細(xì)胞凋亡

講授提綱一、概述1.概念4.誘導(dǎo)與抑制2.形態(tài)學(xué)改變5.分期3.與壞死的區(qū)別二、發(fā)生機(jī)制(一)、膜受體途徑(二)、線粒體途徑(三)、酶學(xué)變化1.Caspase2.CAD(核酸內(nèi)切酶)(四)、凋亡相關(guān)基因及其表達(dá)的蛋白1.Bcl-22.p53(核途徑)3.C-myc

(五)、第二信使—神經(jīng)酰胺的作用三、凋亡細(xì)胞的轉(zhuǎn)歸四、凋亡與疾病五、凋亡的防治

概念細(xì)胞凋亡：由各種體內(nèi)外因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而引起的細(xì)胞自殺性死亡過程。是一種主動的、由基因調(diào)控的、與細(xì)胞壞死不同的細(xì)胞死亡形式。

Apoptosis

PCD(ProgrammedCellDeath)淋巴細(xì)胞凋亡各期形態(tài)學(xué)變化神經(jīng)細(xì)胞凋亡透射電鏡觀察凋亡的神經(jīng)細(xì)胞

（電鏡、熒光及TUNEL)CTL腫瘤細(xì)胞CTL正在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡凋亡的誘導(dǎo)劑細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)與抑制細(xì)胞凋亡過程凋亡誘導(dǎo)因素Ca2+、cAMP、神經(jīng)酰胺死亡信號凋亡相關(guān)基因激活Caspases激活DNase激活細(xì)胞凋亡凋亡細(xì)胞被吞噬繼發(fā)性壞死(A)Activation(B)Execution(C)Disposal(D)SecondaryNecrosis二、發(fā)生機(jī)制細(xì)胞凋亡的三條主要途徑1、膜受體途徑2、線粒體途徑3細(xì)胞核途徑p53細(xì)胞凋亡的膜受體途徑FasFasLFADDDISCDDCaspase細(xì)胞凋亡的線粒體途徑Apaf-1Bcl-XL兩個發(fā)現(xiàn)活性氧NO缺血、缺氧Ca2+PTP線粒體PTP開放的誘導(dǎo)劑與抑制劑Caspases的激活方式及其

空間結(jié)構(gòu)凋亡時Caspases的作用底物核纖層蛋白Lamin在核內(nèi)的

結(jié)構(gòu)和位置Caspases與Calpain作用底物的異同Caspas8Caspas3Caspas9CleavageofmanydeathsubstratesNucleusDegradationofDNACAD激活方式p53二、發(fā)生機(jī)制(四)凋亡相關(guān)基因凋亡相關(guān)基因及其表達(dá)的蛋白1、抑制凋亡基因：Bcl-22、促進(jìn)凋亡基因：p53，Bak，Bid，Bik3、雙向調(diào)控基因：c-myc，Bcl-XBcl-2超家族中的Bcl-2亞家族Bcl-XL在線粒體膜上的作用機(jī)理ApoptosomeComplexCARDP53(MolecularPoliceman)的checkpoint作用DNA受損后p53的checkpoint作用細(xì)胞核途徑P53與MitC-myc基因C-myc基因：是一種瘤基因是一種凋亡雙向調(diào)控基因即：c-myc基因上調(diào)+有生長因子支持→細(xì)胞增殖c-myc基因上調(diào)+無生長因子支持→細(xì)胞凋亡第二信使—神經(jīng)酰胺(Ceramide)的作用產(chǎn)生：

神經(jīng)鞘磷脂神經(jīng)酰胺神經(jīng)鞘磷脂酶誘導(dǎo)因素：TNF-α、Fas、CD28、細(xì)胞因子(IL-1)、激素、免疫分子、HSP、抗癌藥、活性氧、離子射線等作用：1.神經(jīng)酰胺激活的蛋白激酶2.神經(jīng)酰胺激活的蛋白磷酸脂酶3.調(diào)整PKC家族4.激活應(yīng)激活化的蛋白激酶5.激活ced-3/ICE樣蛋白酶CPP32(Caspase-3)細(xì)胞凋亡過程及機(jī)制模式圖三、凋亡轉(zhuǎn)歸單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞

吞噬凋亡小體小鼠燙傷后凋亡的胸腺細(xì)胞被

胸腺內(nèi)吞噬細(xì)胞吞噬吞噬細(xì)胞識別吞噬凋亡細(xì)胞的機(jī)制TSP吞噬細(xì)胞與凋亡細(xì)胞的相互識別凋亡細(xì)胞被吞噬后的生物學(xué)意義四、凋亡與疾病細(xì)胞凋亡與疾病細(xì)胞凋亡的防治燙傷引起的小鼠胸腺細(xì)胞凋亡(吖啶橙＋溴乙錠雙染色)654－2對H2O2所致BPAEC凋亡的影響(吖啶橙＋溴乙錠雙染色)(TUNEL)654-2對內(nèi)毒素血癥小鼠胸腺細(xì)胞

凋亡時DNA“梯”狀條帶的影響參麥注射液、IL－2對燙傷小鼠

脾細(xì)胞DNA片斷化的影響參麥注射液防治燙傷小鼠胸腺細(xì)胞

凋亡與其防止Bcl-2降低有關(guān)謝謝！DNA“梯”狀條帶DNA斷裂與“梯狀條帶”(1)DNA斷裂與“梯狀條帶”(2)返回英文縮略語TUNEL:TdTmediateddUTPNickEnd-Labeling末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的連接生物素的脫氧三磷酸鳥苷缺口末端標(biāo)記法CTL:CytotoxicTLymphocyteICE:Interlukin-1βConvertingEnzyme白介素-1β轉(zhuǎn)化酶DD:DeathDomainFADD:FasAssociatedprotenwithDeathDomainDISC:Death-InducingSignalingComplexCaspase:Cysteine-ContainingAspatate-SpecificProtease半胱天冬蛋白酶含有半胱氨酸的、具有天冬氨酸特異酶切位點(diǎn)的蛋白酶PTP：PermeabilityTransitionPoreApaf-1:ApoptosisProteaseActivatingFactor–1CAD:CaspaseActivatedDNase由Caspase激活的核酸酶