(19)國家知識產(chǎn)權(quán)局(12)發(fā)明專利(10)授權(quán)公告號CN1107343(21)申請?zhí)?01910926970.7(65)同一申請的已公布的文獻號(43)申請公布日2020.01.31(73)專利權(quán)人黑龍江龍麻工業(yè)大麻二酚提取有限公司地址150000黑龍江省哈爾濱市呼蘭區(qū)北大街119號(72)發(fā)明人張樹權(quán)李國輝肖挽(74)專利代理機構(gòu)北京科龍寰宇知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11139專利代理師孫皓晨譚志堅等.麻類作物中主要藥用活性成分提期),審查員李勇一種大麻二酚的提取純化方法本發(fā)明公開了一種大麻二酚的提取純化方超臨界氬萃取法進行提取，再采用分子蒸餾法進行初步分離，最后采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，獲得高純度的大麻二酚。本發(fā)明的純化提取方法使得大麻二酚的提取收率有較大提高，使終產(chǎn)品純度、有機溶劑殘留及農(nóng)藥殘21.一種大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，包(1)將大麻花、葉或種皮在60～150℃條件下用熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥至含水量不高于6%;(2)將干燥的大麻花、葉或種皮粉碎至顆粒在20～100目；(3)采用超臨界氬萃取法對粉碎的大麻花、葉或種皮進行提取，提取溫度為20℃,采用階段式壓力控制方式，使氬氣壓力達到30MPa的超臨界狀態(tài)，提取時間為5小時，解析溫度為20℃,解析壓力為10MPa,得到大麻提取物；(4)采用分子蒸餾法，對步驟(3)得到的大麻提取物進行蒸餾2～5次，蒸餾溫度為115~220℃,真空度為0.5～20Pa,得到粗制大麻油；(5)將步驟(4)得到的粗制大麻油用6～20倍重量的乙醇或甲醇溶解，采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，色譜條件：柱溫-70～20℃,壓力30～70MPa,流速10～50ml/min,層析柱填料選用十八烷基硅烷鍵合硅膠、大孔樹脂、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙(6)收集步驟(5)所得大麻二酚流段，得到大麻二酚純品。2.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(1)中的干燥溫度為120℃。3.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(2)中的粉碎程度為100目。4.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(4)中的蒸餾次數(shù)為5次。5.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(4)中的蒸餾溫度為180℃。6.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(4)中的真空度為10Pa。7.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(5)中用于溶解的溶劑為粗制大麻油12倍重量的乙醇。8.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(5)中的色譜條件為柱溫4℃,壓力50MPa,流速20ml/min。9.如權(quán)利要求1所述的大麻二酚的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(5)中的層析柱填料為氧化鋁。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及一種大麻二酚的提取純化方法，屬于藥物成分提取技術(shù)領(lǐng)域。背景技術(shù)草本植物。因其成分四氫大麻酚(THC)在吸食或口服后有精神和生理的活性作用，它能讓人學(xué)成分四氫大麻酚的含量要求低于0.3%;大麻二酚(CBD)為大麻中存在的非精神活性物麻花及大麻葉中主要成分大麻二酚的含量高于3%。[0003]目前，大麻二酚的提取工藝中主要采取用二氧化碳超臨界萃取、氮超臨界萃取及有機溶劑萃取等方式進行提取，并結(jié)合加熱或超聲等操作進行混合提取。采用現(xiàn)有技術(shù)中的提取工藝無法全面達到去除重金屬殘留、農(nóng)藥殘留雜質(zhì)等，使終產(chǎn)品的安全性存在隱患，同時對產(chǎn)品的純度也造成一定的負面影響，純度最高僅能達到98%,不能獲得純度更高、雜質(zhì)更低的物質(zhì)，也容易導(dǎo)致提取過程中大麻二酚與其它成分產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，降低提取收率，實際應(yīng)用領(lǐng)域有較大限制。[0004]可見，現(xiàn)有技術(shù)對終產(chǎn)品的質(zhì)量依據(jù)，僅僅把提取成本及純度作為提取目的，未把重金屬殘留、農(nóng)藥殘留、有機溶劑殘留及提取過程中引入的雜質(zhì)等的去除作為工藝的重要組成部分，這樣反而影響了最終的產(chǎn)品純度，并對大麻二酚在醫(yī)藥、保健品及化妝品等領(lǐng)域應(yīng)用的安全性產(chǎn)生不可預(yù)計的不良反應(yīng)?，F(xiàn)代社會把在人體上應(yīng)用的安全性放到了跟實用化方法。發(fā)明內(nèi)容[0005]為解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述缺點，本發(fā)明提供一種大麻二酚的提取純化方法，先將大麻花、葉或種皮干燥，粉碎，然后采用超臨界氬萃取法進行提取，再采用分子蒸餾法進行初步分離，最后采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，獲得高純度的大麻二酚。本發(fā)明的純化提取方法使得大麻二酚的提取收率有較大提高，使終產(chǎn)品純度、有機溶劑殘留及農(nóng)藥殘留較現(xiàn)有產(chǎn)品有顯著提高，為產(chǎn)品應(yīng)用于化妝品、保健食品及藥品中的安全性提供保障。[0006]具體的，本發(fā)明提供一種大麻二酚的提取純化方法，包括以下步驟：[0007](1)將大麻花、葉或種皮在60～150℃條件下用熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥至含水量不高于[0008](2)將干燥的大麻花、葉或種皮粉碎至顆粒在20～100目；[0009](3)采用超臨界氬萃取法對粉碎的大麻花、葉或種皮進行提取，提取溫度為-70~440℃,采用階段式壓力控制方式，使氬氣壓力達到5～50MPa的超臨界狀態(tài)，提取時間為0.5~5小時，解析溫度為-70～20℃,解析壓力為1～20MPa,得到大麻提取物；[0010](4)采用分子蒸餾法，對步驟(3)得到的大麻提取物進行蒸餾2～5次，蒸餾溫度為115～220℃,真空度為0.5～20Pa,得到粗制大麻油；[0011](5)將步驟(4)得到的粗制大麻油用6～20倍重量的乙醇或甲醇溶解，采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，色譜條件：柱溫-70～20℃,壓力30～70MPa,流速10~50ml/min,層析柱填料選用十八烷基硅烷鍵合硅膠、大孔樹脂、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲[0015]優(yōu)選的，所述步驟(3)中的提取溫度為20℃,氬氣壓力為30MPa,提取時間為5小時，解析溫度為20℃,解析壓力為10MPa。[0017]優(yōu)選的，所述步驟(4)中的蒸餾溫度為180℃。[0018]優(yōu)選的，所述步驟(4)中的真空度為10Pa。[0019]優(yōu)選的，所述步驟(5)中用于溶解的溶劑為粗制大麻油12倍重量的乙醇。[0020]優(yōu)選的，所述步驟(5)中的色譜條件為柱溫4℃,壓力50MPa,流速20ml/min。[0021]優(yōu)選的，所述步驟(5)中的層析柱填料為氧化鋁。[0023]1.本發(fā)明所采用的熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥法及干燥條件，干燥速度快，能夠保證大麻[0024]2.本發(fā)明所采用的超臨界氬萃取法及萃取條件，首次采用氬進行超臨界萃取，優(yōu)勢包括：①氬超臨界流體比現(xiàn)有技術(shù)中常用的二氧化碳超臨界流體相比，更容易獲取，且無殘留；②氬超臨界流體比現(xiàn)有技術(shù)中常用的二氧化碳超臨界流體相比，其溶解譜更窄，對大麻中的酶、脂肪酸、色素及膠體物質(zhì)等的溶解能力較弱，對農(nóng)藥殘留及重金屬殘留的溶解能力更弱，因而對提取目標(biāo)物具有很高的選擇性，利于后期純化，能夠去除大麻中的重金屬和農(nóng)藥殘留；③氬屬于惰性氣體，能在提取純化過程中對各成分具有保護作用，可避免大麻二酚在提取過程中與其它物質(zhì)反應(yīng)，提高產(chǎn)品收率。[0025]3.本發(fā)明所采用的分子蒸餾法，因大麻油中各成分與雜質(zhì)成分的分子自由程的差別進行大麻油的純化，可以按照類別進行分離，工藝操作簡單、效率高，能夠去除大部分的含四氫大麻酚)純度達到95%以上，大麻二酚含量達到80%以上。[0026]4.本發(fā)明所采用的氬超臨界流體色譜分離法，分離效率高，選擇性高，分離得到樣品的純度高，有機溶劑去除效率高，得到大麻二酚純度達99.8%以上，整體大麻二酚收率在94.5%以上，水準(zhǔn)顯著高于現(xiàn)有技術(shù)所制備的產(chǎn)品。[0027]5.本發(fā)明在采用氬超臨界流體色譜分離法時采用少量溶劑乙醇或甲醇，在氬揮發(fā)過程中有協(xié)助去除的作用，不會造成溶劑殘留。5具體實施方式[0028]下面結(jié)合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。[0029]實施例1[0030](1)將大麻花、葉或種皮在120℃條件下用熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥至含水量不高于6%;[0032](3)采用超臨界氬萃取法對粉碎的大麻花、葉或種皮進行提取，提取溫度為20℃,采用階段式壓力控制方式，使氬氣壓力達到30MPa的超臨界狀態(tài)，提取時間為5小時，解析溫度為20℃,解析壓力為10MPa,得到大麻提取物；[0033](4)采用分子蒸餾法，對步驟(3)得到的大麻提取物進行蒸餾5次，蒸餾溫度為180℃,真空度為10Pa,得到粗制大麻油；[0034](5)將步驟(4)得到的粗制大麻油用12倍重量的乙醇或甲醇溶解，采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，色譜條件：柱溫4℃,壓力50MPa,流速20ml/min,層析柱填料選[0035](6)收集步驟(5)所得大麻二酚流段，得到大麻二酚純品。[0037](1)將大麻花、葉或種皮在60℃條件下用熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥至含水量不高于6%;[0038](2)將干燥的大麻花、葉或種皮粉碎至顆粒在20目；[0039](3)采用超臨界氬萃取法對粉碎的大麻花、葉或種皮進行提取，提取溫度為-70℃,采用階段式壓力控制方式，使氬氣壓力達到5MPa的超臨界狀態(tài)，提取時間為0.5小時，解析溫度為-70℃,解析壓力為1MPa,得到大麻提取物；[0040](4)采用分子蒸餾法，對步驟(3)得到的大麻提取物進行蒸餾2次，蒸餾溫度為115℃,真空度為0.5Pa,得到粗制大麻油；[0041](5)將步驟(4)得到的粗制大麻油用6倍重量的乙醇或甲醇溶解，采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，色譜條件：柱溫-70℃,壓力30MPa,流速10ml/min,層析柱填料選用石墨化碳，以超臨界氬作為流動相；[0042](6)收集步驟(5)所得大麻二酚流段，得到大麻二酚純品。[0043]實施例3[0044](1)將大麻花、葉或種皮在150℃條件下用熱風(fēng)循環(huán)風(fēng)箱干燥至含水量不高于6%;[0045](2)將干燥的大麻花、葉或種皮粉碎至顆粒在100目；[0046](3)采用超臨界氬萃取法對粉碎的大麻花、葉或種皮進行提取，提取溫度為40℃,采用階段式壓力控制方式，使氬氣壓力達到50MPa的超臨界狀態(tài)，提取時間為5小時，解析溫度為20℃,解析壓力為20MPa,得到大麻提取物；[0047](4)采用分子蒸餾法，對步驟(3)得到的大麻提取物進行蒸餾5次，蒸餾溫度為220℃,真空度為20Pa,得到粗制大麻油；[0048](5)將步驟(4)得到的粗制大麻油用20倍重量的乙醇或甲醇溶解，采用氬超臨界流體色譜分離法進行分離純化，色譜條件：柱溫20℃,壓力70MPa,流速50ml/min,層析柱填料6選用聚苯乙烯-二乙烯基苯，以超臨界氬作為流動相；[0049](6)收集步驟(5)所得大麻二酚流段，得到大麻二酚純品。[0051]有機溶劑萃取法，操作簡單，但是絕大多數(shù)農(nóng)藥都是易溶于有機溶劑，后期的農(nóng)藥殘留更高，對產(chǎn)品應(yīng)用的安全性無法預(yù)估，且因沒有惰性物質(zhì)環(huán)境，在萃取過程中容易發(fā)生不可預(yù)測的比如脫羧，與殘留重金屬成鹽，與殘留農(nóng)藥發(fā)生反應(yīng)，生成更難去除的毒性物質(zhì)[0052]與二氧化碳超臨界萃取法相比，氬超臨界流體的溶解譜更窄，對大麻中的酶、脂肪酸、色素及膠體物質(zhì)等的溶解能力較弱，對農(nóng)藥殘留及重金屬殘留的溶解能力更弱，比二氧化碳超臨界流體更容易獲取，雖然實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)條件要求更嚴(yán)格，但是與實際能夠達到的效果相比，萃取條件的嚴(yán)格更值得。[0053]與氮超臨界萃取法相比，氬的惰性更好，氬超臨界萃取要求的萃取條件比氮超臨界萃取更低，更適合工業(yè)化生產(chǎn)，且比氮超臨界流體的溶解能力弱，在第一步萃取過程中即可減少非主成分的萃取量，為接下來的分離純化步驟提供更高質(zhì)量的前提，為最后制備的產(chǎn)品收率和純度的提高提供前提。[0054]此外，本發(fā)明中只有在分子蒸餾之前用了少量的有機溶劑乙醇或甲醇，以方便分子蒸餾操作，而現(xiàn)有技術(shù)中除萃取步驟外，還需要用到大量有機溶劑，導(dǎo)致藥物殘渣處理、[0055]現(xiàn)就本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)中的幾種主要提取方式所制備的產(chǎn)品進行對比實驗如下：[0056]1、以實施例1的步驟(1)至(3)為基礎(chǔ)，對不同萃取法所得到的大麻提取物進行對比，各萃取法的區(qū)別僅在于更換步驟(3)中的超臨界流體或有機溶劑，結(jié)果如表1所示。[0057]表1不同萃取法所得到的大麻提取物對比結(jié)果實驗項目二氧化碳超臨界萃取法有機溶劑萃7外觀性狀白色至類白色粉末褐色粘稠膏褐色粘稠膏棕色粘稠膏有機溶劑殘留(單位：%)乙醇未檢出未檢出未檢出乙酸乙酯未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出丙酮未檢出未檢出未檢出未檢出甲醇未檢出未檢出未檢出未檢出農(nóng)藥殘留(單位：百萬分之)胺酸酯噻吩磺隆二四地丁酯其它雜質(zhì)膠體物質(zhì)重金屬不超過百萬分之二十不超過百萬分之五十不超過百萬分之五十不超過十萬分之十[0060]通過上述實驗對比可以看出：對于提取物中的重要雜質(zhì)成分(如脂肪酸類、膠體物質(zhì)、農(nóng)藥殘留、重金屬物質(zhì)及色素等),有機溶劑萃取法的各項指標(biāo)明顯高于超臨界萃取法，本發(fā)明的氬超臨界萃取法的各項指