xué)誘變根據(jù)誘變機(jī)制，誘變劑分為烷化劑、堿基類似物、其它具有特殊誘變機(jī)制的誘變劑；生物誘變育種包括細(xì)胞工程育種、基因工程育種、分子標(biāo)記輔助育種等?？臻g誘變主要使用返回式衛(wèi)星或高空氣球所能夠提供的特殊空間環(huán)境，讓育種材料受到部分輻射、微重力、弱磁力等空間因素，對(duì)植物材料的生長(zhǎng)發(fā)育和生理生化特性產(chǎn)生影響，隨后在地面上選育產(chǎn)生新的突變，可獲得新的種質(zhì)資源。常壓室溫等離子誘變系統(tǒng)（ARTP）能夠在大氣壓下產(chǎn)生溫度在25–40℃之間具有高活性粒子（包括處于激發(fā)態(tài)的氦原子、氧原子、OH自由基等）濃度的等離子體射流，可以對(duì)動(dòng)植物及微生物細(xì)胞產(chǎn)生多重作用，如造成遺傳物質(zhì)的損傷、引起細(xì)胞膜通透性和蛋白結(jié)構(gòu)的改變等。ARTP誘變具有突變性能優(yōu)越、應(yīng)用范圍廣、儀器使用方便易操作、樣品處理快速等特點(diǎn)，其主要應(yīng)用于微生物、動(dòng)植物育種領(lǐng)域，通過(guò)物理誘變方式構(gòu)建遺傳多樣性突變庫(kù)，在提升農(nóng)作物發(fā)芽率、優(yōu)化微生物菌種性能等方面已取得顯著成果。重離子束輻照是一種高效的誘變技術(shù)，與X射線、γ射線、電子束等射線輻照相比，它具有傳能線密度高、相對(duì)生物學(xué)效應(yīng)大、損傷后修復(fù)效應(yīng)小等特點(diǎn)，因此，可以在存活率較高的情況下得到較高的突變率，易于獲得目標(biāo)突變體。重離子束輻射誘變技術(shù)具有操作簡(jiǎn)單、突變率高、突變譜廣等特點(diǎn)，在糧食作物和觀賞植物上已經(jīng)培育出多個(gè)新品種。與物理誘變相比，化學(xué)誘變劑分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易造成生物DNA的損傷和錯(cuò)配修復(fù)，主要引起基因的點(diǎn)突變，且突變點(diǎn)位具有特異性?；瘜W(xué)誘變具有操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉、突變率高、突變范圍廣、染色體畸變少等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于創(chuàng)制優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源。目前，不少研究者已利用誘變方法在水稻、小麥、玉米、花生等作物中成功構(gòu)建突變體庫(kù)，并利用其中突變體材料，研究了大量的功能基因。此外，對(duì)突變體庫(kù)進(jìn)行種質(zhì)資源評(píng)價(jià)是基因挖掘和遺傳改良的基礎(chǔ)。精準(zhǔn)、高效的表型鑒定與篩選標(biāo)準(zhǔn)有利于評(píng)估突變體的遺傳多樣性和穩(wěn)定性，還可以全面且系統(tǒng)地分析和篩選誘變?nèi)后w中的優(yōu)良突變體，篩選出具有潛在育種和研究?jī)r(jià)值的種質(zhì)，為育種工作提供可靠的遺傳基礎(chǔ)。我們飼用燕麥誘變育種研究目前主要集中在各世代表型變異鑒定，突變體篩選等，且表型鑒定規(guī)則不一，我國(guó)尚未有飼用燕麥高產(chǎn)突變體的鑒定評(píng)價(jià)規(guī)范/規(guī)程，因此，本規(guī)程制定小組利用多年空間誘變、等離子誘變、重離子誘變、化學(xué)誘變的突變體表型篩選鑒定評(píng)價(jià)結(jié)果，制定合理的突變體表型篩選和評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程，利用該技術(shù)規(guī)程可以快速創(chuàng)制新材料，豐富燕麥種質(zhì)資源，解決栽培燕麥的遺傳基礎(chǔ)狹窄的問(wèn)題，加快燕麥育種進(jìn)程。編制過(guò)程（一）分工情況本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及主要工作內(nèi)容如下表1所示表1標(biāo)準(zhǔn)參與編寫人員及其所做的工作姓名工作單位職稱主要工作內(nèi)容楊紅善中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所研究員項(xiàng)目主持人，負(fù)責(zé)方案設(shè)計(jì)崔光欣中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所副研究員主要參加人，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)編寫吳芳中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所助理研究員主要參加人，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)編寫段慧榮中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所副研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證王亞芳西北農(nóng)林科技大學(xué)副教授標(biāo)準(zhǔn)編寫、驗(yàn)證和修訂張?zhí)N薇中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)教授修訂陳軍中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授修訂朱新強(qiáng)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究副研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證路遠(yuǎn)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證張茜中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證許蕾中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證王勇中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究助理研究員參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證宋標(biāo)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證李玉雯中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證楊倩倩中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究碩士研究生參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證張靜中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究科研助理參與標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)驗(yàn)證（二）起草階段2023年3月，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所抗逆牧草育種與利用團(tuán)隊(duì)牽頭，調(diào)研國(guó)內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、專利和論文成果，召開(kāi)啟動(dòng)會(huì)議，介紹了編制背景和意義，聯(lián)合參編單位對(duì)編制方案進(jìn)行了研討，對(duì)前期調(diào)研和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行了討論和分工。（1）2023年4月，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所組織協(xié)調(diào)建立了《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制小組，并制定工作方案。（2）2023年4月-2025年8月，編制小組進(jìn)行了為期三年的飼用燕麥誘變突變體篩選試驗(yàn)。（3）2025年10月，編制小組根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，撰寫《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》工作組討論稿，撰寫編制說(shuō)明，向內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)提交申請(qǐng)。（4）2025年10月24日，由內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)組織召開(kāi)《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)論證會(huì)，順利立項(xiàng)。（三）征求意見(jiàn)階段2025年10月24日-10月31日，編制小組根據(jù)專家意見(jiàn)對(duì)《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》工作組討論稿進(jìn)行了修改，形成征求意見(jiàn)稿。（四）送審階段2025年X月～X月通過(guò)網(wǎng)上公開(kāi)征求意見(jiàn)，經(jīng)過(guò)XXXX等單位共X名專家函審，經(jīng)收集歸納整理，收集修改意見(jiàn)XX條；2025年X月～X月，針對(duì)專家提出的反饋意見(jiàn)進(jìn)行匯總整理，逐條進(jìn)行斟酌修改，其中采納XX條，部分采納X條，不采納X條，完成征求意見(jiàn)稿的修改，形成送審稿。（五）報(bào)批階段2025年X月X日，由內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)組織召開(kāi)《飼用燕麥誘變突變體表型鑒定技術(shù)規(guī)程》地方標(biāo)準(zhǔn)審查會(huì)，審查委員會(huì)聽(tīng)取標(biāo)準(zhǔn)起草組介紹標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)文本逐條審查，并形成會(huì)議紀(jì)要。工作組認(rèn)真聽(tīng)取審查意見(jiàn)，仔細(xì)整理會(huì)議紀(jì)要和修改意見(jiàn)，完善送審材料，形成報(bào)批稿，報(bào)送內(nèi)蒙古標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)審批發(fā)布。制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系（一）原則和依據(jù)1、編制原則科學(xué)性：本技術(shù)規(guī)程基于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)研究和實(shí)踐數(shù)據(jù)，確保對(duì)飼用燕麥誘變突變體表型進(jìn)行客觀、準(zhǔn)確的鑒定和評(píng)價(jià)。在標(biāo)準(zhǔn)適用范圍內(nèi)力求完整，在標(biāo)準(zhǔn)文本編制過(guò)程中力求做到技術(shù)內(nèi)容的表述科學(xué)準(zhǔn)確、清晰易懂。實(shí)用性：把經(jīng)濟(jì)實(shí)用和可操作性作為重要的依據(jù)，確保標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容便于實(shí)施，方便育種家在飼用燕麥誘變突變體表型鑒定和評(píng)價(jià)過(guò)程中應(yīng)用，避免繁瑣和復(fù)雜化，且易于被其他標(biāo)準(zhǔn)和文件所引用。先進(jìn)性：對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)內(nèi)容的確定，嚴(yán)格遵守我國(guó)相關(guān)法律法規(guī)、規(guī)章制度及標(biāo)準(zhǔn)的要求，力求反映本研究領(lǐng)域的國(guó)內(nèi)外先進(jìn)技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)，既體現(xiàn)目前急需解決的問(wèn)題，又能為未來(lái)技術(shù)發(fā)展提供框架，使標(biāo)準(zhǔn)中所規(guī)定的技術(shù)內(nèi)容有利于提高草種質(zhì)資源評(píng)價(jià)和利用的技術(shù)水平?？刹僮餍裕罕緲?biāo)準(zhǔn)是多年多點(diǎn)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)飼用燕麥誘變突變體表型鑒定進(jìn)行了規(guī)范，經(jīng)過(guò)反復(fù)驗(yàn)證后認(rèn)為其具有較大的科學(xué)性和實(shí)用性，體現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)可操作性。2、編制依據(jù)嚴(yán)格按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草文件。主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù)：（1）飼用燕麥標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容：用于生產(chǎn)飼草的栽培燕麥，一年生草本植物，染色體2n=6x=42。根據(jù)籽粒帶皮或裸粒，分為皮燕麥和裸燕麥兩種類型。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中3.1燕麥的術(shù)語(yǔ)和定義“禾本科燕麥屬的栽培種，是一年生草本植物，染色體數(shù)2n=6x=42。根據(jù)籽粒帶皮和裸粒，分為皮燕麥和裸燕麥兩種類型?！币约癉B50/T1368-2023《飼用燕麥種植技術(shù)規(guī)程》中3.2飼用燕麥的定義和術(shù)語(yǔ)“用于生產(chǎn)飼草的栽培燕麥，包括皮燕麥和裸燕麥?！保?）空間誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：空間誘變又稱航天誘變，是利用返回式航天器（如衛(wèi)星、飛船等）將植物材料（如種子、組織、細(xì)胞等）搭載到太空，在太空獨(dú)特的環(huán)境（如微重力、弱地磁、強(qiáng)輻射、高真空、超低溫等）作用下，誘發(fā)植物遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的方法。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)直接引用《航天誘變多葉紫花苜蓿新品種選育研究》中的航天誘變育種概念。（3）常壓室溫等離子體誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：常溫常壓等離子誘變技術(shù)是指利用在常壓、常溫條件下產(chǎn)生的等離子體，作用于生物體（如種子、組織、細(xì)胞等），從而引起生物體遺傳信息的改變的方式。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《常壓室溫等離子體誘變處理小麥的生物效應(yīng)研究》中的常壓室溫等離子體概念，稍作修改。（4）重離子誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：重離子誘變是指利用加速器將重離子（如碳、氬等原子序數(shù)大于2的原子核）加速到高能狀態(tài)，形成高線性能量轉(zhuǎn)移的射線，照射生物材料（如種子、組織、細(xì)胞），使其遺傳物質(zhì)發(fā)生損傷和變異的誘變方式。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《高能重離子束輻射水稻誘變育種研究進(jìn)展》中的重離子誘變概念，稍作修改。（5）化學(xué)誘變標(biāo)準(zhǔn)原文：化學(xué)誘變是指利用特定的化學(xué)誘變劑（如EMS）等處理生物材料（如種子、花粉、組織培養(yǎng)物等），從而誘發(fā)生物材料基因突變的方法。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)引用《大豆化學(xué)誘變育種研究進(jìn)展》中“化學(xué)誘變育種是通過(guò)化學(xué)誘變劑，如平陽(yáng)霉素（PYM）、甲基磺酸乙酯（EMS）和硫酸二乙酯（DES）等對(duì)植物種子、花粉、花藥進(jìn)行處理的一種生物育種技術(shù)”，稍作修改。（6）生育期標(biāo)準(zhǔn)原文：燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中5.4幼苗習(xí)性“燕麥種質(zhì)資源從播種期至成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d”一致，所以直接引用了此定義。（7）幼苗習(xí)性標(biāo)準(zhǔn)原文：幼苗階段生長(zhǎng)的姿態(tài)，包括直立、半匍匐、匍匐。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中5.4幼苗習(xí)性“燕麥種質(zhì)資源在幼苗階段生長(zhǎng)的姿態(tài)”一致，所以直接引用了此定義。（8）乳熟期標(biāo)準(zhǔn)原文：50%以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常籽粒大小的時(shí)期。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)與DB50/T1368-2023《飼用燕麥種植技術(shù)規(guī)程》中3.6乳熟期的定義和術(shù)語(yǔ)“50%以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常籽粒大小的時(shí)期”一致，所以直接引用了此標(biāo)準(zhǔn)中的定義。（9）成熟期標(biāo)準(zhǔn)原文：80%以上穗子的籽粒進(jìn)入蠟熟的日期，以年月日表示。理由和依據(jù)：本標(biāo)準(zhǔn)參照《燕麥種質(zhì)資源描述規(guī)范》中5.16成熟期的定義和術(shù)語(yǔ)“燕麥種質(zhì)資源試驗(yàn)小區(qū)中，80%穗子的籽粒進(jìn)入蠟熟的日期。以年月日表示，格式為YYYYMMDD?！保ǘ┡c現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)在編制過(guò)程中，沒(méi)有出現(xiàn)與現(xiàn)行有關(guān)法律、法規(guī)和國(guó)家、行業(yè)、地方標(biāo)準(zhǔn)相違背的情況。目前，我國(guó)至今尚無(wú)制定燕麥誘變突變體表型鑒定方面的標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)程，本規(guī)程未采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)。但在編制規(guī)程的過(guò)程中參考了GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級(jí)，GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則，NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則等標(biāo)準(zhǔn)。主要條款的說(shuō)明，主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)驗(yàn)證的論述1、主要條款說(shuō)明本規(guī)范主要包括七部分，第一部分規(guī)定了本規(guī)范的適用范圍，本文件規(guī)定了飼用燕麥誘變突變體鑒定的術(shù)語(yǔ)和定義，確定了突變體篩選標(biāo)準(zhǔn)，適用于飼用燕麥誘變突變體的鑒定和篩選。第二部分是規(guī)范性引用文件，主要引用了GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級(jí)，GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則，NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則。第三部分是定義和術(shù)語(yǔ)，這部分對(duì)飼用燕麥、空間誘變、等離子誘變、重離子誘變、化學(xué)誘變、生育期、幼苗習(xí)性、分蘗期、拔節(jié)期、抽穗期、乳熟期、成熟期進(jìn)行了定義。第四部分是土地準(zhǔn)備，主要包括選地和整地。第五部分是種植，主要是種子選擇、種子誘變處理、播種、田間管理。第六部分是指標(biāo)測(cè)定，主要包括生育期、幼苗習(xí)性、株高、莖粗、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)、旗葉長(zhǎng)、旗葉寬、穗形、單株生物量指標(biāo)。第七部分是突變體篩選，分為篩選標(biāo)準(zhǔn)和世代篩選方法。2、主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗(yàn)論證的論述2.1、種子誘變處理選擇GB6142Ⅱ級(jí)及以上的種子進(jìn)行不同誘變處理：空間誘變處理：將飼用燕麥種子搭載在返回式飛行器，利用微重力、高能輻射、高真空等特殊環(huán)境進(jìn)行誘變，誘變種子數(shù)為3249粒。等離子誘變處理：誘變條件為功率380W、氣量15SLM，種子處理時(shí)間為10min~300min之間，誘變種子數(shù)為2380粒。重離子誘變處理：在碳離子束，能量80MeV/u，傳能線密度34KeV/um條件下，種子處理劑量為100Gy~400Gy之間，誘變種子數(shù)為2863粒。EMS誘變處理：EMS濃度為0.5%~1%，種子處理時(shí)間為8h~16h之間，誘變種子數(shù)為4900粒。2.2誘變?nèi)后w的種植選擇地勢(shì)平坦、排灌方便、耕層深厚、土質(zhì)疏松、pH的土壤。施足底肥，有機(jī)肥以22500kg/hm2~30000kg/hm2為宜，肥料使用應(yīng)符合NY/T496規(guī)定。施肥后深耕，耕翻深度>20cm，除去草根、石塊等。打碎土塊，耙平地面，使土層上虛下實(shí)，深淺一致，達(dá)到地平土碎土細(xì)。M1群體的構(gòu)建：2023年3月至2023年8月，經(jīng)空間誘變、等離子誘變和重離子誘變處理的全部種子種植于蘭州大洼山試驗(yàn)基地（平均海拔約1500m，年平均氣溫10.9℃，年平均降水量約為300mm，降雨集中在每年7-9月），采用單株種植，穴盤育苗10d后移栽在試驗(yàn)地，行距40cm，株距20cm，同期種下適量未經(jīng)誘變的野生型種子。此外，2023年4-9月，經(jīng)化學(xué)誘變處理的種子種植于陜西林業(yè)集團(tuán)蘇坊基地，該基地位于陜西省咸陽(yáng)市武功縣蘇坊鎮(zhèn)，地處關(guān)中平原腹地，平均海拔550m，多年平均氣溫12.9℃，年平均降水量633.7mm，主要集中在7月至9月。按照行距40cm、株距40cm、播種深度4-5cm進(jìn)行穴播，同期種下適量未經(jīng)誘變的野生型種子。共獲得6177個(gè)誘變單株材料，其中空間誘變1797個(gè)單株、重離子誘變1551個(gè)單株、等離子誘變1892個(gè)單株和EMS誘變937個(gè)單株。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，并在乳熟期對(duì)每一株進(jìn)行編號(hào)后掛牌標(biāo)記，并開(kāi)展性狀調(diào)查工作；在成熟期進(jìn)行單株收種并脫粒保存，獲得M1代種子。M2群體的構(gòu)建：2024年3月至2024年8月，除未收種，農(nóng)藝性狀較差的M1材料不播種之外，余下的4608個(gè)M1代材料（空間誘變1260株系、重離子誘變1086株系、等離子誘變1325株系和EMS誘變937株系）播種于天水市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所綠色農(nóng)業(yè)研究中心甘谷試驗(yàn)站（平均海拔約1200m，多年平均氣溫10.5℃，年降水量約550mm，主要集中在6月至9月），采用單株種植，每個(gè)突變體種植20個(gè)單株，株距20cm，行距40cm，以未經(jīng)處理的‘中天4號(hào)’作為對(duì)照。田間管理同M1代群體。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，并在乳熟期測(cè)定株高、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)，并在成熟期測(cè)定單株鮮重和干重，成熟后挑選每個(gè)突變體最好的1株收種獲得M2代種子。M3群體的構(gòu)建：2025年3月至2025年8月，將M2代篩選到的疑似高產(chǎn)突變體播種于蘭州大洼山試驗(yàn)基地，即為M3代，每個(gè)突變材料（100株）種植成小區(qū)，株距10cm，行距20cm，以未經(jīng)處理的‘中天4號(hào)’作為對(duì)照。記錄每株材料的生育期、幼苗習(xí)性和穗形，乳熟期和成熟期測(cè)定株高、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)，并在成熟期測(cè)定單株鮮重和干重，每個(gè)突變材料挑選最好的單株收種獲得M3代種子。2.3田間管理除草：采用人工方式及時(shí)清除雜草。灌溉：適時(shí)灌溉，水質(zhì)應(yīng)符合GB5084要求。病蟲害防治：采用化學(xué)方式防治，農(nóng)藥使用應(yīng)符合GB/T8321和NY/T1276的規(guī)定2.4指標(biāo)測(cè)定2.4.1生育期統(tǒng)計(jì)飼用燕麥從播種期到成熟期所經(jīng)歷的天數(shù)，單位為d。與對(duì)照品種相比，生育期少7~14d為早熟、少14d以上為特早熟，生育期長(zhǎng)7~14d為晚熟、長(zhǎng)14d以上為特晚熟。2.4.2幼苗習(xí)性幼苗的顏色分為直立、半匍匐、匍匐。2.4.3株高乳熟期測(cè)定植株從地面到穗頂（不含芒）的絕對(duì)高度，精確到0.1cm。2.4.4莖粗乳熟期主莖地上第二節(jié)間中部的粗度，單位0.1mm。2.4.5分蘗數(shù)乳熟期植株在生長(zhǎng)過(guò)程中從地面附近或地下莖節(jié)上產(chǎn)生分枝的數(shù)量。2.4.6有效分蘗數(shù)乳熟期分蘗中結(jié)實(shí)形成產(chǎn)量的分蘗數(shù)。2.4.7旗葉長(zhǎng)乳熟期測(cè)定旗葉基部至葉尖的長(zhǎng)度，精確到0.1cm。2.4.8旗葉寬乳熟期測(cè)定旗葉最寬處的寬度，精確到0.1cm。2.4.9穗形成熟期穗子性狀的類型，包括側(cè)緊、側(cè)散、周緊、周散。2.4.10單株地上生物量M0-M1,M1-M2成熟期收割，風(fēng)干后稱干重。M2-M3乳熟期收割，并稱鮮重，風(fēng)干后稱干重。2.5突變體篩選2.5.1生育期對(duì)照品種相比，生育期少7~14d為早熟、少14d以上為特早熟，生育期長(zhǎng)7~14d為晚熟、長(zhǎng)14d以上為特晚熟。通過(guò)觀測(cè)發(fā)現(xiàn)在M2代有晚熟材料1份。2.5.2幼苗習(xí)性與對(duì)照品種相比，1.直立；2.半匍匐；3.匍匐發(fā)生變化，如圖所示。圖1幼苗習(xí)性通過(guò)觀測(cè)發(fā)現(xiàn)在M2代有匍匐材料25份。2.5.3穗形與對(duì)照品種相比，1.側(cè)緊；2.側(cè)散；3.周緊；4.周散發(fā)生變化，如圖所示。圖2穗形通過(guò)觀測(cè)發(fā)現(xiàn)在M2代有周散穗形的材料5份。2.5.4株高、莖粗、分蘗數(shù)、有效分蘗數(shù)、旗葉長(zhǎng)、旗葉寬、單株生物量計(jì)算對(duì)照平均值±3???????的最大閾值、最小閾值，比較突變體性狀測(cè)定值與閾值的大小，劃分突變體的變異類型，其中，平均值為對(duì)照平均值，Sck為對(duì)照所測(cè)表型性狀標(biāo)準(zhǔn)差。結(jié)合前期研究結(jié)果，通過(guò)相關(guān)性分析結(jié)果表明誘變單株的干草產(chǎn)量與成熟期有效分蘗數(shù)、拔節(jié)期分蘗數(shù)、抽穗期分蘗數(shù)、灌漿期有效分蘗數(shù)呈極顯著正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.859、0.769、0.785、0.715，與株高的相關(guān)系數(shù)為0.616，呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。因此，在M3代突變體篩選時(shí)選擇干重、株高、總分蘗和有效分蘗作為主要指標(biāo)。在M3代中，通過(guò)計(jì)算對(duì)照植株的干重、株高、總分蘗和有效分蘗平均值，依據(jù)對(duì)照平均值±3???????篩選突變體，共篩選到36株誘變突變體，其中正向突變體9株，誘變突變體單株干重>對(duì)照平均值+3???????的有2株，誘變突變體株高>對(duì)照平均值+3???????的有1株，誘變突變體植株的總分蘗或有效分蘗>對(duì)照平均值+3???????的有6株。此外，誘變突變體單株干重<對(duì)照平均值-3???????的有20株，誘變突變體株高<對(duì)照平均值-3???????的有6株，誘變突變體植株的總分蘗或有效分蘗<對(duì)照平均值-3???????的有18株。2.5.5世代篩選方法M1代：共獲得6177個(gè)誘變單株材料（M1代），其中空間誘變1797個(gè)單株、重離子誘變1551個(gè)單株、等離子誘變1892個(gè)單株和EMS誘變937個(gè)單株。以單株為對(duì)象觀測(cè)田間農(nóng)藝性狀，成熟后單株收種獲得M1代種子。M2代：M2代是變異的世代也是選擇的世代。除未收種，農(nóng)藝性狀較差的M1材料不播種之外，余下的4608個(gè)M1代材料（空間誘變1260株系、重離子誘變1086株系、等離子誘變1325株系和EMS誘變937株系）全部種植。以單株為