液體活檢技術(shù)：腫瘤個體化治療的新基石演講人2026-01-08

液體活檢的技術(shù)內(nèi)涵與核心原理01當前面臨的挑戰(zhàn)與突破方向02液體活檢在腫瘤個體化治療中的關(guān)鍵應(yīng)用03未來展望：重塑腫瘤診療生態(tài)的“基石力量”04目錄

液體活檢技術(shù)：腫瘤個體化治療的新基石引言：腫瘤診療困境與液體活檢的崛起在腫瘤臨床一線工作十余年，我見證了無數(shù)患者因“一刀切”的傳統(tǒng)治療方案而錯失最佳治療時機的遺憾。傳統(tǒng)組織活檢作為腫瘤診斷的“金標準”，雖能提供病理類型和基因突變信息，卻存在諸多局限：侵入性操作導(dǎo)致部分患者無法耐受（如晚期、轉(zhuǎn)移或體弱患者）；腫瘤異質(zhì)性使得單一組織樣本難以反映整體病灶特征；重復(fù)活檢的難度與風險限制了動態(tài)監(jiān)測治療響應(yīng)的可能性。隨著精準醫(yī)療時代的到來，腫瘤個體化治療對實時、全面、微創(chuàng)的檢測手段提出了迫切需求——正是在這樣的背景下，液體活檢技術(shù)應(yīng)運而生，以其獨特的優(yōu)勢逐步成為腫瘤診療領(lǐng)域不可或缺的“新基石”。

液體活檢，顧名思義，是通過檢測體液（如外周血、尿液、腦脊液等）中腫瘤來源的生物標志物，實現(xiàn)對腫瘤的分子分型、療效監(jiān)測、耐藥預(yù)警等目的的技術(shù)。它不僅突破了傳統(tǒng)活檢的空間限制，更通過“動態(tài)監(jiān)測”的特性，為腫瘤個體化治療提供了前所未有的決策依據(jù)。正如我在2022年參與的一例晚期非小細胞肺癌（NSCLC）診療中，一位因縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無法耐受組織活檢的患者，通過液體活檢檢測到EGFRL858R突變，靶向治療8個月后影像學(xué)評估疾病穩(wěn)定，ctDNA清除率100%——這一案例讓我深刻體會到，液體活檢不僅是一種檢測工具，更是連接“精準診斷”與“個體化治療”的橋梁。本文將從技術(shù)內(nèi)涵、臨床應(yīng)用、挑戰(zhàn)突破及未來展望四個維度，系統(tǒng)闡述液體活檢如何重塑腫瘤個體化治療的實踐路徑。01ONE液體活檢的技術(shù)內(nèi)涵與核心原理

液體活檢的技術(shù)內(nèi)涵與核心原理液體活檢并非單一技術(shù)，而是一個以“腫瘤源性生物標志物”為核心的技術(shù)體系，其本質(zhì)是通過捕捉體液中微量腫瘤信息，解碼腫瘤的生物學(xué)行為。理解其技術(shù)內(nèi)涵，需從標志物類型、檢測原理及技術(shù)平臺三個層面展開。

核心標志物類型：腫瘤信息的“載體”腫瘤細胞在生長、侵襲、轉(zhuǎn)移過程中，會釋放多種物質(zhì)進入體液，這些物質(zhì)成為液體活檢的“標志物”。目前臨床應(yīng)用最廣泛的標志物包括以下四類：1.循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）：ctDNA是腫瘤細胞壞死、凋亡或主動分泌釋放到血液中的DNA片段，長度通常為166-200bp，攜帶與原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶一致的體細胞突變、甲基化、拷貝數(shù)變異等遺傳信息。其優(yōu)勢在于：半衰期短（約2小時），能實時反映腫瘤負荷變化；在血液中含量雖低（晚期患者約占游離DNA的0.1%-10%），但技術(shù)進步已可實現(xiàn)低豐度突變檢測（如ddPCR靈敏度達0.01%）；適用范圍廣，幾乎涵蓋所有實體瘤。例如，我在臨床中觀察到，結(jié)直腸癌術(shù)后患者ctDNA水平早于影像學(xué)6-12個月出現(xiàn)升高，成為復(fù)發(fā)預(yù)警的關(guān)鍵指標。

核心標志物類型：腫瘤信息的“載體”2.循環(huán)腫瘤細胞（CTCs）：CTCs是自發(fā)從原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶脫落，進入外周血的完整腫瘤細胞，其數(shù)量與腫瘤分期、預(yù)后密切相關(guān)（如乳腺癌患者CTCs≥5個/7.5mL血液提示預(yù)后不良）。CTCs的價值不僅在于計數(shù)，更在于對其開展體外培養(yǎng)（如類器官構(gòu)建）、單細胞測序等功能分析，直接指導(dǎo)藥敏試驗。2023年，我中心一位前列腺癌患者通過CTCs測序發(fā)現(xiàn)AR-V7突變，避免了無效的阿比特龍治療，改用多西他賽后PSA下降50%。3.外泌體（Exosomes）：外泌體是細胞分泌的直徑30-150nm的囊泡，攜帶DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子。其特點是：穩(wěn)定性強（脂質(zhì)雙層膜保護不易降解），能跨越血腦屏障（適用于腦瘤患者），且能反映腫瘤微環(huán)境信息。例如，膠質(zhì)母細胞瘤患者腦脊液中外泌體的EGFRvIII突變檢測陽性率顯著高于ctDNA，為靶向治療提供了新靶點。

核心標志物類型：腫瘤信息的“載體”4.循環(huán)RNA（circRNA、miRNA等）：circRNA具有穩(wěn)定性高、組織特異性強的特點，如circ-PVT1在肝癌中高表達，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)；miRNA則參與腫瘤調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，如miR-21在多種實體瘤中作為“致癌miRNA”過表達，其血清水平可輔助療效評估。

檢測技術(shù)平臺：從“捕捉”到“解讀”的跨越液體活檢的臨床價值依賴于高靈敏度、高特異性的檢測技術(shù)。當前主流技術(shù)平臺可分為三類，各具優(yōu)勢與適用場景：1.高通量測序（NGS）技術(shù)：NGS能同時對數(shù)百萬個DNA/RNA分子進行并行測序，全面檢測基因突變（單核苷酸變異、插入缺失、拷貝數(shù)變異）、融合基因、腫瘤突變負荷（TMB）等。其優(yōu)勢在于“全景式”分析，如FoundationOneLiquidCDx（FDA批準）可檢測70個基因，指導(dǎo)晚期NSCLC、乳腺癌等多癌種的靶向治療。但NGS存在成本高、分析流程復(fù)雜、低頻突變漏檢等局限，需結(jié)合生物信息學(xué)算法（如UMI標簽技術(shù)）提升準確性。

檢測技術(shù)平臺：從“捕捉”到“解讀”的跨越2.數(shù)字PCR（dPCR）技術(shù)：dPCR通過微滴式（ddPCR）或芯片式（digitalPCR）將反應(yīng)體系分割成數(shù)千個獨立單元，實現(xiàn)“絕對定量”檢測，靈敏度可達0.001%，特別適用于EGFRT790M、KRASG12C等耐藥突變的監(jiān)測。例如，我中心對一例奧希替尼耐藥的NSCLC患者采用ddPCR檢測，發(fā)現(xiàn)ctDNA中EGFRC797S突變豐度0.05%，及時調(diào)整治療方案為化療聯(lián)合MET抑制劑。3.新興技術(shù)平臺：如單細胞測序（解決CTCs異質(zhì)性）、納米孔測序（實現(xiàn)長片段測序，揭示甲基化模式）、表面增強拉曼散射（SERS，基于光學(xué)信號快速檢測標志物）等，正在推動液體活檢向“更精準、更快速、更便捷”方向發(fā)展。

技術(shù)優(yōu)勢與傳統(tǒng)活檢的互補性與傳統(tǒng)組織活檢相比，液體活檢的核心優(yōu)勢可概括為“四性”：微創(chuàng)性（僅需10mL外周血）、實時性（可重復(fù)檢測動態(tài)變化）、全面性（反映不同轉(zhuǎn)移灶的異質(zhì)性）、早期性（影像學(xué)異常前即可檢測到標志物變化）。但需強調(diào)的是，液體活檢并非要取代組織活檢，而是“互補”：對于組織活檢不可及的患者，液體活檢是“救命稻草”；對于組織活檢可及的患者，二者結(jié)合可實現(xiàn)“雙保險”（如組織活檢驅(qū)動初始治療，液體活檢動態(tài)監(jiān)測）。02ONE液體活檢在腫瘤個體化治療中的關(guān)鍵應(yīng)用

液體活檢在腫瘤個體化治療中的關(guān)鍵應(yīng)用腫瘤個體化治療的核心是“基于分子分型的精準干預(yù)”，而液體活檢貫穿了“早期篩查-診斷分型-療效監(jiān)測-耐藥預(yù)警-預(yù)后評估”的全病程管理鏈條，成為實現(xiàn)這一目標的關(guān)鍵支撐。以下結(jié)合具體癌種與臨床場景，闡述其應(yīng)用價值。

早期篩查與輔助診斷：從“不可見”到“可預(yù)見”腫瘤早期是治療的最佳窗口，但傳統(tǒng)影像學(xué)與血清學(xué)標志物（如CEA、AFP）的靈敏度與特異性有限。液體活檢通過檢測ctDNA突變、甲基化等早期事件，有望實現(xiàn)“無癥狀期”腫瘤的檢出。1.多癌種早期篩查：如GRAIL公司的Galleri?檢測通過cfDNA甲基化譜分析，可檢測包括肺癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌等在內(nèi)的50多種癌癥，特異性高達99.5%，在臨床研究中對I期癌癥的檢出率達43%。2023年ASCO會議公布的PATHFINDER研究顯示，液體活檢陽性人群中，72%通過后續(xù)檢查確診為惡性腫瘤，其中39%為I-II期。

早期篩查與輔助診斷：從“不可見”到“可預(yù)見”2.特定癌種輔助診斷：在肝癌中，ctDNA的AFP基因甲基化檢測靈敏度（85%）顯著高于血清AFP（59%）；在肺癌中，SINA基因甲基化聯(lián)合CT可將早期診斷靈敏度提升至92%。我接觸過一例長期吸煙、體檢CT陰性但痰液cfDNA檢測發(fā)現(xiàn)KRAS突變的患者，3個月后隨訪CT確診為早期肺腺癌，通過胸腔鏡微創(chuàng)手術(shù)實現(xiàn)根治。

分子分型與靶向治療選擇：從“廣譜治療”到“精準打擊”靶向治療的核心是“驅(qū)動基因檢測”，而液體活檢在組織不可及時仍能提供關(guān)鍵分子信息。1.驅(qū)動基因檢測：EGFR、ALK、ROS1、BRAF等驅(qū)動基因突變在NSCLC中的發(fā)生率約50%，對應(yīng)多種靶向藥物。液體活檢對EGFR突變的檢測靈敏度與組織活檢一致（約90%），如ARTEMIS研究顯示，血漿ctDNA檢測EGFR敏感突變的符合率達94.4%。對于ALK融合，NGS-based液體活檢的符合率達88.2%，尤其適用于無法獲取組織樣本的患者。2.罕見突變與復(fù)雜融合檢測：如RET融合、MET14號外顯子跳躍突變等罕見靶點，液體活檢可通過RNA-seq實現(xiàn)準確檢測。一例我科收治的肺腺腦轉(zhuǎn)移患者，組織活檢因病灶太小失敗，液體活檢檢出RET融合，給予塞普替尼治療后，顱內(nèi)病灶縮小80%，神經(jīng)癥狀明顯改善。

療效監(jiān)測與動態(tài)調(diào)整：從“靜態(tài)評估”到“動態(tài)管理”傳統(tǒng)療效評估依賴RECIST標準（影像學(xué)測量病灶大?。嬖跍笮裕[瘤縮小需數(shù)周至數(shù)月），且無法反映分子層面的早期變化。液體活檢通過標志物水平變化，可在治療早期（1-2周期）預(yù)測療效，及時調(diào)整方案。1.快速評估治療響應(yīng)：如接受靶向治療的NSCLC患者，若治療后ctDNA清除率（突變豐度下降≥50%）在2周內(nèi)出現(xiàn)，其無進展生存期（PFS）顯著延長（中位PFS18.5個月vs6.2個月）；若ctDNA持續(xù)陽性，即使影像學(xué)疾病穩(wěn)定（SD），也預(yù)示后續(xù)進展風險高（我中心數(shù)據(jù)：ctDNA陽性患者SD后6個月內(nèi)進展率78%）。

療效監(jiān)測與動態(tài)調(diào)整：從“靜態(tài)評估”到“動態(tài)管理”2.免疫治療療效預(yù)測：腫瘤突變負荷（TMB）和微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）是免疫治療的重要生物標志物。液體活檢TMB檢測與組織TMB相關(guān)性達0.82，且可動態(tài)變化：如PD-1抑制劑治療后ctDNATMB下降患者，客觀緩解率（ORR）達45%，而TMB上升者ORR僅12%。（四）耐藥機制解析與治療策略優(yōu)化：從“經(jīng)驗性換藥”到“靶向耐藥”耐藥是腫瘤治療失敗的主要原因，液體活檢能快速解析耐藥機制，指導(dǎo)后續(xù)治療選擇。1.靶向治療耐藥監(jiān)測：如EGFR-TKI耐藥后，50%-60%患者出現(xiàn)T790M突變，液體活檢可無創(chuàng)檢測這一靶點，指導(dǎo)奧希替尼等三代TKI的使用；若檢測到MET擴增、HER2突變等旁路激活，可聯(lián)合相應(yīng)抑制劑。

療效監(jiān)測與動態(tài)調(diào)整：從“靜態(tài)評估”到“動態(tài)管理”2.免疫治療耐藥機制：免疫耐藥涉及T細胞耗竭、抗原呈遞缺失等多重機制，液體活檢通過CTCs免疫表型分析（如PD-L1、TIM3表達）及ctDNA免疫相關(guān)基因突變（如JAK1/2、STK11），可提示耐藥原因。例如，STK11突變患者對PD-1單藥響應(yīng)率極低，聯(lián)合CTLA-4抑制劑可提高ORR至30%。

預(yù)后評估與復(fù)發(fā)預(yù)警：從“被動隨訪”到“主動干預(yù)”術(shù)后或治療后患者的復(fù)發(fā)風險分層是個體化隨訪的關(guān)鍵，液體活檢通過微小殘留病灶（MRD）檢測，實現(xiàn)復(fù)發(fā)風險的精準預(yù)測。1.MRD狀態(tài)評估：如結(jié)直腸癌術(shù)后患者，若ctDNA持續(xù)陰性，2年復(fù)發(fā)率<5%；若ctDNA陽性，即使影像學(xué)陰性，復(fù)發(fā)風險也顯著升高（HR=12.3）。我科對Ⅱ-Ⅲ期結(jié)直腸癌患者開展MRD監(jiān)測，對陽性患者強化輔助化療，使3年無復(fù)發(fā)生存率提高18%。2.動態(tài)監(jiān)測復(fù)發(fā)：乳腺癌患者術(shù)后ctDNA水平較基線升高2倍以上時，中位復(fù)發(fā)時間僅4.2個月，較影像學(xué)提前6-12個月，為早期干預(yù)（如局部放療、二次靶向治療）提供窗口。03ONE當前面臨的挑戰(zhàn)與突破方向

當前面臨的挑戰(zhàn)與突破方向盡管液體活檢在腫瘤個體化治療中展現(xiàn)出巨大潛力，但其臨床推廣仍面臨技術(shù)、臨床轉(zhuǎn)化及倫理等多重挑戰(zhàn)。正視這些挑戰(zhàn)，并尋求突破方向，是推動技術(shù)成熟的關(guān)鍵。

技術(shù)挑戰(zhàn)：從“檢測可行性”到“臨床可靠性”1.靈敏度與特異性的平衡：早期腫瘤、低腫瘤負荷患者ctDNA含量極低（<0.01%），現(xiàn)有技術(shù)易漏檢；而“克隆造血”（CHIP）導(dǎo)致的體細胞突變（如DNMT3A、TET2）會干擾ctDNA檢測結(jié)果，造成假陽性。突破方向包括：優(yōu)化富集技術(shù)（如CTC微流控芯片、ctDNA甲基化化富集）、開發(fā)CHIP過濾算法（如基于突變特征區(qū)分腫瘤與造血來源突變）。2.腫瘤異質(zhì)性的動態(tài)捕捉：原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶、不同轉(zhuǎn)移灶間的克隆異質(zhì)性可能導(dǎo)致液體活檢結(jié)果片面化。解決方案包括：多組學(xué)整合分析（ctDNA+CTCs+外泌體）、單細胞測序技術(shù)（解析單個CTCs的突變圖譜），以及液體活檢與組織活檢的“多點聯(lián)合”。

技術(shù)挑戰(zhàn)：從“檢測可行性”到“臨床可靠性”3.標準化與質(zhì)量控制：不同平臺、不同實驗室的檢測結(jié)果存在差異（如NGSpanels不同導(dǎo)致TMB值偏差），限制了跨中心數(shù)據(jù)對比。亟需建立標準化操作流程（SOP）、參考品體系（如標準品細胞系cfDNA），并推動第三方質(zhì)控認證。

臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從“實驗室數(shù)據(jù)”到“臨床指南”1.臨床驗證的滯后性：多數(shù)液體活檢檢測仍處于“探索性研究”階段，缺乏大規(guī)模前瞻性臨床試驗證據(jù)（如Ⅲ期RCT驗證其指導(dǎo)治療的有效性）。目前僅少數(shù)檢測（如FoundationOneLiquidCDx、Guardant360）獲FDA/NMPA批準，多數(shù)應(yīng)用處于“off-label”狀態(tài)。2.衛(wèi)生經(jīng)濟學(xué)與可及性：液體活檢檢測費用（約3000-10000元/次）對部分患者仍較高，且醫(yī)保覆蓋有限。需通過技術(shù)成本優(yōu)化（如POCT設(shè)備開發(fā)）、多中心數(shù)據(jù)共享降低成本，并推動醫(yī)保準入，讓更多患者獲益。3.臨床路徑整合：如何將液體活檢結(jié)果融入現(xiàn)有診療指南（如NCCN、CSCO），明確其在不同癌種、不同場景下的推薦等級（如一線檢測、耐藥檢測、MRD監(jiān)測），需要多學(xué)科專家（腫瘤科、病理科、檢驗科）的共識協(xié)作。

倫理與法規(guī)挑戰(zhàn)：從“技術(shù)進步”到“規(guī)范應(yīng)用”1.數(shù)據(jù)隱私與腫瘤遺傳信息：液體活檢檢測的基因信息可能包含遺傳風險（如BRCA1/2胚系突變），如何保護患者隱私、避免基因歧視，需要建立完善的數(shù)據(jù)安全管理體系和倫理審查機制。013.監(jiān)管框架的完善：液體活檢作為IVD產(chǎn)品，其監(jiān)管需平衡“創(chuàng)新”與“安全”。我國NMPA已發(fā)布《循環(huán)腫瘤細胞檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則》，但仍需針對ctDNA、外泌體等不同標志物制定細分指南，推動行業(yè)規(guī)范發(fā)展。032.“過度檢測”與“過度治療”風險：若液體活檢用于無癥狀人群篩查，可能發(fā)現(xiàn)“惰性腫瘤”或臨床意義不明的變異（VUS），導(dǎo)致過度醫(yī)療。需明確適用人群（如高危人群、特定驅(qū)動基因突變攜帶者），并加強患者教育。0204ONE未來展望：重塑腫瘤診療生態(tài)的“基石力量”

未來展望：重塑腫瘤診療生態(tài)的“基石力量”液體活檢技術(shù)的發(fā)展，不僅是檢測手段的革新，更將推動腫瘤診療模式從“經(jīng)驗醫(yī)學(xué)”向“精準預(yù)測醫(yī)學(xué)”轉(zhuǎn)變。未來5-10年，液體活檢有望在以下領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)突破，成為腫瘤個體化治療的“核心基礎(chǔ)設(shè)施”。

技術(shù)融合：多組學(xué)與人工智能的協(xié)同賦能1.多組學(xué)整合分析：單一標志物（如ctDNA）難以全面反映腫瘤生物學(xué)行為，未來將實現(xiàn)“ctDNA+CTCs+外泌體+循環(huán)蛋白+代謝物”的多組學(xué)聯(lián)合檢測，構(gòu)建“液體活檢全景圖”。例如，通過ctDNA突變譜+CTCs蛋白表達譜，可同時解析腫瘤基因組學(xué)與免疫微環(huán)境特征，指導(dǎo)免疫聯(lián)合靶向治療。2.人工智能輔助決策：基于深度學(xué)習(xí)的算法可整合液體活檢數(shù)據(jù)（突變豐度、甲基化模式）、臨床數(shù)據(jù)（分期、既往治療）及影像學(xué)數(shù)據(jù)，預(yù)測治療響應(yīng)、復(fù)發(fā)風險及生存期。如IBMWatsonforGenomics已能根據(jù)液體活檢結(jié)果推薦靶向藥物，未來將向“動態(tài)自適應(yīng)決策系統(tǒng)”發(fā)展。

應(yīng)用場景拓展：從“治療中”到“全生命周期管理”1.早篩早診的普及化：隨著多癌種早篩產(chǎn)品的成熟（如Galleri?、CancerSEEK），液體活檢有望成為常規(guī)體檢項目，實現(xiàn)腫瘤的“零級預(yù)防”。預(yù)計2030年，全球早篩市場規(guī)模將達200億美元，使更多患者通過“早發(fā)現(xiàn)、早治療”實現(xiàn)治愈。2.新藥研發(fā)的加速器：液體活檢可作為臨床試驗的“動態(tài)終點指標”，替代傳統(tǒng)影像學(xué)評估，縮短新藥研發(fā)周期。例如，在靶向藥物I期試驗中，通過ctDNA清除率預(yù)測療效，可提前淘汰無效藥物，提高研發(fā)效率。3.腫瘤疫苗與細胞治療的伴隨診斷：個性化腫瘤疫苗（如NeoVax）和CAR-T治療依賴于腫瘤新抗原的鑒定，液體活檢提供的ctDNA突