2025年微生物檢驗(yàn)技術(shù)副高級(jí)職稱考試題庫附答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共20題）1.關(guān)于VITEK2Compact全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理，正確的是（）A.基于濁度法檢測細(xì)菌代謝產(chǎn)物B.利用比色法和熒光法分析碳源利用及酶活性C.通過質(zhì)譜分析細(xì)菌蛋白質(zhì)指紋圖譜D.采用核酸雜交技術(shù)進(jìn)行菌種鑒定答案：B2.以下哪種培養(yǎng)基屬于選擇性培養(yǎng)基？（）A.血瓊脂培養(yǎng)基B.巧克力瓊脂培養(yǎng)基C.SS瓊脂培養(yǎng)基D.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基答案：C（SS瓊脂含膽鹽、煌綠等抑制革蘭陽性菌和部分大腸埃希菌，選擇性分離沙門菌、志賀菌）3.進(jìn)行分枝桿菌萋尼染色時(shí)，脫色步驟使用的試劑是（）A.3%鹽酸乙醇B.95%乙醇C.碘液D.亞甲藍(lán)答案：A4.實(shí)驗(yàn)室檢測新型冠狀病毒（SARSCoV2）時(shí)，若Ct值≥40且擴(kuò)增曲線不典型，應(yīng)報(bào)告為（）A.陽性B.陰性C.可疑陽性D.需重復(fù)檢測答案：B（依據(jù)《新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)指南》，Ct≥40且無典型擴(kuò)增曲線判為陰性）5.以下哪種細(xì)菌的β內(nèi)酰胺酶檢測需采用頭孢硝噻吩紙片法？（）A.金黃色葡萄球菌B.肺炎鏈球菌C.流感嗜血桿菌D.腸球菌答案：C（流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需用頭孢硝噻吩法檢測β內(nèi)酰胺酶）6.血培養(yǎng)瓶中添加樹脂的主要作用是（）A.提供營養(yǎng)成分B.中和血液中的抗菌藥物C.抑制真菌生長D.增強(qiáng)細(xì)菌呼吸代謝答案：B（樹脂可吸附血液中的抗生素，提高陽性檢出率）7.進(jìn)行真菌G試驗(yàn)時(shí)，檢測的靶物質(zhì)是（）A.1,3βD葡聚糖B.半乳甘露聚糖C.甘露糖D.烯醇化酶答案：A8.以下不屬于臨床微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全二級(jí)（BSL2）操作要求的是（）A.實(shí)驗(yàn)人員需穿戴防護(hù)服、手套B.操作潛在感染性材料時(shí)需在生物安全柜中進(jìn)行C.實(shí)驗(yàn)室入口設(shè)置生物危害標(biāo)識(shí)D.配備高壓蒸汽滅菌器處理廢棄物答案：無（全為BSL2要求；若選項(xiàng)含“使用正壓防護(hù)服”則為錯(cuò)誤）9.采用MALDITOFMS進(jìn)行細(xì)菌鑒定時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品的主要作用是（）A.校準(zhǔn)儀器質(zhì)量軸B.提供內(nèi)參峰C.驗(yàn)證樣本純度D.增強(qiáng)離子化效率答案：A（標(biāo)準(zhǔn)品用于校準(zhǔn)質(zhì)譜儀質(zhì)量軸，確保結(jié)果準(zhǔn)確性）10.大腸埃希菌ATCC25922在藥敏試驗(yàn)中的主要用途是（）A.質(zhì)量控制菌株B.陽性對(duì)照菌株C.陰性對(duì)照菌株D.耐藥表型誘導(dǎo)菌株答案：A（ATCC25922是CLSI規(guī)定的革蘭陰性菌藥敏質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株）11.檢測結(jié)核分枝桿菌利福平耐藥性時(shí)，首選的分子靶標(biāo)是（）A.rpoB基因B.katG基因C.inhA基因D.embB基因答案：A（rpoB基因突變是利福平耐藥的主要機(jī)制）12.以下哪種方法可用于區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌與非發(fā)酵菌？（）A.氧化酶試驗(yàn)B.觸酶試驗(yàn)C.凝固酶試驗(yàn)D.吲哚試驗(yàn)答案：A（腸桿菌科氧化酶陰性，非發(fā)酵菌多為陽性）13.進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)時(shí)，厭氧環(huán)境的氧化還原電勢(shì)（Eh）應(yīng)低于（）A.100mVB.0mVC.+100mVD.+200mV答案：A（厭氧菌需Eh＜100mV才能生長）14.以下哪種病毒需采用細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）結(jié)合免疫熒光法進(jìn)行檢測？（）A.單純皰疹病毒B.人類免疫缺陷病毒（HIV）C.乙型肝炎病毒（HBV）D.人乳頭瘤病毒（HPV）答案：A（HSV常用細(xì)胞培養(yǎng)觀察CPE，再用熒光抗體確認(rèn)）15.實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中，“室內(nèi)質(zhì)控”的主要目的是（）A.評(píng)估實(shí)驗(yàn)室間檢測結(jié)果的一致性B.監(jiān)測檢測過程的穩(wěn)定性C.驗(yàn)證新方法的準(zhǔn)確性D.滿足認(rèn)證認(rèn)可要求答案：B（室內(nèi)質(zhì)控用于監(jiān)控日常檢測過程的精密度和準(zhǔn)確性）16.檢測肺炎支原體時(shí)，血清學(xué)試驗(yàn)的“窗口期”通常為（）A.感染后13天B.感染后1周內(nèi)C.感染后23周D.感染后1個(gè)月以上答案：B（IgM抗體在感染后1周開始升高，23周達(dá)高峰）17.以下哪種真菌的鏡下特征為“假菌絲+芽生孢子”？（）A.新生隱球菌B.白假絲酵母菌C.煙曲霉D.毛霉答案：B（白假絲酵母菌在玉米吐溫80培養(yǎng)基中可形成假菌絲和厚壁孢子）18.進(jìn)行血培養(yǎng)時(shí)，成人采血量推薦為（）A.58ml/瓶B.810ml/瓶C.1015ml/瓶D.1520ml/瓶答案：B（CLSI推薦成人每瓶采血量810ml，2瓶/次）19.以下哪種細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)需采用稀釋法而非紙片擴(kuò)散法？（）A.肺炎克雷伯菌B.銅綠假單胞菌C.屎腸球菌（萬古霉素）D.金黃色葡萄球菌答案：C（腸球菌對(duì)萬古霉素的藥敏需用肉湯稀釋法或Etest確認(rèn)）20.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生標(biāo)本溢灑時(shí)，首選的消毒試劑是（）A.75%乙醇B.0.5%次氯酸鈉C.2%戊二醛D.3%過氧化氫答案：B（次氯酸鈉可有效滅活細(xì)菌、病毒等病原微生物）二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.關(guān)于革蘭染色的注意事項(xiàng)，正確的有（）A.涂片厚度需適中，過厚易導(dǎo)致脫色不完全B.老齡菌可能出現(xiàn)假陰性（革蘭陽性染成陰性）C.結(jié)晶紫染色時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致陽性菌著色淺D.碘液媒染時(shí)間過長會(huì)影響結(jié)果答案：ABC（碘液媒染時(shí)間一般1分鐘，過長不影響結(jié)果）2.需采用厭氧培養(yǎng)的標(biāo)本包括（）A.深部膿腫穿刺液B.痰液C.血液D.壞死組織答案：AD（痰液、血液通常需需氧+厭氧培養(yǎng)，但深部膿腫、壞死組織以厭氧菌為主）3.以下屬于β內(nèi)酰胺酶抑制劑的有（）A.克拉維酸B.舒巴坦C.他唑巴坦D.亞胺培南答案：ABC（亞胺培南屬于碳青霉烯類抗生素）4.實(shí)驗(yàn)室檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的方法包括（）A.頭孢西丁紙片擴(kuò)散法B.檢測mecA基因C.苯唑西林鹽瓊脂篩選試驗(yàn)D.β內(nèi)酰胺酶檢測答案：ABC（MRSA耐藥機(jī)制為mecA基因編碼PBP2a，頭孢西丁是替代藥物；β內(nèi)酰胺酶檢測針對(duì)青霉素耐藥）5.關(guān)于真菌培養(yǎng)的描述，正確的有（）A.沙保弱培養(yǎng)基需添加氯霉素抑制細(xì)菌生長B.皮膚癬菌培養(yǎng)需2528℃孵育C.隱球菌培養(yǎng)需57天觀察結(jié)果D.酵母樣真菌在血瓊脂上生長快于沙保弱培養(yǎng)基答案：ABCD（沙保弱培養(yǎng)基含4%葡萄糖和1%蛋白胨，氯霉素抑制細(xì)菌；皮膚癬菌為嗜溫菌；隱球菌生長較慢；血瓊脂營養(yǎng)豐富，酵母生長快）6.以下哪些情況需考慮血培養(yǎng)污染？（）A.單一瓶陽性且為凝固酶陰性葡萄球菌B.2次采血均分離出表皮葡萄球菌C.分離菌為微球菌屬D.分離菌為痤瘡丙酸桿菌（僅1瓶陽性）答案：ACD（凝固酶陰性葡萄球菌、微球菌、痤瘡丙酸桿菌常為皮膚正常菌群，若單瓶陽性或無臨床感染跡象，提示污染）7.分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用包括（）A.結(jié)核分枝桿菌快速鑒定（XpertMTB/RIF）B.血流感染病原體宏基因組測序（mNGS）C.淋病奈瑟菌耐藥基因檢測D.細(xì)菌16SrRNA基因測序答案：ABCD（均為分子技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用）8.實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中，失控處理的步驟包括（）A.立即停止檢測，查找原因B.回顧近期質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，分析趨勢(shì)C.更換試劑或校準(zhǔn)儀器后重新檢測質(zhì)控品D.失控時(shí)已發(fā)出的報(bào)告無需召回答案：ABC（失控時(shí)需評(píng)估已發(fā)報(bào)告的準(zhǔn)確性，必要時(shí)召回）9.以下哪些細(xì)菌可引起社區(qū)獲得性肺炎（CAP）？（）A.肺炎鏈球菌B.流感嗜血桿菌C.嗜肺軍團(tuán)菌D.鮑曼不動(dòng)桿菌答案：ABC（鮑曼不動(dòng)桿菌多為醫(yī)院獲得性感染）10.關(guān)于支原體的特性，正確的有（）A.無細(xì)胞壁，呈多形性B.可在無生命培養(yǎng)基中生長（需膽固醇）C.對(duì)β內(nèi)酰胺類抗生素敏感D.肺炎支原體可引起間質(zhì)性肺炎答案：ABD（支原體無細(xì)胞壁，β內(nèi)酰胺類無效；需用大環(huán)內(nèi)酯類或四環(huán)素類）三、填空題（每空1分，共10題）1.結(jié)核分枝桿菌的最適培養(yǎng)溫度是________℃，需孵育________周觀察結(jié)果。答案：3537；282.進(jìn)行細(xì)菌藥敏試驗(yàn)時(shí)，MH培養(yǎng)基的pH值應(yīng)控制在________，厚度為________mm。答案：7.27.4；43.新型隱球菌的特異性實(shí)驗(yàn)室檢測方法是________，其英文學(xué)名為________。答案：墨汁負(fù)染色；Indiainkstaining4.檢測幽門螺桿菌的非侵入性方法包括________和________。答案：尿素呼氣試驗(yàn)；糞便抗原檢測5.金黃色葡萄球菌的典型致病物質(zhì)有________（至少2種）。答案：凝固酶、腸毒素、α溶血素（任選2種）四、簡答題（共4題，20分）1.（5分）簡述細(xì)菌L型的檢測方法及注意事項(xiàng)。答案：檢測方法：①高滲培養(yǎng)基分離（如L型培養(yǎng)基，含20%蔗糖或3%NaCl）；②原代培養(yǎng)（標(biāo)本直接接種）與傳代培養(yǎng)（普通菌轉(zhuǎn)L型）；③形態(tài)觀察（革蘭染色多形性，高倍鏡下可見油煎蛋樣菌落）；④返祖試驗(yàn)（L型菌轉(zhuǎn)種普通培養(yǎng)基，觀察是否恢復(fù)原菌形態(tài)）。注意事項(xiàng)：避免使用β內(nèi)酰胺類抗生素（誘導(dǎo)L型形成）；培養(yǎng)基需保持高滲狀態(tài)；培養(yǎng)時(shí)間延長至7天；需結(jié)合返祖試驗(yàn)確認(rèn)。2.（5分）簡述血培養(yǎng)的采集流程及質(zhì)量控制要點(diǎn)。答案：采集流程：①嚴(yán)格皮膚消毒（70%乙醇→碘伏→70%乙醇，待干）；②成人采2套（需氧+厭氧），每套2瓶，采血量810ml/瓶；③兒童采12套，采血量15ml/瓶（根據(jù)體重）；④2次采血間隔≥1小時(shí)（懷疑敗血癥時(shí)）；⑤標(biāo)識(shí)清晰（患者信息、采血時(shí)間）。質(zhì)量控制要點(diǎn)：避免皮膚菌群污染（嚴(yán)格消毒）；采血量充足（過少降低陽性率，過多抑制細(xì)菌生長）；2小時(shí)內(nèi)送檢（室溫保存不超過4小時(shí)）；厭氧瓶優(yōu)先接種（減少氧氣進(jìn)入）；記錄采血時(shí)間與抗生素使用情況。3.（5分）簡述分子生物學(xué)技術(shù)（如PCR）在微生物檢驗(yàn)中的局限性。答案：局限性：①無法區(qū)分活菌與死菌（需結(jié)合培養(yǎng)或死活染料）；②存在假陽性（交叉污染、引物非特異性結(jié)合）；③假陰性（模板降解、抑制物干擾）；④無法直接提供藥敏信息（需聯(lián)合表型檢測）；⑤對(duì)操作環(huán)境要求高（需分區(qū)操作，避免氣溶膠污染）；⑥成本較高（設(shè)備、試劑費(fèi)用）；⑦依賴靶基因選擇（未知病原體可能漏檢）。4.（5分）簡述實(shí)驗(yàn)室如何進(jìn)行多重耐藥菌（MDRO）的監(jiān)測與報(bào)告。答案：監(jiān)測：①常規(guī)藥敏試驗(yàn)中篩選MDRO（如耐碳青霉烯腸桿菌科細(xì)菌CRE、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA等）；②建立MDRO登記本，記錄菌株類型、患者信息、藥敏結(jié)果；③定期分析科室分布、耐藥趨勢(shì)（每月/季度總結(jié)）。①檢測到MDRO后2小時(shí)內(nèi)電話通知臨床科室；②24小時(shí)內(nèi)出具正式報(bào)告（注明“多重耐藥菌”）；③同時(shí)報(bào)告醫(yī)院感染管理科；④結(jié)果需包含具體耐藥表型（如“對(duì)碳青霉烯類、三代頭孢、氟喹諾酮類耐藥”）；⑤建議臨床采取接觸隔離措施。五、案例分析題（共2題，30分）案例1（15分）：患者男性，65歲，因“發(fā)熱伴咳嗽、咳痰3天”入院，體溫39.2℃，白細(xì)胞18×10?/L（中性粒細(xì)胞89%），胸部CT示右下肺實(shí)變影。痰標(biāo)本涂片革蘭染色見大量革蘭陰性桿菌，痰培養(yǎng)結(jié)果：肺炎克雷伯菌（ESBL陽性，對(duì)頭孢噻肟、左氧氟沙星耐藥，對(duì)亞胺培南敏感）。問題：（1）該患者可能的診斷是什么？依據(jù)是什么？（5分）（2）實(shí)驗(yàn)室檢測ESBL的方法有哪些？如何驗(yàn)證結(jié)果？（5分）（3）臨床治療應(yīng)選擇何種抗生素？需注意哪些問題？（5分）答案：（1）診斷：社區(qū)獲得性肺炎（CAP），由產(chǎn)ESBL的肺炎克雷伯菌引起。依據(jù)：老年患者，發(fā)熱、咳嗽、咳痰，白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞升高，胸部CT示肺實(shí)變；痰培養(yǎng)分離到肺炎克雷伯菌（ESBL陽性），且為優(yōu)勢(shì)菌（涂片見大量革蘭陰性桿菌）。（2）ESBL檢測方法：①紙片擴(kuò)散法（CLSI推薦頭孢泊肟/頭孢他啶/頭孢噻肟單藥與加克拉維酸的復(fù)合紙片，抑菌圈直徑差值≥5mm為陽性）；②肉湯稀釋法（比較單藥與復(fù)合藥的MIC，比值≥8倍為陽性）；③自動(dòng)化系統(tǒng)（如VITEK2的ESBL檢測模塊）。驗(yàn)證：需同時(shí)檢測三代頭孢（如頭孢噻肟）和單環(huán)β內(nèi)酰胺類（氨曲南）的耐藥性，若均因克拉維酸恢復(fù)敏感，可確認(rèn)ESBL陽性；此外，可通過分子生物學(xué)方法檢測blaCTXM、blaSHV等ESBL基因。（3）治療選擇：亞胺培南（對(duì)該菌敏感），或其他碳青霉烯類（如美羅培南）。注意事項(xiàng)：①需結(jié)合患者腎功能調(diào)整劑量（老年患者可能存在腎功能減退）；②監(jiān)測藥物不良反應(yīng)（如中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性）；③治療35天后評(píng)估療效（體溫、白細(xì)胞、癥狀改善情況）；④若病情好轉(zhuǎn)，可降階梯為β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑（如哌拉西林/他唑巴坦），但需確認(rèn)該復(fù)合藥對(duì)菌株敏感（需查看藥敏結(jié)果）；⑤注意醫(yī)院感染防控（接觸隔離，避免交叉