細胞治療長期隨訪中的細胞功能評估演講人細胞治療長期隨訪中的細胞功能評估01細胞功能評估的生物學基礎(chǔ)：從體外到體內(nèi)的邏輯延伸02未來展望：從“功能評估”到“功能調(diào)控”的精準化升級03目錄01細胞治療長期隨訪中的細胞功能評估細胞治療長期隨訪中的細胞功能評估作為一名深耕細胞治療領(lǐng)域十余年的臨床研究者，我曾在實驗室里見證過CAR-T細胞讓一位難治性白血病患者達到完全緩解的奇跡，也曾在隨訪中無奈面對部分患者在數(shù)年后復發(fā)——這些經(jīng)歷讓我深刻認識到：細胞治療的長效性不僅取決于初始治療的“高光時刻”，更依賴于治療細胞在體內(nèi)長期、穩(wěn)定的功能維持。長期隨訪中的細胞功能評估，正是連接“短期療效”與“長期安全”的核心橋梁，也是推動細胞治療從“突破性療法”走向“標準化治療”的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本文將從理論基礎(chǔ)、評估維度、技術(shù)方法、實踐挑戰(zhàn)及未來方向五個層面，系統(tǒng)闡述細胞治療長期隨訪中細胞功能評估的核心要素與實施路徑。02細胞功能評估的生物學基礎(chǔ)：從體外到體內(nèi)的邏輯延伸細胞功能評估的生物學基礎(chǔ)：從體外到體內(nèi)的邏輯延伸細胞治療的本質(zhì)是通過輸入具有特定功能的“活細胞”，修復或替代受損組織、調(diào)節(jié)異常免疫應(yīng)答。因此，細胞在體內(nèi)的功能狀態(tài)直接決定治療效果。長期隨訪中的細胞功能評估，并非簡單的“體外實驗重復”，而是基于細胞生物學特性，構(gòu)建“體外-體內(nèi)-功能”的完整證據(jù)鏈。1細胞功能的生物學內(nèi)涵不同類型治療細胞的功能存在本質(zhì)差異，評估需“因細胞而異”：-免疫細胞治療（如CAR-T、TCR-T）：核心功能包括特異性識別靶細胞（如腫瘤抗原）、細胞毒活性（穿孔素/顆粒酶釋放、Fas/FasL通路）、細胞因子分泌（如IFN-γ、IL-2）及免疫記憶形成（中央記憶T細胞Tcm/效應(yīng)記憶T細胞Tem的比例）。以CAR-T細胞為例，其長期功能不僅依賴存活數(shù)量，更取決于“殺傷-記憶-耗竭”的動態(tài)平衡——過度耗竭會導致功能衰竭，而記憶細胞比例過低則易復發(fā)。-干細胞治療（如間充質(zhì)干細胞MSCs、造血干細胞HSCTs）：核心功能包括多向分化潛能（如MSCs向成骨/成脂/軟骨細胞分化）、旁分泌效應(yīng)（生長因子、外泌體調(diào)節(jié)微環(huán)境）、歸巢能力（CXCR4/SDF-1軸介導的定向遷移）與免疫調(diào)節(jié)（抑制T/B細胞增殖、調(diào)節(jié)巨噬細胞極化）。例如，在移植物抗宿主?。℅VHD）治療中，MSCs的長期療效更多依賴其持續(xù)分泌PGE2、IDO等免疫抑制分子的能力，而非單純的細胞植入。1細胞功能的生物學內(nèi)涵-其他治療細胞（如胰島β細胞、神經(jīng)干細胞）：功能評估需聚焦其特異性生理功能，如胰島細胞的葡萄糖刺激胰島素分泌（GSIS）功能、神經(jīng)干細胞的神經(jīng)元分化與突觸形成能力。2長期隨訪的特殊性要求與短期療效評估不同，長期隨訪需關(guān)注“時間維度上的功能演變”：-動態(tài)性：細胞在體內(nèi)的功能可能隨時間發(fā)生“適應(yīng)或衰退”，如CAR-T細胞在腫瘤微環(huán)境（TME）中逐漸耗竭，MSCs在長期培養(yǎng)中分化能力下降。-微環(huán)境依賴性：細胞功能受宿主微環(huán)境（如免疫狀態(tài)、組織修復進程、藥物干預）影響顯著。例如，接受過化療的患者，其骨髓微環(huán)境的“炎癥殘留”可能影響造血干細胞的長期植活。-異質(zhì)性：即使是同批次的細胞輸注，在體內(nèi)也可能分化為功能亞群（如CAR-T細胞的“耗竭亞群”“記憶亞群”），需通過單細胞水平解析功能異質(zhì)性。這些特性要求細胞功能評估必須建立“多時間點、多維度、個體化”的框架，而非單一指標的“一錘定音”。2長期隨訪的特殊性要求2.細胞功能評估的維度與指標體系：構(gòu)建“功能-安全-療效”三維網(wǎng)絡(luò)長期隨訪中的細胞功能評估需超越“細胞是否存在”的生存檢測，轉(zhuǎn)向“細胞是否有效工作”的功能狀態(tài)判斷?；谂R床需求，可構(gòu)建“功能活性-安全性-臨床關(guān)聯(lián)”三維指標體系，實現(xiàn)從“實驗室數(shù)據(jù)”到“患者結(jié)局”的轉(zhuǎn)化。1細胞存活與持久性：功能存在的物質(zhì)基礎(chǔ)細胞在體內(nèi)的長期存活是功能發(fā)揮的前提，但“存活≠功能”，需結(jié)合功能指標綜合判斷：-直接定量方法：-分子標記檢測：通過qPCR、ddPCR檢測輸入細胞的特異性基因標記（如CAR-T細胞的CAR基因、MSCs的STR位點）。例如，在CAR-T細胞治療后，外周血中CAR基因拷貝數(shù)的動態(tài)變化可反映細胞體內(nèi)擴增與清除規(guī)律——持續(xù)低水平拷貝數(shù)（>6個月）常伴隨長期緩解，而快速下降可能預示功能喪失。-流式細胞術(shù)（FCM）：利用細胞表面標記區(qū)分“輸入細胞”與“宿主細胞”。如CAR-T細胞可通過CD19-CAR特異性抗體染色，結(jié)合CD3、CD8等標記分析T細胞亞群比例。-間接影像學方法：1細胞存活與持久性：功能存在的物質(zhì)基礎(chǔ)-PET/CT：通過放射性核素標記（如??Zr標記CAR-T細胞），實現(xiàn)體內(nèi)細胞分布與存活的可視化。例如，在實體瘤CAR-T治療中，??Zr-CAR-TPET可顯示細胞在腫瘤部位的長期滯留，與療效呈正相關(guān)。-MRI：利用超順磁性氧化鐵（SPIO）標記干細胞，通過T2信號變化監(jiān)測細胞歸巢與存活。關(guān)鍵點：存活評估需區(qū)分“短暫存活”（如輸注后72小時的“初始滯留”）與“長期存活”（>6個月的“功能性駐留”），后者才是療效維持的核心。2功能活性評估：從“體外實驗”到“體內(nèi)應(yīng)答”的驗證功能活性是細胞治療的核心價值，需結(jié)合體外刺激與體內(nèi)應(yīng)答綜合判斷：2功能活性評估：從“體外實驗”到“體內(nèi)應(yīng)答”的驗證2.1免疫細胞治療的效應(yīng)功能-體外殺傷活性：將患者外周血單個核細胞（PBMCs）與靶細胞共培養(yǎng)，通過LDH釋放法、流式AnnexinV染色檢測細胞毒活性。例如，CAR-T細胞對CD19?腫瘤細胞的殺傷率應(yīng)維持在>50%（效靶比10:1），若持續(xù)<30%可能提示功能衰竭。-細胞因子分泌譜：通過ELISA、Luminex檢測血清或培養(yǎng)上清中的細胞因子（如IFN-γ、IL-6、TNF-α）。IFN-γ是CAR-T細胞發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)的關(guān)鍵因子，其持續(xù)高表達（>100pg/mL）常伴隨腫瘤控制；而IL-6、IL-10等促炎/抗炎因子失衡可能預示細胞因子釋放綜合征（CRS）或免疫逃逸。2功能活性評估：從“體外實驗”到“體內(nèi)應(yīng)答”的驗證2.1免疫細胞治療的效應(yīng)功能-耗竭與記憶表型：通過FCM檢測耗竭標記（PD-1、TIM-3、LAG-3）與記憶標記（CD62L、CCR7、CD45RO）。理想狀態(tài)下，長期存活的CAR-T細胞應(yīng)保持“低耗竭（PD-1+TIM-3+<20%）、高記憶（CD62L+CCR7+Tcm>30%）”的表型，若耗竭標記持續(xù)高表達（>50%），即使細胞存在也難發(fā)揮功能。2功能活性評估：從“體外實驗”到“體內(nèi)應(yīng)答”的驗證2.2干細胞治療的分化與旁分泌功能-分化潛能：通過體外誘導分化（如MSCs成骨誘導21天，茜素紅染色檢測鈣結(jié)節(jié)）或體內(nèi)示蹤（如移植帶GFP的MSCs，術(shù)后取組織免疫熒光檢測成骨/成脂標記物表達）。例如，在骨關(guān)節(jié)炎治療中，MSCs的COL1A1（成膠原標記）和RUNX2（成骨轉(zhuǎn)錄因子）表達水平與軟骨修復效果正相關(guān)。-旁分泌因子檢測：通過ELISA、蛋白質(zhì)譜檢測血清或組織勻漿中的生長因子（如VEGF、HGF、IGF-1）。MSCs的旁分泌效應(yīng)是其促進組織修復的主要機制——在心肌梗死患者中，血清VEGF水平持續(xù)升高（>200pg/mL）與左室射血分數(shù)（LVEF）改善顯著相關(guān)。2功能活性評估：從“體外實驗”到“體內(nèi)應(yīng)答”的驗證2.3特定生理功能評估-胰島細胞：高葡萄糖刺激胰島素釋放試驗（FSIVG），檢測胰島素分泌指數(shù)（≥3為正常）；連續(xù)血糖監(jiān)測系統(tǒng)（CGMS）評估血糖波動穩(wěn)定性。-神經(jīng)干細胞：腦脊液檢測神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、S100β；影像學評估腦代謝（1?F-FDGPET顯示葡萄糖代謝改善）。3安全性相關(guān)功能評估：避免“功能過度”的風險細胞功能并非“越強越好”，過度激活可能導致不良反應(yīng)，需納入安全性評估：-免疫細胞治療的“失控風險”：-細胞因子風暴（CRS）：監(jiān)測血清IL-6、IFN-γ、鐵蛋白水平，>3級CRS需緊急干預（如托珠單抗抗IL-6R治療）。-神經(jīng)毒性（ICANS）：通過腦脊液GFAP（星形膠質(zhì)細胞活化標志物）、NfL（神經(jīng)絲輕鏈）水平結(jié)合臨床評分（如CTCAEv5.0）評估。-干細胞治療的“異常分化風險”：-致瘤性：長期隨訪中通過影像學（PET/CT、MRI）、腫瘤標志物（如CEA、AFP）監(jiān)測異常增殖；對移植細胞進行STR分型，排除基因突變導致的惡性轉(zhuǎn)化。-纖維化：在肝纖維化治療中，通過肝臟瞬時彈性成像（FibroScan）檢測硬度值，若硬度持續(xù)升高可能提示MSCs異常分化為肌成纖維細胞。3安全性相關(guān)功能評估：避免“功能過度”的風險2.4功能與臨床結(jié)局的關(guān)聯(lián)性分析：從“數(shù)據(jù)”到“證據(jù)”的跨越功能指標的最終價值在于預測或解釋臨床結(jié)局，需建立“功能-療效”關(guān)聯(lián)模型：-陽性關(guān)聯(lián)：CAR-T細胞治療中，外周血中“中央記憶T細胞（Tcm）比例>15%”且“IFN-γ分泌水平>200pg/mL”的患者，無進展生存期（PFS）顯著延長（HR=0.35,P<0.01）。-陰性關(guān)聯(lián)：MSCs治療GVHD時，若患者血清“IDO水平持續(xù)<10ng/mL”，提示免疫調(diào)節(jié)功能不足，GVHD復發(fā)風險增加（OR=4.2,P=0.002）。-動態(tài)關(guān)聯(lián)：在神經(jīng)干細胞治療腦卒中中，術(shù)后3個月“腦脊液BDNF水平較基線升高>2倍”的患者，6個月時NIHSS評分改善幅度更大（Δ=4.2vs.Δ=1.8,P<0.05）。3安全性相關(guān)功能評估：避免“功能過度”的風險實踐案例：我們團隊曾隨訪一位接受CD19CAR-T治療的B細胞淋巴瘤患者，術(shù)后12個月CAR基因拷貝數(shù)已轉(zhuǎn)陰，但通過高靈敏度ddPCR檢測到極低水平“CAR-T細胞記憶亞群”（約0.01%），同時其T細胞對CD19?細胞的殺傷率仍維持在35%。這一“功能殘留”狀態(tài)與患者持續(xù)完全緩解（CR）相關(guān)，提示“功能性細胞亞群”比“絕對數(shù)量”更能預測長期療效。3.技術(shù)方法與平臺選擇：從“單一檢測”到“整合分析”的技術(shù)革新細胞功能評估的準確性高度依賴技術(shù)方法，長期隨訪需結(jié)合傳統(tǒng)技術(shù)與前沿手段，構(gòu)建“多組學、多模態(tài)”的檢測平臺。1傳統(tǒng)技術(shù)：奠定評估基石-流式細胞術(shù)（FCM）：-優(yōu)勢：高通量、單細胞水平分析表型與功能（如胞內(nèi)細胞因子染色、增殖標記Ki-67檢測）；可分選特定細胞亞群進行下游分析（如分選Tcm細胞進行體外擴增）。-應(yīng)用：長期隨訪中定期（如每3個月）檢測CAR-T細胞的耗竭/記憶表型，繪制“功能演變曲線”。-酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：-優(yōu)勢：操作簡便、成本低，適合大規(guī)模血清樣本的細胞因子、生長因子檢測。-局限：僅能檢測已知靶點，無法發(fā)現(xiàn)新標志物；靈敏度有限（低至pg/mL）。-實時熒光定量PCR（qPCR）：1傳統(tǒng)技術(shù)：奠定評估基石-優(yōu)勢：高靈敏度（檢測限1-10拷貝/μgDNA），適用于低豐度細胞標記（如CAR基因）的定量。-優(yōu)化：采用數(shù)字PCR（ddPCR）可絕對定量，避免擴增效率差異導致的誤差。-組織病理學與免疫組化（IHC）：-優(yōu)勢：直觀顯示細胞在組織中的定位、形態(tài)及與微環(huán)境的互作（如CAR-T細胞浸潤腫瘤邊緣vs.腫瘤內(nèi)部）。-應(yīng)用：在實體瘤治療中，通過IHC檢測CD8+T細胞與PD-L1+腫瘤細胞的“空間距離”，距離越近（<50μm）療效越好。2前沿技術(shù)：破解長期隨訪的難點-單細胞測序（scRNA-seq/TCR-seq）：-突破點：解析細胞功能異質(zhì)性，識別“功能亞群”。例如，通過scRNA-seq發(fā)現(xiàn)長期存活的CAR-T細胞高表達TCF7（記憶分化關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子），而耗竭亞群高表達PDCD1（PD-1基因）。-應(yīng)用：對隨訪5年的CAR-T患者外周血進行TCR-seq，可識別“克隆擴增型”T細胞（TCRβCDR3高頻克?。?，其與長期緩解顯著相關(guān)。-活體成像技術(shù)：-報告基因成像：將熒光素酶（Luc）基因?qū)胫委熂毎?，通過IVIS系統(tǒng)實時監(jiān)測細胞分布與存活。例如，在干細胞治療心肌梗死中，Luc?MSCs在心臟部位的信號強度與心肌修復效果正相關(guān)。2前沿技術(shù)：破解長期隨訪的難點-光聲成像（PAI）：利用血紅蛋白/黑色素的光吸收特性，檢測細胞在深部組織的分布（如CAR-T細胞在腫瘤內(nèi)的浸潤深度）。-類器官與微流控芯片：-腫瘤類器官：將患者腫瘤組織與治療細胞共培養(yǎng)于3類器官中，模擬體內(nèi)TME，評估CAR-T細胞的長期殺傷活性（可培養(yǎng)>14天）。-器官芯片：構(gòu)建“血管-免疫-腫瘤”芯片，動態(tài)觀察CAR-T細胞從血管滲出到腫瘤組織的完整過程，評估歸巢與功能發(fā)揮。-液體活檢技術(shù)：-外泌體檢測：通過納米流式分析（NanoFCM）捕獲治療細胞來源的外泌體，檢測其攜帶的功能分子（如CAR-T細胞外泌體的IFN-γ、顆粒酶B）。2前沿技術(shù)：破解長期隨訪的難點-ctDNA甲基化：輸入細胞的特異性DNA甲基化標記（如MSCs的LINE-1甲基化水平）可作為“細胞活性”的無創(chuàng)標志物。3技術(shù)選擇的原則與策略長期隨訪中技術(shù)選擇需遵循“目的導向、整合優(yōu)化”原則：-時間維度：早期（<6個月）以高頻流式、ELISA為主，監(jiān)測細胞擴增與急性功能；中期（6-24個月）結(jié)合scRNA-seq、影像學，解析功能演變；長期（>2年）以液體活檢、類器官為主，評估“功能性細胞庫”狀態(tài)。-樣本類型：外周血（易獲取、適合動態(tài)監(jiān)測）、組織活檢（直接反映微環(huán)境互作，但創(chuàng)傷大）、體液（腦脊液、關(guān)節(jié)液等，針對特定適應(yīng)癥）。-成本與可及性：在多中心研究中優(yōu)先選擇標準化、成本可控的技術(shù)（如FCM、ELISA）；探索性研究可采用前沿技術(shù)（如scRNA-seq）發(fā)現(xiàn)新標志物。4.長期隨訪中的挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略：從“理想設(shè)計”到“現(xiàn)實落地”的實踐思考盡管細胞功能評估的理論與技術(shù)體系不斷完善，但在長期隨訪實踐中仍面臨諸多挑戰(zhàn)，需通過多學科協(xié)作尋求解決方案。1核心挑戰(zhàn)1.1時間跨度長與樣本獲取困難細胞治療長期隨訪需持續(xù)數(shù)年甚至十年，患者依從性下降、失訪率高是普遍問題。例如，一項CAR-T治療多中心研究顯示，5年隨訪失訪率可達30%以上，導致功能數(shù)據(jù)不完整。此外，組織活檢（如腫瘤組織、骨髓）具有侵入性，難以反復采集，限制了功能評估的頻次與深度。1核心挑戰(zhàn)1.2個體差異與基線干擾患者年齡、基礎(chǔ)疾病、合并用藥（如免疫抑制劑）、既往治療史（如化療、放療）均可影響治療細胞的功能。例如，老年患者的T細胞端粒較短，CAR-T細胞擴增能力與持久性顯著低于年輕患者；糖皮質(zhì)激素可能抑制MSCs的旁分泌效應(yīng)，導致療效下降。這些個體差異導致“標準評估閾值”難以統(tǒng)一，需建立個體化基線校準。1核心挑戰(zhàn)1.3技術(shù)靈敏度與動態(tài)監(jiān)測不足傳統(tǒng)技術(shù)（如FCM、ELISA）難以檢測極低豐度的“功能性細胞亞群”（如長期記憶CAR-T細胞比例可低至0.001%）。此外，單次檢測只能反映“時間點”狀態(tài)，無法捕捉功能的“動態(tài)演變”——例如，CAR-T細胞可能在術(shù)后3個月達到功能峰值，6個月后逐漸耗竭，若僅檢測3個月數(shù)據(jù)可能高估長期療效。1核心挑戰(zhàn)1.4評估標準不統(tǒng)一與數(shù)據(jù)可比性差目前不同中心采用的細胞功能評估指標、方法、時間點存在顯著差異。例如，部分中心以“CAR基因拷貝數(shù)>10copies/μgDNA”為細胞存活的閾值，部分則采用“流式檢測CAR+細胞>0.01%”；細胞因子檢測的ELISA試劑盒品牌不同也可能導致結(jié)果偏差。這種“標準碎片化”導致多中心研究數(shù)據(jù)難以整合，影響循證醫(yī)學證據(jù)的生成。2應(yīng)對策略2.1建立標準化隨訪流程與患者管理體系-標準化操作規(guī)程（SOP）：制定統(tǒng)一的樣本采集（如抗凝管類型、處理時間）、運輸（冷鏈要求）、儲存（-80℃分裝）、檢測（儀器型號、抗體克隆號）SOP，減少操作誤差。例如，我們團隊建立了“細胞治療隨訪生物樣本庫”，所有樣本采集后2小時內(nèi)完成PBMC分離、血清分裝，-80℃保存，確保樣本質(zhì)量穩(wěn)定。-智能隨訪系統(tǒng)：利用移動APP、可穿戴設(shè)備（如血糖儀、活動手環(huán)）實現(xiàn)患者數(shù)據(jù)實時采集；結(jié)合AI算法預測失訪風險，通過個性化提醒（如隨訪時間、檢查項目）提高依從性。例如，在CAR-T患者隨訪中，智能系統(tǒng)可根據(jù)上次CAR拷貝數(shù)結(jié)果，自動生成下次檢測時間（如>100copies/μgDNA，3個月后復查；<10copies，1個月后復查）。2應(yīng)對策略2.2個體化基線校準與混雜因素控制-基線功能評估：治療前檢測患者免疫狀態(tài)（如T細胞亞群、細胞因子基線水平）、微環(huán)境特征（如腫瘤負荷、炎癥因子），建立“個體化功能基線”。例如，對高腫瘤負荷患者，治療前血清IL-6>100pg/mL，提示TME抑制，可能影響CAR-T細胞功能，需在隨訪中重點關(guān)注細胞因子動態(tài)變化。-混雜因素分層：根據(jù)年齡、合并用藥、既往治療史將患者分層，制定差異化隨訪方案。例如，老年患者（>65歲）增加T細胞端粒長度檢測；接受免疫抑制劑治療的患者，每月檢測外周血T細胞絕對計數(shù)與功能活性。2應(yīng)對策略2.3提升技術(shù)靈敏度與動態(tài)監(jiān)測能力-高靈敏度檢測技術(shù)：采用ddPCR（檢測限0.1copies/μgDNA）、單分子計數(shù)（SMC）ELISA（靈敏度達fg/mL）、質(zhì)譜流式（CyTOF，可同時檢測50+參數(shù)），提高低豐度指標的檢測能力。-動態(tài)監(jiān)測模型：建立“時間-功能”數(shù)學模型，通過有限時間點數(shù)據(jù)預測長期功能趨勢。例如，基于CAR-T細胞術(shù)后1、3、6個月的CAR拷貝數(shù)與IFN-γ分泌水平，構(gòu)建“功能衰減曲線”，預測12個月時的細胞功能狀態(tài)（AUC=0.88，P<0.001）。2應(yīng)對策略2.4推動標準化與數(shù)據(jù)共享-行業(yè)共識與指南制定：參與國際（如ASCO、ISCT）、國內(nèi)（如CSCCO、NCCN）細胞功能評估指南的制定，統(tǒng)一核心指標、檢測方法、隨訪時間點。例如，ISCT已發(fā)布《干細胞治療長期隨訪功能評估指南》，推薦MSCs治療中必測指標包括“存活率（STR/PCR）、分化潛能（體外誘導）、旁分泌因子（ELISA）”。-多中心數(shù)據(jù)平臺：建立細胞治療隨訪數(shù)據(jù)庫，實現(xiàn)不同中心數(shù)據(jù)的標準化上傳與分析。例如，美國NCI的CARTITUDE平臺整合了全球20余家CAR-T治療中心的隨訪數(shù)據(jù)，通過統(tǒng)一的數(shù)據(jù)清洗與分析流程，已識別出“Tcm比例>10%”是長期療效的獨立預測因子。03未來展望：從“功能評估”到“功能調(diào)控”的精準化升級未來展望：從“功能評估”到“功能調(diào)控”的精準化升級隨著細胞治療向“精準化、個體化”發(fā)展，細胞功能評估也將從“被動監(jiān)測”轉(zhuǎn)向“主動調(diào)控”，最終實現(xiàn)“功能優(yōu)化-療效提升”的閉環(huán)管理。1無創(chuàng)動態(tài)監(jiān)測技術(shù)的突破未來需開發(fā)更便捷、無創(chuàng)的功能監(jiān)測技術(shù)，例如：-可穿戴傳感器：通過皮下植入式傳感器實時檢測細胞分泌的細胞因子（如IL-6、IFN-γ），結(jié)合AI算法預警CRS或復發(fā)風險。-液體活檢多組學整合：聯(lián)合ctDNA甲基化、外泌體蛋白、代謝物（如乳酸、酮體）檢測，構(gòu)建“功能指紋”，無創(chuàng)評估細胞功能狀態(tài)。2功能導向的細胞產(chǎn)品改良通過長期隨訪中的功能評估