2026年全日制醫(yī)學(xué)博士研究生入學(xué)考試實(shí)驗(yàn)操作題庫一、顯微鏡觀察技術(shù)（共3題，每題10分）1.顯微鏡下觀察人體組織切片題目：取一張已制備好的“人胃黏膜組織切片”，在顯微鏡下觀察并回答以下問題：（1）描述胃黏膜上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及主要功能。（2）簡述胃黏膜固有層中哪種細(xì)胞與胃酸分泌直接相關(guān)，并說明其形態(tài)學(xué)特征。（3）指出胃黏膜上皮細(xì)胞與非上皮細(xì)胞（如腺上皮細(xì)胞）的細(xì)胞連接方式及意義。答案與解析：（1）胃黏膜上皮細(xì)胞為單層柱狀細(xì)胞，頂部有微絨毛，細(xì)胞核位于細(xì)胞中部，呈圓形或橢圓形。其主要功能是吸收營養(yǎng)物質(zhì)和分泌黏液。（2）與胃酸分泌直接相關(guān)的細(xì)胞是壁細(xì)胞，其形態(tài)學(xué)特征為體積較大，細(xì)胞質(zhì)呈強(qiáng)嗜堿性（因富含胃酸分泌酶原顆粒）。（3）上皮細(xì)胞間主要存在緊密連接，防止胃液滲漏至固有層；此外還有橋粒連接，增強(qiáng)細(xì)胞穩(wěn)定性。2.顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞異型性題目：取一張“人肺癌組織切片”，在顯微鏡下觀察并回答：（1）描述腫瘤細(xì)胞與正常肺泡上皮細(xì)胞的形態(tài)差異（至少三點(diǎn)）。（2）指出腫瘤細(xì)胞核漿比例的變化及其臨床意義。（3）簡述腫瘤細(xì)胞間質(zhì)成分的變化及其對腫瘤侵襲性的影響。答案與解析：（1）腫瘤細(xì)胞較正常細(xì)胞更大，形態(tài)不規(guī)則；核染色質(zhì)增多、邊移位；細(xì)胞核形態(tài)異常（如核分裂象）。（2）核漿比例顯著增大，提示細(xì)胞增殖活躍，是腫瘤惡性程度的重要指標(biāo)。（3）腫瘤間質(zhì)中膠原纖維減少，血管增生，為腫瘤生長和轉(zhuǎn)移提供通路。3.顯微鏡下觀察炎癥細(xì)胞浸潤題目：取一張“急性闌尾炎組織切片”，在顯微鏡下觀察并回答：（1）描述闌尾腔內(nèi)及黏膜下層的主要炎癥細(xì)胞類型及形態(tài)特征。（2）簡述中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞在炎癥反應(yīng)中的不同作用。（3）指出炎癥局部血管的變化及其對炎癥進(jìn)程的影響。答案與解析：（1）闌尾腔內(nèi)以中性粒細(xì)胞為主（核染色質(zhì)呈粗塊狀），黏膜下層可見淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞。（2）中性粒細(xì)胞主要吞噬病原體，淋巴細(xì)胞參與免疫調(diào)節(jié)和記憶反應(yīng)。（3）炎癥局部血管擴(kuò)張、通透性增加，利于炎癥介質(zhì)和細(xì)胞滲出。二、生化實(shí)驗(yàn)操作（共4題，每題10分）1.蛋白質(zhì)定量分析題目：使用Bradford法測定某樣本（如血清）的蛋白質(zhì)濃度，回答：（1）簡述Bradford法的原理及指示劑（CoomassieBrilliantBlueG-250）的作用機(jī)制。（2）若樣品中存在高濃度糖類干擾，應(yīng)如何消除干擾？（3）寫出蛋白質(zhì)濃度計(jì)算的公式，并說明各符號含義。答案與解析：（1）Bradford法基于蛋白質(zhì)與染料結(jié)合后顏色變深，因蛋白質(zhì)分子與染料結(jié)合后結(jié)構(gòu)改變，吸收峰波長移動。（2）可通過添加脫糖劑（如DNase）降解糖類，或采用雙縮脲法（對糖類干擾?。┨娲?。（3）公式：蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）=（A樣品-A空白）×稀釋倍數(shù)×標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率。2.DNA提取與電泳檢測題目：從新鮮血液中提取DNA并使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，回答：（1）簡述DNA提取的常用方法及關(guān)鍵步驟。（2）若電泳結(jié)果出現(xiàn)彌散條帶，可能的原因有哪些？（3）說明DNA在電場中遷移的原理及染色方法。答案與解析：（1）常用方法包括苯酚-氯仿法，關(guān)鍵步驟：細(xì)胞裂解、蛋白酶K消化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀。（2）彌散條帶可能因DNA降解、濃度過高或電泳條件不當(dāng)（如電壓過高）。（3）DNA帶負(fù)電荷，在電場中向正極遷移；染色常用EB（溴化乙錠）或SYBRSafe。3.酶活性測定題目：測定某組織勻漿中的乳酸脫氫酶（LDH）活性，回答：（1）簡述LDH測定原理及反應(yīng)體系的主要成分。（2）若酶活性測定結(jié)果偏高，可能的原因有哪些？（3）說明酶活性單位定義及計(jì)算方法。答案與解析：（1）LDH催化乳酸氧化為丙酮酸，生成NADH，通過spectrophotometer測定吸光度變化。（2）可能原因：反應(yīng)溫度過高、底物濃度不足或存在抑制物。（3）單位：μmolNADH/min/mgprotein。計(jì)算：活性=（ΔA/min）×稀釋倍數(shù)/蛋白濃度。4.脂質(zhì)化學(xué)分析題目：測定血清總膽固醇（TC）含量，回答：（1）簡述膽固醇測定的酶法原理及關(guān)鍵酶的作用。（2）若測定結(jié)果偏低，可能的原因有哪些？（3）說明膽固醇測定的質(zhì)量控制措施。答案與解析：（1）膽固醇在膽固醇酯酶作用下水解為自由膽固醇，與膽固醇氧化酶反應(yīng)生成膽固醇酸，通過顯色劑測定吸光度。（2）可能原因：樣品溶血、酶活性不足或試劑失效。（3）需使用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)、定期質(zhì)控及避免樣品污染。三、病理實(shí)驗(yàn)操作（共3題，每題10分）1.染色技術(shù)比較題目：比較蘇木精-伊紅（H&E）染色與免疫組化（IHC）技術(shù)的應(yīng)用場景，回答：（1）簡述H&E染色的原理及細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色特點(diǎn)。（2）IHC技術(shù)中抗體選擇需注意哪些問題？（3）說明H&E染色在腫瘤診斷中的主要作用。答案與解析：（1）H&E染色基于細(xì)胞成分對酸堿染料的不同親和力，核呈藍(lán)紫色，質(zhì)呈粉紅色。（2）IHC需選擇特異性抗體、優(yōu)化稀釋度及避免交叉反應(yīng)。（3）H&E可評估組織結(jié)構(gòu)完整性、細(xì)胞異型性及炎癥反應(yīng)。2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)題目：體外培養(yǎng)某腫瘤細(xì)胞株，回答：（1）簡述細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟及無菌操作要點(diǎn)。（2）若細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制，可能的原因有哪些？（3）說明細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的注意事項(xiàng)。答案與解析：（1）步驟：細(xì)胞復(fù)蘇、貼壁培養(yǎng)、傳代，要點(diǎn)：無菌環(huán)境、避免污染。（2）可能原因：培養(yǎng)基成分不足、pH失衡或細(xì)胞密度過高。（3）凍存需加入DMSO降低冰晶損傷，復(fù)蘇后需緩慢恢復(fù)培養(yǎng)條件。3.組織切片制作題目：制備“肝組織石蠟切片”，回答：（1）簡述組織固定、脫水、包埋的原理及常用試劑。（2）若切片出現(xiàn)脫片現(xiàn)象，可能的原因有哪些？（3）說明染色前組織預(yù)處理的目的。答案與解析：（1）固定用10%中性緩沖甲醛，脫水用乙醇梯度，包埋用石蠟。（2）可能原因：包埋不均、切片刀鈍或染色前處理不當(dāng)。（3）預(yù)處理（如脫水、脫蠟）使組織透明，利于染料滲透。四、臨床實(shí)驗(yàn)技能（共4題，每題10分）1.心電圖（ECG）分析題目：分析一份“心肌梗死患者ECG”，回答：（1）描述ST段抬高型心梗的典型ECG表現(xiàn)。（2）若出現(xiàn)T波倒置，需排除哪些干擾因素？（3）說明ECG導(dǎo)聯(lián)選擇的臨床意義。答案與解析：（1）ST段抬高、病理性Q波、T波倒置。（2）需排除低鉀血癥、藥物影響（如洋地黃）。（3）導(dǎo)聯(lián)選擇反映不同心肌區(qū)域損傷，如V1-5導(dǎo)聯(lián)評估前壁損傷。2.實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)控題目：評估某生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)控（IQC），回答：（1）簡述IQC的常用方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）若質(zhì)控值超出范圍，需采取哪些措施？（3）說明質(zhì)控品與患者樣本的區(qū)別。答案與解析：（1）常用方法：每天檢測質(zhì)控品，結(jié)果在±2SD內(nèi)為在控。（2）需檢查試劑、儀器或操作，必要時(shí)重新校準(zhǔn)。（3）質(zhì)控品成分穩(wěn)定，用于日常檢測，患者樣本需評估個體差異。3.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)題目：進(jìn)行“金黃色葡萄球菌藥敏試驗(yàn)”，回答：（1）簡述Kirby-Bauer法原理及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)。（2）若菌株出現(xiàn)耐藥，可能的原因有哪些？（3）說明藥敏試驗(yàn)的臨床意義。答案與解析：（1）基于抑菌圈直徑判斷敏感性，如≥15mm為敏感。（2）可能原因：基因突變、質(zhì)粒介導(dǎo)耐藥或抗生素不當(dāng)使用。（3）指導(dǎo)臨床合理用藥，避免耐藥菌擴(kuò)散。4.影像學(xué)讀片題目：分析一張