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(2025年)檢驗實踐能力考試題及答案一、操作技能考核(40分)(一)手工白細(xì)胞分類計數(shù)操作(20分)1.操作要求:使用患者EDTA抗凝血制備血涂片,完成瑞氏-吉姆薩染色后進(jìn)行白細(xì)胞分類計數(shù)(100個白細(xì)胞),記錄各類細(xì)胞比例并判斷是否符合參考范圍。2.操作步驟(需按順序敘述,每錯漏1項扣1分):(1)取潔凈載玻片,用吸管吸取1滴抗凝血(約5μl)置于載玻片一端1/3處;(2)以推片與載玻片呈30°-45°角,均勻快速向前推動,制成頭體尾分明、厚薄適宜的血膜;(3)待血膜自然干燥后,滴加瑞氏染液覆蓋血膜(約8-10滴),固定1分鐘;(4)滴加等量吉姆薩緩沖液(pH6.4-6.8)與染液混合,輕輕晃動載玻片,染色8-10分鐘;(5)用蒸餾水從玻片一端緩慢沖洗,避免沖掉血膜,干燥后鏡檢;(6)在油鏡下從體尾交界處開始,按“蛇形”路線計數(shù)100個白細(xì)胞,分別記錄中性分葉核粒細(xì)胞(Nsg)、中性桿狀核粒細(xì)胞(Nst)、嗜酸性粒細(xì)胞(Eos)、嗜堿性粒細(xì)胞(Bas)、淋巴細(xì)胞(Lym)、單核細(xì)胞(Mon)的數(shù)量;(7)計算各類細(xì)胞百分比,與參考范圍(Nsg40%-75%、Nst0%-5%、Eos0.4%-8%、Bas0%-1%、Lym20%-50%、Mon3%-10%)對比分析。3.常見問題及扣分點(diǎn)(共5分):-血涂片過厚或過?。?分);-染色過深或過淺(扣1分);-計數(shù)區(qū)域選擇不當(dāng)(未選體尾交界,扣1分);-未計數(shù)滿100個細(xì)胞(每少5個扣1分)。(二)全自動生化分析儀校準(zhǔn)操作(20分)1.操作要求:使用某品牌全自動生化分析儀(型號:BS-800),對丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)項目進(jìn)行兩點(diǎn)校準(zhǔn)(校準(zhǔn)品濃度:低水平20U/L,高水平200U/L)。2.操作步驟(需結(jié)合儀器界面描述,每錯漏1項扣1分):(1)開機(jī)預(yù)熱30分鐘,檢查儀器狀態(tài)(水位、試劑位、樣品針清潔度),確認(rèn)無報警;(2)進(jìn)入“校準(zhǔn)”模塊,選擇ALT項目,設(shè)定校準(zhǔn)類型為“兩點(diǎn)校準(zhǔn)”,輸入校準(zhǔn)品靶值(低20U/L,高200U/L);(3)將校準(zhǔn)品1(低水平)和校準(zhǔn)品2(高水平)分別放置于樣品盤指定位置(如1號、2號位);(4)在儀器參數(shù)設(shè)置中確認(rèn)ALT的檢測方法(速率法,波長340nm/405nm)、試劑R1/R2體積(R1240μl,R280μl)、樣品量(10μl)、孵育時間(5分鐘);(5)啟動校準(zhǔn)程序,儀器自動吸取校準(zhǔn)品,加入試劑,檢測吸光度變化;(6)校準(zhǔn)完成后,查看校準(zhǔn)曲線(r應(yīng)≥0.995),確認(rèn)斜率(K值)和截距(B值)在允許范圍內(nèi)(K值波動≤±5%,B值≤±2U/L);(7)打印校準(zhǔn)記錄,簽字確認(rèn)并歸檔。3.關(guān)鍵注意事項(共5分):-校準(zhǔn)品需與檢測系統(tǒng)匹配(未核對扣2分);-校準(zhǔn)前需做儀器維護(hù)(未做比色杯清潔扣1分);-校準(zhǔn)失敗時需檢查試劑批號是否變更(未排查扣1分);-校準(zhǔn)結(jié)果需經(jīng)第二人復(fù)核(未復(fù)核扣1分)。二、案例分析題(30分)(一)臨床血液學(xué)案例(15分)患者,女,32歲,主訴“乏力、頭暈3個月,加重1周”。血常規(guī)結(jié)果:Hb78g/L(↓),RBC3.1×1012/L(↓),MCV72fl(↓),MCH24pg(↓),MCHC310g/L(↓),RDW18.5%(↑);血清鐵5.2μmol/L(↓,參考值11-30μmol/L),總鐵結(jié)合力82μmol/L(↑,參考值45-72μmol/L),鐵蛋白8μg/L(↓,參考值20-200μg/L)。問題1:該患者貧血的形態(tài)學(xué)分類及最可能的病因是什么?(5分)答案:小細(xì)胞低色素性貧血(2分);最可能病因為缺鐵性貧血(3分)。問題2:需與哪些疾病進(jìn)行鑒別診斷?需補(bǔ)充哪些實驗室檢查?(5分)答案:需鑒別慢性病性貧血(ACD)、地中海貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血(2分)。補(bǔ)充檢查:骨髓鐵染色(觀察細(xì)胞內(nèi)外鐵)、血紅蛋白電泳(排除地中海貧血)、血清可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)檢測(sTfR升高支持缺鐵性貧血,ACD時正?;蚪档停?分)。問題3:若患者治療3個月后Hb升至110g/L,但停藥1個月后Hb再次下降至85g/L,可能的原因是什么?(5分)答案:可能原因:①未明確缺鐵病因(如消化道慢性失血未糾正,如月經(jīng)過多、痔瘡等);②補(bǔ)鐵療程不足(需在Hb正常后繼續(xù)補(bǔ)鐵4-6個月以補(bǔ)足儲存鐵);③存在干擾鐵吸收的因素(如同時服用抗酸藥、飲茶等)(每點(diǎn)2分,答滿3點(diǎn)得5分)。(二)臨床微生物學(xué)案例(15分)患者,男,68歲,COPD急性發(fā)作入院,痰培養(yǎng)結(jié)果:革蘭陰性桿菌,氧化酶陽性,動力陽性,42℃生長,麥康凱平板上形成綠色黏液型菌落;進(jìn)一步檢測:葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(O/F)為氧化型,精氨酸雙水解酶陽性,賴氨酸脫羧酶陰性,鳥氨酸脫羧酶陰性。問題1:該菌最可能的鑒定結(jié)果是什么?依據(jù)是什么?(5分)答案:銅綠假單胞菌(2分)。依據(jù):氧化酶陽性、動力陽性、42℃生長、麥康凱平板綠色菌落(提示產(chǎn)生綠膿素)、O/F氧化型、精氨酸雙水解酶陽性(3分)。問題2:該菌的主要耐藥機(jī)制有哪些?需關(guān)注哪些耐藥表型?(5分)答案:耐藥機(jī)制:①外膜蛋白缺失(OprD缺失導(dǎo)致對碳青霉烯類耐藥);②產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶(如金屬酶IMP、VIM);③主動外排系統(tǒng)(MexAB-OprM等);④生物被膜形成(2分)。需關(guān)注:對碳青霉烯類耐藥(CRPA)、多粘菌素耐藥(需檢測MIC)、是否產(chǎn)ESBL(雖非主要機(jī)制,但可能合并其他耐藥)(3分)。問題3:若該患者痰培養(yǎng)同時檢出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA),經(jīng)驗性治療應(yīng)如何調(diào)整?(5分)答案:需聯(lián)合抗銅綠假單胞菌藥物(如頭孢他啶/阿維巴坦、哌拉西林/他唑巴坦)與抗MRSA藥物(如萬古霉素、利奈唑胺)(3分);同時需評估感染嚴(yán)重程度,若為重癥肺炎,可考慮碳青霉烯類(如美羅培南)聯(lián)合糖肽類(2分)。三、質(zhì)量控制與實驗室管理(30分)(一)室內(nèi)質(zhì)量控制(15分)某實驗室生化室使用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)測肌酐(Cr)項目,連續(xù)5天的質(zhì)控結(jié)果(靶值100μmol/L,標(biāo)準(zhǔn)差5μmol/L)如下:第1天:103μmol/L(+0.6s)第2天:106μmol/L(+1.2s)第3天:109μmol/L(+1.8s)第4天:112μmol/L(+2.4s)第5天:115μmol/L(+3.0s)問題1:該組質(zhì)控數(shù)據(jù)違反了哪些質(zhì)控規(guī)則?(5分)答案:違反了“7規(guī)則”中的“趨勢性變化”(連續(xù)5次結(jié)果逐漸遞增,超過+0.6s→+3.0s)(3分)和“13s”規(guī)則(第5天結(jié)果超過+3s)(2分)。問題2:出現(xiàn)上述失控情況時,應(yīng)采取哪些處理措施?(5分)答案:①立即停止報告患者結(jié)果(1分);②檢查質(zhì)控品是否失效(復(fù)溶是否正確、保存條件)(1分);③檢查儀器狀態(tài)(校準(zhǔn)是否過期、試劑批號是否更換、比色杯是否污染)(1分);④重新測定質(zhì)控品(若仍失控,更換新批號質(zhì)控品或校準(zhǔn)品)(1分);⑤失控處理過程記錄完整(包括原因分析、糾正措施、驗證結(jié)果)(1分)。問題3:若最終確認(rèn)原因為校準(zhǔn)品賦值錯誤,后續(xù)應(yīng)如何改進(jìn)?(5分)答案:①追溯近3天內(nèi)所有Cr檢測結(jié)果,使用正確校準(zhǔn)參數(shù)重新計算(2分);②與臨床溝通異常結(jié)果,必要時重新檢測患者樣本(1分);③加強(qiáng)校準(zhǔn)品管理,使用前核對溯源性文件(1分);④對技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn),強(qiáng)調(diào)校準(zhǔn)后需驗證質(zhì)控結(jié)果(1分)。(二)實驗室生物安全(15分)某實驗室工作人員在處理HBsAg陽性血清時,被離心管碎片刺傷左手食指(可見出血)。問題1:該事件的生物安全等級屬于哪一類?暴露源的危害程度如何?(5分)答案:屬于二級暴露(皮膚刺傷伴出血)(2分);暴露源為HBsAg陽性血清,具有高傳染性(HBV載量未知時按高風(fēng)險處理)(3分)。問題2:現(xiàn)場應(yīng)立即采取哪些應(yīng)急處理措施?(5分)答案:①立即從近心端向遠(yuǎn)心端擠壓傷口,盡可能擠出損傷處血液(1分);②用肥皂水和流動清水沖洗傷口(1分);③用75%乙醇或0.5%碘伏消毒傷口(1分);④報告實驗室負(fù)責(zé)人和生物安全管理員(1分);⑤填寫《職業(yè)
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