生物反應(yīng)器無菌滅菌技師（中級）考試試卷及答案填空題（10題，每題1分）1.生物反應(yīng)器常用的濕熱滅菌方式主要有______和______。2.培養(yǎng)基滅菌的關(guān)鍵參數(shù)是溫度、時間和______。3.無菌空氣制備中，過濾介質(zhì)的除菌效率主要取決于______和______。4.生物反應(yīng)器滅菌前需對夾套進(jìn)行______，防止冷熱沖擊損壞設(shè)備。5.滅菌過程中，排氣閥的作用是排出______，保證滅菌溫度均勻。6.在線滅菌（SIP）通常采用的滅菌介質(zhì)是______。7.無菌檢測常用的培養(yǎng)基是______。8.滅菌后生物反應(yīng)器的冷卻介質(zhì)需經(jīng)過______處理。9.干熱滅菌的溫度一般控制在______℃以上。10.培養(yǎng)基滅菌時，需確保培養(yǎng)基______，避免局部過熱。答案1.飽和蒸汽滅菌；過熱水滅菌2.蒸汽壓力3.孔徑大??；介質(zhì)厚度4.預(yù)熱5.冷空氣6.飽和蒸汽7.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基8.無菌9.16010.充分?jǐn)嚢鑶雾椷x擇題（10題，每題2分）1.下列屬于濕熱滅菌的是？A.干熱空氣滅菌B.環(huán)氧乙烷滅菌C.飽和蒸汽滅菌D.紫外線滅菌2.生物反應(yīng)器滅菌時，飽和蒸汽壓力通?？刂圃冢緼.0.1-0.15MPaB.0.2-0.3MPaC.0.3-0.4MPaD.0.4-0.5MPa3.無菌空氣預(yù)過濾器的作用是去除？A.微生物B.大顆粒雜質(zhì)C.水分D.油霧4.滅菌失敗的常見原因不包括？A.冷空氣未排盡B.蒸汽壓力不足C.培養(yǎng)基攪拌充分D.滅菌時間不夠5.在線滅菌（SIP）設(shè)備的死角率應(yīng)控制在多少以下？A.1%B.2%C.3%D.5%6.不能用于生物反應(yīng)器滅菌的介質(zhì)是？A.飽和蒸汽B.過熱水C.干熱空氣D.酒精7.培養(yǎng)基滅菌后需冷卻至多少溫度以下接種？A.30℃B.40℃C.50℃D.60℃8.無菌檢測的培養(yǎng)溫度通常為？A.25℃B.30℃C.37℃D.42℃9.滅菌前無需檢查的部件是？A.閥門密封性B.攪拌器轉(zhuǎn)速C.蒸汽過濾器完整性D.培養(yǎng)基pH10.濕熱滅菌的原理是？A.蛋白質(zhì)變性B.破壞細(xì)胞膜C.氧化微生物D.干擾核酸合成答案1-5：CABCC；6-10：DBCDA多項選擇題（10題，每題2分）1.生物反應(yīng)器滅菌的對象包括？A.培養(yǎng)基B.設(shè)備內(nèi)壁C.空氣系統(tǒng)D.冷卻系統(tǒng)2.濕熱滅菌的優(yōu)點有？A.穿透力強(qiáng)B.滅菌溫度低C.時間短D.對設(shè)備腐蝕小3.無菌空氣制備流程包括？A.粗過濾B.加熱除濕C.精過濾D.冷卻4.滅菌需監(jiān)控的參數(shù)有？A.溫度B.壓力C.時間D.蒸汽流量5.生物反應(yīng)器死角類型包括？A.管道盲端B.閥門內(nèi)部C.攪拌軸密封D.夾套縫隙6.在線滅菌（SIP）注意事項有？A.蒸汽分布均勻B.控制升溫速率C.滅菌后干燥D.冷卻介質(zhì)無菌7.培養(yǎng)基滅菌方式包括？A.分批滅菌B.連續(xù)滅菌C.輻照滅菌D.化學(xué)滅菌8.無菌檢測方法包括？A.沉降菌檢測B.表面擦拭檢測C.培養(yǎng)基無菌試驗D.浮游菌檢測9.滅菌失敗處理措施包括？A.查找原因B.重新滅菌C.廢棄培養(yǎng)基D.記錄分析10.滅菌前準(zhǔn)備工作包括？A.設(shè)備清潔B.閥門檢查C.蒸汽供應(yīng)確認(rèn)D.培養(yǎng)基配制答案1.ABCD；2.ABC；3.ABCD；4.ABCD；5.ABCD；6.ABCD；7.AB；8.ABCD；9.ABCD；10.ABCD判斷題（10題，每題2分）1.飽和蒸汽溫度越高，滅菌效果越好，無需控制時間。（×）2.無菌空氣精過濾器孔徑通常小于0.2μm。（√）3.生物反應(yīng)器滅菌可直接通高溫蒸汽，無需預(yù)熱。（×）4.培養(yǎng)基滅菌后需立即接種，無需冷卻。（×）5.干熱滅菌適用于不耐濕熱的物品。（√）6.SIP時所有閥門需打開，確保蒸汽流通。（×）7.無菌檢測培養(yǎng)時間通常為48小時。（√）8.滅菌過程中排氣閥應(yīng)始終關(guān)閉。（×）9.過熱水滅菌溫度通常為121℃。（×）10.滅菌后需無菌確認(rèn)才能使用。（√）簡答題（4題，每題5分）1.簡述濕熱滅菌的基本原理。答案：濕熱滅菌利用高溫（飽和蒸汽、過熱水等）使微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸變性凝固，破壞代謝活性。飽和蒸汽穿透力強(qiáng)，冷凝釋放潛熱提升效率，相比干熱滅菌溫度更低、時間更短，適用于生物反應(yīng)器、培養(yǎng)基滅菌，對設(shè)備損傷小。2.說明無菌空氣制備的關(guān)鍵步驟及注意事項。答案：關(guān)鍵步驟：粗過濾（除大顆粒）→加熱除濕（降濕度）→精過濾（0.2μm濾膜除菌）→冷卻。注意事項：過濾器定期完整性檢測；蒸汽滅菌控制升溫速率（防濾膜損壞）；空氣系統(tǒng)定期清潔；滅菌后干燥濾器（防潮）。3.簡述生物反應(yīng)器在線滅菌（SIP）的操作流程。答案：①準(zhǔn)備：關(guān)閉外接閥門，確認(rèn)清潔；②預(yù)熱：夾套通溫水至80-90℃；③滅菌：通飽和蒸汽，升溫≤1℃/min，121℃/0.1MPa維持30-60min；④排氣：緩慢排蒸汽；⑤干燥：通無菌空氣；⑥冷卻：通無菌介質(zhì)至接種溫度；⑦無菌確認(rèn)：取樣檢測。4.說明培養(yǎng)基滅菌失敗的常見原因及排查方法。答案：常見原因：冷空氣未排盡、蒸汽參數(shù)不達(dá)標(biāo)、攪拌不充分、設(shè)備死角、過濾器損壞。排查方法：檢查排氣閥、校準(zhǔn)溫壓傳感器、驗證攪拌系統(tǒng)、檢查死角、培養(yǎng)基無菌檢測。討論題（2題，每題5分）1.討論如何控制生物反應(yīng)器滅菌死角對效果的影響。答案：①設(shè)計優(yōu)化：減少盲端、縫隙，死角率≤3%；②滅菌前清潔：無殘留雜質(zhì)；③蒸汽分布：安裝噴射器，均勻覆蓋；④參數(shù)監(jiān)控：死角裝溫度傳感器；⑤生物驗證：用枯草芽孢桿菌芽孢驗證；⑥維護(hù)：定期清理死角，更換積污部件。