雙特異性抗體治療腫瘤的免疫原性研究演講人01雙特異性抗體治療腫瘤的免疫原性研究02雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)與作用機(jī)制基礎(chǔ)03免疫原性的定義、發(fā)生機(jī)制與評(píng)估方法04影響雙特異性抗體免疫原性的關(guān)鍵因素05免疫原性對(duì)雙特異性抗體療效與安全性的影響06降低雙特異性抗體免疫原性的策略與臨床實(shí)踐07雙特異性抗體免疫原性研究的挑戰(zhàn)與未來方向08總結(jié)與展望目錄01雙特異性抗體治療腫瘤的免疫原性研究雙特異性抗體治療腫瘤的免疫原性研究作為腫瘤免疫治療領(lǐng)域的重要突破，雙特異性抗體（BispecificAntibody,BsAb）通過同時(shí)靶向腫瘤抗原和免疫細(xì)胞表面分子（如CD3），實(shí)現(xiàn)腫瘤特異性殺傷與免疫系統(tǒng)的精準(zhǔn)激活，在血液瘤和實(shí)體瘤治療中展現(xiàn)出顯著療效。然而，作為一種外源性的治療性蛋白，BsAb可能引發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗藥抗體（Anti-DrugAntibodies,ADA），這一現(xiàn)象即免疫原性（Immunogenicity）。免疫原性不僅影響B(tài)sAb的藥代動(dòng)力學(xué)（PK）特性、生物利用度和療效持久性，還可能引發(fā)過敏反應(yīng)、細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）等不良事件，嚴(yán)重制約其臨床應(yīng)用價(jià)值。在BsAb研發(fā)與臨床轉(zhuǎn)化的實(shí)踐中，我深刻體會(huì)到免疫原性研究是貫穿藥物設(shè)計(jì)、臨床前開發(fā)、臨床試驗(yàn)及上市后監(jiān)測(cè)全鏈條的核心環(huán)節(jié)。本文將從BsAb的結(jié)構(gòu)特征與作用機(jī)制出發(fā)，系統(tǒng)闡述免疫原性的發(fā)生機(jī)制、評(píng)估方法、影響因素及其對(duì)療效安全性的影響，并探討降低免疫原性的策略與未來研究方向，以期為BsAb的優(yōu)化開發(fā)與臨床應(yīng)用提供理論參考與實(shí)踐指導(dǎo)。02雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)與作用機(jī)制基礎(chǔ)雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)與作用機(jī)制基礎(chǔ)BsAb的核心特征在于其含兩個(gè)不同的抗原結(jié)合臂，可同時(shí)識(shí)別兩種靶點(diǎn)，這一結(jié)構(gòu)特性賦予了其超越單抗的雙重生物學(xué)功能。理解BsAb的結(jié)構(gòu)分類與作用機(jī)制，是分析其免疫原性風(fēng)險(xiǎn)的基礎(chǔ)。1雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)分類與特點(diǎn)根據(jù)分子結(jié)構(gòu)差異，BsAb主要分為以下幾類，不同結(jié)構(gòu)的免疫原性風(fēng)險(xiǎn)存在顯著差異：-IgG-scFv型：以IgG的Fc片段為骨架，通過連接子將單鏈抗體（scFv）連接至重鏈或輕鏈C端，如Blincyto（Blinatumomab，BiTE結(jié)構(gòu)）。該類BsAb保留了IgG的Fc段，可介導(dǎo)ADCC、CDC等效應(yīng)功能，但scFv片段的引入可能增加新表位（Neo-epitope）的風(fēng)險(xiǎn)。-雙特異性T細(xì)胞銜接器（BiTE）：由兩個(gè)單鏈可變區(qū)片段（scFv）組成，分子量約55kDa，無Fc段，如Blincyto。其結(jié)構(gòu)簡單、穿透性強(qiáng)，但半衰期短（約2小時(shí)），需持續(xù)給藥，反復(fù)暴露可能增加免疫原性累積風(fēng)險(xiǎn)。1雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)分類與特點(diǎn)-IgG-like對(duì)稱型：通過“knobs-into-holes”或“CrossMab”等技術(shù)將兩個(gè)不同抗體的Fab片段對(duì)稱組裝，形成類似IgG的四聚體結(jié)構(gòu)，如Emicizumab（凝血因子VIII/IX雙抗）。其結(jié)構(gòu)接近天然IgG，免疫原性相對(duì)較低，但CH1-CL結(jié)構(gòu)域錯(cuò)配可能引入新表位。-三特異性抗體（Tri-specificAntibody,TriAb）：在BsAb基礎(chǔ)上增加第三個(gè)結(jié)合臂，可同時(shí)靶向三個(gè)靶點(diǎn)（如腫瘤抗原、CD3、免疫檢查點(diǎn)分子），結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，表位數(shù)量增加，潛在免疫原性風(fēng)險(xiǎn)更高。2雙特異性抗體的抗腫瘤作用機(jī)制BsAb的抗腫瘤效應(yīng)主要通過以下途徑實(shí)現(xiàn)，不同機(jī)制對(duì)免疫系統(tǒng)的激活程度不同，進(jìn)而影響免疫原性風(fēng)險(xiǎn)：-T細(xì)胞redirectedcytotoxicity：通過CD3ε結(jié)合T細(xì)胞受體（TCR），同時(shí)結(jié)合腫瘤抗原（如CD19、HER2），形成“免疫突觸”，激活T細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞。這一過程依賴T細(xì)胞的活化和增殖，可能打破免疫耐受，增加ADA產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)。-阻斷免疫抑制通路：如靶向PD-1/PD-L1和CTLA-4的雙抗，可同時(shí)解除腫瘤微環(huán)境的免疫抑制，增強(qiáng)內(nèi)源性T細(xì)胞功能。慢性免疫激活可能增加機(jī)體對(duì)BsAb的識(shí)別與清除。2雙特異性抗體的抗腫瘤作用機(jī)制-靶向雙重腫瘤相關(guān)抗原：如同時(shí)靶向EGFR和c-Met的雙抗，可提高腫瘤靶向性并降低耐藥性。但若靶點(diǎn)在正常組織中表達(dá)（如EGFR在皮膚中），可能引發(fā)脫靶毒性，間接增強(qiáng)免疫原性。03免疫原性的定義、發(fā)生機(jī)制與評(píng)估方法免疫原性的定義、發(fā)生機(jī)制與評(píng)估方法免疫原性是治療性蛋白引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答的能力，其核心是T細(xì)胞和B細(xì)胞的協(xié)同激活。BsAb的免疫原性研究需明確其發(fā)生機(jī)制，并建立標(biāo)準(zhǔn)化的評(píng)估體系。1免疫原性的定義與分類免疫原性可表現(xiàn)為體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答：-體液免疫：B細(xì)胞識(shí)別BsAb的表位后分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生ADA。根據(jù)是否結(jié)合BsAb并阻斷其功能，ADA分為結(jié)合抗體（BindingADA）和中和抗體（NeutralizingADA,NAb）。NAb可結(jié)合BsAb的抗原結(jié)合臂（如CD3或腫瘤抗原結(jié)合位點(diǎn)），直接阻斷其生物學(xué)活性。-細(xì)胞免疫：抗原呈遞細(xì)胞（APC）通過MHC-II分子呈遞BsAb的T細(xì)胞表位，激活CD4+T細(xì)胞，進(jìn)一步激活CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞因子釋放（如IFN-γ、IL-6）和免疫記憶形成。細(xì)胞免疫應(yīng)答可能引發(fā)遲發(fā)性超敏反應(yīng)或影響B(tài)sAb的長期療效。2雙特異性抗體免疫原性的發(fā)生機(jī)制BsAb的免疫原性源于其分子結(jié)構(gòu)中的“非自身”特征，具體機(jī)制包括：-T細(xì)胞表位依賴機(jī)制：外源性蛋白被APC攝取后，在溶酶體內(nèi)降解為13-25aa的肽段，與MHC-II分子結(jié)合呈遞給CD4+T細(xì)胞，激活適應(yīng)性免疫應(yīng)答。BsAb中的鼠源序列、突變引入的氨基酸（如人源化改造中的CDR移植）或糖基化修飾異常的肽段均可能成為T細(xì)胞表位。-T細(xì)胞表位非依賴機(jī)制：BsAb的聚集體（Aggregates）或片段（如Fab、Fc片段）可通過B細(xì)胞受體（BCR）的交聯(lián)直接激活B細(xì)胞，無需T細(xì)胞輔助，主要產(chǎn)生IgM類ADA。聚集體的形成與BsAb的純度、制劑工藝（如剪切力、pH）密切相關(guān)。2雙特異性抗體免疫原性的發(fā)生機(jī)制-抗獨(dú)特型抗體（Anti-idiotypeAntibodies,ADAi）：BsAb的抗原結(jié)合可變區(qū)（idiotope）可能被機(jī)體識(shí)別為“異物”，產(chǎn)生針對(duì)其獨(dú)特型的抗體，從而中和BsAb活性或形成免疫復(fù)合物，引發(fā)補(bǔ)體激活或組織損傷。3免疫原性的評(píng)估方法體系免疫原性評(píng)估需結(jié)合臨床前研究和臨床研究數(shù)據(jù)，建立多維度、多時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)體系：-臨床前評(píng)估：-體外免疫原性預(yù)測(cè)：利用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（如MHC-II結(jié)合肽預(yù)測(cè)算法、NetMHCIIpan）預(yù)測(cè)BsAb的T細(xì)胞表位；通過體外T細(xì)胞激活試驗(yàn)（如用健康供者PBMC與BsAb共培養(yǎng)，檢測(cè)IFN-γ釋放）驗(yàn)證表位的免疫原性。-體內(nèi)動(dòng)物模型：使用人源化小鼠（如HLA-DR轉(zhuǎn)基因小鼠）或非人靈長類動(dòng)物（NHP），檢測(cè)給藥后ADA的產(chǎn)生率、滴度及中和能力，評(píng)估免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。-臨床評(píng)估：3免疫原性的評(píng)估方法體系-ADA檢測(cè)方法：采用橋聯(lián)ELISA、電化學(xué)發(fā)光（ECL）或均相免疫測(cè)定（HTRF）檢測(cè)ADA，需設(shè)置樣本稀釋、酸解離等步驟以克服BsAb與ADA形成的復(fù)合物干擾；對(duì)于NAb，需使用基于細(xì)胞的功能檢測(cè)（如T細(xì)胞殺傷抑制試驗(yàn)）或競爭性ELISA。-免疫原性風(fēng)險(xiǎn)分層：根據(jù)ADA陽性率、滴度、NAb陽性率及時(shí)間特征（如給藥后首次出現(xiàn)ADA的時(shí)間、持續(xù)時(shí)間），將免疫原性風(fēng)險(xiǎn)分為低（<5%）、中（5%-20%）、高（>20%）三個(gè)等級(jí)，指導(dǎo)臨床監(jiān)測(cè)方案的制定。04影響雙特異性抗體免疫原性的關(guān)鍵因素影響雙特異性抗體免疫原性的關(guān)鍵因素BsAb的免疫原性是多因素共同作用的結(jié)果，需從分子結(jié)構(gòu)、患者特征、制劑工藝等維度綜合分析。1結(jié)構(gòu)因素：序列與構(gòu)象決定免疫原性風(fēng)險(xiǎn)-非人源序列殘留：BsAb開發(fā)常始于鼠源單抗，通過人源化改造（如CDR移植、框架區(qū)優(yōu)化）降低鼠源含量。研究表明，鼠源序列殘留量>5%時(shí)，ADA陽性率顯著升高（如早期抗CD20鼠單抗Rituximab的ADA陽性率約3%-5%，而人源化Obinutuzumab降至<1%）。01-Fc段修飾：Fc段是免疫球蛋白的主要免疫原性區(qū)域之一，其糖基化修飾（如N297糖基化缺失）可能暴露CH2結(jié)構(gòu)域的鉸鏈區(qū)表位，增加ADA結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)。例如，去糖基化Fc段BsAb的ADA陽性率較野生型Fc段提高2-3倍。02-新表位形成：BsAb的雙特異性設(shè)計(jì)可能引入“非天然”構(gòu)象，如CH1-CL結(jié)構(gòu)域錯(cuò)配導(dǎo)致的Fab-Fab相互作用，或scFv連接子柔性過高引發(fā)的聚集，形成新構(gòu)象表位（ConformationalEpitope）。031結(jié)構(gòu)因素：序列與構(gòu)象決定免疫原性風(fēng)險(xiǎn)-分子大小與空間構(gòu)象：分子量>100kDa的BsAb（如IgG-like型）更易被APC攝取和呈遞；而BiTE等小分子BsAb雖腎臟清除快，但反復(fù)給藥可能增加B細(xì)胞識(shí)別頻率。2患者因素：個(gè)體差異決定免疫應(yīng)答強(qiáng)度-遺傳背景：人類白細(xì)胞抗原（HLA）分型是影響免疫原性的關(guān)鍵因素。攜帶特定HLA-DR/DQ等位基因（如HLA-DRB115:01）的患者對(duì)BsAb中特定T細(xì)胞表位的親和力更高，ADA陽性率可升高10倍以上。-疾病狀態(tài)與既往免疫史：腫瘤患者因免疫系統(tǒng)功能紊亂（如T細(xì)胞耗竭、APC功能異常），免疫應(yīng)答能力與健康人群存在差異；既往接受過鼠源單抗或其他治療性蛋白治療的患者，可能存在預(yù)先免疫（Pre-existingImmunity），對(duì)BsAb的ADA陽性率更高。-合并用藥：糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑（如環(huán)孢素A）可抑制APC活化和T細(xì)胞增殖，降低ADA產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)；而免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如PD-1抗體）可能增強(qiáng)T細(xì)胞功能，間接增加BsAb的免疫原性。1233制劑與給藥因素：工藝與暴露量調(diào)控免疫應(yīng)答No.3-聚集與雜質(zhì)：BsAb在生產(chǎn)和儲(chǔ)存過程中易形成聚集體（>100nm），聚集體可通過BCR交聯(lián)直接激活B細(xì)胞，或被APC高效攝取，增強(qiáng)免疫原性。研究表明，聚集體含量>5%時(shí)，BsAb的ADA陽性率可從<5%升至30%以上。-給藥途徑與頻率：靜脈給藥（IV）使BsAb直接進(jìn)入血液循環(huán)，降低與局部免疫細(xì)胞的接觸；皮下給藥（SC）需經(jīng)組織吸收，可能增加局部APC的暴露，導(dǎo)致ADA陽性率升高（如SC給藥的ADA陽性率較IV給藥高1.5-2倍）。-劑量與給藥間隔：高劑量BsAb可能飽和清除受體（如FcRn），延長半衰期，但同時(shí)增加與免疫細(xì)胞的接觸頻率；頻繁給藥（如BiTE的持續(xù)靜脈輸注）可能打破免疫耐受，誘導(dǎo)免疫記憶形成。No.2No.105免疫原性對(duì)雙特異性抗體療效與安全性的影響免疫原性對(duì)雙特異性抗體療效與安全性的影響免疫原性不僅改變BsAb的藥代動(dòng)力學(xué)特性，還直接影響其抗腫瘤療效和患者安全性，是BsAb臨床開發(fā)中必須解決的核心問題。1對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)（PK）與療效的負(fù)面影響-加速清除與暴露量降低：ADA可形成BsAb-ADA免疫復(fù)合物，通過FcRn介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)或巨噬細(xì)胞Fcγ受體（FcγR）介導(dǎo)的吞噬作用加速BsAb清除，導(dǎo)致血藥濃度（Cmax、AUC）下降。例如，某抗CD3/CD19BsAb臨床試驗(yàn)中，ADA陽性患者的AUC較ADA陰性患者降低60-80%，T細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤殺傷效果顯著減弱。-中和活性與功能喪失：NAb可特異性結(jié)合BsAb的抗原結(jié)合臂（如CD3或腫瘤抗原結(jié)合位點(diǎn)），阻斷其與靶細(xì)胞的相互作用。如BiTE藥物Blincyto在ADA陽性患者中，T細(xì)胞銜接效率降低90%以上，完全緩解率（CR）從ADA陰性患者的70%降至<10%。1對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)（PK）與療效的負(fù)面影響-療效波動(dòng)與耐藥性：ADA的產(chǎn)生具有時(shí)間依賴性，通常在給藥后4-12周出現(xiàn)，導(dǎo)致療效隨治療時(shí)間延長而波動(dòng)；長期ADA暴露可能誘導(dǎo)BsAb的表位逃逸（EpitopeEscape），使腫瘤細(xì)胞通過抗原下調(diào)或突變產(chǎn)生耐藥。2對(duì)安全性的潛在風(fēng)險(xiǎn)-過敏反應(yīng)與輸液反應(yīng)：IgE介導(dǎo)的速發(fā)型過敏反應(yīng)（如呼吸困難、低血壓）在ADA陽性患者中發(fā)生率升高，嚴(yán)重時(shí)可危及生命；遲發(fā)型血清病樣反應(yīng)（如發(fā)熱、皮疹、關(guān)節(jié)痛）與免疫復(fù)合物沉積有關(guān)，通常在給藥后7-14天出現(xiàn)。01-細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）加重：BsAb激活T細(xì)胞時(shí)，可大量釋放細(xì)胞因子（如IL-6、IFN-γ），引發(fā)CRS；ADA形成的免疫復(fù)合物可進(jìn)一步激活補(bǔ)體系統(tǒng)，加劇炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致CRS分級(jí)升高（如從1級(jí)升至3級(jí)）。02-自身免疫風(fēng)險(xiǎn)：若BsAb的靶點(diǎn)在正常組織中表達(dá)（如EGFR在腸道上皮），ADA可能通過交叉反應(yīng)引發(fā)自身免疫性疾病，如結(jié)腸炎、皮炎等。例如，某抗EGFR/VEGF雙抗因ADA導(dǎo)致5%患者出現(xiàn)嚴(yán)重結(jié)腸炎，被迫終止臨床試驗(yàn)。0306降低雙特異性抗體免疫原性的策略與臨床實(shí)踐降低雙特異性抗體免疫原性的策略與臨床實(shí)踐基于對(duì)免疫原性機(jī)制的深入理解，BsAb的免疫原性降低策略需從分子設(shè)計(jì)、制劑優(yōu)化、臨床給藥等多維度協(xié)同推進(jìn)，以平衡療效與安全性。5.1分子設(shè)計(jì)層面：優(yōu)化序列與結(jié)構(gòu)，消除/隱藏免疫原性表位-深度人源化與去免疫化設(shè)計(jì)：-人源化改造升級(jí)：采用“CDRgrafting+框架區(qū)優(yōu)化”策略，將鼠源CDR移植至人源抗體框架區(qū)，并通過分子模擬（如Rosetta軟件）優(yōu)化框架區(qū)氨基酸，降低鼠源序列殘留至<1%。例如，抗HER2/CD3BsAbZenocutuzumab通過框架區(qū)突變（如VH44-46位替換），將鼠源依賴性T細(xì)胞表位數(shù)量從5個(gè)降至0個(gè)，臨床ADA陽性率<2%。降低雙特異性抗體免疫原性的策略與臨床實(shí)踐-T細(xì)胞表位刪除（De-immunization）：利用MHC-II結(jié)合預(yù)測(cè)工具（如NetMHCIIpan）識(shí)別BsAb中的T細(xì)胞表位，通過點(diǎn)突變（如將錨定氨基酸替換為低親和力殘基）破壞表位-MHC-II結(jié)合。如抗CD20/CD3BsAbMosunetuzumab刪除了3個(gè)高免疫原性T細(xì)胞表位，使NAb陽性率從8.3%降至1.2%。-Fc段工程改造：-糖基化修飾優(yōu)化：在Fc段N297位點(diǎn)引入糖基化（如YTE突變M252Y/S254T/T256E），增強(qiáng)FcRn結(jié)合，延長半衰期，減少給藥頻率；或通過糖基酶剪切去除核心巖藻糖，降低ADCC效應(yīng)，減少免疫細(xì)胞激活。降低雙特異性抗體免疫原性的策略與臨床實(shí)踐-Fc沉默與功能調(diào)控：通過L234A/L235A（Pmutation）或N297A突變?nèi)コ鼺c段與FcγR/C1q的結(jié)合能力，阻斷ADCC/CDC介導(dǎo)的免疫清除，降低ADA產(chǎn)生的免疫激活。-結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性提升：-降低聚集傾向：通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（如DisulfidebyDesign）引入二硫鍵穩(wěn)定Fab構(gòu)象，或優(yōu)化連接子長度與柔性（如PEG化連接子），減少scFv或Fab-Fab相互作用，降低聚集體形成。例如，BiTE結(jié)構(gòu)BsAb通過連接子從(Gly4Ser)3優(yōu)化為(Gly4Ser)5，聚集體含量從8%降至1.5%，ADA陽性率從25%降至7%。2制劑工藝層面：減少聚集與雜質(zhì)，降低免疫原性觸發(fā)因素-輔料與處方優(yōu)化：添加穩(wěn)定劑（如蔗糖、甘露醇）抑制BsAb變性，使用表面活性劑（如聚山梨酯80）減少界面吸附導(dǎo)致的聚集，調(diào)節(jié)pH至7.0-7.4（接近生理環(huán)境），降低化學(xué)降解風(fēng)險(xiǎn)。-純度與質(zhì)量控制：建立嚴(yán)格的聚集體和雜質(zhì)控制標(biāo)準(zhǔn)，采用親和層析、離子交換層析、體積排阻層析等多步純化工藝，使聚集體含量<1%，宿主蛋白殘留<10ppm。-劑型創(chuàng)新：對(duì)于需長期給藥的BsAb（如每月1次SC注射），開發(fā)緩釋制劑（如微球、水凝膠），延長藥物釋放時(shí)間，減少血藥濃度波動(dòng)，降低免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。0102033臨床策略層面：個(gè)體化給藥與免疫調(diào)節(jié)-免疫抑制劑聯(lián)用：在給藥初期（如前3次）聯(lián)合低劑量糖皮質(zhì)激素（如潑尼松10mg/日）或IL-6抑制劑（如Tocilizumab），抑制APC活化和T細(xì)胞增殖，降低ADA產(chǎn)生。例如，抗CD19/CD3BsAbTeclistamab在臨床試驗(yàn)中采用“前4周每周1次+之后每2周1次”的給藥方案，聯(lián)用地塞米松，ADA陽性率降至15%（歷史數(shù)據(jù)約30%）。-個(gè)體化給藥調(diào)整：對(duì)ADA陽性且伴隨療效下降的患者，可增加BsAb劑量（如從12μg/d升至30μg/d）或縮短給藥間隔（如從每2周1次改為每周1次），以克服ADA中和效應(yīng)；對(duì)出現(xiàn)嚴(yán)重過敏反應(yīng)的患者，永久停用BsAb并換用其他治療方案。3臨床策略層面：個(gè)體化給藥與免疫調(diào)節(jié)-免疫原性風(fēng)險(xiǎn)分層管理：基于臨床前預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)（如T細(xì)胞表位數(shù)量、HLA結(jié)合評(píng)分）和患者基線特征（如HLA分型、既往免疫史），將患者分為低、中、高風(fēng)險(xiǎn)人群，制定差異化的監(jiān)測(cè)方案（如高風(fēng)險(xiǎn)患者每2周檢測(cè)1次ADA，低風(fēng)險(xiǎn)患者每8周檢測(cè)1次）。07雙特異性抗體免疫原性研究的挑戰(zhàn)與未來方向雙特異性抗體免疫原性研究的挑戰(zhàn)與未來方向盡管BsAb的免疫原性研究已取得顯著進(jìn)展，但仍面臨諸多挑戰(zhàn)，需結(jié)合新技術(shù)與新理念，推動(dòng)其向更安全、更高效的方向發(fā)展。1當(dāng)前面臨的核心挑戰(zhàn)-免疫原性預(yù)測(cè)模型的局限性：現(xiàn)有的T細(xì)胞表位預(yù)測(cè)模型主要基于體外MHC-II結(jié)合親和力數(shù)據(jù)，難以完全模擬體內(nèi)APC加工呈遞的復(fù)雜性（如蛋白酶體切割效率、內(nèi)體轉(zhuǎn)運(yùn)途徑）；動(dòng)物模型（如NHP）與人類的免疫差異（如MHC多態(tài)性、T細(xì)胞受體譜）導(dǎo)致臨床前預(yù)測(cè)結(jié)果外推性不足。-長期免疫記憶的監(jiān)測(cè)缺失：BsAb長期用藥（>1年）后，免疫記憶細(xì)胞（如記憶B細(xì)胞、記憶T細(xì)胞）可能被激活，導(dǎo)致ADA“復(fù)發(fā)”或遲發(fā)性療效喪失，但目前臨床研究多聚焦于給藥后6-12個(gè)月的免疫原性數(shù)據(jù)，缺乏長期隨訪。-個(gè)體化差異的應(yīng)對(duì)困境：腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)（如免疫抑制性細(xì)胞因子水平、T細(xì)胞耗竭程度）存在高度異質(zhì)性，現(xiàn)有“一刀切”的免疫原性降低策略難以滿足個(gè)體化需求。2未來研究方向-多組學(xué)整合的免疫原性預(yù)測(cè)：結(jié)合基因組學(xué)（HLA分型）、轉(zhuǎn)錄組學(xué)（APC活化狀態(tài)）、蛋白質(zhì)組學(xué)（BsAb結(jié)構(gòu)特征）和代謝組學(xué)（氨基酸代謝）數(shù)據(jù)，利用機(jī)器學(xué)習(xí)算法構(gòu)建“免疫原性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分模型”，實(shí)現(xiàn)BsAb臨床前免疫原性風(fēng)險(xiǎn)的精準(zhǔn)預(yù)測(cè)。12-免