高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省無錫市江陰市六校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、單項(xiàng)選擇題：每題2分，共計(jì)28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列與發(fā)酵技術(shù)相關(guān)的描述，正確的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理，生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物B.通過酵母菌發(fā)酵獲得大量菌體，并從細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白作為動(dòng)物飼料或食品添加劑C.水果等原料可為微生物的生長(zhǎng)提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，傳統(tǒng)發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理D.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)酵工程要接種通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種【答案】C〖祥解〗發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。【詳析】A、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中用到的微生物包含酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌等。其中，酵母菌屬于真菌，毛霉也屬于真菌，它們都具有成形的細(xì)胞核，是真核生物，并非全是原核生物，所以不能說傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理來生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物，A錯(cuò)誤；B、通過酵母菌發(fā)酵獲得大量菌體，菌體本身即細(xì)胞就可以作為單細(xì)胞蛋白，用于動(dòng)物飼料或食品添加劑，B錯(cuò)誤；C、谷物、水果等原料本身含有多種營(yíng)養(yǎng)成分，像糖類、蛋白質(zhì)、維生素等，這些可為微生物的生長(zhǎng)提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而且在傳統(tǒng)發(fā)酵過程中，由于原料上本身攜帶的微生物就可以進(jìn)行發(fā)酵，所以發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理，C正確；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所利用的菌株通常是原材料自帶的菌株，或者是之前發(fā)酵保留下來的菌株，大多是混合菌種發(fā)酵。而發(fā)酵工程使用的菌株多是通過人工分離、選擇和培育得到的，一般為純種發(fā)酵，但不一定是通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種，D錯(cuò)誤。故選C。2.研究者用酸筍開發(fā)具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發(fā)酵液接種到含有CaCO3固體培養(yǎng)基上，篩選出乳酸菌，然后將擴(kuò)大培養(yǎng)后的乳酸菌接種到含膽固醇培養(yǎng)液中，篩選出能高效降解膽固醇的乳酸菌。下列敘述正確的是（）A.酸筍發(fā)酵過程中需要定期排氣以確保發(fā)酵罐內(nèi)壓強(qiáng)穩(wěn)定B.培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落為目標(biāo)菌落C.與酸筍風(fēng)味形成相關(guān)的乳酸菌為厭氧型，所以不會(huì)分布在空氣中D.膽固醇既可為乳酸菌的生長(zhǎng)提供氮源，也可參與動(dòng)物細(xì)胞膜的組成【答案】B〖祥解〗酸筍制作的原理是：乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸?！驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌，發(fā)酵過程中不產(chǎn)生氣體，不需要定期排氣，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸能與CaCO3發(fā)生反應(yīng)，使CaCO3分解成可溶性物質(zhì)乳酸鈣和CO2，導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)溶鈣圈，故溶鈣圈直徑與菌落直徑的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標(biāo)菌落，B正確；C、在自然界中，乳酸菌分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人和動(dòng)物的腸道內(nèi)都分布有乳酸菌，C錯(cuò)誤；D、膽固醇屬于脂質(zhì)，含有C、H、O元素，主要為微生物的生長(zhǎng)提供碳源，膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的重要成分，D錯(cuò)誤。故選B。3.發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如圖所示。下列說法正確的是（）A.在發(fā)酵之前需要利用固體培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)B.發(fā)酵結(jié)束后，可通過過濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身C.在酸性條件下可以利用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸D.發(fā)酵工程的產(chǎn)品就是微生物的代謝產(chǎn)物，包括初生代謝產(chǎn)物和次生代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的代謝活動(dòng)，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)特定的代謝產(chǎn)物或菌體本身的過程?！驹斘觥緼、擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是增加菌種數(shù)量，通常使用液體培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)成分均勻，菌體與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)接觸充分，繁殖速度快）。固體培養(yǎng)基主要用于菌種分離、純化和保藏，而非擴(kuò)大培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞（如單細(xì)胞蛋白），可通過過濾、離心、沉淀等物理方法將菌體與發(fā)酵液分離。若產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，則需進(jìn)一步提取純化，B正確；C、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵產(chǎn)生谷氨酸的適宜條件是中性至弱堿性環(huán)境。酸性條件下可能會(huì)抑制菌體代謝或?qū)е庐a(chǎn)物降解，無法有效獲得谷氨酸，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵工程的產(chǎn)品不僅包括微生物的代謝產(chǎn)物（如抗生素、氨基酸等），還包括微生物細(xì)胞本身（如酵母菌、乳酸菌等菌體用于食品或飼料），D錯(cuò)誤。故選B。4.以玄參莖段為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，流程圖如下，相關(guān)敘述正確的是（）①外植體的選擇及其消毒→②外植體的接種及愈傷組織誘導(dǎo)→③叢芽與不定根的誘導(dǎo)→④煉苗與移栽A.所用培養(yǎng)基含植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽、蔗糖和激素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.過程①需用酒精和次氯酸鈉混合液對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理C.過程②脫分化形成愈傷組織時(shí)可發(fā)生基因突變和染色體變異D.只有再分化的過程中存在基因的選擇性表達(dá)，脫分化的過程中不存在【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株?！驹斘觥緼、植物激素不屬于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、過程①需依次用酒精和次氯酸鈉對(duì)外植體進(jìn)行無菌處理，B錯(cuò)誤；C、由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞不發(fā)生分化，但細(xì)胞通過有絲分裂方式進(jìn)行增殖，在有絲分裂間期可能會(huì)發(fā)生基因突變，在細(xì)胞分裂期可能會(huì)發(fā)生染色體變異，C正確；D、脫分化是由已分化的狀態(tài)恢復(fù)到未分化的狀態(tài)，在脫分化的過程中也有相應(yīng)的基因選擇性表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選C。5.下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草寧，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)B.花藥離體培養(yǎng)得到的單倍體植株可大田栽培提高作物產(chǎn)量C.取香蕉莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得抗病毒苗D.組培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基【答案】D〖祥解〗植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織時(shí)期可獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物紫草寧，從而實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，A錯(cuò)誤；B、花藥離體培養(yǎng)得到的單倍體植株一般高度不育，不可大田栽培，還需要人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍后才可獲得能穩(wěn)定遺傳的個(gè)體，B錯(cuò)誤；C、莖尖為新生組織，細(xì)胞內(nèi)幾乎不含病毒，利用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗，而不是抗病毒苗，C錯(cuò)誤；D、組培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基，防止培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生雜菌等影響組培苗的生長(zhǎng)，D正確。故選D。6.蝸牛會(huì)取食水稻秸稈，下圖是利用甲（高產(chǎn)）、乙（耐鹽）兩種水稻的各自優(yōu)勢(shì)，通過植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽的雜種植株的流程圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用蝸牛消化道提取液進(jìn)行a處理時(shí)，也能獲得原生質(zhì)體B.b之前的誘導(dǎo)過程除PEG之外還可以使用滅活的病毒C.b之后得到的愈傷組織細(xì)胞與正常細(xì)胞相比沒有細(xì)胞壁D.c是具有耐鹽性狀的幼芽，c即可直接發(fā)育為耐鹽植株【答案】A〖祥解〗分析題圖：圖示為培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株的培育過程，其中a表示酶解法去除細(xì)胞壁，b表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，c為胚狀體?！驹斘觥緼、圖中a處理是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性，使用纖維素酶和果膠酶可以去除細(xì)胞壁，所以進(jìn)行a處理時(shí)，需要用到纖維素酶和果膠酶，而根據(jù)題意，蝸牛會(huì)取食水稻秸稈，因此蝸牛消化道液提取液中含有纖維素和果膠酶，用其處理也能獲得原生質(zhì)體，A正確；B、滅活的病毒常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，而植物原生質(zhì)體融合可以用PEG（聚乙二醇）等方法誘導(dǎo)，一般不使用滅活的病毒，B錯(cuò)誤；C、b過程是原生質(zhì)體融合，之后得到的愈傷組織細(xì)胞是具有細(xì)胞壁的。植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織是具有細(xì)胞壁的薄壁細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、是經(jīng)過在含鈉鹽濃度為0.6%的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選出的具有耐鹽性狀的愈傷組織，愈傷組織需要經(jīng)過再分化等過程才能發(fā)育為耐鹽植株，而不是直接發(fā)育為植株，D錯(cuò)誤。故選A。7.如圖表示試管鼠的基本制備流程，下列敘述正確的是（）A處理1給4-6周齡雌鼠注射性激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理B.處理2和處理3是分別使卵母細(xì)胞和精子獲得受精能力C.過程1和過程2均在代孕鼠體內(nèi)完成細(xì)胞的分裂和分化D.胚胎分割對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)需將滋養(yǎng)層均等分割【答案】B〖祥解〗圖中處理1是注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，處理2是使卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，獲得受精能力，處理3是精子進(jìn)行處理，使其獲得受精能力。過程1是胚胎的體外發(fā)育，過程2是胚胎移植?！驹斘觥緼、處理1一般通過注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，A錯(cuò)誤；B、要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行處理，使其獲能，另外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，使卵母細(xì)胞獲得受精能力，即圖中的處理2和處理3，B正確；C、過程1是胚胎的體外發(fā)育，在體外完成細(xì)胞的分裂和分化，C錯(cuò)誤；D、對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割，需要保證內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等切割，D錯(cuò)誤。故選B。8.下列關(guān)于細(xì)胞工程的有關(guān)敘述，不正確的是（）A.利用細(xì)胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，由根尖細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞脫分化、染色體變異或基因突變，而不可能發(fā)生細(xì)胞分化和基因重組C.“試管嬰兒”實(shí)質(zhì)上就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產(chǎn)物”，但無法使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子D.目前人類的同卵雙胞胎多數(shù)是通過胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的【答案】D〖祥解〗試管嬰兒技術(shù)包括體外受體、早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術(shù)，屬于有性生殖?！驹斘觥緼、利用細(xì)胞工程培育“番茄--馬鈴薯”雜種植株也需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，原理包括植物細(xì)胞具有全能性，A正確；B、在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞通過有絲分裂方式增殖，可能會(huì)發(fā)生染色體變異或基因突變，沒有發(fā)生分化和基因重組，B正確；C、試管嬰兒的產(chǎn)生采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，但該技術(shù)無法使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子，C正確；D、目前人類的同卵雙胞胎少數(shù)是通過胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的，D錯(cuò)誤。故選D。9.在基因工程中常使用噬菌體作為載體。M13噬菌體與噬菌體均能侵染大腸桿菌，但被M13噬菌體侵染的大腸桿菌不發(fā)生裂解?？蒲行〗M欲將目的基因的特定序列和基因編輯酶基因與噬菌體DNA進(jìn)行重組，進(jìn)而對(duì)大腸桿菌進(jìn)行基因編輯。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.噬菌體載體上需要含有標(biāo)記基因和多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)B.與噬菌體相比，M13噬菌體更適合作為轉(zhuǎn)化大腸桿菌的載體C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，必須先用處理大腸桿菌D.噬菌體重組DNA能在大腸桿菌中復(fù)制和表達(dá)才可實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸桿菌的基因編輯【答案】C〖祥解〗“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。常用的載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒、λ噬菌體的衍生物等。基因表達(dá)載體常包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。題中基因編輯能將目的基因整合到受體細(xì)胞DNA的特定位置?！驹斘觥緼、噬菌體載體上含有標(biāo)記基因，可鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。噬菌體載體有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，才具有攜帶多種目的基因的能力，A正確；B、被M13噬菌體侵染的大腸桿菌不發(fā)生裂解，才能得到導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，B正確；C、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)，常常先用Ca2+處理大腸桿菌使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞。電擊法也能達(dá)到相同效果，C錯(cuò)誤；D、噬菌體重組DNA能在大腸桿菌中復(fù)制和表達(dá)，基因編輯酶基因表達(dá)后才能產(chǎn)生基因編輯酶，進(jìn)而進(jìn)行基因編輯，D正確。故選C。10.下圖為轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（其中ampr為氨芐青霉素抗性基因）。下列敘述不正確的是（）A.質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)B.可同時(shí)選用限制酶PstI、SmaI對(duì)含目的基因的DNA進(jìn)行剪切C.過程②可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.④過程中可利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針對(duì)植株進(jìn)行篩選【答案】A〖祥解〗根據(jù)題意和圖示分析可知：①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要限制酶和DNA連接酶；②表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；③④表示植物組織培養(yǎng)過程，其中③是脫分化過程、④是再分化過程?！驹斘觥緼、質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，A錯(cuò)誤；B、目的基因兩側(cè)是限制酶PstⅠ和SmaⅠ的識(shí)別序列，且質(zhì)粒上也含有這兩種限制酶的切割位點(diǎn)，所以可同時(shí)選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ對(duì)含目的基因的DNA進(jìn)行切割，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、圖中過程④可以利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針來篩選含有目的基因的幼苗，D正確。故選A。11.1998年，我國(guó)科研人員用兩個(gè)機(jī)理不同的抗蟲基因（CryIA和Cpti）構(gòu)建融合基因表達(dá)載體，導(dǎo)入棉花細(xì)胞培育出雙價(jià)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)抗蟲棉的推廣在提高經(jīng)濟(jì)和環(huán)境效益的同時(shí)，也保護(hù)了中國(guó)棉花產(chǎn)業(yè)的安全。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.基因表達(dá)載體中融合基因位于啟動(dòng)子與終止子之間B.該融合基因必須整合到棉花細(xì)胞的基因組DNA中C.可用DNA探針檢測(cè)融合基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNAD.雙價(jià)抗蟲棉比單價(jià)棉選擇抗性棉鈴蟲的速率更快【答案】D〖祥解〗基因工又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ碳夹g(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。【詳析】A、基因表達(dá)載體中融合基因位于啟動(dòng)子與終止子之間，才能保證抗性基因的表達(dá)，A正確；B、該融合基因必須整合到棉花細(xì)胞的基因組DNA中，才能使抗性基因穩(wěn)定存在并表達(dá)，B正確；C、可用DNA探針檢測(cè)融合基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，C錯(cuò)誤；D、雙價(jià)抗蟲棉與單價(jià)棉相選擇的機(jī)理不同，從不同方向?qū)οx進(jìn)行選擇，雙價(jià)抗蟲棉比單價(jià)棉選擇抗性棉鈴蟲的速率慢，D錯(cuò)誤。故選D。12.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”、“PCR擴(kuò)增”、“瓊脂糖凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是（）A.將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘，DNA存在于沉淀B.洋蔥濾液中加入冷酒精，用玻璃棒攪拌會(huì)使DNA的提取量增加C.DNA片段的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶D.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察【答案】C〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于上清液中，A錯(cuò)誤；B、洋蔥濾液中加入冷酒精，用玻璃棒攪拌會(huì)使DNA的析出，因?yàn)镈NA不溶于冷酒精，B錯(cuò)誤；C、DNA片段的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶，即鎂離子是DNA聚合酶的激活劑，C正確；D、DNA分子在凝膠載樣緩沖液中帶正電荷或負(fù)電荷，可用于電泳；凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下可以被檢測(cè)出來，D錯(cuò)誤。故選C。13.麥汁發(fā)酵是啤酒釀造的重要過程，可以分為接種酵母→充氧→前發(fā)酵→封罐→后發(fā)酵等重要步驟。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.為避免雜菌污染，需對(duì)發(fā)酵罐、麥汁、接種儀器等進(jìn)行滅菌B.前發(fā)酵階段，葡萄糖在酵母菌中分解可生成二氧化碳C.后發(fā)酵階段，酵母菌細(xì)胞主要進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精D.發(fā)酵過程中會(huì)有較多熱量釋放，因此發(fā)酵罐需配有降溫裝置【答案】C〖祥解〗果酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進(jìn)行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進(jìn)行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的細(xì)胞核，屬于真核生物?！驹斘觥緼、在啤酒釀造過程中，雜菌污染會(huì)影響發(fā)酵過程和啤酒品質(zhì)，對(duì)發(fā)酵罐、麥汁、接種儀器等進(jìn)行滅菌處理能夠有效避免雜菌污染，保證發(fā)酵順利進(jìn)行，A正確；B、前發(fā)酵階段，葡萄糖在酵母菌細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行糖酵解生成丙酮酸，丙酮酸再進(jìn)入線粒體進(jìn)一步分解并生成二氧化碳，B正確；C、后發(fā)酵階段，由于封罐缺少氧氣，酵母菌細(xì)胞不能進(jìn)行有氧呼吸，只能進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵過程中無論是有氧呼吸還是無氧呼吸，都會(huì)釋放能量，其中大部分以熱能形式散失，會(huì)使發(fā)酵罐內(nèi)溫度升高，所以發(fā)酵罐需配有降溫裝置來維持適宜的發(fā)酵溫度，D正確。故選C。14.下列關(guān)于細(xì)胞工程的相關(guān)“檢測(cè)”的敘述，正確的是（）A.“作物脫毒”是否成功可以接種一定的病毒來檢測(cè)B.植物體細(xì)胞雜交過程中“去壁”過程是否充分，可取樣用低滲溶液鑒定C.傳代培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞是否癌變可通過核型分析而確定D.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中添加胰島素可促進(jìn)培養(yǎng)基中糖原的合成【答案】B〖祥解〗（1）植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。（2）動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞核移植等，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)?！驹斘觥緼、作物脫毒指的是作物本身沒有病毒感染，但作物脫毒不代表它不能被病毒感染，因此不能通過是否成功可以接種一定的病毒來檢測(cè)“作物脫毒”，A錯(cuò)誤；B、若植物體細(xì)胞雜交過程中“去壁”過程充分，在低滲溶液原生質(zhì)體會(huì)發(fā)生滲透吸水膨漲甚至破裂，而未去壁植物體細(xì)胞有細(xì)胞壁的保護(hù)，在低滲溶液中不會(huì)吸水漲破，所以用低滲溶液可對(duì)去壁的植物體細(xì)胞進(jìn)行鑒定，B正確；C、核型分析是通過觀察和分析細(xì)胞中染色體的數(shù)量、結(jié)構(gòu)和形態(tài)來檢測(cè)細(xì)胞是否發(fā)生異常的方法，但有些基因突變導(dǎo)致的癌變，染色體的數(shù)量、結(jié)構(gòu)、形態(tài)不發(fā)生改變，無法根據(jù)核型分析而確定，C錯(cuò)誤；D、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中添加胰島素的目的是促進(jìn)細(xì)胞攝取、利用葡萄糖，胰島素可以促進(jìn)機(jī)體肝臟細(xì)胞形成肝糖原，D錯(cuò)誤。故選B。二、多選題：本部分包括5題，每題3分，共計(jì)15分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)的得3分，選對(duì)但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15.科研人員采集了某深海冷泉附近的沉積物樣品，經(jīng)分離、純化、鑒定得到了降解藻類多糖的擬桿菌菌株，具體過程如圖(Ⅰ～Ⅳ是操作步驟)。下列敘述正確的有（）A.步驟Ⅰ均采用濕熱滅菌法對(duì)深海冷泉沉積物的樣品和海水進(jìn)行滅菌B.步驟Ⅱ可通過添加不同藻類多糖配制系列培養(yǎng)基①獲得多種擬桿菌菌株C.步驟Ⅲ培養(yǎng)基②中以藻類多糖為唯一碳源，且需加入適量瓊脂等凝固劑D.步驟Ⅳ可通過增加培養(yǎng)基③中碳源的濃度，獲得高耐受藻類多糖的菌株【答案】BCD〖祥解〗（1）培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。不同的培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源。（2）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。微生物常見的接種的方法：(1)平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。(2)稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳析】A、深海冷泉沉積物的樣品不能滅菌，否則得不到需要的菌株，A錯(cuò)誤；B、向基本培養(yǎng)基中分別添加不同藻類多糖來配制系列培養(yǎng)基①，可獲得不同種類的擬桿菌菌株，B正確；C、步驟IV需要挑取單菌落并轉(zhuǎn)接，則需要再固體培養(yǎng)基上接種，需要加瓊脂作為凝固劑，C正確；D、本實(shí)驗(yàn)的目的是純化、鑒定得到降解藻類多糖的擬桿菌菌株，步驟IV可通過增加培養(yǎng)基③中碳源的濃度，獲得高耐受藻類多糖的菌株，D正確。故選BCD。16.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。某研究小組以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，研制抗病毒A的單克隆抗體。下列敘述正確的是（）A.篩選2利用96孔板經(jīng)1次篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞B.將小鼠體內(nèi)取出的脾臟用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.篩選1需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選才能獲得融合的雜交痛瘤胞D.實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A是為了得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞【答案】CD〖祥解〗單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾臟內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、第二次篩選用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群，該過程用到抗原抗體雜交，獲取的雜交瘤細(xì)胞通過培養(yǎng)獲得大量的分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、由于胃蛋白酶的最適PH較低，因此將小鼠體內(nèi)取出的脾臟用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、為了得到能產(chǎn)生抗病毒A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)，C正確；D、該實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞，D正確。故選CD。17.最終獲得克隆鼠。經(jīng)鑒定證實(shí)克隆鼠是從iPS細(xì)胞發(fā)育而來的，并可繁殖后代。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.可用顯微注射法將iPS細(xì)胞注入四倍體囊胚中B.獲得的iPS細(xì)胞在體外培育后能發(fā)育成個(gè)體C.四倍體囊胚因?yàn)槿旧w結(jié)構(gòu)變異而無法發(fā)育D.重組囊胚的早期發(fā)育不需要額外提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)【答案】BCD〖祥解〗胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)?！驹斘觥緼、顯微注射法是一種常用的技術(shù)，可以將外源基因片段或細(xì)胞直接注射到早期胚胎中，包括四倍體囊胚中，A正確；B、動(dòng)物細(xì)胞（包括iPS細(xì)胞）不具有細(xì)胞全能性，在體外培育后并不能直接發(fā)育成個(gè)體，B錯(cuò)誤；C、四倍體囊胚屬于染色體數(shù)目異常，C錯(cuò)誤；D、重組囊胚的早期發(fā)育為體外培養(yǎng)，需要額外提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以支持其生長(zhǎng)和發(fā)育，D錯(cuò)誤。故選BCD。18.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。某DNA片段的PCR反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.預(yù)變性可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制B.退火是讓解旋狀態(tài)模板DNA恢復(fù)雙螺旋C.延伸結(jié)束后，新片段中的引物將被切除D.終延伸可使目的基因的擴(kuò)增更加充分【答案】ABC〖祥解〗PCR過程為①變性，當(dāng)溫度超過90℃時(shí)，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解聚為單鏈；②復(fù)性，當(dāng)溫度降低到50℃左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；③延伸，溫度上升到72℃左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈?！驹斘觥緼、預(yù)變性的目的是破壞DNA中可能存在的較難破壞的復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)，使DNA充分變性，A錯(cuò)誤；B、退火是讓兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，B錯(cuò)誤；C、延伸結(jié)束后，新片段中不會(huì)切除引物，C錯(cuò)誤；D、終延伸過程是為了讓引物完全延伸并讓單鏈產(chǎn)物完全復(fù)性形成雙鏈結(jié)構(gòu)，可使目的基因的擴(kuò)增更加充分，D正確。故選ABC。19.下圖是利用豬唾液腺生產(chǎn)大量高純度人神經(jīng)生長(zhǎng)因子（hNGF）的流程，相關(guān)說法正確的是（）A.培養(yǎng)豬細(xì)胞A和重構(gòu)胚胎通常需在培養(yǎng)液中加入血清B.培育轉(zhuǎn)基因豬D的過程涉及核移植、胚胎移植等技術(shù)C.轉(zhuǎn)基因豬D的遺傳性狀由A和C的遺傳物質(zhì)決定D.豬唾液腺作為生物反應(yīng)器具有不受性別限制的特點(diǎn)【答案】ABD〖祥解〗圖示是利用了基因工程、細(xì)胞核移植和胚胎移植等技術(shù)生產(chǎn)人神經(jīng)生長(zhǎng)因子（hNGF）?！驹斘觥緼、血清中含有多種未知的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)，因此培養(yǎng)豬細(xì)胞A和重構(gòu)胚胎通常需在培養(yǎng)液中加入血清，A正確；B、圖示將經(jīng)過轉(zhuǎn)基因的豬的成纖維細(xì)胞核導(dǎo)入去核的卵細(xì)胞，采用了細(xì)胞核移植技術(shù)，形成的重構(gòu)胚發(fā)育到桑椹胚或囊胚后經(jīng)胚胎移植導(dǎo)入代孕豬C子宮內(nèi)，該過程采用了胚胎移植技術(shù)，B正確；C、據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因豬的遺傳物質(zhì)來自卵細(xì)胞B的細(xì)胞質(zhì)和成纖維細(xì)胞A的細(xì)胞核以及人的hNGF基因，代孕豬C沒有為其提供遺傳物質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、雌、雄動(dòng)物體的唾液腺都可以合成分泌物，因此豬唾液腺作為生物反應(yīng)器具有不受性別限制的特點(diǎn)，D正確。故選ABD。20.某品牌老陳醋有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，在釀造過程中產(chǎn)生了川芎嗪、黃酮類化合物等對(duì)人體有益的物質(zhì)，極具養(yǎng)生價(jià)值。一企業(yè)對(duì)老配方進(jìn)行了更新，并設(shè)計(jì)了如下制作流程。請(qǐng)回答下列問題：注：膨化處理是指將糧食加入密閉容器中，加熱加壓后突然減壓，糧食中的水分汽化膨脹，使其出現(xiàn)許多小孔，變得松脆。紅曲菌屬于真菌。（1）對(duì)主糧膨化處理的作用是___________。釀制糧食酒時(shí)，______（填“需要”或“不需要”）對(duì)主糧進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，原因是______________。多次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵液的液面經(jīng)常觀察到一層明顯的菌膜，該膜是由_______________繁殖而成。（2）利用菌種發(fā)酵獲得醋酸的條件有兩種情況，一是在___________________時(shí)，將糖分解成醋酸：二是在缺少糖源時(shí)，利用__________生成醋酸。（3）研究表明，在陳醋的釀造過程中，起主導(dǎo)作用的是醋酸菌，而乳酸菌也存在于醋醅中，其代謝產(chǎn)生的乳酸是影響陳醋風(fēng)味的重要因素。成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期__________________（至少寫出2種）等環(huán)境因素的變化，淘汰了部分乳酸菌種類。（4）乙偶姻和川穹嗪均是山西老陳醋中重要的風(fēng)味物質(zhì)，對(duì)熏醅階段中二者的含量進(jìn)行測(cè)定得到了如下結(jié)果，由圖可知，川穹嗪最早產(chǎn)生于__________，乙偶姻可能在更早的醋酸發(fā)酵階段就開始產(chǎn)生。隨著熏醅階段的進(jìn)行，乙偶姻與川穹嗪的含量變化趨勢(shì)______（填“相同”“相反”或“無關(guān)聯(lián)”），推測(cè)二者關(guān)系為_________________?！敬鸢浮浚?）①.加大與紅曲菌的接觸面積②.不需要③.隨著發(fā)酵過程的進(jìn)行，酒精逐漸積累，大多數(shù)雜菌對(duì)酒精不耐受，雜菌的生命活動(dòng)受到抑制④.醋酸菌（2）①.氧氣和糖源都充足②.酒精（3）氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH等（4）①.熏醅階段第二天②.相反③.川穹嗪可能是由乙偶姻轉(zhuǎn)化而來〖祥解〗醋酸制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30～35℃、一直需氧。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！窘馕觥浚?）由題意可知，膨化處理是指將糧食加入密閉容器中，加熱加壓后突然減壓，糧食中的水分汽化膨脹，使其出現(xiàn)許多小孔，變得松脆，這有利于加大與紅曲菌的接觸面積，使發(fā)酵更充分。釀制糧食酒時(shí)，不需要對(duì)主糧進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，原因是隨著發(fā)酵過程逐漸進(jìn)行，酒精逐漸積累，大多數(shù)雜菌對(duì)酒精不耐受，雜菌的生命活動(dòng)受到抑制。發(fā)酵液的液面經(jīng)常觀察到一層明顯的菌膜，該膜是由醋酸菌繁殖而成。（2）利用醋酸菌獲得醋酸的條件有兩種情況，一是在氧氣和糖源都充足時(shí)，將糖分解成醋酸；二是在糖源不充足時(shí)，也可以利用酒精生成醋酸。（3）在陳醋的釀造過程中，起主導(dǎo)作用的是醋酸菌，成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH等環(huán)境因素的變化，加劇了不同種乳酸菌之間的種間競(jìng)爭(zhēng)（或競(jìng)爭(zhēng)），淘汰了部分乳酸菌種類。（4）據(jù)右圖可知，生產(chǎn)線1、2、3都在熏醅第2天就出現(xiàn)了川穹嗪，因此川穹嗪最早產(chǎn)生于熏醅階段第二天。據(jù)左圖可知，隨著熏醅階段的進(jìn)行，乙偶姻含量逐漸下降；據(jù)右圖可知，隨著熏醅階段的進(jìn)行，川穹嗪含量逐漸增加，乙偶姻與川穹嗪的含量變化趨勢(shì)相反，據(jù)此可推測(cè)二者之間可能的關(guān)系是川穹嗪可能是由乙偶姻轉(zhuǎn)化而來。21.某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_______________的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_______________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于______________培養(yǎng)基。（2）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在滅菌______（填“前”或“后”）進(jìn)行操作。倒平板時(shí)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在________附近進(jìn)行，接種后的培養(yǎng)皿需________放于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（3）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋______倍。（4）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1點(diǎn)即可）。（5）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟___________________?！敬鸢浮浚?）①.高壓蒸汽滅菌②.瓊脂③.選擇（2）①.前②.酒精燈火焰旁③.倒置（3）104（4）S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)（5）取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以S為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，其中Y為瓊脂，④為挑取單菌落接種，⑤在以S為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)一步篩選出高效降解S的菌株。【解析】（1）常用高壓蒸汽滅菌法對(duì)盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶進(jìn)行滅菌；乙培養(yǎng)基為接種的培養(yǎng)基，屬于固體培養(yǎng)基，結(jié)合題干“乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y”，其中S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）為碳源和氮源，則Y物質(zhì)是瓊脂（凝固劑）；甲、乙培養(yǎng)基均以S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）為唯一碳源和氮源，屬于選擇培養(yǎng)基。（2）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的

pH，應(yīng)該在滅菌前進(jìn)行操作，以防滅菌以后再調(diào)節(jié)pH帶入新的雜菌等微生物，倒平板實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰旁附近進(jìn)行，接種后的培養(yǎng)皿需倒置放于

37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（3）利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，在每個(gè)平板上涂布100μL（即0.1mL）稀釋后的菌液，則有200×a÷0.1=2×107，則稀釋倍數(shù)a=104。（4）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是：S的濃度超過某一值時(shí)，此時(shí)外界溶液濃度大于細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的濃度，導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過多，從而抑制菌株的生長(zhǎng)。（5）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，主要實(shí)驗(yàn)步驟有淤泥中取樣，然后進(jìn)行梯度稀釋，微生物的培養(yǎng)與觀察，計(jì)數(shù)。22.狼爪瓦松是一種具有觀賞價(jià)值的野生花卉，其產(chǎn)生的黃酮類化合物可入藥。狼爪瓦松野生資源有限，難以滿足市場(chǎng)化需求。因此，目前一般通過植物細(xì)胞工程進(jìn)行培養(yǎng)，具體過程如圖所示，其中的數(shù)字序號(hào)代表處理或生理過程。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：（1）進(jìn)行①過程前要對(duì)狼爪瓦松植株甲幼嫩的葉進(jìn)行________處理，所用的試劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液。圖中②過程稱為_________，通過②③培養(yǎng)獲得植株乙所利用技術(shù)的細(xì)胞學(xué)原理是________________。（2）培養(yǎng)中的愈傷組織細(xì)胞一直處于_________________的狀態(tài)，可用于④誘導(dǎo)產(chǎn)生突變體。（3）⑤過程需要用_________________酶進(jìn)行處理，形成植株丁的過程中，PEG的作用是______________________。（4）黃酮類化合物是狼爪瓦松的次生代謝物，⑥為對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)行工廠化生產(chǎn)，某同學(xué)認(rèn)為細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要目的是提高單個(gè)細(xì)胞中黃酮類化合物的含量，你同意該同學(xué)的觀點(diǎn)嗎_______，請(qǐng)說明相應(yīng)的理由：__________________。（5）通過植物細(xì)胞工程對(duì)狼爪瓦松培養(yǎng)，獲得藥物黃酮類化合物，下列相關(guān)敘述正確的是___。A.過程③通常先在生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例高的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理后即可獲得大量目的植株C.過程⑥中甘草西定可通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得，應(yīng)將愈傷組織細(xì)胞在液體培養(yǎng)基培養(yǎng)D.所得三種植株中乙和丙的遺傳信息與甲相同，植株丁和甲是同一物種【答案】（1）①.消毒②.脫分化③.植物細(xì)胞的全能性（2）不斷增殖（3）①.纖維素酶、果膠酶②.促進(jìn)原生質(zhì)體融合（4）①.不同意②.植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低，利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)黃酮類化合物主要是通過增加細(xì)胞數(shù)量從而增加黃酮類化合物的含量（5）C〖祥解〗圖中①表示外植體接種，②表示脫分化，③表示再分化，④表示再分化過程產(chǎn)生突變體，⑤表示去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，⑥表示黃酮類化合物的提取。【解析】（1）用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液對(duì)外植體消毒。②表示脫分化，③表示再分化，通過②③培養(yǎng)獲得植株乙為植物組織培養(yǎng)，所利用的原理是植物細(xì)胞的全能性。（2）愈傷組織在不誘導(dǎo)再分化的情況下，一般處于不斷增殖的狀態(tài)。（3）⑤表示去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，該過程需用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。培育形成植株丁的過程中，PEG的作用是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，屬于化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。（4）不同意該同學(xué)觀點(diǎn)，黃酮類化合物屬于植物的次生代謝物，植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低，利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)黃酮類化合物主要是通過增加細(xì)胞數(shù)量從而增加黃酮類化合物的含量。（5）A、生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比值高時(shí)，利于生根；該比值低時(shí)，利于生芽。過程③是再分化，需先生芽再生根，所以需要先在生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例低的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、過程④為誘變育種，常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理的是愈傷組織，經(jīng)篩選并進(jìn)一步培養(yǎng)才能獲得大量所需的突變體植株丙，B錯(cuò)誤；C、過程⑥中甘草西定可通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得，應(yīng)將愈傷組織細(xì)胞在液體培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)，即植物組織培養(yǎng)，C正確；D、所得三種植株中乙和丙的遺傳信息不一定與甲相同，因?yàn)橹仓瓯钦T變育種得到的，遺傳信息可能發(fā)生改變；植株丁經(jīng)過植物體細(xì)胞雜交，染色體數(shù)目發(fā)生了改變，和甲不一致，所以不是同一物種，D錯(cuò)誤。故選C。23.2018年1月25日，我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物-食蟹猴，流程如圖所示，①~⑥表示過程。（1）動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中一般選擇MII中期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，最主要的原因是_______________去掉卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是_____________。（2）過程③之后需要將獲得的融合細(xì)胞在含“兩鹽”、氨基酸、核苷酸、維生素、激素和____________的培養(yǎng)液中培養(yǎng)至_____________階段再進(jìn)行胚胎移植。（3）研究人員在確定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用時(shí)，做了兩組實(shí)驗(yàn)，其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示。分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，Kd4d的mRNA的作用是______________。（4）假如用胚胎分割移植的方式來克隆食蟹猴，依據(jù)的原理是__________，胚胎分割時(shí)應(yīng)注意的問題是________________。請(qǐng)從遺傳物質(zhì)角度分析，利用這些孤雄小鼠作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究的優(yōu)點(diǎn)是_____________?！敬鸢浮浚?）①.卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)種含有促進(jìn)細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)②.使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞（避免卵母細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)傳遞到子代）（2）①血清②.桑葚胚或囊胚（3）注入mRNA通過翻譯產(chǎn)生的去甲基化酶促進(jìn)了相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)而表現(xiàn)出既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率、也能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率（4）①.胚胎干細(xì)胞的全能性②.注意切割囊胚階段的胚胎要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的正常發(fā)育。③.這些小鼠遺傳物質(zhì)相同，所以作為實(shí)驗(yàn)材料可以排除由基因的差異造成的個(gè)體差異，進(jìn)而可以通過這些遺傳背景相同的個(gè)體來對(duì)比來分析.〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞核移植是用體細(xì)胞作為供體細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞核移植，將供核細(xì)胞注射到培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞中，用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎，再將胚胎移植到雌性動(dòng)物子宮內(nèi)，就可以孕育出新的個(gè)體。【解析】（1）卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)種含有促進(jìn)細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)，故動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中一般選擇MII中期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞。為了使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞，需要去掉卵母細(xì)胞細(xì)胞核。（2）融合細(xì)胞需要在含“兩鹽”、氨基酸、核苷酸、維生素、激素和血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚期再進(jìn)行移植。（3）根據(jù)圖中數(shù)據(jù)可知，正常培養(yǎng)的A組與向融合細(xì)胞中注入去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的融合細(xì)胞B組數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照分析，后者的融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率、囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率都高于前者，說明Kd4d的mRNA的作用是注入mRNA通過翻譯產(chǎn)生的去甲基化酶促進(jìn)了相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)而表現(xiàn)出既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率、也能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率。（4）胚胎分割形成克隆動(dòng)物體現(xiàn)胚胎干細(xì)胞的全能性，即胚胎分割的原理是胚胎干細(xì)胞的全能性，另外注意切割囊胚階段的胚胎要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的正常發(fā)育。這些孤雄小鼠遺傳物質(zhì)相同，所以作為實(shí)驗(yàn)材料可以排除由基因的差異造成的個(gè)體差異，進(jìn)而可以通過這些遺傳背景相同的個(gè)體來對(duì)比來分析，故常作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究。24.某植物蛋白酶抑制劑Ⅱ基因，轉(zhuǎn)錄的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知?，F(xiàn)利用PCR等技術(shù)擴(kuò)增該基因，具體原理如下圖所示，其中①～③表示有關(guān)過程，Ⅰ～Ⅲ表示有關(guān)物質(zhì)。請(qǐng)回答：（1）過程反應(yīng)體系中，生成雜合鏈物質(zhì)Ⅰ需要加入____________種引物，一般來說所用的引物越短，引物特異性越__________（填“高”或“低”）；同時(shí)還需加入____________酶。（2）利用DNA末端轉(zhuǎn)移酶催化過程②，使DNA單鏈左側(cè)末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列[AAA（A）n]，其目的是___________________，進(jìn)而利于過程③擴(kuò)增獲得目的基因序列Ⅲ；據(jù)此推測(cè)③過程除了引物1的另一種引物富含_______堿基。（3）在物質(zhì)Ⅲ的兩端通常還需要增加____________序列，以便與相應(yīng)的載體重組，再利用_______處理大腸桿菌等，以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞，構(gòu)建cDNA文庫(kù)。（4）微滴式數(shù)字PCR（ddPCR）是一種檢測(cè)RNA病毒等病原體的手段，正確的A.RNA病毒樣本在進(jìn)行ddPCR檢測(cè)時(shí)，需要先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄處理B.多孔板中如果某個(gè)孔沒有核酸分子，就不需要加入引物和Taq酶C.檢測(cè)時(shí)只要有一個(gè)孔出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，就可以說明原樣本中有病毒核酸D.相對(duì)于傳統(tǒng)手段，ddPCR更加靈敏，更容易檢測(cè)出微量病毒【答案】（1）①.1②.低③.逆轉(zhuǎn)錄（2）①.便于設(shè)計(jì)引物②.T（3）①.限制酶識(shí)別②.Ca2+（4）ACD〖祥解〗分析圖解：圖中過程①表示逆轉(zhuǎn)錄過程，即以RNA為模板合成cDNA單鏈的過程；過程②表示在末端轉(zhuǎn)移酶的作用下在cDNA末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列；過程③表示在DNA聚合酶的作用下生成互補(bǔ)鏈?！窘馕觥浚?）過程①表示逆轉(zhuǎn)錄過程，即以RNA為模板合成cDNA單鏈的過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；由于該過程只生成了一條單鏈cDNA，因此反應(yīng)體系中，只需要加入1種引物。一般來說所用的引物越短，引物特異性越低。其次RNA合成DNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化，因此同時(shí)還需加入逆轉(zhuǎn)錄酶。（2）利用DNA末段轉(zhuǎn)移酶催化過程②，使cDNA單鏈左側(cè)末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列[AAA（A）n]，其目是便于設(shè)計(jì)引物，進(jìn)而利于過程③擴(kuò)增獲得目的基因序列Ⅲ。根據(jù)題圖分析，同時(shí)結(jié)合堿基互補(bǔ)配對(duì)原則推測(cè)③過程除了引物1的另一種引物富含T堿基。（3）獲取目的基因是需要用限制酶切割獲得，因此在物質(zhì)Ⅲ的兩端通常還需增加限制酶識(shí)別序列，以便與相應(yīng)的載體重組；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2+處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞。（4）A、逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板合成DNA的過程，因此RNA病毒樣本在進(jìn)行ddPCR檢測(cè)時(shí)，需要先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄處理，A正確；B、多孔板中如果某個(gè)孔沒有核酸分子，仍然需要加入引物和Taq酶，排除無關(guān)變量影響，B錯(cuò)誤；C、檢測(cè)時(shí)只要有一個(gè)孔出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，就可以說明含有病毒核酸，證明原樣本中有病毒核酸，C正確；D、傳統(tǒng)手段檢測(cè)抗原，要求抗原數(shù)量一定值，因此相對(duì)于傳統(tǒng)手段，ddPCR更加靈敏，更容易檢測(cè)出微量病毒，D正確。故選ACD。25.新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因（neo）是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中常用的標(biāo)記基因，但neo存在于動(dòng)物細(xì)胞中會(huì)影響動(dòng)物體生長(zhǎng)和發(fā)育。為實(shí)現(xiàn)在敲除目的基因后，將neo基因從基因組中敲除，科研人員構(gòu)建了Cre-loxP重組系統(tǒng)。圖1為loxP序列的結(jié)構(gòu)示意圖，圖2為Cre-loxP重組系統(tǒng)的作用機(jī)理示意圖，圖3為通用型基因打靶載體的構(gòu)建及Flox鼠建立過程示意圖。請(qǐng)回答下列問題：（1）loxP位點(diǎn)是一段長(zhǎng)為34bp的序列，具有方向性，結(jié)合圖1，推測(cè)其方向性由區(qū)段_____決定。Cre酶可同時(shí)識(shí)別2個(gè)loxP位點(diǎn)的a和c區(qū)段，并同時(shí)催化b區(qū)段箭頭處___________鍵水解。（2）據(jù)圖2分析，若同一個(gè)DNA分子上具有2個(gè)同向的loxP位點(diǎn)，經(jīng)Cre酶作用后會(huì)得到一條鏈狀DNA分子和一個(gè)環(huán)狀DNA分子，從作用結(jié)果分析，Cre酶同時(shí)具有類似___________酶的作用。（3）圖3中，過程①可在限制酶和DNA連接酶等作用下，將同源臂1和同源臂2插入pAT質(zhì)粒中的多克隆位點(diǎn)序列MCS中。作為通用型載體，pAT質(zhì)粒的MCS中含有多個(gè)在基因組（待敲除基因所在DNA）中出現(xiàn)頻率較低的酶切位點(diǎn)，其意義是____________。（4）兩段擁有相同/相似堿基序列（如同源臂）的DNA片段在重組酶的催化下，可發(fā)生同源重組，同源臂間的DNA序列可發(fā)生交換。為敲除特定基因，以待敲除基因兩端的短小序列為依據(jù)設(shè)計(jì)引物，經(jīng)PCR1和PCR2獲得同源臂1和同源臂2，PCR1和PCR2不能在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行的原因是__________；為將同源臂定向插入pAT的MCS中，設(shè)計(jì)引物時(shí)需要在引物的___________端添加相應(yīng)的限制酶切位點(diǎn)。（5）過程②為重組pAT質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠受精卵的過程，該過程通常采用___________法。過程③需將轉(zhuǎn)染后的受精卵置于適宜培養(yǎng)液中，培養(yǎng)24h后，能存活的胚胎為成功轉(zhuǎn)染并整合到染色體DNA上的胚胎，后續(xù)通過___________等技術(shù)獲得Flox小鼠。（6）Flox小鼠中存在的neo基因，其兩側(cè)的2個(gè)LoxP位點(diǎn)的方向是___________的，可利用Cre酶將其敲除，獲得不含neo基因的基因敲除鼠。為實(shí)現(xiàn)在特定的時(shí)間對(duì)特定細(xì)胞中的neo基因進(jìn)行敲除，可在Cre基因的cDNA一段添加________________實(shí)現(xiàn)?！敬鸢浮浚?）①.b②.磷酸二酯（2）限制酶和DNA連接（3）使目的基因準(zhǔn)確連接到質(zhì)粒的特定位點(diǎn)上（4）①.PCR1和PCR2所用引物存在互補(bǔ)配對(duì)片段，至于同一反應(yīng)系統(tǒng)時(shí)他們會(huì)發(fā)生相互結(jié)合而失去作用②.5'（5）①.顯微注射②.胚胎移植（6）①.相反②.特異型啟動(dòng)子序列〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！窘馕觥浚?）Cre酶能識(shí)別loxP位點(diǎn)（特定的DNA序列），并使loxP位點(diǎn)間的基因序列被重組或刪除，如圖1中箭頭表示Cre酶的作用位點(diǎn)，則說明b區(qū)域決定了loxP位點(diǎn)的方向性。Cre酶催化b區(qū)段箭頭處磷酸二酯鍵的水解。（2）Cre酶作用后會(huì)得到一條鏈狀DNA分子和一個(gè)環(huán)狀DNA分子，說明能使loxP位點(diǎn)間的基因序列被重組或刪除，則需要切割DNA序列并連接，說明Cre酶的功能類似于限制酶和DNA連接酶。（3）pAT質(zhì)粒的MCS中含有多個(gè)在基因組中出現(xiàn)頻率較低的酶切位點(diǎn)，而同源臂1和同源臂2插入pAT質(zhì)粒中的多克隆位點(diǎn)序列MCS中，如果MCS中的酶切位點(diǎn)在基因中出現(xiàn)頻率較高，可能會(huì)使目的基因插入其他位點(diǎn)，因此pAT質(zhì)粒的MCS中含有多個(gè)在基因組中出現(xiàn)頻率較低的酶切位點(diǎn)的意義是使目的基因準(zhǔn)確連接到質(zhì)粒的特定位點(diǎn)上。（4）為敲除特定基因，以待敲除基因兩端的短小序列為依據(jù)設(shè)計(jì)引物，由于兩段擁有相同/相似堿基序列（如同源臂）的DNA片段在重組酶的催化下，可發(fā)生同源重組，因此經(jīng)PCR1和PCR2獲得同源臂1和同源臂2，PCR1和PCR2所用引物存在互補(bǔ)配對(duì)片段，至于同一反應(yīng)系統(tǒng)時(shí)他們會(huì)發(fā)生相互結(jié)合而失去作用，所以PCR1和PCR2不能在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要在引物的5'端添加相應(yīng)的限制酶切位點(diǎn)，因?yàn)?'端連接脫氧核苷酸。（5）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞通常選擇顯微注射法，為獲得Flox小鼠，需要通過胚胎移植技術(shù)。（6）Cre酶可同時(shí)識(shí)別2個(gè)loxP位點(diǎn)a和c區(qū)段，根據(jù)圖1中a段和c段的序列，可以推測(cè)neo基因其兩側(cè)的2個(gè)LoxP位點(diǎn)的方向是相反的，為實(shí)現(xiàn)在特定的時(shí)間對(duì)特定細(xì)胞中的neo基因進(jìn)行敲除，可在Cre基因的cDNA一段添加特異型啟動(dòng)子序列實(shí)現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)基因選擇性表達(dá)。江蘇省無錫市江陰市六校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、單項(xiàng)選擇題：每題2分，共計(jì)28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列與發(fā)酵技術(shù)相關(guān)的描述，正確的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理，生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物B.通過酵母菌發(fā)酵獲得大量菌體，并從細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白作為動(dòng)物飼料或食品添加劑C.水果等原料可為微生物的生長(zhǎng)提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，傳統(tǒng)發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理D.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)酵工程要接種通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種【答案】C〖祥解〗發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。【詳析】A、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中用到的微生物包含酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌等。其中，酵母菌屬于真菌，毛霉也屬于真菌，它們都具有成形的細(xì)胞核，是真核生物，并非全是原核生物，所以不能說傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理來生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物，A錯(cuò)誤；B、通過酵母菌發(fā)酵獲得大量菌體，菌體本身即細(xì)胞就可以作為單細(xì)胞蛋白，用于動(dòng)物飼料或食品添加劑，B錯(cuò)誤；C、谷物、水果等原料本身含有多種營(yíng)養(yǎng)成分，像糖類、蛋白質(zhì)、維生素等，這些可為微生物的生長(zhǎng)提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而且在傳統(tǒng)發(fā)酵過程中，由于原料上本身攜帶的微生物就可以進(jìn)行發(fā)酵，所以發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理，C正確；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所利用的菌株通常是原材料自帶的菌株，或者是之前發(fā)酵保留下來的菌株，大多是混合菌種發(fā)酵。而發(fā)酵工程使用的菌株多是通過人工分離、選擇和培育得到的，一般為純種發(fā)酵，但不一定是通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種，D錯(cuò)誤。故選C。2.研究者用酸筍開發(fā)具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發(fā)酵液接種到含有CaCO3固體培養(yǎng)基上，篩選出乳酸菌，然后將擴(kuò)大培養(yǎng)后的乳酸菌接種到含膽固醇培養(yǎng)液中，篩選出能高效降解膽固醇的乳酸菌。下列敘述正確的是（）A.酸筍發(fā)酵過程中需要定期排氣以確保發(fā)酵罐內(nèi)壓強(qiáng)穩(wěn)定B.培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落為目標(biāo)菌落C.與酸筍風(fēng)味形成相關(guān)的乳酸菌為厭氧型，所以不會(huì)分布在空氣中D.膽固醇既可為乳酸菌的生長(zhǎng)提供氮源，也可參與動(dòng)物細(xì)胞膜的組成【答案】B〖祥解〗酸筍制作的原理是：乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。【詳析】A、乳酸菌是厭氧菌，發(fā)酵過程中不產(chǎn)生氣體，不需要定期排氣，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸能與CaCO3發(fā)生反應(yīng)，使CaCO3分解成可溶性物質(zhì)乳酸鈣和CO2，導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)溶鈣圈，故溶鈣圈直徑與菌落直徑的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標(biāo)菌落，B正確；C、在自然界中，乳酸菌分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人和動(dòng)物的腸道內(nèi)都分布有乳酸菌，C錯(cuò)誤；D、膽固醇屬于脂質(zhì)，含有C、H、O元素，主要為微生物的生長(zhǎng)提供碳源，膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的重要成分，D錯(cuò)誤。故選B。3.發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如圖所示。下列說法正確的是（）A.在發(fā)酵之前需要利用固體培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)B.發(fā)酵結(jié)束后，可通過過濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身C.在酸性條件下可以利用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸D.發(fā)酵工程的產(chǎn)品就是微生物的代謝產(chǎn)物，包括初生代謝產(chǎn)物和次生代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的代謝活動(dòng)，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)特定的代謝產(chǎn)物或菌體本身的過程?！驹斘觥緼、擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是增加菌種數(shù)量，通常使用液體培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)成分均勻，菌體與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)接觸充分，繁殖速度快）。固體培養(yǎng)基主要用于菌種分離、純化和保藏，而非擴(kuò)大培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞（如單細(xì)胞蛋白），可通過過濾、離心、沉淀等物理方法將菌體與發(fā)酵液分離。若產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，則需進(jìn)一步提取純化，B正確；C、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵產(chǎn)生谷氨酸的適宜條件是中性至弱堿性環(huán)境。酸性條件下可能會(huì)抑制菌體代謝或?qū)е庐a(chǎn)物降解，無法有效獲得谷氨酸，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵工程的產(chǎn)品不僅包括微生物的代謝產(chǎn)物（如抗生素、氨基酸等），還包括微生物細(xì)胞本身（如酵母菌、乳酸菌等菌體用于食品或飼料），D錯(cuò)誤。故選B。4.以玄參莖段為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，流程圖如下，相關(guān)敘述正確的是（）①外植體的選擇及其消毒→②外植體的接種及愈傷組織誘導(dǎo)→③叢芽與不定根的誘導(dǎo)→④煉苗與移栽A.所用培養(yǎng)基含植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽、蔗糖和激素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.過程①需用酒精和次氯酸鈉混合液對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理C.過程②脫分化形成愈傷組織時(shí)可發(fā)生基因突變和染色體變異D.只有再分化的過程中存在基因的選擇性表達(dá)，脫分化的過程中不存在【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株?！驹斘觥緼、植物激素不屬于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、過程①需依次用酒精和次氯酸鈉對(duì)外植體進(jìn)行無菌處理，B錯(cuò)誤；C、由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞不發(fā)生分化，但細(xì)胞通過有絲分裂方式進(jìn)行增殖，在有絲分裂間期可能會(huì)發(fā)生基因突變，在細(xì)胞分裂期可能會(huì)發(fā)生染色體變異，C正確；D、脫分化是由已分化的狀態(tài)恢復(fù)到未分化的狀態(tài)，在脫分化的過程中也有相應(yīng)的基因選擇性表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選C。5.下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草寧，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)B.花藥離體培養(yǎng)得到的單倍體植株可大田栽培提高作物產(chǎn)量C.取香蕉莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得抗病毒苗D.組培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基【答案】D〖祥解〗植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織時(shí)期可獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物紫草寧，從而實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，A錯(cuò)誤；B、花藥離體培養(yǎng)得到的單倍體植株一般高度不育，不可大田栽培，還需要人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍后才可獲得能穩(wěn)定遺傳的個(gè)體，B錯(cuò)誤；C、莖尖為新生組織，細(xì)胞內(nèi)幾乎不含病毒，利用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗，而不是抗病毒苗，C錯(cuò)誤；D、組培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基，防止培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生雜菌等影響組培苗的生長(zhǎng)，D正確。故選D。6.蝸牛會(huì)取食水稻秸稈，下圖是利用甲（高產(chǎn)）、乙（耐鹽）兩種水稻的各自優(yōu)勢(shì)，通過植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽的雜種植株的流程圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用蝸牛消化道提取液進(jìn)行a處理時(shí)，也能獲得原生質(zhì)體B.b之前的誘導(dǎo)過程除PEG之外還可以使用滅活的病毒C.b之后得到的愈傷組織細(xì)胞與正常細(xì)胞相比沒有細(xì)胞壁D.c是具有耐鹽性狀的幼芽，c即可直接發(fā)育為耐鹽植株【答案】A〖祥解〗分析題圖：圖示為培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株的培育過程，其中a表示酶解法去除細(xì)胞壁，b表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，c為胚狀體。【詳析】A、圖中a處理是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性，使用纖維素酶和果膠酶可以去除細(xì)胞壁，所以進(jìn)行a處理時(shí)，需要用到纖維素酶和果膠酶，而根據(jù)題意，蝸牛會(huì)取食水稻秸稈，因此蝸牛消化道液提取液中含有纖維素和果膠酶，用其處理也能獲得原生質(zhì)體，A正確；B、滅活的病毒常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，而植物原生質(zhì)體融合可以用PEG（聚乙二醇）等方法誘導(dǎo)，一般不使用滅活的病毒，B錯(cuò)誤；C、b過程是原生質(zhì)體融合，之后得到的愈傷組織細(xì)胞是具有細(xì)胞壁的。植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織是具有細(xì)胞壁的薄壁細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、是經(jīng)過在含鈉鹽濃度為0.6%的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選出的具有耐鹽性狀的愈傷組織，愈傷組織需要經(jīng)過再分化等過程才能發(fā)育為耐鹽植株，而不是直接發(fā)育為植株，D錯(cuò)誤。故選A。7.如圖表示試管鼠的基本制備流程，下列敘述正確的是（）A處理1給4-6周齡雌鼠注射性激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理B.處理2和處理3是分別使卵母細(xì)胞和精子獲得受精能力C.過程1和過程2均在代孕鼠體內(nèi)完成細(xì)胞的分裂和分化D.胚胎分割對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)需將滋養(yǎng)層均等分割【答案】B〖祥解〗圖中處理1是注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，處理2是使卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，獲得受精能力，處理3是精子進(jìn)行處理，使其獲得受精能力。過程1是胚胎的體外發(fā)育，過程2是胚胎移植?！驹斘觥緼、處理1一般通過注射促性腺激素使性成熟的雌鼠超數(shù)排卵處理，A錯(cuò)誤；B、要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行處理，使其獲能，另外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，使卵母細(xì)胞獲得受精能力，即圖中的處理2和處理3，B正確；C、過程1是胚胎的體外發(fā)育，在體外完成細(xì)胞的分裂和分化，C錯(cuò)誤；D、對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割，需要保證內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等切割，D錯(cuò)誤。故選B。8.下列關(guān)于細(xì)胞工程的有關(guān)敘述，不正確的是（）A.利用細(xì)胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，由根尖細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞脫分化、染色體變異或基因突變，而不可能發(fā)生細(xì)胞分化和基因重組C.“試管嬰兒”實(shí)質(zhì)上就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產(chǎn)物”，但無法使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子D.目前人類的同卵雙胞胎多數(shù)是通過胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的【答案】D〖祥解〗試管嬰兒技術(shù)包括體外受體、早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術(shù)，屬于有性生殖?！驹斘觥緼、利用細(xì)胞工程培育“番茄--馬鈴薯”雜種植株也需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，原理包括植物細(xì)胞具有全能性，A正確；B、在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞通過有絲分裂方式增殖，可能會(huì)發(fā)生染色體變異或基因突變，沒有發(fā)生分化和基因重組，B正確；C、試管嬰兒的產(chǎn)生采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，但該技術(shù)無法使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子，C正確；D、目前人類的同卵雙胞胎少數(shù)是通過胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生的，D錯(cuò)誤。故選D。9.在基因工程中常使用噬菌體作為載體。M13噬菌體與噬菌體均能侵染大腸桿菌，但被M13噬菌體侵染的大腸桿菌不發(fā)生裂解?？蒲行〗M欲將目的基因的特定序列和基因編輯酶基因與噬菌體DNA進(jìn)行重組，進(jìn)而對(duì)大腸桿菌進(jìn)行基因編輯。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.噬菌體載體上需要含有標(biāo)記基因和多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)B.與噬菌體相比，M13噬菌體更適合作為轉(zhuǎn)化大腸桿菌的載體C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，必須先用處理大腸桿菌D.噬菌體重組DNA能在大腸桿菌中復(fù)制和表達(dá)才可實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸桿菌的基因編輯【答案】C〖祥解〗“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。常用的載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒、λ噬菌體的衍生物等?；虮磉_(dá)載體常包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。題中基因編輯能將目的基因整合到受體細(xì)胞DNA的特定位置?！驹斘觥緼、噬菌體載體上含有標(biāo)記基因，可鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。噬菌體載體有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，才具有攜帶多種目的基因的能力，A正確；B、被M13噬菌體侵染的大腸桿菌不發(fā)生裂解，才能得到導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，B正確；C、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)，常常先用Ca2+處理大腸桿菌使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞。電擊法也能達(dá)到相同效果，C錯(cuò)誤；D、噬菌體重組DNA能在大腸桿菌中復(fù)制和表達(dá)，基因編輯酶基因表達(dá)后才能產(chǎn)生基因編輯酶，進(jìn)而進(jìn)行基因編輯，D正確。故選C。10.下圖為轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（其中ampr為氨芐青霉素抗性基因）。下列敘述不正確的是（）A.質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)B.可同時(shí)選用限制酶PstI、SmaI對(duì)含目的基因的DNA進(jìn)行剪切C.過程②可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.④過程中可利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針對(duì)植株進(jìn)行篩選【答案】A〖祥解〗根據(jù)題意和圖示分析可知：①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要限制酶和DNA連接酶；②表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；③④表示植物組織培養(yǎng)過程，其中③是脫分化過程、④是再分化過程。【詳析】A、質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，A錯(cuò)誤；B、目的基因兩側(cè)是限制酶PstⅠ和SmaⅠ的識(shí)別序列，且質(zhì)粒上也含有這兩種限制酶的切割位點(diǎn)，所以可同時(shí)選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ對(duì)含目的基因的DNA進(jìn)行切割，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、圖中過程④可以利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針來篩選含有目的基因的幼苗，D正確。故選A。11.1998年，我國(guó)科研人員用兩個(gè)機(jī)理不同的抗蟲基因（CryIA和Cpti）構(gòu)建融合基因表達(dá)載體，導(dǎo)入棉花細(xì)胞培育出雙價(jià)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)抗蟲棉的推廣在提高經(jīng)濟(jì)和環(huán)境效益的同時(shí)，也保護(hù)了中國(guó)棉花產(chǎn)業(yè)的安全。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.基因表達(dá)載體中融合基因位于啟動(dòng)子與終止子之間B.該融合基因必須整合到棉花細(xì)胞的基因組DNA中C.可用DNA探針檢測(cè)融合基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNAD.雙價(jià)抗蟲棉比單價(jià)棉選擇抗性棉鈴蟲的速率更快【答案】D〖祥解〗基因工又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段?！驹斘觥緼、基因表達(dá)載體中融合基因位于啟動(dòng)子與終止子之間，才能保證抗性基因的表達(dá)，A正確；B、該融合基因必須整合到棉花細(xì)胞的基因組DNA中，才能使抗性基因穩(wěn)定存在并表達(dá)，B正確；C、可用DNA探針檢測(cè)融合基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，C錯(cuò)誤；D、雙價(jià)抗蟲棉與單價(jià)棉相選擇的機(jī)理不同，從不同方向?qū)οx進(jìn)行選擇，雙價(jià)抗蟲棉比單價(jià)棉選擇抗性棉鈴蟲的速率慢，D錯(cuò)誤。故選D。12.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”、“PCR擴(kuò)增”、“瓊脂糖凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是（）A.將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘，DNA存在于沉淀B.洋蔥濾液中加入冷酒精，用玻璃棒攪拌會(huì)使DNA的提取量增加C.DNA片段的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶D.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察【答案】C〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于上清液中，A錯(cuò)誤；B、洋蔥濾液中加入冷酒精，用玻璃棒攪拌會(huì)使DNA的析出，因?yàn)镈NA不溶于冷酒精，B錯(cuò)誤；C、DNA片段的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶，即鎂離子是DNA聚合酶的激活劑，C正確；D、DNA分子在凝膠載樣緩沖液中帶正電荷或負(fù)電荷，可用于電泳；凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下可以被檢測(cè)出來，D錯(cuò)誤。故選C。13.麥汁發(fā)酵是啤酒釀造的重要過程，可以分為接種酵母→充氧→前發(fā)酵→封罐→后發(fā)酵等重要步驟。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.為避免雜菌污染，需對(duì)發(fā)酵罐、麥汁、接種儀器等進(jìn)行滅菌B.前發(fā)酵階段，葡萄糖在酵母菌中分解可生成二氧化碳C.后發(fā)酵階段，酵母菌細(xì)胞主要進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精D.發(fā)酵過程中會(huì)有較多熱量釋放，因此發(fā)酵罐需配有降溫裝置【答案】C〖祥解〗果酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進(jìn)行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進(jìn)行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的細(xì)胞核，屬于真核生物?！驹斘觥緼、在啤酒釀造過程中，雜菌污染會(huì)影響發(fā)酵過程和啤酒品質(zhì)，對(duì)發(fā)酵罐、麥汁、接種儀器等進(jìn)行滅菌處理能夠有效避免雜菌污染，保證發(fā)酵順利進(jìn)行，A正確；B、前發(fā)酵階段，葡萄糖在酵母菌細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行糖酵解生成丙酮酸，丙酮酸再進(jìn)入線粒體進(jìn)一步分解并生成