高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1天津市部分區(qū)2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期期中練習(xí)（I卷）一、選擇題：每小題4分，共48分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一個(gè)最符合題意。1.傳統(tǒng)發(fā)酵食醋具有獨(dú)特的風(fēng)味，這是由多種物質(zhì)共同作用的結(jié)果。下列敘述不正確的是（）A.醋酸菌在氧氣和糖源充足的情況下才能產(chǎn)生乙酸B.白醋、陳醋、米醋發(fā)酵所需菌種主要是醋酸菌C.發(fā)酵初期發(fā)酵液溫度升高主要是微生物代謝活動(dòng)增強(qiáng)所致D.發(fā)酵后期大多數(shù)微生物死亡與營養(yǎng)物質(zhì)消耗、有機(jī)酸積累等有關(guān)【答案】A〖祥解〗發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。人們可以通過傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)或發(fā)酵工程來進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵和半固體發(fā)酵為主。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等環(huán)節(jié)。【詳析】A、醋酸菌在氧氣、糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸；當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，將乙醇變成乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珹錯(cuò)誤；B、傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種發(fā)酵為主，其中白醋、陳醋、米醋發(fā)酵所需的菌種主要是醋酸菌，B正確；C、發(fā)酵初期，醋酸菌等微生物代謝增強(qiáng)，產(chǎn)熱增多，發(fā)酵液溫度升高，C正確；D、發(fā)酵后期，營養(yǎng)物質(zhì)基本消耗完，各種代謝產(chǎn)物如有機(jī)酸積累，溫度升高，pH下降，滲透壓升高，這些因素都不利于微生物生存，導(dǎo)致大量微生物死亡，D正確。故選A。2.“篩選”是生物技術(shù)與工程中重要的環(huán)節(jié)。下列敘述正確的是（）A.用選擇培養(yǎng)基篩選微生物，對照組不接種微生物，實(shí)驗(yàn)組接種微生物B.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞C.在試管嬰兒技術(shù)中，需取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定來篩選所需的胚胎D.制備單克隆抗體時(shí)，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過三次篩選：①篩選能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞②篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞。最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體?！驹斘觥緼、選擇培養(yǎng)基的作用是目的菌能夠正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，為了確定選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用，應(yīng)設(shè)計(jì)一個(gè)在完全培養(yǎng)基上接種的培養(yǎng)皿作對照，即對照組也接種微生物，只是實(shí)驗(yàn)組和對照組培養(yǎng)基的成分不同，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因?yàn)橥N融合細(xì)胞也會(huì)再生出細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；C、在試管嬰兒技術(shù)中，不需要進(jìn)行胚胎的性別鑒定，設(shè)計(jì)試管嬰兒有時(shí)需要進(jìn)行性別鑒定，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體制備過程中，第一次篩選要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選要用抗體陽性檢測方法從分子水平篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，即從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選D。3.下列有關(guān)倒平板操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上C.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰D.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過來放置【答案】B〖祥解〗倒平板操作的步驟：（1）將滅過菌培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；（2）右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；（3）用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；（4）等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染?！驹斘觥緼、整個(gè)倒平板過程要防止外來雜菌的入侵，因此滅過菌的培養(yǎng)皿應(yīng)放在火焰旁，A正確；B、培養(yǎng)皿應(yīng)打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開，B錯(cuò)誤；C、打開的錐形瓶瓶口應(yīng)迅速通過火焰，防止雜菌污染，C正確；D、等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過來放置，防止皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染，D正確。故選B。4.下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)（Y=C或T，R=A或G）。下列相關(guān)敘述正確的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'A.限制酶切割一次需切斷2個(gè)磷酸二酯鍵，增加4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.由上表可知一種限制酶只能識(shí)別一種核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)切割C.AluI切割后的DNA片段可用E.coliDNA連接酶或T4連接酶連接D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段進(jìn)行重組后，BamHI和Sau3AI均不能識(shí)別并切割【答案】C〖祥解〗限制酶特點(diǎn)：識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。【詳析】A、限制酶切割一次需切斷2個(gè)磷酸二酯鍵，形成2個(gè)新的游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；B、一種限制酶不一定只識(shí)別一種核苷酸序列，如HindⅡ，B錯(cuò)誤；C、AluI切割后形成的是平末端，E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶既可以連接黏性末端，也可以連接平末端，C正確；D、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段進(jìn)行重組后，BamHⅠ不能識(shí)別并切割重組片段，而Sau3AⅠ可識(shí)別并切割重組片段，D錯(cuò)誤。故選C。5.無菌操作是生物實(shí)驗(yàn)中一項(xiàng)重要的基本操作。下列過程不需要嚴(yán)格無菌操作的是（）A.傳統(tǒng)泡菜的制作 B.酵母菌的純培養(yǎng)C.動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) D.花藥離體培養(yǎng)【答案】A〖祥解〗在傳統(tǒng)生物技術(shù)中，無需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件?！驹斘觥吭趥鹘y(tǒng)生物技術(shù)中，如傳統(tǒng)泡菜的制作過程，不需要嚴(yán)格的無菌操作，通常是根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件進(jìn)行的，而實(shí)驗(yàn)室中的一些生物工程技術(shù)，如酵母菌的純培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、花藥離體培養(yǎng)等需要嚴(yán)格的無菌操作，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。6.研究人員將胰島素B鏈的第28位氨基酸替換為天冬氨酸，抑制了胰島素聚合，從而獲得速效胰島素類似物。下列敘述正確的是（）A.該產(chǎn)品是通過直接改造胰島素來生產(chǎn)的B.改變氨基酸的種類不會(huì)影響胰島素的空間結(jié)構(gòu)C.可通過定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基增添達(dá)到改造目的D.胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過程相反【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成，即改造胰島素的過程實(shí)際是改造胰島素基因的過程，A錯(cuò)誤；B、氨基酸的種類及排列順序影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、可通過定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基替換達(dá)到第28位氨基酸替換為天冬氨酸的目的，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過程（基因→蛋白質(zhì)合成）相反，D正確。故選D。7.科研人員通過基因編輯技術(shù)將綠色熒光蛋白（GEP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如圖1所示。隨機(jī)挑取5個(gè)品系細(xì)胞通過PCR驗(yàn)證GFP的導(dǎo)入情況，結(jié)果如圖2所示。據(jù)此推測在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，所選擇的引物為（）A.F1，R1 B.F2，R1 C.F1，R2 D.F2，R2【答案】A〖祥解〗PCR技術(shù)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)?！驹斘觥拷Y(jié)合圖1和圖2推測，P-GFP融合基因電泳后的DNA片段較大，未插入GFP基因則電泳后的DNA片段較小，5個(gè)品系細(xì)胞中有的只擴(kuò)增出小片段或大片段，有的兩種片段均有，應(yīng)選擇圖1中的引物組合是F1、R1。故選A。8.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”“瓊脂糖凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)說法，正確的是（）A.利用酒精初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA溶于酒精B.過濾后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解C.瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，DNA分子越大，遷移速率越快D.提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后即可變?yōu)樗{(lán)色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色；耐高溫的DNA聚合酶在延伸環(huán)節(jié)時(shí)進(jìn)行子鏈的合成。【詳析】A、DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離，A錯(cuò)誤；B、洋蔥研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正確；C、待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會(huì)影響DNA在電泳中的遷移速率，DNA分子越小，遷移的速率越快，DNA分子越大，遷移速率越慢，C錯(cuò)誤；D、將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后，水浴加熱條件下才會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選B。9.哺乳動(dòng)物卵原細(xì)胞減數(shù)分裂形成成熟卵子的過程，只有在促性腺激素和精子的誘導(dǎo)下才能完成。下圖為某哺乳動(dòng)物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.下丘腦、垂體參與該哺乳動(dòng)物次級卵母細(xì)胞的形成B.受精作用促進(jìn)次級卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂C.多數(shù)哺乳動(dòng)物IV形成時(shí)，只能觀察到兩個(gè)極體D.精子接觸透明帶時(shí)，透明帶會(huì)發(fā)生生理反應(yīng)從而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗分析題圖：圖中細(xì)胞Ⅰ為卵原細(xì)胞，細(xì)胞Ⅱ?yàn)榻?jīng)過復(fù)制的初級卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅲ可表示次級卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅳ是經(jīng)過受精作用形成的受精卵，受精卵進(jìn)行的是有絲分裂?！驹斘觥緼、據(jù)圖可知，減數(shù)第一次分裂完成需要促性腺激素處理，下丘腦合成的促性腺激素釋放激素作用于垂體，使得垂體分泌促性腺激素，因此下丘腦、垂體參與該哺乳動(dòng)物次級卵母細(xì)胞的形成，A正確；B、結(jié)合題圖可知，次級卵母細(xì)胞在精子的作用下才能完成減數(shù)第二次分裂，產(chǎn)生成熟的卵細(xì)胞，從而形成受精卵，即受精作用促進(jìn)次級卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，B正確；C、多數(shù)哺乳動(dòng)物Ⅳ的形成只產(chǎn)生兩個(gè)極體，在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體，說明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，C正確；D、在精子接觸卵細(xì)胞膜時(shí)，會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)，能防止多個(gè)精子入卵，D錯(cuò)誤。故選D。10.我國是香蕉的主產(chǎn)地之一，大多數(shù)栽培香蕉是三倍體品種。傳統(tǒng)生產(chǎn)采用吸芽繁殖方式，不僅周期長、產(chǎn)率低、果品不佳，還易積累病毒。下列措施無法達(dá)到改良目的的是（）A.通過基因工程轉(zhuǎn)入外源基因提高果實(shí)品質(zhì)B.用香蕉頂端分生區(qū)作為外植體獲得脫毒苗C.利用單倍體育種對栽培香蕉進(jìn)行品種選育D.用香蕉葉鞘進(jìn)行植物組織培養(yǎng)以提高產(chǎn)率【答案】C〖祥解〗脫毒香蕉苗的獲得：選取香蕉外植體，通過誘導(dǎo)脫分化產(chǎn)生愈傷組織，然后通過調(diào)整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，獲得大量試管苗?！驹斘觥緼、通過基因工程轉(zhuǎn)入外源基因可以改變香蕉的基因組成，從而有可能提高果實(shí)品質(zhì)，達(dá)到改良香蕉的目的，可以達(dá)到改良目的，A不符合題意；B、用香蕉頂端分生區(qū)作為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗。因?yàn)橹参镯敹朔稚鷧^(qū)附近的病毒含量很低或者幾乎沒有病毒，通過這種方式可以減少香蕉積累的病毒，提高香蕉的品質(zhì)和產(chǎn)量，可以達(dá)到改良目的，B不符合題意；C、大多數(shù)栽培香蕉是三倍體品種，在減數(shù)分裂過程中會(huì)出現(xiàn)聯(lián)會(huì)紊亂，無法正常產(chǎn)生配子，難以進(jìn)行單倍體育種，無法達(dá)到改良目的，C符合題意；D、用香蕉葉鞘進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的香蕉植株，縮短培養(yǎng)周期，從而提高產(chǎn)率，達(dá)到改良香蕉繁殖方式的目的，可以達(dá)到改良目的，D不符合題意。故選C。11.生物技術(shù)的發(fā)展改善了人類的生活，是推動(dòng)人類社會(huì)向前發(fā)展的重要科學(xué)技術(shù)。但科學(xué)是一把雙刃劍，只有合理應(yīng)用于生產(chǎn)生活才能造福全人類，下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的論述錯(cuò)誤的是（）A.轉(zhuǎn)基因生物可能通過花粉雜交影響非轉(zhuǎn)基因生物B.對流感病毒基因進(jìn)行改造可能會(huì)引發(fā)大規(guī)模流行性疾病C.人類基因編輯可用于編輯出完美嬰兒，以實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育D.“只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用”不屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)【答案】C〖祥解〗（1）轉(zhuǎn)基因技術(shù)給人類帶來了琳瑯滿目的產(chǎn)品，也引發(fā)了社會(huì)對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的關(guān)注和爭論。（2）治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞、組織、器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的；生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，它面臨很多倫理問題。我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因生物可通過花粉雜交影響非轉(zhuǎn)基因生物，即轉(zhuǎn)入的基因可能會(huì)從轉(zhuǎn)基因植物的體內(nèi)擴(kuò)散到非轉(zhuǎn)基因生物鐘，A正確；B、對流感病毒基因進(jìn)行改造可能會(huì)提高流感病毒的傳染性和致病能力，從而引發(fā)大規(guī)模流行性疾病，B正確；C、人類基因編輯用于編輯出完美嬰兒，會(huì)造成社會(huì)歧視現(xiàn)象的發(fā)生，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)給人類帶來許多便利，但同時(shí)也存在一些安全性問題，即既能看到轉(zhuǎn)基因技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，也能明白其中的不足，這屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，“只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用”不屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，D正確。故選C。12.下圖是小鼠（2N=40）孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞系的獲得過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.過程①中精子需用獲能液培養(yǎng)，卵母細(xì)胞應(yīng)處于減數(shù)第二次分裂中期B.過程②中的早期胚胎培養(yǎng)應(yīng)置于含95%O2和5%CO2混合氣體的培養(yǎng)箱中C.圖中“早期胚胎”是桑葚胚，細(xì)胞已經(jīng)逐漸分化，出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層D.推測孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞只含有一個(gè)染色體組，具有增殖和分化的能力【答案】BC〖祥解〗分析圖示可知：表示小鼠孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞系獲得過程，精子和卵母細(xì)胞經(jīng)過①受精作用形成受精卵，然后移除雄原核，經(jīng)過②早期胚胎發(fā)育形成早期胚胎，最終形成孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞?！驹斘觥緼、在受精過程中，精子需要獲能才能完成受精作用，卵母細(xì)胞應(yīng)處于減數(shù)第二次分裂中期，A正確；B、早期胚胎培養(yǎng)應(yīng)置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中，而不是95\%O2，B錯(cuò)誤；C、圖中的“早期胚胎”是桑葚胚，此時(shí)細(xì)胞未分化，C錯(cuò)誤；D、孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞是由孤雌生殖得到的單倍體胚胎干細(xì)胞，只含有一個(gè)染色體組，具有增殖和分化的能力，D正確。故選BC。（Ⅱ卷）二、非選擇題：共52分13.多年來，腐乳一直受到人們的喜愛。這是因?yàn)榻?jīng)過微生物（主要是毛霉）的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收。（1）毛霉等微生物能產(chǎn)生多種“酶類”，使豆腐質(zhì)地變軟，并賦予腐乳特殊的風(fēng)味。此處“酶類”主要指_______（注：糖化酶能水解多糖為單糖，也能合成雙糖）A.蛋白酶 B.糖化酶C.DNA聚合酶 D.限制性內(nèi)切核酸酶（2）早期發(fā)酵階段（毛霉生長階段），豆腐可以被視為______培養(yǎng)基（編號(hào)選填）①固體培養(yǎng)基②液體培養(yǎng)基③選擇培養(yǎng)基④鑒別培養(yǎng)基（3）為高效篩選自然界的目標(biāo)菌種，可以采用如圖所示的“高通量篩選”方法。圖中手持的器材稱為________，該器材運(yùn)用在以下哪個(gè)實(shí)驗(yàn)中________。A．平板劃線法B．稀釋涂布平板法C．PCR擴(kuò)增DNAD．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳鑒定【答案】（1）A（2）①（3）①.移液器（或移液槍）②.BCD〖祥解〗腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制；在腐乳生產(chǎn)過程中，溫度應(yīng)控制在15～18℃，且應(yīng)保持一定的濕度，以便毛霉生長?！窘馕觥浚?）毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。（2）早期發(fā)酵階段（毛霉生長階段），豆腐能為毛霉等微生物的生長提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)和支撐，豆腐可以被視為固體培養(yǎng)基，①正確，②③④錯(cuò)誤。故選①。（3）圖中手持的器材稱為移液器（或移液槍）。ABCD、移液器主要用于準(zhǔn)確吸取和轉(zhuǎn)移一定體積的液體，在稀釋涂布平板法中，需要將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后，再用移液器吸取一定體積的稀釋液涂布到平板上，從而實(shí)現(xiàn)高效篩選目標(biāo)菌種。而平板劃線法是用接種環(huán)進(jìn)行操作；PCR擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳鑒定也需要用到移液槍。所以該器材運(yùn)用在BCD實(shí)驗(yàn)中，BCD正確，A錯(cuò)誤。故選BCD。14.羊乳的成分更接近于人乳，可作為牛乳過敏體質(zhì)者最理想的替代乳品。但研究表明山羊乳中β-乳球蛋白也是引起人體過敏反應(yīng)的一種主要致敏原，為實(shí)現(xiàn)羊乳“人源化”改造，研究人員利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除了山羊乳腺細(xì)胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因，同時(shí)在相應(yīng)位點(diǎn)導(dǎo)入人乳鐵蛋白（hLF）基因（通常只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)）。該研究為培育羊乳中低致敏原和富含人乳鐵蛋白功能營養(yǎng)成分的轉(zhuǎn)基因山羊新品種提供了科學(xué)依據(jù)。下圖為研究人員利用該技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因山羊的操作過程?；卮鹣铝袉栴}：（1）上述技術(shù)中的目的基因是______，可通過PCR技術(shù)快速擴(kuò)增目的基因，擴(kuò)增時(shí)引物的作用是________。（2）CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要包含向?qū)NA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除山羊乳腺細(xì)胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因時(shí)，科研人員設(shè)計(jì)了sgBLG引導(dǎo)序列，sgBLG能夠通過______方式與山羊基因組中BLG基因的靶位點(diǎn)結(jié)合。（3）Cas9蛋白類似于基因工程中常用到的______酶，但Cas9蛋白特性與該酶的區(qū)別是_______。（4）檢測發(fā)現(xiàn)過程②中，hLF基因成功插入在母羊乙成纖維細(xì)胞中的一條常染色體上。上圖過程①②運(yùn)用到的技術(shù)有______，過程③④⑤中，運(yùn)用到的技術(shù)有______（編號(hào)選填）。①顯微注射技術(shù)②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)③胚胎移植技術(shù)④DNA重組技術(shù)⑤動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)⑥細(xì)胞核移植技術(shù)（5）篩選后得到的早期胚胎細(xì)胞中沒有檢測到該蛋白，能否說明目的基因沒有成功導(dǎo)入并表達(dá)，理由是________。【答案】（1）①.人乳鐵蛋白基因（HLF基因）②.使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸（2）堿基互補(bǔ)配對（3）①.限制性內(nèi)切核酸（限制）②.Cas9蛋白沒有的專一識(shí)別DNA分子特定核苷酸序列的特性（4）①.①④②.②③⑥（5）不能，人乳鐵蛋白基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)〖祥解〗基因工程的操作步驟（1）目的基因的獲取；方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！窘馕觥浚?）本研究是為了培育羊乳中低致敏原和富含人乳鐵蛋白功能營養(yǎng)成分的轉(zhuǎn)基因山羊新品種，因此目的基因是人乳鐵蛋白基因（HLF基因），可通過PCR技術(shù)快速擴(kuò)增目的基因，擴(kuò)增時(shí)引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。（2）sgBLG通過堿基互補(bǔ)配對與山羊基因組中BLG基因座的第一外顯子（Ex1）中的靶位點(diǎn)結(jié)合。（3）Cas9蛋白可切割DNA，類似于基因工程中常用到限制酶，但Cas9蛋白特性與該酶的區(qū)別是Cas9蛋白沒有限制性內(nèi)切核酸酶所具有的專一識(shí)別DNA分子特定核苷酸序列的特性。（4）上圖過程①是基因替換，屬于DNA重組技術(shù)，②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，用到顯微注射技術(shù)，因此運(yùn)用到的技術(shù)有①②，過程③是核移植，④是早期胚胎培養(yǎng)，即需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，⑤為胚胎移植，因此運(yùn)用到的技術(shù)有②③⑥。（5）人乳鐵蛋白（目的）基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，因此在的早期胚胎細(xì)胞中不表達(dá)，沒有檢測到該蛋白不能說明目的基因是否成功導(dǎo)入。15.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，并且取得了顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。下圖表示植物細(xì)胞工程的相關(guān)操作過程及應(yīng)用，已知該植物為二倍體，體細(xì)胞中染色體數(shù)目為2m?；卮鹣铝袉栴}。（1）通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速繁殖植物，屬于_______生殖。圖中的單倍體幼苗體細(xì)胞中含有染色體數(shù)目為______，該單倍體幼苗經(jīng)_______處理后可獲得正常二倍體植株。（2）圖中C過程的目的是_______。細(xì)胞丙和細(xì)胞丁融合前應(yīng)先用________酶處理，獲得原生質(zhì)體。若融合僅考慮兩兩融合，則培養(yǎng)液中的融合細(xì)胞類型有_______種，獲得的雜種細(xì)胞中_______（填“含有”或“不含”）同源染色體。（3）次生代謝產(chǎn)物______（填“是”或“不是”）其基本生命活動(dòng)所必需的產(chǎn)物，為獲得圖中次生代謝產(chǎn)物，通常需將外植體培養(yǎng)至_______階段。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)脫毒苗的成苗率和脫毒率與外植體的大小有關(guān)，并利用馬鈴薯進(jìn)行脫毒苗的培育實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖。該圖表明，馬鈴薯脫毒培養(yǎng)過程中，適宜的莖尖大小為______?！敬鸢浮浚?）①.無性②.m③.秋水仙素或低溫（2）①.提高乙細(xì)胞的突變頻率②.纖維素酶和果膠酶③.3##三④.含有（3）①.不是②.愈傷組織（4）0.27mm〖祥解〗植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)等，植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞（稱為外植體）等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，屬于無性生殖的方式，利用的原理是植物細(xì)胞具有全能性。植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)，利用的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性?！窘馕觥浚?）通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速繁殖植物，屬于無性生殖，已知該植物為二倍體，體細(xì)胞中染色體數(shù)目為2m，則圖中的單倍體幼苗體細(xì)胞中染色體數(shù)目減半為m，單倍體幼苗可用秋水仙素或低溫處理，通過抑制紡錘體的形成，使染色體數(shù)目加倍，從而獲得正常二倍體植株。（2）C過程用紫外線照射處理，可以提高乙細(xì)胞的突變頻率。植物細(xì)胞融合之前要先使用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，若融合僅考慮兩兩融合，則培養(yǎng)液中的融合細(xì)胞類型有3種類型，即兩個(gè)丙細(xì)胞融合、兩個(gè)丁細(xì)胞融合、丙和丁細(xì)胞融合，獲得的雜種細(xì)胞含有兩個(gè)親本中所有染色體，故細(xì)胞中含有同源染色體。（3）次生代謝產(chǎn)物不是其基本生命活動(dòng)所必需的產(chǎn)物，為獲得圖中次生代謝產(chǎn)物，需將外植體培養(yǎng)至愈傷組織階段，因?yàn)橛鷤M織細(xì)胞分裂快，代謝旺盛，可產(chǎn)生所需的產(chǎn)物。（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)過程中，適宜的莖尖大小為0.27mm左右，既保證成苗率相對較高，也保證了脫毒苗的脫毒率較高。16.埃博拉病毒（EBOV）是一種能導(dǎo)致人類出血熱的致死性病毒，對公共衛(wèi)生具有較嚴(yán)重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒復(fù)制中具有重要作用，也是檢測EBOV的重要靶蛋白。實(shí)驗(yàn)人員用NP蛋白免疫小鼠來制備抗EBOV單克隆抗體，過程如下圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）制備抗EBOV單克隆抗體過程中，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是________。（2）選擇骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合，原因是骨髓瘤細(xì)胞具有_____的特征。從細(xì)胞來源的角度分析，與其他瘤細(xì)胞相比，選擇骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合的優(yōu)點(diǎn)為________。（3）②過程中通常采用的誘導(dǎo)融合的方法有_______（寫出一種即可），細(xì)胞融合的原理是________。（4）抗EBOV單克隆抗體可用于檢測血漿中EBOV的含量，檢測原理如下圖所示。①檢測前，先將抗EBOV單克隆抗體固定在支持物上，然后向檢測體系中加入一定量含有EBOV的血漿（其NP蛋白稱為待測抗原）和等量酶標(biāo)記的NP蛋白（酶標(biāo)記抗原），目的是讓待測抗原、酶標(biāo)記抗原與抗EBOV單克隆抗體_______結(jié)合。②保溫一段時(shí)間后洗滌，再向檢測體系中加入一定量的白色底物，若檢測體系藍(lán)色越淺，則說明血漿中NP蛋白（EBOV）含量_______?！敬鸢浮浚?）刺激小鼠產(chǎn)生更多能分泌抗NP抗體的B淋巴細(xì)胞（2）①.能無限增殖②.骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞均來自骨髓中的造血干細(xì)胞，有利于細(xì)胞的融合（3）①.滅活病毒誘導(dǎo)②.細(xì)胞膜的流動(dòng)性（4）①.競爭性②.越高〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【解析】（1）制備抗EBOV單克隆抗體過程中，需要用免疫過的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，因此，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多能分泌抗NP抗體的B淋巴細(xì)胞。（2）適宜條件下，骨髓瘤細(xì)胞具有能無限增殖的特點(diǎn)，因此選擇免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合進(jìn)而獲得雜交瘤細(xì)胞，此時(shí)的雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖；從細(xì)胞來源的角度分析，與其他瘤細(xì)胞相比，選擇骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合的優(yōu)點(diǎn)為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞均來自骨髓中的造血干細(xì)胞，有利于細(xì)胞的融合。（3）②過程動(dòng)物細(xì)胞融合與植物細(xì)胞融合相比（有物理方法、化學(xué)方法等），誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合特有的方法是滅活病毒誘導(dǎo)法，細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。（4）①根據(jù)圖示反應(yīng)原理，檢測前，先將抗EBOV單克隆抗體固定在支持物上，然后向檢測體系中加入一定量含有EBOV的血漿（其NP蛋白稱為待測抗原）和等量酶標(biāo)記的NP蛋白（酶標(biāo)記抗原），待測抗原中的目標(biāo)抗原和酶標(biāo)記抗原競爭結(jié)合固相抗體，即待測抗原、酶標(biāo)記抗原與抗EBOV單克隆抗體發(fā)生競爭性結(jié)合。②標(biāo)記抗原的酶可催化白色底物變?yōu)樗{(lán)色產(chǎn)物，所以如果待測抗原中目標(biāo)抗原越多，則酶標(biāo)記抗原和抗體結(jié)合得越少，催化生成的藍(lán)色產(chǎn)物就越少，檢測體系藍(lán)色就越淺。即檢測體系藍(lán)色越淺，則說明血漿中NP蛋白（EBOV）含量越高。17.北方白犀牛曾經(jīng)廣泛分布于非洲，但由于猖獗的盜獵和自然棲息地的喪失，它們的個(gè)體數(shù)量不斷減少。2018年3月，世界上最后一頭雄性北方白犀牛去世，該物種僅剩下兩頭雌性。然而在此之前，研究人員已設(shè)法保存了北方白犀牛的精子?；卮鹣铝袉栴}：（1）若通過胚胎工程對北方白犀牛進(jìn)行繁殖，則操作步驟應(yīng)為：對僅存的兩頭雌性個(gè)體注射_________進(jìn)行超數(shù)排卵處理→體外受精→早期胚胎培養(yǎng)→_______+是否妊娠檢查→產(chǎn)生白犀牛后代。（2）為了提高胚胎利用率，可以對早期胚胎進(jìn)行胚胎分割，對囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意________，以免影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。（3）保護(hù)白色犀牛的最根本措施是借助生態(tài)工程使白犀牛被破壞的生態(tài)環(huán)境得到收復(fù)，生態(tài)工程遵循的基本原理包括_______（答出2點(diǎn)即可）。除了上述建立精子庫外，保護(hù)生物多樣性的措施還有__________。（答出1點(diǎn)即可）。【答案】（1）①.促性腺激素②.胚胎移植（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（3）①.整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、自生②.建立自然保護(hù)〖祥解〗胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此，胚胎分割可以看做動(dòng)物無性繁殖或克隆的方法之一。進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后，用分割針或分割刀進(jìn)行分割。對于不同發(fā)育階段的胚胎，分割的具體操作不完全相同?！窘馕觥浚?）若通過胚胎工程對北方白犀牛進(jìn)行繁殖，則操作步驟應(yīng)為：對僅存的兩頭雌性個(gè)體注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵，體外受精→早期胚胎培養(yǎng)→胚胎移植+是否妊娠檢查→產(chǎn)生白犀牛后代。（2）胚胎分割時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好的、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚，并注意將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，以免影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。（3）保護(hù)白色犀牛的最根本措施是借助生態(tài)工程使白犀牛被破壞的生態(tài)環(huán)境得到恢復(fù)，生態(tài)工程遵循的基本原理整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、自生等。除了上述建立精子庫外，保護(hù)生物多樣性的措施還有建立自然保護(hù)區(qū)以及風(fēng)景名勝區(qū)。天津市部分區(qū)2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期期中練習(xí)（I卷）一、選擇題：每小題4分，共48分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一個(gè)最符合題意。1.傳統(tǒng)發(fā)酵食醋具有獨(dú)特的風(fēng)味，這是由多種物質(zhì)共同作用的結(jié)果。下列敘述不正確的是（）A.醋酸菌在氧氣和糖源充足的情況下才能產(chǎn)生乙酸B.白醋、陳醋、米醋發(fā)酵所需菌種主要是醋酸菌C.發(fā)酵初期發(fā)酵液溫度升高主要是微生物代謝活動(dòng)增強(qiáng)所致D.發(fā)酵后期大多數(shù)微生物死亡與營養(yǎng)物質(zhì)消耗、有機(jī)酸積累等有關(guān)【答案】A〖祥解〗發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。人們可以通過傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)或發(fā)酵工程來進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵和半固體發(fā)酵為主。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等環(huán)節(jié)。【詳析】A、醋酸菌在氧氣、糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸；當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，將乙醇變成乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珹錯(cuò)誤；B、傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種發(fā)酵為主，其中白醋、陳醋、米醋發(fā)酵所需的菌種主要是醋酸菌，B正確；C、發(fā)酵初期，醋酸菌等微生物代謝增強(qiáng)，產(chǎn)熱增多，發(fā)酵液溫度升高，C正確；D、發(fā)酵后期，營養(yǎng)物質(zhì)基本消耗完，各種代謝產(chǎn)物如有機(jī)酸積累，溫度升高，pH下降，滲透壓升高，這些因素都不利于微生物生存，導(dǎo)致大量微生物死亡，D正確。故選A。2.“篩選”是生物技術(shù)與工程中重要的環(huán)節(jié)。下列敘述正確的是（）A.用選擇培養(yǎng)基篩選微生物，對照組不接種微生物，實(shí)驗(yàn)組接種微生物B.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞C.在試管嬰兒技術(shù)中，需取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定來篩選所需的胚胎D.制備單克隆抗體時(shí)，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過三次篩選：①篩選能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞②篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞。最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體?！驹斘觥緼、選擇培養(yǎng)基的作用是目的菌能夠正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，為了確定選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用，應(yīng)設(shè)計(jì)一個(gè)在完全培養(yǎng)基上接種的培養(yǎng)皿作對照，即對照組也接種微生物，只是實(shí)驗(yàn)組和對照組培養(yǎng)基的成分不同，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因?yàn)橥N融合細(xì)胞也會(huì)再生出細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；C、在試管嬰兒技術(shù)中，不需要進(jìn)行胚胎的性別鑒定，設(shè)計(jì)試管嬰兒有時(shí)需要進(jìn)行性別鑒定，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體制備過程中，第一次篩選要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選要用抗體陽性檢測方法從分子水平篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，即從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選D。3.下列有關(guān)倒平板操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上C.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰D.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過來放置【答案】B〖祥解〗倒平板操作的步驟：（1）將滅過菌培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；（2）右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；（3）用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；（4）等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染?！驹斘觥緼、整個(gè)倒平板過程要防止外來雜菌的入侵，因此滅過菌的培養(yǎng)皿應(yīng)放在火焰旁，A正確；B、培養(yǎng)皿應(yīng)打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開，B錯(cuò)誤；C、打開的錐形瓶瓶口應(yīng)迅速通過火焰，防止雜菌污染，C正確；D、等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過來放置，防止皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染，D正確。故選B。4.下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)（Y=C或T，R=A或G）。下列相關(guān)敘述正確的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'A.限制酶切割一次需切斷2個(gè)磷酸二酯鍵，增加4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.由上表可知一種限制酶只能識(shí)別一種核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)切割C.AluI切割后的DNA片段可用E.coliDNA連接酶或T4連接酶連接D.BamHI和Sau3AI切割形成的片段進(jìn)行重組后，BamHI和Sau3AI均不能識(shí)別并切割【答案】C〖祥解〗限制酶特點(diǎn)：識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、限制酶切割一次需切斷2個(gè)磷酸二酯鍵，形成2個(gè)新的游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；B、一種限制酶不一定只識(shí)別一種核苷酸序列，如HindⅡ，B錯(cuò)誤；C、AluI切割后形成的是平末端，E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶既可以連接黏性末端，也可以連接平末端，C正確；D、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段進(jìn)行重組后，BamHⅠ不能識(shí)別并切割重組片段，而Sau3AⅠ可識(shí)別并切割重組片段，D錯(cuò)誤。故選C。5.無菌操作是生物實(shí)驗(yàn)中一項(xiàng)重要的基本操作。下列過程不需要嚴(yán)格無菌操作的是（）A.傳統(tǒng)泡菜的制作 B.酵母菌的純培養(yǎng)C.動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) D.花藥離體培養(yǎng)【答案】A〖祥解〗在傳統(tǒng)生物技術(shù)中，無需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件。【詳析】在傳統(tǒng)生物技術(shù)中，如傳統(tǒng)泡菜的制作過程，不需要嚴(yán)格的無菌操作，通常是根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件進(jìn)行的，而實(shí)驗(yàn)室中的一些生物工程技術(shù)，如酵母菌的純培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、花藥離體培養(yǎng)等需要嚴(yán)格的無菌操作，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。6.研究人員將胰島素B鏈的第28位氨基酸替換為天冬氨酸，抑制了胰島素聚合，從而獲得速效胰島素類似物。下列敘述正確的是（）A.該產(chǎn)品是通過直接改造胰島素來生產(chǎn)的B.改變氨基酸的種類不會(huì)影響胰島素的空間結(jié)構(gòu)C.可通過定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基增添達(dá)到改造目的D.胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過程相反【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成，即改造胰島素的過程實(shí)際是改造胰島素基因的過程，A錯(cuò)誤；B、氨基酸的種類及排列順序影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、可通過定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基替換達(dá)到第28位氨基酸替換為天冬氨酸的目的，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過程（基因→蛋白質(zhì)合成）相反，D正確。故選D。7.科研人員通過基因編輯技術(shù)將綠色熒光蛋白（GEP）基因整合到野生型小鼠P蛋白基因的一端，如圖1所示。隨機(jī)挑取5個(gè)品系細(xì)胞通過PCR驗(yàn)證GFP的導(dǎo)入情況，結(jié)果如圖2所示。據(jù)此推測在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，所選擇的引物為（）A.F1，R1 B.F2，R1 C.F1，R2 D.F2，R2【答案】A〖祥解〗PCR技術(shù)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)?！驹斘觥拷Y(jié)合圖1和圖2推測，P-GFP融合基因電泳后的DNA片段較大，未插入GFP基因則電泳后的DNA片段較小，5個(gè)品系細(xì)胞中有的只擴(kuò)增出小片段或大片段，有的兩種片段均有，應(yīng)選擇圖1中的引物組合是F1、R1。故選A。8.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”“瓊脂糖凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)說法，正確的是（）A.利用酒精初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA溶于酒精B.過濾后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解C.瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，DNA分子越大，遷移速率越快D.提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后即可變?yōu)樗{(lán)色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色；耐高溫的DNA聚合酶在延伸環(huán)節(jié)時(shí)進(jìn)行子鏈的合成?！驹斘觥緼、DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離，A錯(cuò)誤；B、洋蔥研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正確；C、待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會(huì)影響DNA在電泳中的遷移速率，DNA分子越小，遷移的速率越快，DNA分子越大，遷移速率越慢，C錯(cuò)誤；D、將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后，水浴加熱條件下才會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選B。9.哺乳動(dòng)物卵原細(xì)胞減數(shù)分裂形成成熟卵子的過程，只有在促性腺激素和精子的誘導(dǎo)下才能完成。下圖為某哺乳動(dòng)物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.下丘腦、垂體參與該哺乳動(dòng)物次級卵母細(xì)胞的形成B.受精作用促進(jìn)次級卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂C.多數(shù)哺乳動(dòng)物IV形成時(shí)，只能觀察到兩個(gè)極體D.精子接觸透明帶時(shí)，透明帶會(huì)發(fā)生生理反應(yīng)從而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗分析題圖：圖中細(xì)胞Ⅰ為卵原細(xì)胞，細(xì)胞Ⅱ?yàn)榻?jīng)過復(fù)制的初級卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅲ可表示次級卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅳ是經(jīng)過受精作用形成的受精卵，受精卵進(jìn)行的是有絲分裂?！驹斘觥緼、據(jù)圖可知，減數(shù)第一次分裂完成需要促性腺激素處理，下丘腦合成的促性腺激素釋放激素作用于垂體，使得垂體分泌促性腺激素，因此下丘腦、垂體參與該哺乳動(dòng)物次級卵母細(xì)胞的形成，A正確；B、結(jié)合題圖可知，次級卵母細(xì)胞在精子的作用下才能完成減數(shù)第二次分裂，產(chǎn)生成熟的卵細(xì)胞，從而形成受精卵，即受精作用促進(jìn)次級卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，B正確；C、多數(shù)哺乳動(dòng)物Ⅳ的形成只產(chǎn)生兩個(gè)極體，在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體，說明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，C正確；D、在精子接觸卵細(xì)胞膜時(shí)，會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)，能防止多個(gè)精子入卵，D錯(cuò)誤。故選D。10.我國是香蕉的主產(chǎn)地之一，大多數(shù)栽培香蕉是三倍體品種。傳統(tǒng)生產(chǎn)采用吸芽繁殖方式，不僅周期長、產(chǎn)率低、果品不佳，還易積累病毒。下列措施無法達(dá)到改良目的的是（）A.通過基因工程轉(zhuǎn)入外源基因提高果實(shí)品質(zhì)B.用香蕉頂端分生區(qū)作為外植體獲得脫毒苗C.利用單倍體育種對栽培香蕉進(jìn)行品種選育D.用香蕉葉鞘進(jìn)行植物組織培養(yǎng)以提高產(chǎn)率【答案】C〖祥解〗脫毒香蕉苗的獲得：選取香蕉外植體，通過誘導(dǎo)脫分化產(chǎn)生愈傷組織，然后通過調(diào)整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，獲得大量試管苗。【詳析】A、通過基因工程轉(zhuǎn)入外源基因可以改變香蕉的基因組成，從而有可能提高果實(shí)品質(zhì)，達(dá)到改良香蕉的目的，可以達(dá)到改良目的，A不符合題意；B、用香蕉頂端分生區(qū)作為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗。因?yàn)橹参镯敹朔稚鷧^(qū)附近的病毒含量很低或者幾乎沒有病毒，通過這種方式可以減少香蕉積累的病毒，提高香蕉的品質(zhì)和產(chǎn)量，可以達(dá)到改良目的，B不符合題意；C、大多數(shù)栽培香蕉是三倍體品種，在減數(shù)分裂過程中會(huì)出現(xiàn)聯(lián)會(huì)紊亂，無法正常產(chǎn)生配子，難以進(jìn)行單倍體育種，無法達(dá)到改良目的，C符合題意；D、用香蕉葉鞘進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的香蕉植株，縮短培養(yǎng)周期，從而提高產(chǎn)率，達(dá)到改良香蕉繁殖方式的目的，可以達(dá)到改良目的，D不符合題意。故選C。11.生物技術(shù)的發(fā)展改善了人類的生活，是推動(dòng)人類社會(huì)向前發(fā)展的重要科學(xué)技術(shù)。但科學(xué)是一把雙刃劍，只有合理應(yīng)用于生產(chǎn)生活才能造福全人類，下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的論述錯(cuò)誤的是（）A.轉(zhuǎn)基因生物可能通過花粉雜交影響非轉(zhuǎn)基因生物B.對流感病毒基因進(jìn)行改造可能會(huì)引發(fā)大規(guī)模流行性疾病C.人類基因編輯可用于編輯出完美嬰兒，以實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育D.“只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用”不屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)【答案】C〖祥解〗（1）轉(zhuǎn)基因技術(shù)給人類帶來了琳瑯滿目的產(chǎn)品，也引發(fā)了社會(huì)對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的關(guān)注和爭論。（2）治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞、組織、器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的；生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，它面臨很多倫理問題。我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因生物可通過花粉雜交影響非轉(zhuǎn)基因生物，即轉(zhuǎn)入的基因可能會(huì)從轉(zhuǎn)基因植物的體內(nèi)擴(kuò)散到非轉(zhuǎn)基因生物鐘，A正確；B、對流感病毒基因進(jìn)行改造可能會(huì)提高流感病毒的傳染性和致病能力，從而引發(fā)大規(guī)模流行性疾病，B正確；C、人類基因編輯用于編輯出完美嬰兒，會(huì)造成社會(huì)歧視現(xiàn)象的發(fā)生，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)給人類帶來許多便利，但同時(shí)也存在一些安全性問題，即既能看到轉(zhuǎn)基因技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，也能明白其中的不足，這屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，“只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用”不屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，D正確。故選C。12.下圖是小鼠（2N=40）孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞系的獲得過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.過程①中精子需用獲能液培養(yǎng)，卵母細(xì)胞應(yīng)處于減數(shù)第二次分裂中期B.過程②中的早期胚胎培養(yǎng)應(yīng)置于含95%O2和5%CO2混合氣體的培養(yǎng)箱中C.圖中“早期胚胎”是桑葚胚，細(xì)胞已經(jīng)逐漸分化，出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層D.推測孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞只含有一個(gè)染色體組，具有增殖和分化的能力【答案】BC〖祥解〗分析圖示可知：表示小鼠孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞系獲得過程，精子和卵母細(xì)胞經(jīng)過①受精作用形成受精卵，然后移除雄原核，經(jīng)過②早期胚胎發(fā)育形成早期胚胎，最終形成孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞?！驹斘觥緼、在受精過程中，精子需要獲能才能完成受精作用，卵母細(xì)胞應(yīng)處于減數(shù)第二次分裂中期，A正確；B、早期胚胎培養(yǎng)應(yīng)置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中，而不是95\%O2，B錯(cuò)誤；C、圖中的“早期胚胎”是桑葚胚，此時(shí)細(xì)胞未分化，C錯(cuò)誤；D、孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞是由孤雌生殖得到的單倍體胚胎干細(xì)胞，只含有一個(gè)染色體組，具有增殖和分化的能力，D正確。故選BC。（Ⅱ卷）二、非選擇題：共52分13.多年來，腐乳一直受到人們的喜愛。這是因?yàn)榻?jīng)過微生物（主要是毛霉）的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收。（1）毛霉等微生物能產(chǎn)生多種“酶類”，使豆腐質(zhì)地變軟，并賦予腐乳特殊的風(fēng)味。此處“酶類”主要指_______（注：糖化酶能水解多糖為單糖，也能合成雙糖）A.蛋白酶 B.糖化酶C.DNA聚合酶 D.限制性內(nèi)切核酸酶（2）早期發(fā)酵階段（毛霉生長階段），豆腐可以被視為______培養(yǎng)基（編號(hào)選填）①固體培養(yǎng)基②液體培養(yǎng)基③選擇培養(yǎng)基④鑒別培養(yǎng)基（3）為高效篩選自然界的目標(biāo)菌種，可以采用如圖所示的“高通量篩選”方法。圖中手持的器材稱為________，該器材運(yùn)用在以下哪個(gè)實(shí)驗(yàn)中________。A．平板劃線法B．稀釋涂布平板法C．PCR擴(kuò)增DNAD．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳鑒定【答案】（1）A（2）①（3）①.移液器（或移液槍）②.BCD〖祥解〗腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制；在腐乳生產(chǎn)過程中，溫度應(yīng)控制在15～18℃，且應(yīng)保持一定的濕度，以便毛霉生長?！窘馕觥浚?）毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。（2）早期發(fā)酵階段（毛霉生長階段），豆腐能為毛霉等微生物的生長提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)和支撐，豆腐可以被視為固體培養(yǎng)基，①正確，②③④錯(cuò)誤。故選①。（3）圖中手持的器材稱為移液器（或移液槍）。ABCD、移液器主要用于準(zhǔn)確吸取和轉(zhuǎn)移一定體積的液體，在稀釋涂布平板法中，需要將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后，再用移液器吸取一定體積的稀釋液涂布到平板上，從而實(shí)現(xiàn)高效篩選目標(biāo)菌種。而平板劃線法是用接種環(huán)進(jìn)行操作；PCR擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳鑒定也需要用到移液槍。所以該器材運(yùn)用在BCD實(shí)驗(yàn)中，BCD正確，A錯(cuò)誤。故選BCD。14.羊乳的成分更接近于人乳，可作為牛乳過敏體質(zhì)者最理想的替代乳品。但研究表明山羊乳中β-乳球蛋白也是引起人體過敏反應(yīng)的一種主要致敏原，為實(shí)現(xiàn)羊乳“人源化”改造，研究人員利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除了山羊乳腺細(xì)胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因，同時(shí)在相應(yīng)位點(diǎn)導(dǎo)入人乳鐵蛋白（hLF）基因（通常只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)）。該研究為培育羊乳中低致敏原和富含人乳鐵蛋白功能營養(yǎng)成分的轉(zhuǎn)基因山羊新品種提供了科學(xué)依據(jù)。下圖為研究人員利用該技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因山羊的操作過程?；卮鹣铝袉栴}：（1）上述技術(shù)中的目的基因是______，可通過PCR技術(shù)快速擴(kuò)增目的基因，擴(kuò)增時(shí)引物的作用是________。（2）CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要包含向?qū)NA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除山羊乳腺細(xì)胞中致敏原β-乳球蛋白（BLG）基因時(shí)，科研人員設(shè)計(jì)了sgBLG引導(dǎo)序列，sgBLG能夠通過______方式與山羊基因組中BLG基因的靶位點(diǎn)結(jié)合。（3）Cas9蛋白類似于基因工程中常用到的______酶，但Cas9蛋白特性與該酶的區(qū)別是_______。（4）檢測發(fā)現(xiàn)過程②中，hLF基因成功插入在母羊乙成纖維細(xì)胞中的一條常染色體上。上圖過程①②運(yùn)用到的技術(shù)有______，過程③④⑤中，運(yùn)用到的技術(shù)有______（編號(hào)選填）。①顯微注射技術(shù)②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)③胚胎移植技術(shù)④DNA重組技術(shù)⑤動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)⑥細(xì)胞核移植技術(shù)（5）篩選后得到的早期胚胎細(xì)胞中沒有檢測到該蛋白，能否說明目的基因沒有成功導(dǎo)入并表達(dá)，理由是________?！敬鸢浮浚?）①.人乳鐵蛋白基因（HLF基因）②.使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸（2）堿基互補(bǔ)配對（3）①.限制性內(nèi)切核酸（限制）②.Cas9蛋白沒有的專一識(shí)別DNA分子特定核苷酸序列的特性（4）①.①④②.②③⑥（5）不能，人乳鐵蛋白基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)〖祥解〗基因工程的操作步驟（1）目的基因的獲?。环椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟。基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！窘馕觥浚?）本研究是為了培育羊乳中低致敏原和富含人乳鐵蛋白功能營養(yǎng)成分的轉(zhuǎn)基因山羊新品種，因此目的基因是人乳鐵蛋白基因（HLF基因），可通過PCR技術(shù)快速擴(kuò)增目的基因，擴(kuò)增時(shí)引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。（2）sgBLG通過堿基互補(bǔ)配對與山羊基因組中BLG基因座的第一外顯子（Ex1）中的靶位點(diǎn)結(jié)合。（3）Cas9蛋白可切割DNA，類似于基因工程中常用到限制酶，但Cas9蛋白特性與該酶的區(qū)別是Cas9蛋白沒有限制性內(nèi)切核酸酶所具有的專一識(shí)別DNA分子特定核苷酸序列的特性。（4）上圖過程①是基因替換，屬于DNA重組技術(shù)，②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，用到顯微注射技術(shù)，因此運(yùn)用到的技術(shù)有①②，過程③是核移植，④是早期胚胎培養(yǎng)，即需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，⑤為胚胎移植，因此運(yùn)用到的技術(shù)有②③⑥。（5）人乳鐵蛋白（目的）基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，因此在的早期胚胎細(xì)胞中不表達(dá)，沒有檢測到該蛋白不能說明目的基因是否成功導(dǎo)入。15.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，并且取得了顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。下圖表示植物細(xì)胞工程的相關(guān)操作過程及應(yīng)用，已知該植物為二倍體，體細(xì)胞中染色體數(shù)目為2m?；卮鹣铝袉栴}。（1）通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速繁殖植物，屬于_______生殖。圖中的單倍體幼苗體細(xì)胞中含有染色體數(shù)目為______，該單倍體幼苗經(jīng)_______處理后可獲得正常二倍體植株。（2）圖中C過程的目的是_______。細(xì)胞丙和細(xì)胞丁融合前應(yīng)先用________酶處理，獲得原生質(zhì)體。若融合僅考慮兩兩融合，則培養(yǎng)液中的融合細(xì)胞類型有_______種，獲得的雜種細(xì)胞中_______（填“含有”或“不含”）同源染色體。（3）次生代謝產(chǎn)物______（填“是”或“不是”）其基本生命活動(dòng)所必需的產(chǎn)物，為獲得圖中次生代謝產(chǎn)物，通常需將外植體培養(yǎng)至_______階段。（4）研究人員發(fā)現(xiàn)脫毒苗的成苗率和脫毒率與外植體的大小有關(guān)，并利用馬鈴薯進(jìn)行脫毒苗的培育實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖。該圖表明，馬鈴薯脫毒培養(yǎng)過程中，適宜的莖尖大小為______?！敬鸢浮浚?）①.無性②.m③.秋水仙素或低溫（2）①.提高乙細(xì)胞的突變頻率②.纖維素酶和果膠酶③.3##三④.含有（3）①.不是②.愈傷組織（4）0.27mm〖祥解〗植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)等，植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞（稱為外植體）等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，屬于無性生殖的方式，利用的原理是植物細(xì)胞具有全能性。植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)，利用的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。【解析】（1）通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速繁殖植物，屬于無性生殖，已知該植物為二倍體，體細(xì)胞中染色體數(shù)目為2m，則圖中的單倍體幼苗體細(xì)胞中染色體數(shù)目減半為m，單倍體幼苗可用秋水仙素或低溫處理，通過抑制紡錘體的形成，使染色體數(shù)目加倍，從而獲得正常二倍體植株。（2）C過程用紫外線照射處理，可以提高乙細(xì)胞的突變頻率。植物細(xì)胞融合之前要先使用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，若融合僅考慮兩兩融合，則培養(yǎng)液中的融合細(xì)胞類型有3種類型，即兩個(gè)丙細(xì)胞融合、兩個(gè)丁細(xì)胞融合、丙和丁細(xì)胞融合，獲得的雜種細(xì)胞含有兩個(gè)親本中所有染色體，故細(xì)胞中含有同源染色體。（3）次生代謝產(chǎn)物不是其