循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）檢測臨床應(yīng)用演講人循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）檢測臨床應(yīng)用作為腫瘤精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域的重要突破，循環(huán)腫瘤DNA（circulatingtumorDNA,ctDNA）檢測正逐步改變傳統(tǒng)腫瘤診療的模式。在十余年的臨床實踐中，我見證了ctDNA從基礎(chǔ)研究走向廣泛應(yīng)用的全過程：從最初僅在科研實驗室中探索的“新鮮事物”，到如今成為多個癌種診療指南推薦的“常規(guī)武器”；從單一基因位點(diǎn)的檢測，到覆蓋全基因組、動態(tài)監(jiān)測的多維度應(yīng)用。ctDNA以其“液體活檢”的獨(dú)特優(yōu)勢，突破了傳統(tǒng)組織活檢的時空限制，為腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、精準(zhǔn)分型、療效評估及預(yù)后預(yù)測提供了全新視角。本文將從ctDNA的生物學(xué)特性與檢測技術(shù)基礎(chǔ)出發(fā)，系統(tǒng)梳理其在腫瘤診療全流程中的臨床應(yīng)用，深入分析當(dāng)前面臨的挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略，并對未來發(fā)展方向進(jìn)行展望，旨在為臨床同行提供全面、深入的參考。01ctDNA的生物學(xué)特性與檢測技術(shù)基礎(chǔ)021ctDNA的定義、來源及生物學(xué)特性1ctDNA的定義、來源及生物學(xué)特性ctDNA是指由腫瘤細(xì)胞凋亡、壞死或主動釋放進(jìn)入外周血的DNA片段，其攜帶與原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶相同的體細(xì)胞突變信息。與游離DNA（cfDNA）中來源于正常細(xì)胞的片段不同，ctDNA具有顯著的腫瘤特異性，這使其成為理想的“液體活檢”標(biāo)志物。從來源看，ctDNA的釋放機(jī)制主要包括：①腫瘤細(xì)胞主動分泌：通過胞外囊泡（exosomes）或凋亡小體將DNA釋放至胞外；②腫瘤細(xì)胞被動釋放：因腫瘤血管生成異常、間質(zhì)壓力增高導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞壞死，DNA片段入血；③循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）裂解：CTCs在血液循環(huán)中凋亡或裂解釋放DNA。不同癌種、不同腫瘤負(fù)荷狀態(tài)下，ctDNA的釋放效率和片段特征存在差異：例如，晚期肺癌患者ctDNA濃度可達(dá)100ng/mL以上，而早期患者可能低于0.1ng/mL；轉(zhuǎn)移性病灶較原發(fā)灶釋放更多ctDNA，且片段長度更短（約166bp，對應(yīng)核小體保護(hù)長度）。1ctDNA的定義、來源及生物學(xué)特性ctDNA的核心生物學(xué)特性包括：①腫瘤特異性：攜帶腫瘤特有的基因突變（如EGFR、KRAS、BRAF等）、甲基化、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）或片段化模式；②異質(zhì)性：反映腫瘤的時空異質(zhì)性，既可捕捉原發(fā)灶信息，也能監(jiān)測轉(zhuǎn)移灶或耐藥克?。虎蹌討B(tài)性：隨著腫瘤負(fù)荷變化、治療進(jìn)展或耐藥產(chǎn)生，ctDNA水平及突變譜會發(fā)生實時改變，為動態(tài)監(jiān)測提供可能。這些特性是ctDNA臨床應(yīng)用的理論基石。032ctDNA檢測技術(shù)：從基礎(chǔ)方法到高通量革新2ctDNA檢測技術(shù)：從基礎(chǔ)方法到高通量革新ctDNA檢測技術(shù)的發(fā)展直接推動了其臨床轉(zhuǎn)化。早期基于PCR的方法（如ARMS-PCR）因靈敏度低（僅能檢測1%-5%的突變等位基因頻率，MAF）、通量小，僅適用于已知高頻突變的檢測。隨著高通量測序（NGS）和數(shù)字PCR（dPCR）技術(shù)的突破，ctDNA檢測進(jìn)入“精準(zhǔn)量化”和“全景分析”時代。042.1數(shù)字PCR（dPCR）技術(shù)2.1數(shù)字PCR（dPCR）技術(shù)dPCR通過“微滴分區(qū)”或“芯片分區(qū)”將反應(yīng)體系分割成數(shù)千至數(shù)百萬個獨(dú)立反應(yīng)單元，對目標(biāo)DNA分子進(jìn)行“絕對定量”，無需標(biāo)準(zhǔn)曲線，靈敏度可達(dá)0.01%-0.1%MAF。其優(yōu)勢在于：對已知突變的檢測精度極高，適用于EGFRT790M耐藥突變等低豐度變異的監(jiān)測；操作相對簡單，適合臨床常規(guī)開展。例如，在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中，dPCR檢測外周血EGFR突變狀態(tài)與組織活檢的一致性可達(dá)90%以上，且對于無法獲取組織標(biāo)本的患者，可替代組織活檢進(jìn)行靶向藥物選擇。052.2高通量測序（NGS）技術(shù)2.2高通量測序（NGS）技術(shù)NGS通過并行測序數(shù)百萬條DNA分子，可實現(xiàn)“一次檢測、多重靶標(biāo)”，包括靶向測序（panel測序）、全外顯子組測序（WES）和全基因組測序（WGS）。靶向測序（覆蓋數(shù)十至數(shù)百個腫瘤相關(guān)基因）是目前臨床應(yīng)用的主流，其優(yōu)勢在于：①可同時檢測點(diǎn)突變、插入缺失（Indel）、拷貝數(shù)變異（CNV）、融合基因等多種變異類型；②靈敏度可達(dá)0.1%-1%MAF（通過深度測序和生物信息學(xué)優(yōu)化）；③能發(fā)現(xiàn)新的耐藥突變或罕見突變，為個體化治療提供依據(jù)。例如，在結(jié)直腸癌中，NGS-basedctDNA檢測可同步檢測KRAS、NRAS、BRAF突變以及HER2擴(kuò)增，指導(dǎo)靶向藥物（如抗EGFR抗體）的選擇。062.3其他新興技術(shù)2.3其他新興技術(shù)除了dPCR和NGS，甲基化特異性PCR（MSP）、數(shù)字甲基化測序（bisulfitesequencing）、片段組學(xué)（fragmentomics）等技術(shù)也逐步應(yīng)用于ctDNA檢測。例如，Septin9基因甲基化是結(jié)直腸癌早篩的重要標(biāo)志物，其甲基化特異性檢測試劑盒已獲FDA批準(zhǔn)；ctDNA片段化模式（如末端基序、長度分布）被證實與腫瘤類型相關(guān)，可作為“指紋”用于腫瘤溯源。072.4技術(shù)性能的關(guān)鍵指標(biāo)2.4技術(shù)性能的關(guān)鍵指標(biāo)評價ctDNA檢測技術(shù)的核心指標(biāo)包括：①靈敏度：指在真陽性樣本中檢出突變的能力，受腫瘤負(fù)荷、檢測深度、MAF等因素影響；②特異性：指在健康人群或良性疾病患者中避免假陽性的能力，需關(guān)注胚系突變或克隆性造血（CHIP）的干擾；③重復(fù)性：同一樣本多次檢測的一致性，反映技術(shù)的穩(wěn)定性；④turnaroundtime（TAT）：從樣本采集到報告出具的時間，臨床應(yīng)用需滿足快速決策的需求（如治療過程中的動態(tài)監(jiān)測）。ctDNA檢測在腫瘤診療全流程中的臨床應(yīng)用ctDNA的臨床價值在于其貫穿腫瘤診療的“全生命周期”，從早期篩查到晚期治療，每個環(huán)節(jié)均展現(xiàn)出獨(dú)特的應(yīng)用價值。結(jié)合國內(nèi)外指南（如NCCN、ESMO、CSCO）及臨床實踐，以下分場景闡述其具體應(yīng)用。1早期腫瘤篩查：突破“早診難”的瓶頸傳統(tǒng)腫瘤篩查依賴影像學(xué)（如低劑量CT）和血清腫瘤標(biāo)志物（如AFP、CEA），但前者存在輻射、假陽性等問題，后者靈敏度不足（多數(shù)標(biāo)志物對早期腫瘤的檢出率<30%）。ctDNA憑借其腫瘤特異性，成為早期篩查的新方向。081.1多癌種早篩（MCED）1.1多癌種早篩（MCED）通過檢測ctDNA的甲基化、片段化或突變譜，結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí)算法，可實現(xiàn)“一次檢測、多種癌癥”的篩查。例如，美國GRAIL公司的Galleri檢測可覆蓋50種以上癌癥，對泛癌種早期（I-III期）的檢出率達(dá)76.6%，特異性高達(dá)99.5%（2023年發(fā)表于《AnnalsofOncology》）。國內(nèi)泛生子的“思安寧”等產(chǎn)品也初步顯示出類似潛力，在肺癌、肝癌、胃癌等高發(fā)癌種中，早期靈敏度可達(dá)60%-80%。091.2單癌種早篩1.2單癌種早篩針對高發(fā)癌種，ctDNA檢測可結(jié)合傳統(tǒng)方法提升篩查效能。例如，在肝癌中，AFP聯(lián)合ctDNA（如TP53、CTNNB1突變）檢測，可將早期肝癌的檢出率從50%提升至80%；在肺癌中，甲基化標(biāo)志物（如SHOX2、PTGER4）聯(lián)合低劑量CT，可減少30%的假陽性率（2022年《JournalofClinicalOncology》）。101.3臨床挑戰(zhàn)1.3臨床挑戰(zhàn)盡管ctDNA早篩前景廣闊，但仍面臨核心挑戰(zhàn)：①極早期腫瘤（原位癌）ctDNA釋放量極低（<0.01ng/mL），現(xiàn)有技術(shù)靈敏度不足；②“假陽性”問題：克隆性造血（CHIP）或良性病變（如炎癥）可能導(dǎo)致胚系突變或體細(xì)胞突變誤判；③衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)問題：多癌種早篩單次檢測費(fèi)用較高，需成本效益分析支持。目前，ctDNA早篩多處于“高風(fēng)險人群篩查”階段（如家族史、長期吸煙者），尚未推薦用于普通人群。2輔助診斷與病理分型：彌補(bǔ)組織活檢的不足約20%-30%的腫瘤患者因病灶位置深、穿刺風(fēng)險高或組織insufficient無法獲取組織標(biāo)本，ctDNA檢測成為“液體活檢”替代方案。112.1腫瘤組織溯源與病理分型2.1腫瘤組織溯源與病理分型當(dāng)影像學(xué)或臨床特征難以明確原發(fā)灶時，ctDNA突變譜可輔助判斷腫瘤類型。例如，肺腺癌常見EGFR、KRAS突變，乳腺癌常見PIK3CA、ESR1突變，結(jié)直腸癌常見APC、KRAS突變；通過機(jī)器學(xué)習(xí)模型（如CancerLocator），ctDNA數(shù)據(jù)可對原發(fā)灶進(jìn)行溯源，準(zhǔn)確率達(dá)80%以上（2017年《ScienceTranslationalMedicine》）。在病理分型中，ctDNA檢測可輔助區(qū)分腺癌、鱗癌等亞型，例如NSCLC中，EGFR突變多見于腺癌，而TP53突變在鱗癌中更常見。122.2驅(qū)動突變檢測與靶向治療指導(dǎo)2.2驅(qū)動突變檢測與靶向治療指導(dǎo)驅(qū)動突變是靶向治療的“靶點(diǎn)”，ctDNA檢測可快速識別關(guān)鍵突變。例如：-NSCLC：EGFR、ALK、ROS1、BRAFV600E等突變，ctDNA檢測與組織活檢一致性達(dá)85%-95%（2021年《JournalofThoracicOncology》）；對于無法耐受組織活檢的患者，NCCN指南推薦ctDNA作為EGFR-TKI治療的伴隨診斷。-結(jié)直腸癌：RAS/BRAF突變狀態(tài)是抗EGFR抗體（西妥昔單抗、帕尼單抗）治療的前提，ctDNA檢測可避免組織活檢取樣誤差導(dǎo)致的假陰性（約10%-15%）。-乳腺癌：PIK3CA、ESR1突變與CDK4/6抑制劑、內(nèi)分泌治療耐藥相關(guān)，ctDNA動態(tài)監(jiān)測可指導(dǎo)治療方案調(diào)整。132.3局限性2.3局限性ctDNA檢測不能完全替代組織活檢：①對于腫瘤負(fù)荷低、血行轉(zhuǎn)移晚的患者，ctDNA可能無法檢出（“陰性”不代表無腫瘤）；②ctDNA無法提供腫瘤組織學(xué)形態(tài)（如分化程度、間質(zhì)浸潤情況），需與影像學(xué)、病理學(xué)結(jié)合；③部分突變在ctDNA和組織中的豐度可能存在差異（如EGFRT790M耐藥突變在ctDNA中檢出率高于組織）。3療效監(jiān)測：實時評估治療反應(yīng)傳統(tǒng)療效評估依賴RECIST標(biāo)準(zhǔn)（基于影像學(xué)病灶大小變化），但影像學(xué)變化滯后（通常需4-8周），且無法區(qū)分“腫瘤退縮”與“腫瘤壞死”。ctDNA檢測可更早、更靈敏地反映治療療效，被稱為“分子層面的療效評估”。143.1治療應(yīng)答的早期預(yù)測3.1治療應(yīng)答的早期預(yù)測在靶向治療或免疫治療開始后1-2周，ctDNA水平下降即可預(yù)測治療應(yīng)答。例如，在EGFR-TKI治療的NSCLC患者中，治療2周后ctDNA清除率（降至檢測限以下）與無進(jìn)展生存期（PFS）顯著相關(guān)（HR=0.35，P<0.001，2020年《NatureMedicine》）；相反，若ctDNA水平持續(xù)升高或出現(xiàn)新突變，提示治療無效或耐藥。153.2免疫治療的療效與生物標(biāo)志物3.2免疫治療的療效與生物標(biāo)志物免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICIs）的療效評估復(fù)雜，部分患者表現(xiàn)為“假性進(jìn)展”（影像學(xué)病灶增大但實際有效），ctDNA可輔助鑒別。例如，在黑色素瘤患者中，接受PD-1抑制劑治療后，ctDNA清除者的客觀緩解率（ORR）達(dá)80%，而未清除者ORR僅20%（2021年《Cell》）。此外，ctDNA的腫瘤突變負(fù)荷（TMB）、新抗原負(fù)荷（NAL）以及微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）狀態(tài)，是預(yù)測免疫治療療效的重要標(biāo)志物，與PD-L1表達(dá)水平互補(bǔ)。163.3動態(tài)監(jiān)測指導(dǎo)治療調(diào)整3.3動態(tài)監(jiān)測指導(dǎo)治療調(diào)整通過定期監(jiān)測ctDNA，可實現(xiàn)“個體化治療調(diào)整”。例如，在慢性髓系白血病（CML）中，BCR-ABL1融合基因ctDNA水平與疾病負(fù)荷高度相關(guān)，國際指南推薦以ctDNA水平為指導(dǎo)，優(yōu)化酪氨酸激酶抑制劑（TKI）的劑量；在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者中，術(shù)前新輔助化療后ctDNA清除者，術(shù)后5年生存率可達(dá)90%，而未清除者僅50%，提示需輔助強(qiáng)化治療。4微小殘留病灶（MRD）監(jiān)測：預(yù)防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移腫瘤根治性治療后（手術(shù)、放化療），體內(nèi)殘留的微量腫瘤細(xì)胞（MRD）是復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的根源。傳統(tǒng)方法（影像學(xué)、血清標(biāo)志物）難以檢出MRD（靈敏度約10??），而ctDNA檢測靈敏度可達(dá)10??-10??，成為MRD監(jiān)測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。174.1術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險分層4.1術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險分層在結(jié)直腸癌、乳腺癌、NSCLC等實體瘤中，術(shù)后ctDNA陽性患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險顯著高于陰性者。例如，III期結(jié)直腸癌患者術(shù)后ctDNA陽性者2年復(fù)發(fā)率達(dá)60%，而陰性者僅10%（2022年《NewEnglandJournalofMedicine》）；基于ctDNA的風(fēng)險分層可指導(dǎo)輔助治療強(qiáng)度：ctDNA陽性者需強(qiáng)化化療（如FOLFOX+靶向藥），陰性者可避免過度治療。184.2局部治療后的療效評估4.2局部治療后的療效評估在放療或消融治療后，ctDNA持續(xù)陽性提示局部殘留或遠(yuǎn)處微轉(zhuǎn)移。例如，肝癌射頻消融術(shù)后，ctDNA陽性患者6個月內(nèi)復(fù)發(fā)率高達(dá)70%，而陰性者僅15%，需密切隨訪或二次干預(yù)。194.3MRD指導(dǎo)輔助治療決策4.3MRD指導(dǎo)輔助治療決策針對MRD陽性患者，早期干預(yù)（如免疫治療、靶向治療）可降低復(fù)發(fā)風(fēng)險。例如，在早期NSCLC術(shù)后輔助治療中，ctDNA陽性患者接受EGFR-TKI輔助治療，2年無復(fù)發(fā)生存率（RFS）較單純手術(shù)提升30%（2023年《LancetOncology》）；在乳腺癌中，ctDNA陽性者接受ADC藥物（如T-DM1）輔助治療，可顯著改善DFS。5耐藥機(jī)制分析與治療方案優(yōu)化腫瘤耐藥是治療失敗的主要原因，ctDNA檢測可實時捕捉耐藥突變，指導(dǎo)后續(xù)治療選擇。205.1靶向治療的耐藥機(jī)制5.1靶向治療的耐藥機(jī)制在EGFR-TKI治療的NSCLC中，約50%-60%的患者出現(xiàn)T790M耐藥突變，ctDNA檢測可較組織活檢更早發(fā)現(xiàn)（提前2-3個月），指導(dǎo)換用第三代EGFR-TKI（如奧希替納）；若ctDNA檢測到C797S突變（T790M繼發(fā)耐藥），則提示一代/三代TKI聯(lián)合化療的必要性。在ALK融合陽性肺癌中，耐藥突變（如G1202R、L1196M）可通過ctDNA動態(tài)監(jiān)測，指導(dǎo)換用下一代ALK-TKI（如勞拉替尼）。215.2免疫治療的耐藥與聯(lián)合治療5.2免疫治療的耐藥與聯(lián)合治療免疫治療耐藥機(jī)制復(fù)雜，包括新抗原丟失、免疫微環(huán)境抑制等，ctDNA可輔助識別耐藥相關(guān)突變（如PTEN缺失、JAK1/2突變）。例如，在黑色素瘤中，ctDNA檢測到B2M突變（與抗原呈遞缺陷相關(guān)）提示免疫治療可能耐藥，可考慮聯(lián)合CTLA-4抑制劑或化療。225.3臨床案例分享5.3臨床案例分享我曾接診一位晚期肺腺癌患者，EGFR19del突變，一線奧希替納治療8個月后進(jìn)展，影像學(xué)提示腦膜轉(zhuǎn)移。因無法耐受重復(fù)腦脊液穿刺，我們通過ctDNA檢測發(fā)現(xiàn)EGFRT790M突變（MAF2.3%），換用阿美替尼聯(lián)合貝伐珠單抗治療，2個月后腦脊液壓力恢復(fù)正常，ctDNA降至檢測限以下，患者至今生存期超過18個月。這個案例讓我深刻體會到：ctDNA檢測不僅是對技術(shù)的應(yīng)用，更是對生命的挽救。ctDNA檢測的挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略盡管ctDNA檢測在臨床中展現(xiàn)出巨大價值，但其廣泛應(yīng)用仍面臨多重挑戰(zhàn)，需通過技術(shù)創(chuàng)新、多學(xué)科協(xié)作和標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)逐步解決。231.1靈敏度與特異性的平衡1.1靈敏度與特異性的平衡極早期腫瘤或低腫瘤負(fù)荷患者ctDNA釋放量極低（<0.01%MAF），現(xiàn)有技術(shù)易漏檢；而克隆性造血（CHIP）或良性病變（如炎癥性腸?。┛赡軐?dǎo)致假陽性。應(yīng)對策略包括：①優(yōu)化富集技術(shù)（如腫瘤細(xì)胞捕獲、甲基化富集）；②開發(fā)多重生物標(biāo)志物聯(lián)合檢測（突變+甲基化+片段化）；③結(jié)合影像學(xué)、臨床特征綜合判斷，減少單一標(biāo)志物的局限性。241.2檢測標(biāo)準(zhǔn)化問題1.2檢測標(biāo)準(zhǔn)化問題不同實驗室在樣本采集（血漿分離時間、抗凝劑選擇）、文庫構(gòu)建（片段化、建庫方法）、測序平臺（IlluminavsMGI）、生信分析（突變calling算法、背景噪聲過濾）等環(huán)節(jié)存在差異，導(dǎo)致結(jié)果可比性差。例如，同一份血漿樣本在不同實驗室檢測EGFR突變，一致性可能波動在10%-20%。解決路徑包括：建立統(tǒng)一的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)（如參考品驗證、室間質(zhì)評）、推動試劑盒注冊審批（如NMPA、FDA認(rèn)證）、推動多中心臨床研究驗證。251.3成本與可及性1.3成本與可及性NGS-basedctDNA檢測單次費(fèi)用約3000-8000元，多癌種早篩費(fèi)用更高，限制了基層醫(yī)院的應(yīng)用。隨著技術(shù)進(jìn)步（如納米孔測序、微流控芯片）和規(guī)?；a(chǎn)，成本正逐步下降；此外，醫(yī)保政策覆蓋（如部分地區(qū)已將ctMRD檢測納入大病醫(yī)保）可提升患者可及性。262.1循證醫(yī)學(xué)證據(jù)不足2.1循證醫(yī)學(xué)證據(jù)不足盡管ctDNA檢測在多個場景顯示出應(yīng)用潛力，但多數(shù)研究為單中心、回顧性研究，缺乏前瞻性、大樣本隨機(jī)對照試驗（RCT）證據(jù)。例如，ctMRD指導(dǎo)輔助治療雖前景廣闊，但目前僅少數(shù)III期RCT（如Galaxy、DYNAMIC研究）公布陽性結(jié)果，需更多數(shù)據(jù)支持。未來需開展多中心RCT（如NSABPC-14、EORTC1603），明確ctDNA檢測對生存結(jié)局的改善。272.2臨床路徑整合不足2.2臨床路徑整合不足ctDNA檢測尚未完全融入現(xiàn)有診療路徑，部分醫(yī)生對其適應(yīng)癥、結(jié)果解讀存在困惑。例如，ctDNA陰性是否可放棄治療？ctDNA陽性但影像學(xué)穩(wěn)定如何處理？需通過臨床指南更新（如CSCO將ctDNA納入部分癌種診療路徑）、多學(xué)科會診（MDT）模式推廣、醫(yī)生培訓(xùn)等方式，推動ctDNA檢測與臨床決策的深度融合。282.3數(shù)據(jù)安全與倫理問題2.3數(shù)據(jù)安全與倫理問題ctDNA檢測涉及海量基因組數(shù)據(jù)，需保護(hù)患者隱私（如去標(biāo)識化存儲、數(shù)據(jù)加密）；同時，檢測結(jié)果的“不確定性”（如意義未明變異，VUS）可能導(dǎo)致患者焦慮或過度治療。需建立數(shù)據(jù)共享平臺（如全球ctDNA數(shù)據(jù)庫）、制定變異解讀標(biāo)準(zhǔn)（如ACMG指南）、加強(qiáng)醫(yī)患溝通，明確檢測的局限性。293.1技術(shù)革新：更高靈敏與多組學(xué)整合3.1技術(shù)革新：更高靈敏與多組學(xué)整合單分子測序（如PacBio、ONT）、CRISPR-Cas9富集等技術(shù)可進(jìn)一步提升ctDNA檢測靈敏度至10??；結(jié)合轉(zhuǎn)錄組（ctRNA）、蛋白質(zhì)組（循環(huán)腫瘤蛋白）等多組學(xué)數(shù)據(jù)，可實現(xiàn)“分子全景”分析，更精準(zhǔn)地描繪腫瘤特征。例如，ctRNA可反映基因表達(dá)調(diào)控，循環(huán)蛋白（如ctDNA+VEGF）