2025年大學大一（分子生物學）DNA提取期中測試試題及答案

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題共30分）答題要求：每題只有一個正確答案，請將正確答案的序號填在括號內(nèi)。(總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案的序號填在括號內(nèi))w1.以下哪種不是DNA提取過程中常用的試劑？（）A.蛋白酶KB.乙醇C.氫氧化鈉D.氯仿w2.在DNA提取中，蛋白酶K的作用主要是（）。A.沉淀DNAB.降解蛋白質(zhì)C.去除雜質(zhì)D.溶解DNAw3.提取DNA時，加入氯仿-異戊醇的目的是（）。A.使DNA變性B.沉淀蛋白質(zhì)C.去除多糖D.抑制核酸酶活性w4.下列關(guān)于DNA提取中離心操作的說法，正確的是（）。A.離心速度越高越好B.離心時間越長越好C.不同階段需要不同的離心條件D.離心只是為了讓溶液分層w5.DNA提取過程中，用乙醇沉淀DNA時，最佳的乙醇濃度是（）。A.50%B.70%C.95%D.無水乙醇w6.能使DNA雙鏈解開的方法是（）。A.加熱B.加酸C.加堿D.加酶w7.在DNA提取中，酚-氯仿抽提后，DNA主要存在于（）。A.上層水相B.中層界面C.下層有機相D.都有可能w8.提取植物DNA時，需要先破碎細胞，常用的方法不包括（）。A.研磨B.超聲破碎C.酶解D.離心w9.以下哪種物質(zhì)可用于去除DNA溶液中的RNA雜質(zhì)？（）A.蛋白酶KB.RNaseAC.DNaseID.乙醇w10.DNA提取后，檢測其純度常用的方法是（）。A.紫外分光光度法B.凝膠電泳C.熒光定量D.蛋白質(zhì)印跡法第II卷（非選擇題共70分）w11.（10分）簡述DNA提取的基本原理。w12.（15分）請詳細說明DNA提取過程中各個主要步驟的目的。w13.（15分）材料：從某種植物組織中提取DNA。在提取過程中，發(fā)現(xiàn)提取的DNA量較少且純度不高。分析可能導致這種情況的原因，并提出改進措施。w14.（15分）材料：現(xiàn)有一份血液樣本用于DNA提取。請設(shè)計一個DNA提取的實驗方案，包括具體步驟和所需試劑。w15.（15分）材料：在DNA提取實驗中，有同學按照常規(guī)步驟操作后，得到的DNA溶液經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)有較多雜質(zhì)。請分析雜質(zhì)可能來源，并說明如何進一步純化DNA。答案：w1.Cw2.Bw3.Bw4.Cw5.Cw6.Aw7.Aw8.Dw9.Bw10.Aw11.DNA提取的基本原理是利用DNA與其他生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖等在物理和化學性質(zhì)上的差異，通過一系列方法將DNA從細胞或組織中分離出來。例如利用蛋白酶K降解蛋白質(zhì)，通過酚-氯仿抽提去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，利用乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。w12.細胞破碎步驟目的是釋放出細胞內(nèi)的DNA；加蛋白酶K是為了降解蛋白質(zhì)，避免蛋白質(zhì)與DNA纏繞影響提?。环?氯仿抽提是為了去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)；乙醇沉淀是使DNA聚集沉淀下來；最后洗滌和溶解是為了進一步純化和獲得可用于后續(xù)實驗的DNA溶液。w13.可能原因：植物組織研磨不充分，細胞未完全破碎，導致DNA釋放量少；提取過程中溫度控制不當，影響了酶活性和DNA穩(wěn)定性；試劑使用量不準確或試劑質(zhì)量不佳。改進措施：充分研磨植物組織；嚴格控制提取過程溫度；準確使用試劑并確保試劑質(zhì)量合格。w14.實驗方案：首先采集適量血液樣本，加入抗凝劑防止血液凝固。然后將血液離心，取下層血細胞沉淀。加入細胞裂解液，使細胞破碎釋放DNA。再加入蛋白酶K，37℃孵育一段時間降解蛋白質(zhì)。接著進行酚-氯仿抽提，去除蛋白質(zhì)。取上層水相，加入乙醇沉淀DNA。最后用70%乙醇洗滌沉淀，晾干后用適量TE緩沖液溶解DNA。所需試劑：抗凝劑、細胞裂解液、蛋白酶K、酚、氯仿、異戊醇、乙醇、TE緩沖液等。w15.雜質(zhì)可能來源：組織細胞破碎不完全，殘留的細胞碎片成為雜質(zhì)；蛋白酶K作用不充