ICS65.020.01B05DB41標(biāo)標(biāo)河南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB41/T1926—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：郝西、臧秀旺、劉娟、張俊、鄭崢、郭秀璞、湯豐收、高偉、徐靜、張忠信、孫子淇、苗利娟、杜紅、張香萍、王桂芳、崔亞男、張曼。DB41/T1926—20191高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的術(shù)語和定義、質(zhì)量要求、檢驗(yàn)方法與檢驗(yàn)規(guī)則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于河南省高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程扦樣GB/T3543.3農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程凈度分析GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定GB/T3543.6農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程水分測(cè)定GB5009.168食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪酸的測(cè)定GB20464農(nóng)作物種子標(biāo)簽通則NY/T2237植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南花生3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1高油酸花生種子脂肪中油酸含量≥75%的花生。3.2種子純度品種在特征特性方面典型一致的程度，用本品種的種子數(shù)占供檢本作物樣品種子數(shù)的百分率表示。3.3種子凈度在一定量的種子中，正常種子的重量占總重量（包含正常種子之外的雜質(zhì)）的百分比。3.4四級(jí)種子在種子生產(chǎn)中，以育種家種子為種源，運(yùn)用重復(fù)繁殖技術(shù)路線，按世代順序繁殖的育種家種子、原原種、原種和大田用種的種子。3.5育種家種子育種家育成的最初種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。2DB41/T1926—20193.6原原種由育種家種子直接繁殖的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。3.7原種由原原種直接繁殖的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用紫色標(biāo)簽作標(biāo)記。3.8大田用種由原種繁殖用于大田生產(chǎn)的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用藍(lán)色標(biāo)簽作標(biāo)記。4質(zhì)量要求高油酸花生種子質(zhì)量指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求。表1高油酸花生種子質(zhì)量指標(biāo)0000雜草種子/（粒/kg）≤000100005檢測(cè)方法5.1真實(shí)性和品種純度5.1.1表型鑒定5.1.1.1田間鑒定按品種地上部性狀的典型性和莢果性狀的典型性進(jìn)行鑒定。鑒定方法按NY/T2237的規(guī)定執(zhí)行。5.1.1.2油酸含量測(cè)定按GB5009.168的規(guī)定執(zhí)行；油酸含量指標(biāo)應(yīng)符合該品種本質(zhì)特征。5.1.2分子標(biāo)記采用固定數(shù)目的單核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）引物，通過與標(biāo)準(zhǔn)樣品比較或與SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)比對(duì)的方式，對(duì)品種真實(shí)性進(jìn)行驗(yàn)證或身份鑒定。檢測(cè)方法按附錄A執(zhí)行。DB41/T1926—201935.2凈度和雜質(zhì)按GB/T3543.3的規(guī)定執(zhí)行。5.3發(fā)芽試驗(yàn)按GB/T3543.4的規(guī)定執(zhí)行。5.4水分按GB/T3543.6的規(guī)定執(zhí)行。5.5其他作物、雜草種子和有毒（害）雜草種子數(shù)目按GB/T3543.3的規(guī)定執(zhí)行。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1扦樣按GB/T3543.2的規(guī)定執(zhí)行。6.2質(zhì)量判定按GB20464的規(guī)定執(zhí)行。DB41/T1926—20194（規(guī)范性附錄）花生品種真實(shí)性分子標(biāo)記鑒定方法A.1引物合成利用已遴選的14個(gè)核心SNP引物和36個(gè)擴(kuò)展SNP引物作為品種真實(shí)性驗(yàn)證和身份鑒定的檢測(cè)引物，構(gòu)建已知品種的SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)。根據(jù)真實(shí)性驗(yàn)證或身份鑒定的要求，采用序貫式方法，選定SNP引物。（36umol/μL）、Primer_CoA.2脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid，DNA）提取在種子生產(chǎn)基地隨機(jī)取樣，供檢樣品為葉片或種子，采用混合樣品檢測(cè)（至少含有30個(gè)個(gè)體的材料先單獨(dú)提取DNA，再取等量DNA混合。DNA提取方法應(yīng)保證提取的DNA數(shù)量和質(zhì)量符合PCR擴(kuò)增的要求，DNA無降解，溶液的紫外光吸光度OD260與OD280的比值宜介于1.8～2.0。DNA提取可選CTAB法或試劑盒法。A.3PCR擴(kuò)增SNP反應(yīng)可以在96等不同規(guī)格孔板進(jìn)行，體系的總體積可相應(yīng)采用10μL或5μL，在板上設(shè)無模板對(duì)照。A.4SNP基因分型將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用能檢測(cè)熒光信號(hào)的檢測(cè)平臺(tái)（如可以檢測(cè)FAM和HEX波長(zhǎng)熒光的酶標(biāo)儀FLUOstarOmega及實(shí)時(shí)定量PCR儀）進(jìn)行讀板，并根據(jù)熒光量比值進(jìn)行SNP分型。A.5結(jié)果計(jì)算與表示統(tǒng)計(jì)位點(diǎn)差