生物工程生物科技公司生物技術(shù)員實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在一家生物工程生物科技公司擔(dān)任生物技術(shù)員實(shí)習(xí)生。核心工作成果包括完成3批次細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，總產(chǎn)量達(dá)12升，純化重組蛋白5批，純化率均穩(wěn)定在85%以上。應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)，成功構(gòu)建2個(gè)基因編輯載體，PCR驗(yàn)證效率達(dá)98%。熟練操作自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)，處理樣本量日均提升至200份。通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵工藝參數(shù)，將培養(yǎng)基成分中葡萄糖濃度從5%調(diào)整至3%，發(fā)酵周期縮短2天，乙醇產(chǎn)量提升15%。提煉出的標(biāo)準(zhǔn)化樣本前處理流程，被團(tuán)隊(duì)納入日常操作手冊(cè)。掌握的蛋白質(zhì)純化動(dòng)力學(xué)分析方法，可直接應(yīng)用于類(lèi)似規(guī)模的生產(chǎn)線效率評(píng)估。

二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過(guò)程

1實(shí)習(xí)目的

希望通過(guò)實(shí)踐了解生物技術(shù)員崗位的具體工作，將學(xué)校學(xué)的分子生物學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)等知識(shí)用到實(shí)際項(xiàng)目中，熟悉實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，提升動(dòng)手能力和解決問(wèn)題的能力。

2實(shí)習(xí)單位簡(jiǎn)介

我實(shí)習(xí)的公司是一家專(zhuān)注于重組蛋白藥物研發(fā)的生物工程公司，主要利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)生物制劑。實(shí)驗(yàn)室設(shè)備比較齊全，有細(xì)胞培養(yǎng)室、發(fā)酵罐、層析系統(tǒng)等，項(xiàng)目以中試規(guī)模為主。

3實(shí)習(xí)內(nèi)容與過(guò)程

7月1日到8月3日，我跟著導(dǎo)師做了細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白純化兩個(gè)主要方向的工作。前期學(xué)習(xí)細(xì)胞系復(fù)蘇和傳代，7月10號(hào)獨(dú)立負(fù)責(zé)CHO細(xì)胞日常維護(hù)，每周3次接種T75培養(yǎng)瓶，傳代次數(shù)從第3代穩(wěn)定到第6代，細(xì)胞活力維持在95%以上。8月5號(hào)開(kāi)始參與重組蛋白純化項(xiàng)目，主要是離子交換層析和分子篩脫鹽。我負(fù)責(zé)上樣和收集洗脫峰，記錄洗脫曲線，用HPLC監(jiān)測(cè)純度。期間參與了2個(gè)批次的生產(chǎn)，純化后的蛋白純度都在85%以上，符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。8月15號(hào)還接觸了發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)如何調(diào)整培養(yǎng)基pH值和補(bǔ)料策略，我的小試批次乙醇濃度從4.5g/L提升到5.2g/L。

4實(shí)習(xí)成果與收獲

主要成果有完成12升細(xì)胞培養(yǎng)物收獲，純化出5批重組蛋白，蛋白回收率平均82%。在基因編輯實(shí)驗(yàn)中，我構(gòu)建的2個(gè)CRISPR載體，通過(guò)PCR檢測(cè)插入效率最高達(dá)到92%。最大的收獲是掌握了標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，比如如何避免細(xì)胞培養(yǎng)污染，如何優(yōu)化層析條件。以前覺(jué)得蛋白純化很神秘，現(xiàn)在清楚每一步的邏輯，比如緩沖液pH值如何影響蛋白溶解度。行業(yè)里常用的一些方法，像分批補(bǔ)料發(fā)酵、反相層析的梯度設(shè)置，現(xiàn)在都能上手操作了。

5遇到的具體挑戰(zhàn)及應(yīng)對(duì)

第一個(gè)困難是發(fā)酵階段泡沫控制，8月8號(hào)時(shí)發(fā)酵罐泡沫溢出液位報(bào)警，我趕緊學(xué)習(xí)了自動(dòng)流加消泡劑的方法，通過(guò)調(diào)節(jié)進(jìn)料速率把泡沫壓下去。這讓我意識(shí)到動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)參數(shù)的重要性。第二個(gè)是純化蛋白復(fù)性失敗，8月20號(hào)一批蛋白復(fù)性后SDS顯示條帶不完整，導(dǎo)師教我用不同濃度的尿素梯度洗脫，最后在2M尿素下得到可溶性蛋白。這個(gè)實(shí)驗(yàn)讓我明白蛋白折疊的復(fù)雜性，文獻(xiàn)里的復(fù)性條件不能完全照搬。

6職業(yè)規(guī)劃的啟發(fā)

這8周讓我看清了自己喜歡做實(shí)驗(yàn)，但又覺(jué)得研發(fā)崗位太卷，可能更適應(yīng)技術(shù)支持或者生產(chǎn)管理方向。公司流程里暴露出的問(wèn)題也讓我思考，比如新員工培訓(xùn)周期太短，有些操作只能靠師傅帶，標(biāo)準(zhǔn)化文檔不夠完善。我的建議是增加線上操作視頻庫(kù)，關(guān)鍵步驟做圖文手冊(cè)，現(xiàn)在跟著老師學(xué)的東西，過(guò)幾個(gè)月可能就記不清細(xì)節(jié)了。另外我覺(jué)得生產(chǎn)崗位和技術(shù)崗位的技能樹(shù)可以打通，現(xiàn)在感覺(jué)兩者差異挺大。

三、總結(jié)與體會(huì)

1實(shí)習(xí)價(jià)值閉環(huán)

這8周像把書(shū)里的知識(shí)翻譯成了實(shí)際操作。7月15號(hào)做的第一個(gè)WesternBlot，蛋白條帶拖尾嚴(yán)重，通過(guò)調(diào)整抗體濃度和封閉時(shí)間才解決，現(xiàn)在做這個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)塥?dú)立優(yōu)化參數(shù)。參與發(fā)酵實(shí)驗(yàn)時(shí)，8月5號(hào)記錄的葡萄糖消耗曲線，直接用到了后來(lái)學(xué)到的代謝動(dòng)力學(xué)課程里，感覺(jué)特別連貫。最讓我有成就感的是8月25號(hào)完成的層析優(yōu)化，把蛋白純度從78%提升到86%，導(dǎo)師說(shuō)這個(gè)數(shù)據(jù)對(duì)后續(xù)中試放大有幫助。這種工作成果和學(xué)校實(shí)驗(yàn)完全不同，它真的會(huì)產(chǎn)生實(shí)際價(jià)值，這種閉環(huán)體驗(yàn)很棒。

2職業(yè)規(guī)劃聯(lián)結(jié)

這段經(jīng)歷讓我更想往技術(shù)平臺(tái)方向發(fā)展。之前覺(jué)得研發(fā)需要純靈感，現(xiàn)在明白嚴(yán)謹(jǐn)?shù)腟OP和數(shù)據(jù)分析同樣重要。公司有位老師傅帶我們做細(xì)胞復(fù)蘇，每次都會(huì)強(qiáng)調(diào)無(wú)菌操作細(xì)節(jié)，比如酒精燈火焰要燒到皿蓋邊緣，這種工匠精神挺吸引我。如果繼續(xù)做技術(shù)崗，我打算補(bǔ)齊發(fā)酵工程這塊短板，計(jì)劃下學(xué)期考PMP證書(shū)，了解項(xiàng)目管理流程。同時(shí)也在關(guān)注行業(yè)里細(xì)胞治療和基因編輯的應(yīng)用，感覺(jué)這些方向?qū)夹g(shù)員的要求更注重實(shí)驗(yàn)整合能力。

3行業(yè)趨勢(shì)展望

實(shí)習(xí)中接觸到的自動(dòng)化設(shè)備，比如高通量篩選系統(tǒng)，讓我意識(shí)到AI正在改變生物技術(shù)員的工作方式。8月10號(hào)調(diào)試那個(gè)系統(tǒng)時(shí)，還和導(dǎo)師討論過(guò)，未來(lái)可能很多常規(guī)檢測(cè)會(huì)交給機(jī)器人，但異常情況判斷和工藝開(kāi)發(fā)仍需要人。公司用的LIMS系統(tǒng)也很有意思，全流程數(shù)據(jù)管理現(xiàn)在很關(guān)鍵。不過(guò)我也看到傳統(tǒng)小作坊式的實(shí)驗(yàn)室依然存在，比如8月18號(hào)去參觀的基地，他們還在用人工搖床，說(shuō)明技術(shù)路線多元化是趨勢(shì)。行業(yè)對(duì)復(fù)合型人才的需求越來(lái)越明顯，既懂實(shí)驗(yàn)又懂生產(chǎn)，還懂?dāng)?shù)據(jù)分析的人應(yīng)該更有競(jìng)爭(zhēng)力。

4心態(tài)轉(zhuǎn)變

最明顯的變化是抗壓能力。7月22號(hào)連續(xù)3天被細(xì)胞污染搞得焦頭爛額，第4天請(qǐng)教老師后用UV照射過(guò)夜才解決，現(xiàn)在回想當(dāng)時(shí)真想放棄。但看到導(dǎo)師說(shuō)“實(shí)驗(yàn)失敗是常態(tài)”這句話(huà)時(shí)，突然就平靜了?，F(xiàn)在做實(shí)驗(yàn)會(huì)主動(dòng)做對(duì)照，比如純化蛋白時(shí)同時(shí)做酶活測(cè)定，避免只看純度指標(biāo)。這種從學(xué)生到職場(chǎng)人的心態(tài)過(guò)渡，比我想象的要快。未來(lái)如果再遇到挫折，應(yīng)該能更快找到解決方案。

5未來(lái)行動(dòng)

計(jì)劃把實(shí)習(xí)中用的SOP整理成筆記，特別是發(fā)酵補(bǔ)料策略和層析梯度設(shè)置，這些是書(shū)本上沒(méi)有的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)。打算申請(qǐng)下個(gè)假期去藥企的生產(chǎn)部看看，了解GMP環(huán)境下的技術(shù)員工作。最近在看抗體純化的文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)很多參數(shù)調(diào)整需要結(jié)合HPLC峰形分析，打算自學(xué)更高級(jí)的色譜原理，為秋招做準(zhǔn)備。導(dǎo)師說(shuō)做技術(shù)崗要像海綿一樣吸收知識(shí)，現(xiàn)在感覺(jué)確實(shí)需要主動(dòng)去填滿(mǎn)很多空白。

四、致謝

1

感謝公司提供這次實(shí)習(xí)機(jī)會(huì)，讓我接觸到真實(shí)的生物技術(shù)工作環(huán)境。

2

特別感謝我的導(dǎo)師，從細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)到蛋白純化技巧，耐心指導(dǎo)我解決了很多操作難題。8月15號(hào)討論發(fā)酵參數(shù)調(diào)整時(shí)，您說(shuō)的“先看數(shù)據(jù)再行動(dòng)”我一直記著。

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