合成生物底盤細胞構建工程師崗位招聘考試試卷及答案合成生物底盤細胞構建工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.合成生物底盤細胞是指經人工改造，具備______和可預測性，能承載外源代謝途徑的宿主細胞。2.原核生物中最常用的底盤細胞是______。3.響應特定誘導物（如IPTG）啟動基因表達的啟動子稱為______啟動子。4.CRISPR-Cas系統(tǒng)中識別靶序列的RNA是______。5.調整外源基因密碼子使用頻率以提高表達效率的方法是______。6.合成途徑設計需遵循“前體充足、______、副產物最少”原則。7.調控代謝流提高目標產物產量的技術是______工程。8.底盤細胞維持增殖及功能的能力稱為______。9.不依賴活細胞的表達體系是______體系。10.合成生物學常用基因數(shù)據(jù)庫是______。二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.底盤細胞核心要求不包括（）A.遺傳操作簡便B.代謝背景清晰C.生長速度慢D.安全性高2.大腸桿菌載體常用復制原點是（）A.oriCB.pUCoriginC.T7promoterD.AmpR3.屬于組成型啟動子的是（）A.lacpromoterB.T7promoterC.35SpromoterD.16SrRNApromoter4.CRISPR-Cas9中Cas9來源是（）A.大腸桿菌B.釀酒酵母C.鏈球菌D.枯草芽孢桿菌5.密碼子優(yōu)化主要目的是（）A.縮短基因長度B.提高翻譯效率C.增加穩(wěn)定性D.減少副產物6.代謝通量分析（MFA）核心是（）A.測基因表達B.算代謝物流量C.析蛋白結構D.檢測代謝物濃度7.最小基因組底盤定義是（）A.天然最短基因組B.僅保留必需基因C.無外源基因D.生長最快8.前體供應不足時的策略是（）A.敲除目標途徑B.過表達前體關鍵酶C.增加誘導物D.換啟動子9.不屬于載體核心元件的是（）A.啟動子B.終止子C.復制原點D.核糖體10.底盤篩選常用標記是（）A.熒光蛋白B.抗生素抗性C.營養(yǎng)缺陷互補D.以上都是三、多項選擇題（每題2分，共20分，多選/少選/錯選不得分）1.底盤構建關鍵步驟包括（）A.宿主選擇B.元件設計C.途徑組裝D.功能驗證2.常用真核底盤細胞有（）A.大腸桿菌B.釀酒酵母C.畢赤酵母D.枯草芽孢桿菌3.誘導型啟動子特點是（）A.受誘導物調控B.基礎表達低C.無誘導不表達D.適有毒蛋白4.CRISPR-Cas系統(tǒng)組成元件包括（）A.Cas蛋白B.sgRNAC.靶DNAD.啟動子5.密碼子優(yōu)化方法包括（）A.替換稀有密碼子B.調整GC含量C.避免重復序列D.增加終止密碼子6.代謝調控策略有（）A.關鍵酶過表達B.競爭途徑敲除C.反饋抑制解除D.轉運增強7.底盤穩(wěn)定性影響因素包括（）A.元件整合方式B.代謝負荷C.環(huán)境條件D.宿主背景8.合成生物學常用數(shù)據(jù)庫有（）A.GenBankB.iGEMRegistryC.UniProtD.KEGG9.無細胞體系優(yōu)勢是（）A.不依賴活細胞B.表達周期短C.可表達有毒蛋白D.產量高10.底盤應用方向包括（）A.生物燃料B.藥物合成C.環(huán)境修復D.材料合成四、判斷題（每題2分，共20分，√/×）1.底盤細胞必須是天然宿主（）2.組成型啟動子表達量隨生長階段變化（）3.CRISPR僅能敲除不能插入基因（）4.密碼子優(yōu)化只考慮稀有密碼子（）5.最小基因組僅保留必需基因（）6.代謝調控只針對目標途徑關鍵酶（）7.底盤構建無需考慮元件兼容性（）8.合成途徑設計不用考慮副產物（）9.篩選標記都是抗生素抗性（）10.無細胞體系不需要底盤細胞（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述合成生物底盤細胞的定義及核心要求。2.列舉3種常用底盤細胞及適用場景。3.簡述CRISPR-Cas9在底盤構建中的步驟。4.簡述密碼子優(yōu)化的原則及意義。六、討論題（每題5分，共10分）1.如何提高合成生物底盤細胞的代謝穩(wěn)定性？2.底盤構建中如何平衡“最小化”與“功能多樣性”？---答案部分一、填空題答案1.模塊化2.大腸桿菌（E.coli）3.誘導型4.sgRNA（單導RNA）5.密碼子優(yōu)化6.反應可逆性低7.代謝8.底盤穩(wěn)定性9.無細胞10.GenBank（或iGEMRegistry）二、單項選擇題答案1.C2.B3.D4.C5.B6.B7.B8.B9.D10.D三、多項選擇題答案1.ABCD2.BC3.ABD4.ABC5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ABD9.ABC10.ABCD四、判斷題答案1.×2.√3.×4.×5.√6.×7.×8.×9.×10.√五、簡答題答案1.定義：經人工改造的宿主細胞，具備模塊化、可預測性，能承載外源途徑并執(zhí)行特定功能。核心要求：①遺傳操作簡便；②代謝背景清晰；③生長性能優(yōu)；④安全性高；⑤可擴展性。2.①大腸桿菌：原核，操作易、生長快，適原核途徑（如乙醇合成）；②釀酒酵母：真核，分泌強、調控成熟，適復雜蛋白/天然產物（如青蒿酸前體）；③畢赤酵母：真核，高密度發(fā)酵，適重組蛋白大規(guī)模生產。3.①設計sgRNA（靶向目標位點）；②構建CRISPR載體（含Cas9、sgRNA）；③轉化底盤細胞；④篩選編輯單克?。≒CR/測序）；⑤驗證編輯效果（表達/表型分析）。4.原則：①替換宿主稀有密碼子；②調整GC含量（匹配宿主）；③避免重復序列；④保留關鍵氨基酸。意義：提高翻譯效率，減少停滯，增強蛋白表達，優(yōu)化底盤功能。六、討論題答案1.①元件基因組整合（減少質粒丟失）；②誘導型啟動子調控（降低持續(xù)代謝負荷）；③解除反饋抑制（改造關