消毒液空氣及物表采樣標(biāo)準(zhǔn)操作流程在消毒效果評價、感染防控監(jiān)測等工作中，空氣及物體表面（簡稱“物表”）的采樣檢測是評估消毒措施有效性的核心環(huán)節(jié)?？茖W(xué)規(guī)范的采樣流程能確保檢測結(jié)果真實反映消毒后環(huán)境的微生物污染水平，為感控決策提供可靠依據(jù)。本文結(jié)合《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB____）及相關(guān)行業(yè)規(guī)范，梳理消毒液作用后空氣與物表采樣的標(biāo)準(zhǔn)操作流程，供疾控、醫(yī)療機構(gòu)及相關(guān)檢測單位參考。一、空氣采樣操作流程（一）采樣前準(zhǔn)備1.環(huán)境要求：消毒后按要求通風(fēng)或靜置（如空氣消毒機消毒后需關(guān)閉設(shè)備并靜置30分鐘，化學(xué)噴霧消毒后需待消毒劑自然揮發(fā)至規(guī)定時間）。采樣時環(huán)境溫度宜保持18-25℃、相對濕度40%-60%，避免人員走動、開門窗等干擾。2.器材準(zhǔn)備：根據(jù)采樣場景選擇方法，常用自然沉降法（適用于一般環(huán)境）或撞擊法（適用于潔凈環(huán)境或定量分析）。自然沉降法：準(zhǔn)備直徑9cm的營養(yǎng)瓊脂平板（提前滅菌、在效期內(nèi)）、平板架、記號筆、火焰滅菌裝置、無菌采樣記錄單。撞擊法：需空氣微生物采樣器（如安德森采樣器、浮游菌采樣器）、配套滅菌采樣頭、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（采樣器需提前校準(zhǔn)流量）。（二）采樣操作1.自然沉降法布點原則：房間≤30㎡設(shè)3點（對角線/梅花形分布），＞30㎡每增10㎡加1點（最多5點）。采樣點距墻≥1m、距地面0.8-1.5m（與呼吸帶高度一致），避開空調(diào)風(fēng)口等氣流干擾處。操作步驟：1.打開營養(yǎng)瓊脂平板，使培養(yǎng)基表面暴露于空氣中，同步記錄暴露時間（通常為5分鐘，特殊場景按標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整）。2.暴露結(jié)束后，無菌操作合上平板蓋，在平板底部標(biāo)記采樣點、時間、環(huán)境信息。3.將平板倒置，放入帶溫控的采樣箱，盡快送實驗室培養(yǎng)（若無法立即送檢，需4℃冷藏且不超過2小時）。2.撞擊法布點原則：同自然沉降法，或按潔凈室分級標(biāo)準(zhǔn)布點（如ISO8級潔凈區(qū)每20㎡設(shè)1點）。操作步驟：1.安裝滅菌采樣頭，開機預(yù)熱采樣器，校準(zhǔn)流量（如安德森采樣器流量28.3L/min，浮游菌采樣器按說明書調(diào)整）。2.將采樣頭置于0.8-1.5m高度，開啟采樣，時間根據(jù)污染水平設(shè)定（潔凈區(qū)1-5分鐘，污染區(qū)可縮短至0.5分鐘，確保微生物數(shù)量可計數(shù)）。3.采樣結(jié)束后，關(guān)閉采樣器，取出采樣頭（或直接封存含培養(yǎng)基的采樣頭），標(biāo)記信息后送檢。二、物表采樣操作流程（一）采樣前準(zhǔn)備1.環(huán)境與時機：消毒后按規(guī)定時間采樣（如含氯消毒劑作用30分鐘后、醇類消毒劑作用10分鐘后），采樣時環(huán)境清潔干燥，無殘留消毒劑飛濺風(fēng)險。2.器材準(zhǔn)備：無菌棉拭子（含3ml無菌洗脫液的采樣管）、無菌規(guī)格板（10cm×10cm，或按標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整面積）、記號筆、火焰滅菌裝置、無菌手套、采樣記錄單。（二）采樣操作1.規(guī)則物體表面（如桌面、器械表面）布點原則：物表面積≤100cm2設(shè)1點，≥200cm2設(shè)2點（對角分布），優(yōu)先選擇人員接觸頻繁區(qū)域（如門把手、操作臺面）。操作步驟：1.戴無菌手套，取出棉拭子，將前端浸入采樣管洗脫液中浸濕（避免過度擠壓，保留液量）。2.以規(guī)格板為輔助，用棉拭子在規(guī)格板內(nèi)的物表上“之”字形往返涂抹（橫豎各6次，覆蓋整個規(guī)格板面積），同時轉(zhuǎn)動棉拭子確保采樣充分。3.若物表面積＞100cm2，更換棉拭子（或重新浸濕），在相鄰區(qū)域重復(fù)涂抹，直至覆蓋所有采樣點。4.將棉拭子放入原采樣管（或?qū)?yīng)編號管），折斷棉拭子桿（管外部分≤2cm），旋緊管蓋，標(biāo)記采樣點、物表類型、時間等信息。2.不規(guī)則物體表面（如水龍頭、按鈕、儀器表面）操作步驟：1.若無規(guī)格板，直接用棉拭子在物體表面（面積≤100cm2）全表面涂抹，方式同規(guī)則表面，確保無遺漏。2.若物體有凹陷、縫隙，需用棉拭子重點擦拭，保證采樣充分。3.后續(xù)處理同規(guī)則表面，將棉拭子放入采樣管，標(biāo)記信息后送檢。三、采樣后質(zhì)量控制與注意事項（一）樣本運輸與保存空氣采樣平板：倒置存放于2-8℃冷藏箱，2小時內(nèi)送實驗室，4小時內(nèi)完成培養(yǎng)（撞擊法采樣頭/平板需保持無菌，避免顛簸污染）。物表采樣管：常溫（20-25℃）運輸，6小時內(nèi)送檢；若超6小時，需4℃冷藏，24小時內(nèi)檢測。（二）質(zhì)量控制要點1.空白對照：每批次采樣需設(shè)空白對照（空氣采樣：暴露未采樣的平板；物表采樣：用未接觸物表的棉拭子直接放入采樣管），檢測時同步培養(yǎng)，排除器材或環(huán)境污染。2.重復(fù)采樣：關(guān)鍵區(qū)域（如手術(shù)室、ICU）建議重復(fù)采樣（同一點或相鄰點），取平均值減少誤差。3.器材滅菌驗證：采樣前確認(rèn)平板、棉拭子、采樣管等的滅菌有效性（查看滅菌標(biāo)識、批次檢測報告）。（三）人員防護與操作規(guī)范采樣人員需穿工作服、戴口罩、無菌手套，避免自身微生物污染樣本。操作中嚴(yán)格無菌操作，火焰滅菌時注意安全，避免灼傷或引燃易燃物。采樣后及時消毒采樣區(qū)域（如75%乙醇擦拭臺面），廢棄棉拭子、平板按感染性廢物處置。四、結(jié)果解讀與應(yīng)用采樣后的培養(yǎng)、計數(shù)需按《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB____）或相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行（如空氣自然沉降法以平板菌落數(shù)CFU/皿評價，物表以CFU/cm2評價）。若結(jié)果超標(biāo)準(zhǔn)限值，需回溯消毒流程（如消毒劑濃度、作用時間、覆蓋范圍），調(diào)整方案后重新采樣驗證。結(jié)語：規(guī)范的空氣及物表采樣是消毒效