2026屆重慶康德卷高三生物第一學(xué)期期末達(dá)標(biāo)檢測試題注意事項1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列關(guān)于生命活動調(diào)節(jié)的敘述，正確的有①嚴(yán)重腹瀉后只需補充水分就能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程屬于非條件反射③垂體功能受損的幼犬會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后，就會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正⑤在草原上快速奔跑的狼體內(nèi)，興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上雙向傳導(dǎo)⑥抗生素消滅病菌的過程體現(xiàn)了人體的免疫防衛(wèi)功能⑦記憶細(xì)胞受到同種抗原再次刺激后，細(xì)胞周期變短⑧2、4-D、苯乙酸均為生長素類似物A．一項 B．兩項 C．三項 D．四項2．2018年中國科學(xué)院首次人工創(chuàng)建了自然界不存在的生命——人造單染色體酵母，其與天然酵母細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能相似，但僅含有一條“超級染色體”。下列關(guān)于人造單染色體酵母的敘述正確的是A．沒有以核膜為界的細(xì)胞核 B．遺傳信息儲存在RNA中C．葡萄糖為其直接能源物質(zhì) D．在核糖體中合成蛋白質(zhì)3．“稻田養(yǎng)魚”是利用“魚吃蟲餌、魚糞肥田”的一種養(yǎng)殖模式。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．魚吃蟲餌，蟲餌能量中的10～20%進(jìn)入魚體內(nèi)B．魚糞肥田，魚糞中有機物養(yǎng)料可直接被水稻吸收利用C．害蟲吃水稻，水稻產(chǎn)生的CO2可進(jìn)入害蟲體內(nèi)D．該養(yǎng)殖模式提高了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性4．下列實驗中采用的實驗方法（原理）、實驗步驟及結(jié)果的對應(yīng)錯誤的是（）選項實驗方法（原理）步驟結(jié)果A基因重組R型肺炎雙球菌與S型菌的提取物混合出現(xiàn)了R型菌和S型菌的菌落B同位素標(biāo)記法標(biāo)記人、鼠兩種生物細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)并融合細(xì)胞膜具有流動性C自身對照法將成熟的洋蔥根細(xì)胞浸入高濃度（50%）的紅色蔗糖溶液中細(xì)胞膜內(nèi)出現(xiàn)紅色D標(biāo)志重捕法將已經(jīng)統(tǒng)計數(shù)量且標(biāo)記的小鼠放回原環(huán)境，短時間重捕統(tǒng)計結(jié)果與重捕時間有關(guān)A．A B．B C．C D．D5．MccBl7是一種由大腸桿菌分泌的小分子的毒性肽，其編碼基因位于大腸桿菌的一種質(zhì)粒上，MccB17可通過抑制gyrase酶的作用來阻止其他微生物細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制。下列說法正確的是（）A．MccB17在核糖體上合成后需經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工B．據(jù)題推測可知，McbB17的合成可能受到染色體上基因的調(diào)控C．若在培養(yǎng)液中加入一定濃度的MccB17，則可抑制大腸桿菌的增殖D．gyrase酶基因發(fā)生突變可能會導(dǎo)致細(xì)菌對MccBl7產(chǎn)生抗性6．下列關(guān)于細(xì)胞生命歷程的敘述，錯誤的是（）A．細(xì)胞分化使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率B．衰老的細(xì)胞只發(fā)生形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化，細(xì)胞中的生理狀態(tài)不發(fā)生改變C．細(xì)胞的更新，被病原體感染細(xì)胞的清除，是通過細(xì)胞凋亡完成的，其對于多細(xì)胞生物體穩(wěn)態(tài)的維持具有重要意義D．癌癥是由癌變細(xì)胞惡性增殖和轉(zhuǎn)移引起，與癌細(xì)胞膜成分改變有關(guān)，與基因有關(guān)，與心理狀態(tài)也有一定關(guān)系二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）將人IL-12基因表達(dá)載體導(dǎo)入T細(xì)胞，可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖分化，促進(jìn)淋巴因子分泌，增強效應(yīng)T細(xì)胞的殺瘤活性。回答下列問題：（l）體外采用PCR技術(shù)擴(kuò)增IL-12基因時，依據(jù)的原理是____，該技術(shù)使用Taq酶而不使用細(xì)胞DNA聚合酶的主要原因是____。（2）構(gòu)建的IL-12基因表達(dá)載體的組成有IL-12基因、復(fù)制原點_____（至少答2點）等，將其導(dǎo)入T細(xì)胞常采用的方法是____。（3）檢測IL-12基因在T細(xì)胞中是否翻譯出IL-12蛋白，可采用____，若出現(xiàn)____，則成功翻譯。（4）研究表明：正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達(dá)載體后，抗體的數(shù)量明顯增多。原因是________8．（10分）人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。然而，為心?；颊咦⑸浯髣┝康幕蚬こ蘴-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高。研究證實，將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。（注：下圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒，新霉素為抗生素。）回答下列問題：（1）己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的密碼子為UCU，因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計為____。（2）若t-PA改良基因的粘性末端如圖所示，那么需選用限制酶____和____切開質(zhì)粒pCLY11，才能與t-PA改良基因高效連接，在連接時需要用到___酶。（3）應(yīng)選擇____（能／不能）在加入新霉素的培養(yǎng)基中生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，目的是____。在加入新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞并非都是目的菌株，需選擇呈____色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。（4）以上制造性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程稱為____工程。9．（10分）HIV通過識別T細(xì)胞表面特有的蛋白質(zhì)來侵染T細(xì)胞。2018年11月，有學(xué)者宣布，一對經(jīng)過基因編輯的嬰兒在中國健康誕生，這對嬰兒的一個基因被切除，使其出生后即能抵抗HIV，其使用的是CRISPRCas9基因編輯技術(shù)。下圖為Cas9蛋白依據(jù)sgRNA片段切割DNA示意圖(不同的sgRNA可以識別不同的DNA序列)。請回答下列問題：（1）DNA重組技術(shù)主要用到的工具酶包括DNA連接酶和限制酶，圖中充當(dāng)限制酶的物質(zhì)是_______________。（2）Cas9sgRNA復(fù)合體能夠精準(zhǔn)識別某核苷酸序列的原因可能是______________________________。（3）經(jīng)基因編輯過的嬰兒出生后能夠免遭HIV侵染的直接原因是______________________________。（4）在獲得轉(zhuǎn)基因動物時一般對受精卵進(jìn)行操作，通過顯微注射技術(shù)將含有目的基因的表達(dá)載體直接注入，目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并表達(dá)的過程稱為______________________________。（5）操作后的受精卵需要先在發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)以檢查______________________________。其培養(yǎng)液必須添加血清等天然成分，后經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)一段時間后，再經(jīng)胚胎移植到雌性動物體內(nèi)發(fā)育。移植胚胎能在受體內(nèi)存活的原因是_____________________________________________反應(yīng)。（6）基因編輯技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用前景，如果將西紅柿細(xì)胞中與乙烯合成的相關(guān)基因編輯切除，則這種西紅柿的果實將______________________________，從而獲得耐儲存的西紅柿新品種。10．（10分）下圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進(jìn)行的相關(guān)實驗流程，其中透明圈是微生物在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質(zhì)形成的。圖2、圖3是研究纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。請回答下列問題：（1）本實驗中，選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源，這是因為______。（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為______，并在配制培養(yǎng)基時加入瓊脂作為______。篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株，因為這一指標(biāo)值越大說明_________越強。（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取上述溫度處理的和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，在______℃條件下測定纖維素酶的催化速率，計算______。（4）生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40℃左右，原因是______。11．（15分）布偶貓又稱布拉多爾貓，是貓中體形和體重較大的一種，多為三色貓或雙色貓，是非常理想的家養(yǎng)寵物。已知布偶貓的毛色受多對基因控制，請根據(jù)控制不同顏色基因的特點回答下列相關(guān)問題：（1）布偶貓中有純色個體，野生型為海豹色（B），后來培育出巧克力色（b）、藍(lán)色和丁香色等類型，藍(lán)色、丁香色分別是海豹色、巧克力色的稀釋色，受d基因控制，D基因無稀釋功能。從根本上，巧克力色基因來自_____________________，利用射線處理野生型海豹色個體的受精卵一定能直接獲得巧克力色的個體嗎?并說明原因：______________________________。若將兩只基因型為BbDd的貓進(jìn)行交配，理論上F1個體的表現(xiàn)型及比例為________。如何確定一只藍(lán)色的布偶公貓是純合子還是雜合子?寫出實驗方法并預(yù)測實驗結(jié)果：_________________________________。（2）布偶貓中野生型基因（o）使白色呈現(xiàn)黑色，突變型基因（O）抑制棕色基因的表達(dá)，使白色呈現(xiàn)紅色。①若兩個基因同時存在則為黑紅交錯的雙色貓，且雙色貓均為母貓，不考慮從性遺傳，分析產(chǎn)生的原因是____________________。②當(dāng)白斑基因（S）存在時，對毛發(fā)顏色的分布會造成影響，使雙色貓中同種顏色的毛發(fā)聚為一簇，稱為三花。三花個體也是最受歡迎的類型，三花個體的基因型為__________________，同種基因型的三花貓，同顏色的毛聚集的位置不同，形成的花色多種多樣，原因可能是___________________________。③極少數(shù)的雙色貓和三花貓為公貓，且天生沒有生育能力，產(chǎn)生的原因很可能是__________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

1、大量出汗時，血液主要丟失水分和一部分無機鹽；通常采用喝水和補充無機鹽的方法，來補充血液中丟失的這些成分；嚴(yán)重腹瀉時，人體主要丟失水分，以及一部分無機鹽和葡萄糖等一樣物質(zhì)；通常采用喝水、適量補充無機鹽以及靜脈滴注（或口服）葡萄糖溶液等方法來補充血液中丟失的這些成分。2、人工合成的對植物的生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)稱為植物生長調(diào)節(jié)劑，植物生長調(diào)節(jié)劑具有容易合成原料廣泛，效果穩(wěn)定等優(yōu)點。植物體內(nèi)具有生長素效應(yīng)的物質(zhì)，除IAA外，還有苯乙酸、吲哚丁酸等?！驹斀狻竣賴?yán)重腹瀉后，機體會丟失鹽分，若只補充水分，不能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓，①錯誤；②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程未經(jīng)過完整的反射弧，不屬于非條件反射，②錯誤；③垂體功能受損的幼犬，體內(nèi)會缺乏促甲狀腺激素，導(dǎo)致甲狀腺激素分泌減少，使得代謝減弱，故會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象，③正確；④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后，不一定就會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正，這由神經(jīng)遞質(zhì)的種類決定，④錯誤；⑤興奮在體內(nèi)沿著反射弧單向傳遞，故在草原上快速奔跑的狼體內(nèi)，興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上單向傳導(dǎo)，⑤錯誤；⑥抗生素不是人體免疫系統(tǒng)的產(chǎn)物，故抗生素消滅病菌的過程不能體現(xiàn)人體的免疫防衛(wèi)功能，⑥錯誤；⑦記憶細(xì)胞受到同種抗原再次刺激后，能迅速增殖分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生大量的抗體，故細(xì)胞周期變短，⑦正確；⑧2、4-D屬于人工合成的生長調(diào)節(jié)劑，苯乙酸是植物合成的有生長素效應(yīng)的物質(zhì)，⑧錯誤。故選B。2、D【解析】

原核生物和真核生物的本質(zhì)區(qū)別在于是否有以核膜包被的細(xì)胞核，原核生物和真核生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，常見的真核生物有真菌、植物和動物，據(jù)此作答?！驹斀狻緼、酵母菌屬于真菌，有以核膜為界的細(xì)胞核，A錯誤；B、酵母菌的遺傳信息儲存在DNA中，B錯誤；C、ATP為其直接能源物質(zhì)，C錯誤；D、酵母菌有核糖體，核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，D正確。故選D。3、D【解析】

生產(chǎn)者可利用二氧化碳和水合成有機物，消費者和分解者只能直接利用現(xiàn)成的有機物。生態(tài)系統(tǒng)所具有的保持或恢復(fù)自身結(jié)構(gòu)和功能相對穩(wěn)定的能力叫生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力，是生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的基礎(chǔ)；生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)與功能的協(xié)調(diào)，能提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性；一般生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多，食物網(wǎng)越復(fù)雜，其自我調(diào)節(jié)能力就越強，抵抗力穩(wěn)定性就越強，恢復(fù)力穩(wěn)定性越弱?！驹斀狻緼、10～20%的能量傳遞效率是指魚與害蟲各自所占的兩個營養(yǎng)級同化的能量比值，不是個體之間同化能量的比值，A錯誤；B、魚糞中的有機物不能直接被水稻根部吸收利用，需要經(jīng)過分解者的分解作用才能被水稻利用，B錯誤；C、害蟲為異養(yǎng)生物，不能吸收CO2，C錯誤；D、該養(yǎng)殖模式增加了生物的種類和數(shù)量，增加了生物多樣性，提高了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性，D正確。故選D?！军c睛】本題考查考生對能量傳遞效率、物質(zhì)循環(huán)的形式、抵抗力穩(wěn)定性等知識的理解，意在考查考生對所學(xué)知識的應(yīng)用能力。4、B【解析】

1、基因重組是指在減數(shù)分裂過程中，由于四分體時期同源染色體的非姐妹染色單體的交叉互換或減數(shù)第一次分裂后期非同源染色體上的非等位基因自由組合而發(fā)生基因重組，使后代產(chǎn)生不同于雙親的基因組合。2、放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)運行和變化的規(guī)律，例如噬菌體侵染細(xì)菌的實驗。3、標(biāo)志重捕法是在被調(diào)查種群的生存環(huán)境中捕獲一部分個體將這些個體進(jìn)行標(biāo)志后再放回原來的環(huán)境，經(jīng)過一定期限后進(jìn)行重捕，根據(jù)重捕中標(biāo)志的個體占總捕數(shù)的比例，來估計該種群的數(shù)量，設(shè)該地段種群中個體數(shù)為N，其中標(biāo)志總數(shù)為M，重捕總數(shù)為n，重捕中被標(biāo)志的個體數(shù)為m，則N∶M=n∶m?！驹斀狻緼、R型菌與S型菌的提取物混合，可形成R型菌和S型菌的菌落，這屬于基因重組，A正確；B、利用熒光標(biāo)記法標(biāo)記人、鼠兩種生物細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)并融合，可得出細(xì)胞膜具有流動性，B錯誤；C、利用自身對照的方法，在高濃度的蔗糖溶液中，細(xì)胞失水過快而死亡，細(xì)胞膜失去選擇透過性，內(nèi)部出現(xiàn)紅色，C正確；D、用標(biāo)志重捕法統(tǒng)計小鼠的種群密度時，放回的時間短，小鼠沒有混合均勻，短期內(nèi)再捕會影響統(tǒng)計結(jié)果，D正確。故選B?！军c睛】本題需要考生綜合掌握生物研究過程中的各種方法，易錯點是D選項中標(biāo)志重捕法的注意事項。5、D【解析】

大腸桿菌是原核生物，沒有成型的細(xì)胞核，只有擬核，細(xì)胞質(zhì)中唯一的細(xì)胞器是核糖體。根據(jù)題意MccB17的作用機理是，可通過抑制gyrase酶的作用來阻止其他微生物細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制?！驹斀狻緼、MccB17是一種肽類物質(zhì)，在大腸桿菌的核糖體上合成，細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，A錯誤；B、大腸桿菌細(xì)胞中沒有染色體，B錯誤；C、MccB17是大腸桿菌分泌的，對其他微生物的增殖起抑制作用而不對自身產(chǎn)生抑制，C錯誤；D、gyrase酶基因發(fā)生突變可能會導(dǎo)致gyrase酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使MccB17不能識別gyrase酶，從而使細(xì)菌對MccB17產(chǎn)生抗性，D正確。故選D。6、B【解析】

1.細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動結(jié)束生命的過程，也稱為細(xì)胞編程性死亡。是細(xì)胞和生物體的正常的生命現(xiàn)象，與細(xì)胞壞死不同。2.細(xì)胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程；細(xì)胞分化的特點：普遍性、穩(wěn)定性、不可逆性和不變性；細(xì)胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)；細(xì)胞分化的結(jié)果：細(xì)胞的種類增多，細(xì)胞中細(xì)胞器的種類和數(shù)量發(fā)生改變，細(xì)胞功能趨于專門化。3.衰老細(xì)胞的特征：（1）細(xì)胞內(nèi)水分減少，細(xì)胞萎縮體積變小，但細(xì)胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深。（2）細(xì)胞膜通透性改變，物質(zhì)運輸功能降低。（3）細(xì)胞內(nèi)的色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積，某些酶的活性降低，呼吸速率減慢，新陳代謝減慢。1．細(xì)胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變。癌細(xì)胞的主要特征：無限增殖；細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；細(xì)胞表面發(fā)生變化，細(xì)胞膜上的糖蛋白等減少，細(xì)胞間的黏著性降低，細(xì)胞易擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。【詳解】A、細(xì)胞分化的結(jié)果是產(chǎn)生不同的器官和組織，從而使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率，A正確；B、衰老的細(xì)胞不只發(fā)生形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化，而且細(xì)胞中的生理狀態(tài)也發(fā)生改變，B錯誤；C、細(xì)胞的自然更新，被病原體感染細(xì)胞的清除，是通過細(xì)胞凋亡完成的，其對于多細(xì)胞生物體穩(wěn)態(tài)的維持具有重要意義，C正確；D、癌變與癌細(xì)胞膜成分改變有關(guān)，與基因有關(guān)，與心理狀態(tài)也有一定關(guān)系，癌變的發(fā)生與諸多因素有關(guān)，但其本質(zhì)是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變所致，最終發(fā)生的癌癥是由癌變細(xì)胞惡性增殖和轉(zhuǎn)移引起，D正確。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、DNA（雙鏈）復(fù)制Taq酶熱穩(wěn)定性高，而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會失活啟動子、終止子、標(biāo)記基因顯微注射法抗原一抗體雜交雜交帶正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL–12基因表達(dá)載體后，T細(xì)胞分泌淋巴因子增多，促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強，從而產(chǎn)生更多的抗體【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）PCR擴(kuò)增目的基因利用的是DNA雙鏈復(fù)制的原理，該過程利用的Taq酶熱穩(wěn)定性高，而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會失活。（2）基因表達(dá)載體的組成有l(wèi)L–12基因、復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等，將其導(dǎo)入T細(xì)胞等動物細(xì)胞常采用的方法是顯微注射法。（3）檢測IL–12基因是否導(dǎo)入、轉(zhuǎn)錄和翻譯分別用DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)，若出現(xiàn)雜交帶，則說明翻譯成功。（4）正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL–12基因表達(dá)載體后，促進(jìn)T細(xì)胞分泌淋巴因子，而淋巴因子分泌增加，促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強，從而產(chǎn)生更多的抗體?！军c睛】本題考查基因工程和PCR過程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。8、AGAXmɑⅠBglⅡDNA連接酶不能以便篩選出導(dǎo)入質(zhì)粒pCLY1I的大腸桿菌白蛋白質(zhì)【解析】

基因工程的基本操作步驟：獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斀狻浚?）根據(jù)堿基互補配對的原則，絲氨酸的密碼子為UCU，則其編碼序列為TCT，所以模板鏈的堿基序列為AGA。（2）若要質(zhì)粒pCLY11與t-PA突變基因高效連接，需質(zhì)粒和突變基因切割后產(chǎn)生黏性末端能堿基互補配對，t-PA突變基因切割后的黏性末端分別為：-GGCC和-CTAG，故質(zhì)粒pCLY11需要用XmaI和Bg/II切割，連接時需要應(yīng)DNA連接酶。（3）由于質(zhì)粒上以新霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，所以選擇不能再加入新霉素的培養(yǎng)基中生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，以便篩選出導(dǎo)入質(zhì)粒pCLY1I的大腸桿菌。重組質(zhì)粒的mlacZ序列被破壞，表達(dá)產(chǎn)物使細(xì)胞呈白色，故在加入新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞需選擇呈白色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。（4）通過對基因的改造實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的改造，稱為蛋白質(zhì)工程?！军c睛】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的知識，識記基因工程和蛋白質(zhì)工程的操作步驟，難點是對運載體結(jié)構(gòu)的分析，9、Cas9-sgRNA復(fù)合體sgRNA能與特定的DNA片段發(fā)生堿基互補配對T細(xì)胞表面缺少被HIV識別的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化受精狀況和發(fā)育能力子宮對外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥不能成熟【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）DNA重組技術(shù)主要用到的工具酶包括DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），圖中Cas9-sgRNA復(fù)合體可以充當(dāng)限制酶。（2）Cas9-sgRNA復(fù)合體能夠精確識別某核苷酸序列的原因可能是sgRNA能與特定的DNA片段發(fā)生堿基互補配對。（3）經(jīng)基因編輯過的嬰兒T細(xì)胞表面缺少被HIV識別的蛋白質(zhì)，所以出生后能夠免遭HIV侵染。（4）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。（5）操作后的受精卵要先在發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)以檢查受精狀況和發(fā)育能力；移植胚胎能在受體內(nèi)存活的原因是子宮對外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。（6）乙烯具有促進(jìn)果實成熟的作用；如果將西紅柿細(xì)胞中與乙烯合成相關(guān)基因編輯切除，則這種西紅柿不能合成乙烯，其果實將不能成熟，從而獲得耐儲存的西紅柿新品種?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題。10、蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌唯一碳源凝固劑單體菌體產(chǎn)生的纖維素酶活性50酶活性殘留率該溫度下，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時間持久，且酶活性相對較高【解析】

分解纖維素的微生物的分離：

（1）實驗原理：

①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

（2）實驗過程：

土壤取樣：采集土樣時，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境；

梯度稀釋：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度；

涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上；

挑選產(chǎn)生中心透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈，從產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細(xì)菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在30～37℃條件下培養(yǎng)，可獲得較純的菌種?！驹斀狻浚?）由于蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌，故選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源。

（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源；并在配制培養(yǎng)基時加入瓊脂作為凝固劑；應(yīng)篩選時應(yīng)選擇透明圈較大的菌株，因為這一指標(biāo)值越大說明單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強。

（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取