35Codeofpracticefortissue-culturedseedlingsofCorymbiatorellianaI 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 7 8 9本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件起草單位：漳州市林業(yè)科學研究所、福建省林業(yè)科學研究院、漳州市林木種苗本文件確定了托里桉組培育苗技術流程，規(guī)定了托里托里桉組培育苗的培養(yǎng)基配制和處理、外植體材積和處理、誘導培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗、洗苗和移栽、苗期管理和檔案管理的技術要求，以及上述階段之間的轉換條件，描述了標記、過程記錄等追溯方法。本文件適用于托里桉組培育苗。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T23473林業(yè)植物及其產品調運檢疫規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程LY/T2289林木種苗生產經營檔案DB35/T805桉樹造林苗木質量3術語和定義LY/T1882界定的以及下列術語和定義適用于本文件。原產澳大利亞，又名毛葉桉、澳洲梧桐，桃金娘科傘房屬常綠喬木樹種。4技術流程托里桉組培技術流程見圖1。外植體采集和處理(見第6章)(見第7章)苗期管理(見第12章)(見第8章)洗苗和移栽(見第11章)(見第5章)生根培養(yǎng)(見第9章)(見第10章)圖1托里桉組培育苗技術流程圖25.1培養(yǎng)基配制5.1.2.1誘導培養(yǎng)基1MS改良培養(yǎng)基+L-半胱氨酸5mg/L+KI0.83mg/L+核黃素4mg/L+6-BA(6-芐氨基嘌呤)0.5mg/L+NAA(1-萘乙酸)0.35mg/L+卡拉膠6000mg/L+白糖30000mg/L。5.1.2.2誘導培養(yǎng)基2MS改良培養(yǎng)基+L-半胱氨酸5mg/L+KI0.83mg/L+核黃素4mg/L+6-BA0.45mg/L+NAA0.35mg/L+卡拉膠6000mg/L+白糖30000mg/L。MS改良培養(yǎng)基+L-半胱氨酸6mg/L+KI0.83mg/L+核黃素4.8mg/L+6-BA0.4mg/L+NAA0.3mg/LMS改良培養(yǎng)基+L-半胱氨酸1mg/L+IBA1mg/L+ABT1號生根粉0.4mg/L+VB19.6mg/L+活性炭粉0.05g/L+卡拉膠7000mg/L+白糖20000mg/L。將配制完成的培養(yǎng)基均勻分裝到培養(yǎng)容器內，加蓋封口，做好標記和記錄。高壓蒸汽滅菌器濕熱滅菌，蒸汽壓力0.105MPa,溫度120℃~122℃,時間20min～22min。培養(yǎng)基滅菌后轉移到潔凈、平整、干燥的環(huán)境中自然冷卻至3記錄采集信息，見附錄B。外植體被采集后，立即進行保濕處理，置冷藏取樣箱保存，及時送至實驗室處理。100g/L～200g/L洗衣粉溶液浸泡15min~30min,邊浸泡邊用毛筆刷洗，再用清水洗凈，備用。在超凈工作臺上，將清洗后的莖段用無菌水浸泡1min,瀝干水分；用2.6%次氯酸鈉溶液浸沒外植體材料，并滴入吐溫-20(溶液中吐溫-20濃度1mL/L～2.5mL/L),搖晃7min~10min;用無菌水浸泡將消毒后莖段置于超凈臺無菌的中性濾紙上，用刀片切成1cm～2cm長的莖段，每個莖段至少保留1個芽點，每瓶培養(yǎng)基接入1個莖段。先接入誘導培養(yǎng)基1中培養(yǎng)10d～15d,再接入誘導培養(yǎng)基2中培養(yǎng)無菌培養(yǎng)室溫度25℃~28℃,每次接種后，先在200Lx～300Lx弱光環(huán)境培養(yǎng)5d～7d,再在1000Lx～2000Lx強光環(huán)境繼續(xù)培養(yǎng)，每天光照8h～12h。無菌培養(yǎng)室溫度25℃~28℃,光照強度2000Lx～3000Lx,每天光照10h～12h。培養(yǎng)基，深度為莖芽長度的1/3,莖芽間距1cm～1.5cm。記錄生根培養(yǎng)信息，見附錄D。49.2培養(yǎng)無菌培養(yǎng)室溫度25℃~28℃,先在200Lx～300Lx的弱光環(huán)境下培養(yǎng)7d~8d直至長出側根，再在將生根瓶苗轉入遮陰度為70%～80%的煉苗大棚中培養(yǎng)10d～12d,至苗高3.5cm~4.0cm。當煉苗大棚溫度高于40℃時，及時通風降溫?；|為紅心土，營養(yǎng)袋直徑≥3.5cm,高度≥6cm,用0.1%～0.3%高錳酸鉀溶液澆透基質消毒，苗木移栽后，早晚各澆水1次，保持葉面濕潤，基質田間持水量宜在60%～70%、遮陰度70%～80%、濕度80%～90%、溫度15℃~28℃。苗木成活后減少每次澆水量。每7d～10d噴施N-P?O?-K?0=15:15:15復合肥0.2%～0.5%水溶液1次，夏季施肥宜在早晨或傍晚，出圃前30d停止施肥并減少澆水量。移栽后，每7d～10d噴1次殺菌液防病，殺菌液可選擇50%多菌靈600～800倍液、70%甲基托布津700～900倍液等；蟲害治理宜用4.5%氯氰菊酯1500～3000倍液或90%敵百蟲晶體1000倍稀釋液等噴檢疫應符合GB/T23473的規(guī)定。出圃苗木高度不低于20cm,苗木質量應符合DB35/T805的規(guī)定。5MS基礎培養(yǎng)基成分