152025-10-30發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定年版的4）、毛囊密度的校正（見2018年版的6.4.4——2018年首次發(fā)布為DB15/T15281本文件規(guī)定了絨山羊皮膚毛囊切片測定法的器械及試劑、測定方法等內(nèi)容。本文件適用于皮膚毛囊密度的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。單位面積內(nèi)皮膚初級和次級毛囊數(shù)。皮膚組織在脫水后面積與采樣面積的比率。4器械及試劑皮膚取樣器、手術(shù)刀、鑷子、顯微鏡、切片機等。4.2試劑4%多聚甲醛、無水乙醇、蒸餾水、二甲苯、石蠟、伊紅-蘇木素、碘伏、止血藥等。5測定方法5.1樣品采集及處理2在采樣區(qū)域進行手術(shù)備皮，消毒后，用皮膚取樣器采集皮膚樣本約1cm2。試驗羊創(chuàng)5.2切片制作5.2.1皮膚組織切片制作5.3顯微鏡觀測之間有明顯界限(見附錄C)。顯微鏡下記錄確定區(qū)域內(nèi)毛囊數(shù)量，在具有顯微成像系統(tǒng)的實驗室中，可以利用分析軟件直接選取面積并做毛囊計數(shù)；也可在蓋玻片上人工框定計數(shù)面積或5.4皮膚毛囊密度計算5.4.1皮膚收縮率皮膚組織在脫水透明后皮膚面積與活體樣皮膚面積的比值，結(jié)5.4.2毛囊密度p——毛囊密度的數(shù)值，單位為每平方厘米的數(shù)量(個/cm2);n——選定區(qū)域內(nèi)毛囊數(shù)量的數(shù)值，單位為個(個);r——皮膚收縮率的數(shù)值，單位為百分號(%)。3A.14%多聚甲醛固定采集的皮膚樣品用鑷子展平，置于4%多聚甲醛溶液中浸泡24A.2梯度濃度酒精脫水A.3二甲苯透明A.4石蠟包埋將透明后的皮膚組織浸入石蠟中2h～4h，浸4將載玻片上的皮膚組織分別兩次置于二甲苯中，每次5min～15min，確保石蠟完全溶解。首先，置于蘇木素中浸染8min～10min，用水沖洗。其次，置于分化液（1%鹽酸酒精）中（3s~將染色后的皮膚組織依次浸入75%、85%、95%、100%酒精溶液中各脫水5m將載玻片上的皮膚組織分別兩次置于二甲苯中，每次5min～15m5(資料性)絨山羊皮膚組織切片(橫切)染色成像絨