Y染色體微缺失遺傳篩查專家建議(2025年)摘要要。2023年歐洲男科學學會/歐洲分子遺傳學質量網(wǎng)絡對Y染色體篩行業(yè)標準(YY/T1893-2023),Y染色體療建議。礙最小的染色體，包含6000多萬個堿基對，編碼約1得益于二代測序(next-generationsequencing,NGS)技術和基因組組裝算法的巨大進步，人類首個完整的Y染色體端粒-端粒序列組裝，直至2022年終于完成[2-4]。Y染色體主要包括兩個部分：男性特異性區(qū)域(male-specificregionoftheYchromosome,MSY)和擬常染色體區(qū)(pseudoautosomalregions,PARs)。MSY結構極Tiepolo等[6]研究顯示無精子癥患者存在Yq11缺失，命名為無精子癥因子(azoospermiafactor,AZF)區(qū)域。一項研究顯示，在普通人群中，每2320名男性中就有1名存在Y染色體AZFc完全缺失，而在精子發(fā)生障礙人群可以上升到大約6%[7]?！?016年中國男科疾病診療指南》發(fā)布中國第一版的Y染色體微缺失篩查指南[8]。2017年中國Y染色體微缺失質控聯(lián)盟(YqAZFmicrodeletionexternalqualityassessment,YEQA)成立。2022進一步推動國內Y染色體微缺失篩查的規(guī)范與質控[9]。歐洲男科Andrology/EuropeanMolecularGeneticsQualityNetwork,EAA/EMQN)2023年發(fā)布了新指南，在2003年和2014年版本的基礎上做出多項更新，為我們提供重要的參考與借鑒[10]。在我國出生療建議。類序列：X染色體退化序列、X染色體轉移序列和擴增序列[3]。擴增序列主要包含9個睪丸特異性或富集表達的蛋白質編碼基因家族，基因家族內部存在高度重復序列，其序列一致性超過99.9%,這些重這些擴增子之間可發(fā)生基因轉換及非等位同源重組(non-allelic失主要原因[3,11]。早期研究將AZF區(qū)域分為AZFa、AZFb、AZFc并且發(fā)現(xiàn)了一些新的缺失模式[12-13](圖1)。AZF缺失分為經(jīng)典其次是AZFa完全缺失(0.5%~9%)、AZFb完全缺失(1%~7%)和AZFbc完全缺失(1%~20%)。sY134AZFaAZFbP3 AZFb(P5/proximalP1) AZFbc(P5/distalPI AZFbc(P4/distalPI) 注：AZF示無精子癥因子圖1Y染色體微缺失示意圖毒(humanendogenousretrovirus,HERV)的2個亞型HERVyq1和精子癥[17]。導致包括32個轉錄單位在內的6.2Mb區(qū)域的完全缺失，也稱為P5/僅有個別病例報道，可能與回文序列P5和P3之間的NAHR有關，但并不能解釋所有病例，其發(fā)生機制仍需要進一步研究[18]。AZFc較為廣泛的一種，gr/gr缺失可以造成AZFc區(qū)域近一半基因丟失[3,13],但并非是我國精子發(fā)生障礙患者的發(fā)病原因，其在正常捐針對Y染色體特定區(qū)域序列標簽位點(sequence-taggedsite,STS) [20]。目前常規(guī)檢測有多重實時熒光PCR法、多重PCR-電泳法、 (multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA)和NGS等[21-24]。有研究表明NGS可提拓展位點檢測用于6個STS位點PCR法篩查發(fā)現(xiàn)缺失后，進一步以及AZFc缺失范圍是否延伸到Y染色體長臂末端異染色質區(qū)域。拓拓展檢測明確為AZFa、AZFb、AZFbc部分缺失，則有一定機會獲取到斷有沒有Y染色體長臂末端缺失，末端缺失(sY160拓展位點缺失)可能與(45,X/46,XY)嵌合染色體核型有關，提示睪丸顯微取精 sY84和sY86缺失，建議檢測拓展位點。AZFa上游sY82(存在),AZFa近端邊界sY1064(缺失),AZFa遠端邊界sY1065或sY1182(缺失),AZFa下游sY88(存在),以上結果方可明確為AZFa全部缺失，如果僅檢測到sY84或sY86單個位點缺失(應首先排除擴增失敗),細研究[10]。進一步確定缺失范圍，以明確對精子發(fā)生可能造成的2.AZFb缺失的檢測：sY127和sY134分別位于AZFb區(qū)域的中間和遠端。這兩個位點均缺失，提示AZFb完全缺失[18]。但為了更近端邊界sY121和sY1224(缺失),遠端邊界sY1192(缺失),下游位點sY153(存在),則可明確診斷為AZFb完全缺失，否則提示sY1192等效[26]。但最新版共識認為，sY1192(而非sY143)對micro-TESE獲取精子成功率更有預測價值[27],故推薦拓展位點選擇sY1192。缺失，sY160存在)和末端缺失(sY160缺失)。提示P5/P1遠端缺失，該位點檢測結果有一定的臨床診斷價值[30-31]。建議AZFbc缺失時進行異染色質位點sY160檢測，以確定是否存在末端缺失。5.AZFabc缺失的檢測：多重實時熒光PCR法發(fā)現(xiàn)sY84、sY86、AZFc三個區(qū)域均缺失，建議加做染色體核型分析?？赡艽嬖赮染色體結構異常(等臂單/雙著絲粒Y染色體)或染色體核型為46,XX或45,X/46,XX嵌合。如果內參SRY同時缺失，要排除是否做過骨髓移植，如果是骨髓移植患者，推薦取口腔黏膜細胞行Y染色體微缺失檢測。6.AZFd微缺失的檢測：不建議常規(guī)篩查sY114和sY152位點，因為兩者定位于染色體上多個基因組區(qū)域中。sY152定位于DAZ基因，類似于sY255和sY254位點。根據(jù)sY152定義不存在，不建議進行AZFd區(qū)域的微缺失檢測[10]。7.gr/gr缺失的檢測：檢測sY1291和sY1191這兩個位點可區(qū)分是否存在gr/gr缺失，sY1291缺失而sY1191存在提示gr/gr缺失[32]?；跉W洲人群研究顯示gr/gr缺失是生殖障礙的風險因素，近些年有研究認為gr/gr缺失可能是睪丸生殖細胞腫瘤的風險因素[32]。但在我國男性中，gr/gr缺失普遍存在并且對精子發(fā)生一般無顯著影響，故不推薦gr/gr缺失作為國內Y染色體微缺失的常規(guī)檢測[33]。類似地，在中國人群中，未發(fā)現(xiàn)b2/b3及b1/b3等缺失模型與精子發(fā)生障礙的確切關系，因此，同樣不推薦將其納入國內Y染色體微缺失的近些年出現(xiàn)的第三代DNA測序技術(也稱為長讀長測序),是一失模式對應不同的精液參數(shù)表型和睪丸顯微取精獲精情況(表1)。故Y染色體微缺失篩查對男性不育的病因學診斷和治療具有指導意因診斷，還可評估獲精率[10,33]。不推薦對先天性雙側輸精管缺如、梗阻性無精子癥(排除卵泡刺激素高于正常限值)和低促性腺激現(xiàn)一定頻率的Y染色體微缺失[34]。表1AZF不同缺失類型的精液表型和睪丸顯微含2對引物，建議采取多重PCR技術，常規(guī)檢測時必須設內對照以控制實驗質量。設置兩個內對照基因，分別是性別決定基因 陰性對照(女性DNA)和空白對照(水)[10,33]。2.外部質量評價：中國YEQA自2017年成立以來，每年會向參與位在規(guī)定時間內完成樣本檢測并上報結果。2017年至2019年參與基因型檢測得分逐年遞增，從2017年的(26.54±5.04)分，上升到2019年的(28.38±2.91)分[9]。YEQA同時推動了Y染色體微缺計劃。臨床診斷、檢測方法、實驗結果和實驗室名稱等。6個STS位點、陰性對照、陽性對照檢測結果應該描述為“存在