2026年試驗動物上崗證考試題庫及答案一、法律法規(guī)與倫理規(guī)范1.【單選】根據(jù)《實驗動物管理條例》（2017修訂），下列哪一項行為屬于“嚴重違法”并可直接吊銷許可證？A.將實驗用犬用于教學演示未備案B.超量繁殖裸鼠導致籠位密度超標20%C.偽造實驗動物質量合格證明并向外單位銷售D.未在屏障環(huán)境內穿戴無菌服操作小鼠答案：C解析：條例第二十八條明確“偽造、變造、買賣實驗動物合格證明”屬嚴重違法，直接吊銷許可證并處以貨值金額5–10倍罰款；其余選項屬一般違規(guī)，限期整改并罰款。2.【單選】2021年《中華人民共和國生物安全法》實施后，對實驗動物引進境外遺傳資源提出新的審批要求，下列哪項描述正確？A.僅需農業(yè)農村部審批B.由科技部實驗動物管理辦公室與海關總署聯(lián)合審批C.由省級科技廳審批后報科技部備案D.由海關口岸檢疫合格后直接引進答案：B解析：生物安全法第三十六條、四十二條將“境外實驗動物遺傳資源”納入高風險生物材料，須科技部實驗動物管理辦公室出具行政許可，海關總署憑許可辦理檢疫通關。3.【多選】關于“3R”原則，下列哪些做法符合“Reduction”精神？A.利用歷史對照數(shù)據(jù)減少空白對照組數(shù)量B.采用轉基因疾病模型替代部分藥物毒理實驗C.通過統(tǒng)計軟件進行樣本量預估，避免過度采樣D.同一批小鼠采血后實施安樂死，組織共享給不同課題組答案：A、C、D解析：Reduction指“減少使用數(shù)量”；B屬于Replacement（替代）。A、C、D均通過實驗設計或共享減少動物用量。4.【判斷】實驗動物倫理審查表只需在課題開始前提交一次，研究過程中若實驗方案微調可不再報審。答案：錯誤解析：《實驗動物福利倫理審查指南》（GB/T358922018）5.6.2規(guī)定，任何可能影響動物福利的方案調整須重新報倫理委員會審批并留存記錄。5.【案例分析】某高校從事實驗性脊髓損傷研究，需對120只SD大鼠施行T10段脊髓撞擊。課題組擬采用水合氯醛腹腔麻醉，術后不提供鎮(zhèn)痛。倫理委員會應如何裁決？答案：不予通過，要求修改麻醉與鎮(zhèn)痛方案。解析：水合氯醛已被《獸醫(yī)麻醉鎮(zhèn)痛指南》列為“不推薦”，因其鎮(zhèn)痛效果差且易致腹膜炎；脊髓損傷屬中重度疼痛模型，術后須給予丁丙諾啡等阿片類鎮(zhèn)痛藥，否則違反GB/T358922018“疼痛分級管理”條款。二、實驗動物遺傳與育種6.【單選】C57BL/6JGpt小鼠與C57BL/6NCrl小鼠在基因組水平上的主要差異是：A.第8號染色體發(fā)現(xiàn)Gpt基因敲入片段B.線粒體基因組來源不同C.第11號染色體存在Nnt基因缺失/野生型差異D.微衛(wèi)星位點D1Mit296的CAG重復數(shù)不同答案：C解析：C57BL/6J亞系因Nnt（煙酰胺核苷酸轉氫酶）基因缺失導致胰島素分泌異常；C57BL/6N為野生型，兩者差異已被Jackson實驗室SNP數(shù)據(jù)庫確認。7.【單選】下列哪種交配方式可在最短時間內獲得最大同質性近交系？A.兄妹交配連續(xù)20代B.親子交配連續(xù)15代C.兄妹交配連續(xù)40代D.半兄妹交配連續(xù)25代答案：C解析：兄妹交配（brother–sistermating）每代近交系數(shù)增量為19.1%，40代后近交系數(shù)>0.999，達到理論上完全同質；親子交配雖快但易導致繁殖障礙，不被推薦。8.【多選】導致封閉群（outbred）實驗動物遺傳漂變加劇的因素包括：A.每代繁殖對數(shù)少于25對B.連續(xù)5代不引入外源血緣C.非隨機交配D.每代實行嚴格兄妹交配答案：A、B、C解析：封閉群需保持Ne（有效群體大?。?00，少于25對會使Ne驟降；隨機交配是維持遺傳多樣性的核心；D項屬于近交，會迅速固化基因型，與封閉群管理目標相反。9.【計算】某封閉群SD大鼠群體有效大小Ne=48，預測10代后近交系數(shù)增量ΔF為多少？答案：ΔF=1/(2Ne)×10=10/96≈0.1042，即10.4%解析：按Wright公式ΔF=1/(2Ne)每代計算，10代累積。10.【問答】簡述CRISPR/Cas9技術制備基因敲除小鼠時，如何降低“脫靶”風險并提高遺傳穩(wěn)定性。答案：1)設計階段：利用CasOFFinder、CRISPOR等算法篩選脫靶潛力最低的sgRNA，選擇SpCas9HF1或eSpCas9等高保真變體；2)體外驗證：對潛在脫靶位點進行T7E1或深度測序，確認無>1%的突變；3)注射濃度優(yōu)化：降低Cas9mRNA與sgRNA注射劑量至25ng/μL以下；4)繁育策略：首建鼠（F0）與野生型回交至少兩代，剔除非目標突變；5)建立同系：選用C57BL/6J背景胚胎干細胞或受精卵，減少背景噪聲；6)長期保存：采用精子冷凍+體外受精方式，避免飼養(yǎng)過程累積新突變。三、實驗動物微生物與寄生蟲控制11.【單選】根據(jù)GB14922.22018，對SPF級小鼠必須檢測且“零容忍”的病毒是：A.小鼠肝炎病毒（MHV）B.小鼠諾如病毒（MNV）C.小鼠細小病毒（MPV）D.淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV）答案：D解析：LCMV對人具嚴重人畜共患風險，SPF級檢測表中列為“0陽性”；其余病毒允許低比例血清學陽性。12.【單選】哨兵鼠最佳“臟墊料接觸”時間應為：A.3天B.7天C.14天D.28天答案：C解析：14天足以讓哨兵鼠暴露并產生抗體，同時避免過度應激；短于7天可能漏檢低滴度感染，超過21天則增加成本。13.【多選】可導致免疫缺陷鼠“免疫漏”現(xiàn)象的病原體有：A.鼠棒狀桿菌（C.bovis）B.金黃色葡萄球菌C.綠膿桿菌D.肺支原體答案：A、C解析：C.bovis可在裸鼠體內大量繁殖，引發(fā)皮膚結痂并激活NK細胞，干擾腫瘤移植；綠膿桿菌易在免疫缺陷鼠引發(fā)暴發(fā)性敗血癥，導致實驗提前終止。14.【判斷】采用隔離器（isolator）飼養(yǎng)的GF級小鼠，可在打開隔離器艙門瞬間降為SPF級。答案：正確解析：GF（無菌）定義即體內外檢測不到任何生命體；一旦環(huán)境暴露即符合SPF定義（允許非致病共生菌），但需重新檢測認證。15.【案例】某單位SPF級房間檢出MouseParvovirus（MPV）陽性率5%，請給出三步根除策略。答案：1)暫停繁殖與實驗，封閉房間；對所有動物進行尾尖采血，PCR篩查陽性個體，淘汰陽性鼠；2)徹底消毒：用過氧乙酸0.2%+過氧化氫1%對籠架、墻面、天花板噴霧，維持30min；HEPA過濾器全部更換；3)重新引種：引入經(jīng)胚胎移植凈化的陰性鼠，連續(xù)兩代哨兵鼠檢測陰性后方可恢復生產。四、環(huán)境與設施管理16.【單選】按GB149252010，屏障環(huán)境小鼠飼養(yǎng)室最小換氣次數(shù)應達到：A.10次/hB.15次/hC.20次/hD.25次/h答案：B解析：標準5.3.2規(guī)定屏障環(huán)境≥15次/h，隔離器≥20次/h。17.【單選】壓差梯度設計為：清潔走廊>飼養(yǎng)間>污染走廊，其理論依據(jù)是：A.降低熱負荷B.防止交叉污染C.減少噪音D.節(jié)能答案：B解析：定向氣流確保微生物與塵埃粒子由清潔區(qū)向污染區(qū)單向移動，避免逆向污染。18.【多選】下列哪些指標屬于IVC系統(tǒng)日常監(jiān)測的“關鍵極限值”（CriticalLimit）？A.籠盒內氨濃度≤25ppmB.籠盒內換氣次數(shù)≥60次/hC.籠盒內相對濕度40–70%D.籠盒內CO?≤1500ppm答案：A、B、C解析：CO?在籠盒內通常<5000ppm才影響小鼠，1500ppm非關鍵極限；氨、換氣、濕度直接關聯(lián)動物福利與實驗結果。19.【計算】一間面積40m2、凈高2.8m的小鼠屏障飼養(yǎng)室，設計飼養(yǎng)量800只成年小鼠（20g/只），按GB149252010計算最小通風量。答案：總發(fā)熱量Q=800×0.02kg×0.85W/只=13.6kJ/s空氣比熱容c=1.2kJ/(kg·℃)，空氣密度ρ=1.2kg/m3，允許溫升ΔT=2℃由Q=ρ·V·c·ΔT得V=Q/(ρ·c·ΔT)=13.6/(1.2×1.2×2)=4.72m3/s=16992m3/h換氣次數(shù)n=V/體積=16992/(40×2.8)=151.7次/h結論：需設計換氣次數(shù)≥152次/h，遠超標準15次/h，故應按動物熱負荷校核，而非僅滿足最低換氣次數(shù)。20.【問答】簡述“微環(huán)境”與“宏環(huán)境”概念及其對實驗結果的影響。答案：宏環(huán)境指房間級別的溫度、濕度、照度、噪聲；微環(huán)境指籠盒內的實際氨濃度、CO?、墊料濕度、粉塵。微環(huán)境往往比宏環(huán)境更惡劣，例如宏環(huán)境22℃時，IVC籠盒內可因高密度升至26℃，氨升至40ppm，導致小鼠應激、皮質酮升高，影響藥效學數(shù)據(jù)。研究需同步記錄微環(huán)境參數(shù)，必要時采用墊料更換、降低密度、增加換氣等措施。五、營養(yǎng)與飼料21.【單選】AIN93G標準飼料與AIN76A相比，主要改進是：A.提高蛋白質至30%B.用大豆油完全替代玉米油C.添加0.001%硒酵母D.降低蔗糖、增加玉米淀粉以減小胰島素波動答案：D解析：AIN93G用玉米淀粉+少量蔗糖替代AIN76A的50%蔗糖，減少飲食性胰島素抵抗，更適合長期慢病研究。22.【單選】下列哪種維生素缺乏可導致免疫缺陷鼠發(fā)生“尾巴壞死”？A.維生素AB.維生素EC.維生素KD.維生素B?答案：B解析：維生素E缺乏引發(fā)過氧化損傷，裸鼠表現(xiàn)尾巴、耳尖壞死；補充10mg/kg飼料可逆轉。23.【多選】輻照滅菌劑量過高（>50kGy）對飼料的影響包括：A.維生素B?損失>90%B.蛋白質消化率下降C.脂肪氧化酸敗D.微量元素硒揮發(fā)答案：A、C解析：VB?對輻照最敏感；脂肪在高劑量下產生自由基，酸敗值升高；蛋白質消化率幾乎不受影響；硒為無機鹽不揮發(fā)。24.【計算】某課題組需配制含0.01%多西環(huán)素（Dox）的飲水，用于TetOn系統(tǒng)誘導。已知多西環(huán)素鹽酸鹽純度88%，小鼠日飲水量7mL/只，求每100mL飲水中應稱取多少毫克原藥？答案：有效含量=0.01g/100mL=0.1mg/mL需考慮純度：0.1/0.88=0.1136mg/mL100mL需11.36mg多西環(huán)素鹽酸鹽。25.【問答】簡述高脂飲食誘導肥胖（DIO）小鼠模型中，脂肪源差異對實驗結果的影響。答案：1)豬油基飼料（45%kcalfat）富含飽和脂肪，可快速誘導胰島素抵抗，但炎癥以M1型巨噬細胞為主；2)起酥油+大豆油混合（45%kcal）含反式脂肪酸，導致肝纖維化更嚴重；3)魚油基高脂飼料雖熱量相同，因ω3脂肪酸可拮抗炎癥，體重增加減緩，不適合純肥胖研究；4)研究需根據(jù)目的選擇脂肪源，并在論文中披露脂肪酸組成，否則結果不可重復。六、動物模型與操作技術26.【單選】建立急性胰腺炎小鼠模型，下列方案中死亡率最低且可重復性最高的是：A.雨蛙素（Cerulein）50μg/kg，連續(xù)7次腹腔注射B.L精氨酸4g/kg，一次性腹腔注射C.膽酸鈉0.1mL/只逆行膽胰管注射D.乙醇+油酸灌胃答案：A解析：雨蛙素方案死亡率<5%，病理評分呈劑量依賴性；精氨酸方案死亡率20–30%；膽總管注射需手術，技術差異大；灌胃模型不穩(wěn)定。27.【單選】小鼠尾靜脈注射0.2mL，最佳進針角度為：A.10°B.30°C.45°D.90°答案：B解析：30°既不易刺穿對側血管壁，也便于觀察回血；角度過小易進皮下，過大易穿透。28.【多選】可用于大鼠“微透析”實驗的麻醉組合包括：A.異氟烷1.5%吸入B.戊巴比妥鈉50mg/kg腹腔C.氯胺酮75mg/kg+咪達唑侖5mg/kg腹腔D.水合氯醛400mg/kg腹腔答案：A、C解析：微透析需維持穩(wěn)定血流動力學>2h；戊巴比妥代謝快，需多次補注致數(shù)據(jù)波動；水合氯醛鎮(zhèn)痛差，被指南限制；異氟烷、氯胺酮咪達唑侖組合可穩(wěn)定維持。29.【操作排序】小鼠胚胎移植制備無菌模型，請按正確順序排列：1.供體鼠超排、交配2.胚胎8細胞期采集3.0.5%過氧乙酸浸泡胚胎2min4.無菌PBS+5%胎牛血清沖洗5遍5.假孕鼠輸卵管移植答案：1→2→3→4→5解析：過氧乙酸可殺滅表面微生物但不穿透透明帶，沖洗去除殘留，再移植。30.【問答】描述“小鼠尾套法”無創(chuàng)血壓測量操作要點及常見誤差來源。答案：要點：1)預熱箱37℃，15min，使尾動脈擴張；2)鼠尾穿過尾套，傳感器對準腹側動脈；3)尾套寬度/尾直徑比=0.4，過寬測值偏低；4)測量5次取平均，間隔30s；5)固定動物減少運動偽差。誤差來源：預熱不足致血管收縮；尾套位置距根部過遠（應距尾根1–2cm）；環(huán)境噪音>60dB致應激；晝夜節(jié)律未統(tǒng)一，收縮壓可差10–15mmHg。七、獸醫(yī)護理與疾病防控31.【單選】裸鼠出現(xiàn)“濕尾”樣癥狀，肛周被黃色滲出物黏連，最可能的病原是：A.金黃色葡萄球菌B.綠膿桿菌C.鼠檸檬酸桿菌（C.rodentium）D.梭狀芽孢桿菌答案：C解析：C.rodentium主要感染免疫缺陷鼠，表現(xiàn)結腸增生、腹瀉，類似濕尾；金黃葡萄球菌多致皮膚膿腫；綠膿桿菌為藍綠色膿液；梭菌為出血性腸炎。32.【單選】對實驗兔進行耳緣靜脈采血，首次穿刺失敗，再次穿刺點應：A.向心端距原針眼0.5cmB.離心端距原針眼1cmC.對側耳緣靜脈D.同側耳中央動脈答案：C解析：兔耳緣靜脈修復慢，再次穿刺易致血腫；應換對側，減少疼痛與炎癥。33.【多選】下列哪些藥物可用于小鼠“腫瘤體積>2000mm3”時的安樂死？A.戊巴比妥鈉150mg/kg腹腔B.二氧化碳窒息，流量30%容器體積/minC.三溴乙醇600mg/kg腹腔D.異氟烷過量吸入后頸椎脫臼答案：A、B、D解析：三溴乙醇鎮(zhèn)痛效果差，不推薦用于大腫瘤安樂死；其余方案符合AVMA指南。34.【判斷】對豚鼠補充維生素C可皮下注射10%抗壞血酸溶液，劑量為50mg/kg，每日一次。答案：正確解析：豚鼠缺乏L古洛糖酸內酯氧化酶，需外源維C；該劑量安全，可糾正壞血病。35.【案例】某課題組12只新西蘭兔進行骨科手術，術后48h內3只出現(xiàn)呼吸急促、鼻腔泡沫樣分泌物，死亡1只。剖檢肺葉出血、水腫。請診斷并給出防控方案。答案：診斷：兔流行性出血癥（RHDV）急性感染。依據(jù)：典型肺出血、高死亡率；實驗室可用RTPCR檢測RHDVVP60基因。防控：1)立即隔離病兔，對同群兔接種RHDV滅活疫苗；2)環(huán)境用過氧乙酸0.5%噴霧，關閉房間7天；3)所有手術兔術前檢測RHDV抗體，陰性方可入組；4)尸體及污染物高壓滅菌后無害化處理。八、綜合應用與案例分析36.【單選】某新藥需開展雙物種毒理試驗，下列組合符合ICHM3(R2)指南“默認接受”范圍的是：A.小鼠+大鼠B.小鼠+犬C.大鼠+猴D.大鼠+兔答案：C解析：ICHM3(R2)推薦一種嚙齒類+一種非嚙齒類；大鼠+猴為經(jīng)典組合，可滿足監(jiān)管。37.【單選】計算動物實驗樣本量時，若預期效應量Cohen’sd=0.8、α=0.05、Power=0.8，采用兩獨立樣本t檢驗，每組最少需要多少只小鼠？答案：利用GPower軟件計算得n=21只/組；考慮10%脫落，取24只/組。38.【多選】實驗數(shù)據(jù)出現(xiàn)“批次效應”時，可采用的校正策略有：A.在統(tǒng)計模型中加入批次作為隨機效應B.使用ComBat算法進行基因表達芯片校正