肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制演講人01肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制02引言：肝纖維化與TGF-β1的核心地位03TGF-β1信號(hào)通路的基礎(chǔ)生物學(xué)特性04肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路的激活機(jī)制05TGF-β1信號(hào)通路下游的效應(yīng)分子與細(xì)胞事件06TGF-β1信號(hào)通路的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：平衡與失衡的“雙刃劍”07靶向TGF-β1信號(hào)通路的抗纖維化治療策略：從基礎(chǔ)到臨床目錄01肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制02引言：肝纖維化與TGF-β1的核心地位引言：肝纖維化與TGF-β1的核心地位肝纖維化是多種慢性肝?。ㄈ绮《拘愿窝?、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病等）共有的病理修復(fù)過程，其本質(zhì)是以細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度沉積和肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂為特征的纖維化重塑。若未能及時(shí)干預(yù)，肝纖維化可進(jìn)展為肝硬化、肝功能衰竭甚至肝癌，嚴(yán)重威脅人類健康。在肝纖維化的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中，轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）被公認(rèn)為“核心驅(qū)動(dòng)因子”，它通過多重信號(hào)通路調(diào)控肝星狀細(xì)胞（HSCs）的活化、ECM合成與降解失衡、炎癥微環(huán)境調(diào)控等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，幾乎貫穿了肝纖維化發(fā)生發(fā)展的全過程。作為一名長期從事肝病機(jī)制研究的工作者，我在實(shí)驗(yàn)中反復(fù)見證：當(dāng)TGF-β1信號(hào)通路被過度激活時(shí)，肝組織中的膠原纖維會(huì)呈“條索狀”異常增生；而抑制該通路后，HSCs的活化標(biāo)志物（如α-SMA）表達(dá)顯著降低，ECM降解酶活性恢復(fù)。這種“牽一發(fā)而動(dòng)全身”的調(diào)控作用，使得深入解析TGF-β1信號(hào)通路的分子機(jī)制成為抗纖維化研究的突破口。本文將從TGF-β1信號(hào)通路的基礎(chǔ)生物學(xué)特性出發(fā)，系統(tǒng)闡述其在肝纖維化中的激活機(jī)制、下游效應(yīng)分子、調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及靶向治療策略，以期為臨床干預(yù)提供理論依據(jù)。03TGF-β1信號(hào)通路的基礎(chǔ)生物學(xué)特性TGF-β1信號(hào)通路的基礎(chǔ)生物學(xué)特性TGF-β1信號(hào)通路是一個(gè)高度保守的多功能調(diào)控系統(tǒng)，廣泛參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡、免疫調(diào)節(jié)及組織修復(fù)等過程。其功能的雙重性（生理性修復(fù)與病理性纖維化）取決于信號(hào)強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間及細(xì)胞微環(huán)境，而這一特性的基礎(chǔ)在于其復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)與激活機(jī)制。TGF-β1的結(jié)構(gòu)與合成TGF-β1屬于TGF-β超家族成員，人TGF-β1基因位于19號(hào)染色體，由7個(gè)外顯子編碼，最初合成含390個(gè)氨基酸的前體蛋白（pro-TGF-β1）。前體蛋白經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工后，形成含112個(gè)氨基酸的成熟TGF-β1單體，通過二硫鍵形成同源二聚體。值得注意的是，pro-TGF-β1的N端有一個(gè)潛伏相關(guān)肽（LAP），二者以非共價(jià)鍵結(jié)合形成潛伏型TGF-β1（LatentTGF-β1），需經(jīng)激活后才能發(fā)揮生物學(xué)作用——這一“潛伏-激活”機(jī)制是TGF-β1精準(zhǔn)調(diào)控的關(guān)鍵“開關(guān)”。TGF-β1的受體與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)TGF-β1的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴絲氨酸/蘇氨酸激酶受體復(fù)合物，包括Ⅰ型受體（TβRI，ALK5）、Ⅱ型受體（TβRII）及輔助受體（如β-聚糖、endoglin）。當(dāng)潛伏型TGF-β1被激活（詳見后文）后，可與細(xì)胞膜上的TβRII結(jié)合，誘導(dǎo)其構(gòu)象變化并磷酸化TβRI的GS結(jié)構(gòu)域（甘絲氨酸-rich區(qū)域），形成“TβRII-TβRI”異源四聚體復(fù)合物。隨后，TβRI的激酶結(jié)構(gòu)域被激活，磷酸化下游信號(hào)分子Smad2/3。磷酸化的Smad2/3與Smad4形成三聚體復(fù)合物，入核后與DNA上的Smad結(jié)合元件（SBE）結(jié)合，招募共激活因子（如p300/CBP）或共抑制因子（如TGIF），調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄。除經(jīng)典的Smad通路外，TGF-β1還可通過非Smad通路（如MAPK、PI3K/Akt、RhoGTPases等）參與細(xì)胞骨架重構(gòu)、細(xì)胞遷移等過程，形成“經(jīng)典-非經(jīng)典”協(xié)同調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。TGF-β1的組織來源與調(diào)控在正常肝臟，TGF-β1主要由肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（LSECs）、kupffer細(xì)胞（KCs）及血小板分泌，且以潛伏形式存在，避免過度激活。當(dāng)肝組織受損時(shí)，受損肝細(xì)胞、活化HSCs及浸潤的炎癥細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞）可大量分泌TGF-β1：受損肝細(xì)胞釋放的活性氧（ROS）和損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）能激活KCs，使其分泌TGF-β1；血小板通過脫顆粒作用直接釋放高濃度TGF-β1，形成“局部高濃度微環(huán)境”。這種“損傷-分泌-激活”的正反饋循環(huán)，是TGF-β1在肝纖維化中作用放大的核心環(huán)節(jié)。04肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路的激活機(jī)制肝纖維化中TGF-β1信號(hào)通路的激活機(jī)制肝纖維化的啟動(dòng)依賴于肝細(xì)胞持續(xù)損傷，而TGF-β1信號(hào)通路的過度激活是連接“損傷”與“纖維化”的橋梁。其激活過程涉及“潛伏型TGF-β1的釋放與活化”和“受體-下游信號(hào)的級(jí)聯(lián)放大”兩個(gè)關(guān)鍵步驟，且受多種分子和微環(huán)境因素的精細(xì)調(diào)控。潛伏型TGF-β1的釋放與活化潛伏型TGF-β1（LatentTGF-β1）需從細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）或細(xì)胞膜上釋放并激活，才能與受體結(jié)合。這一過程可通過“整合素依賴”和“非整合素依賴”兩種途徑實(shí)現(xiàn)：1.整合素依賴途徑：整合素（如αvβ6、αvβ8）是介導(dǎo)潛伏型TGF-β1活化的關(guān)鍵分子。在肝纖維化早期，受損的LSECs和活化的HSCs高表達(dá)αvβ6整合素，其胞外結(jié)構(gòu)域可與LAP的RGD序列（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）結(jié)合，通過“張力依賴”機(jī)制：整合素與ECM（如纖連蛋白）結(jié)合后，細(xì)胞骨架收縮產(chǎn)生的機(jī)械力拉扯LAP，導(dǎo)致TGF-β1構(gòu)象改變，暴露出活性位點(diǎn)。例如，在膽管結(jié)扎誘導(dǎo)的肝纖維化模型中，αvβ6整合素基因敲除小鼠的TGF-β1活化顯著降低，膠原沉積明顯減少，印證了該途徑的重要性。潛伏型TGF-β1的釋放與活化2.非整合素依賴途徑：除整合素外，蛋白酶（如基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9、纖溶酶）和酸性環(huán)境可直接切割LAP，釋放活性TGF-β1。例如，kupffer細(xì)胞分泌的纖溶酶可降解LatencyAssociatedPeptide（LAP），使TGF-β1游離；肝纖維化微環(huán)境中炎癥細(xì)胞浸潤導(dǎo)致的局部pH下降（如乳酸堆積），也可通過改變LAP構(gòu)象激活TGF-β1。值得注意的是，非整合素途徑的激活具有“炎癥依賴性”，與肝纖維化中“炎癥-纖維化”的惡性循環(huán)密切相關(guān)。受體-下游信號(hào)的級(jí)聯(lián)放大TGF-β1激活后，通過受體復(fù)合物磷酸化Smad2/3，形成“Smad2/3-Smad4”復(fù)合物入核，啟動(dòng)靶基因轉(zhuǎn)錄。這一過程的放大效應(yīng)依賴于“正反饋調(diào)控”和“非Smad通路的協(xié)同作用”：1.Smad通路的正反饋調(diào)控：活化的HSCs可自分泌TGF-β1，形成“自分泌環(huán)路”；同時(shí)，TGF-β1誘導(dǎo)的靶基因（如PAI-1、CTGF）可進(jìn)一步增強(qiáng)Smad2/3的穩(wěn)定性。例如，結(jié)締組織生長因子（CTGF）作為TGF-β1的下游介質(zhì)，能與TGF-β1形成“復(fù)合物”，延長其與受體的結(jié)合時(shí)間，放大Smad信號(hào)。在肝纖維化患者血清中，CTGF水平與TGF-β1呈正相關(guān)，且與肝纖維化程度正相關(guān)，提示其作為“信號(hào)放大器”的作用。受體-下游信號(hào)的級(jí)聯(lián)放大2.非Smad通路的協(xié)同調(diào)控：（1）MAPK通路：TGF-β1激活TβRI后，可通過Ras激活Raf-MEK-ERK級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)HSCs增殖和遷移。例如，在酒精性肝病中，乙醇代謝產(chǎn)生的ROS可增強(qiáng)TGF-β1誘導(dǎo)的ERK磷酸化，加劇HSCs活化。（2）PI3K/Akt通路：TGF-β1與受體結(jié)合后，可直接激活PI3K，通過Akt磷酸化抑制GSK-3β，穩(wěn)定β-catenin，促進(jìn)HSCs向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化。此外，Akt還可通過抑制FOXO轉(zhuǎn)錄因子，減少ECM降解酶（如MMP-1）的表達(dá)，加劇ECM沉積。（3）RhoGTPases通路：TGF-β1通過RhoA/ROCK信號(hào)調(diào)控細(xì)胞骨架重組，促進(jìn)HSCs收縮（增加肝竇阻力）和遷移（向損傷部位聚集）。在肝纖維化模型中，ROCK抑制劑（如法舒地爾）可顯著降低HSCs活化，減輕纖維化程度。05TGF-β1信號(hào)通路下游的效應(yīng)分子與細(xì)胞事件TGF-β1信號(hào)通路下游的效應(yīng)分子與細(xì)胞事件TGF-β1信號(hào)通路的最終效應(yīng)是通過調(diào)控肝內(nèi)關(guān)鍵細(xì)胞（HSCs、肝細(xì)胞、LSECs、免疫細(xì)胞）的生物學(xué)行為，實(shí)現(xiàn)ECM合成與降解失衡、炎癥微環(huán)境持續(xù)、血管結(jié)構(gòu)紊亂等病理改變，這些改變共同構(gòu)成了肝纖維化的“組織學(xué)基礎(chǔ)”。肝星狀細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)分化：纖維化的“核心效應(yīng)細(xì)胞”HSCs是肝纖維化中ECM的主要來源細(xì)胞，其活化是纖維化啟動(dòng)的“限速步驟”。在正常肝臟，HSCs處于“靜止?fàn)顟B(tài)”，表達(dá)維生素A脂滴和GFAP（膠質(zhì)纖維酸性蛋白）；當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，TGF-β1通過以下途徑誘導(dǎo)HSCs活化為肌成纖維細(xì)胞（MFs）：1.表型轉(zhuǎn)分化：TGF-β1激活Smad2/3后，入核誘導(dǎo)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）基因轉(zhuǎn)錄，α-SMA是MFs的標(biāo)志性蛋白，其表達(dá)使HSCs獲得收縮能力（增加肝竇阻力）和遷移能力（向纖維間隔聚集）。同時(shí)，TGF-β1抑制HSCs中PPARγ（過氧化物酶體增殖物激活受體γ）的表達(dá)——PPARγ是維持HSCs靜止?fàn)顟B(tài)的關(guān)鍵核受體，其下調(diào)是HSCs活化的“分子開關(guān)”。肝星狀細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)分化：纖維化的“核心效應(yīng)細(xì)胞”2.ECM合成與分泌：活化的HSCs大量合成ECM成分，包括Ⅰ型膠原（COL1A1）、Ⅲ型膠原（COL3A1）、纖維連接蛋白（FN）和層粘連蛋白（LN）。TGF-β1通過Smad通路直接激活COL1A1啟動(dòng)子，同時(shí)上調(diào)ECM合成酶（如脯氨酰羥化酶）的表達(dá)，促進(jìn)膠原分子形成穩(wěn)定的三螺旋結(jié)構(gòu)；通過抑制MMPs（如MMP-1、MMP-13）和誘導(dǎo)TIMPs（如TIMP-1、TIMP-2）的表達(dá)，阻斷ECM降解。在臨床肝穿刺樣本中，Ⅰ型膠原陽性面積與TGF-β1表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)，直接證實(shí)了TGF-β1對(duì)ECM合成的調(diào)控作用。肝星狀細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)分化：纖維化的“核心效應(yīng)細(xì)胞”（二）肝細(xì)胞損傷與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）：纖維化的“起始放大”肝細(xì)胞是肝臟的主要功能細(xì)胞，其損傷是肝纖維化的始動(dòng)因素。TGF-β1不僅通過“旁分泌”誘導(dǎo)HSCs活化，還可通過“自分泌”或“旁分泌”誘導(dǎo)肝細(xì)胞發(fā)生EMT，即上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，加劇纖維化進(jìn)程：1.EMT的分子機(jī)制：TGF-β1激活Smad2/3后，協(xié)同非Smad通路（如PI3K/Akt、MAPK）下調(diào)上皮標(biāo)志物（如E-cadherin、ZO-1），上調(diào)間質(zhì)標(biāo)志物（如N-cadherin、Vimentin）。E-cadherin的丟失破壞肝細(xì)胞間的緊密連接，使肝細(xì)胞脫離細(xì)胞層；N-cadherin的表達(dá)則促進(jìn)肝細(xì)胞遷移和浸潤。在膽汁淤積性肝病模型中，TGF-β1誘導(dǎo)的EMT使肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化為“肌成纖維樣細(xì)胞”，直接參與ECM合成。肝星狀細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)分化：纖維化的“核心效應(yīng)細(xì)胞”2.肝細(xì)胞凋亡與壞死：TGF-β1通過激活Smad通路和JNK/p38MAPK通路，誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。在慢性肝病中，肝細(xì)胞凋亡與HSCs活化形成“惡性循環(huán)”：凋亡小體被kupffer細(xì)胞吞噬后，釋放TGF-β1和PDGF（血小板衍生生長因子），進(jìn)一步激活HSCs；而HSCs分泌的TGF-β1又加劇肝細(xì)胞凋亡，形成“損傷-修復(fù)-過度修復(fù)”的惡性循環(huán)。（三）肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（LSECs）毛細(xì)血管化：纖維化的“微環(huán)境改變”LSECs是肝竇內(nèi)皮屏障的主要構(gòu)成細(xì)胞，其正常表型（表達(dá)CD31、CD34、血管性血友病因子vWF）對(duì)維持肝竇窗孔結(jié)構(gòu)和肝細(xì)胞功能至關(guān)重要。TGF-β1通過以下途徑誘導(dǎo)LSECs“毛細(xì)血管化”（即向連續(xù)型血管內(nèi)皮轉(zhuǎn)分化）：肝星狀細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)分化：纖維化的“核心效應(yīng)細(xì)胞”1.窗孔減少與基底膜形成：TGF-β1下調(diào)LSECs中窗孔相關(guān)蛋白（如plasmalemmavesicle-associatedprotein,PV-1）的表達(dá)，增加基底膜成分（如Ⅳ型膠原、LN）的沉積，導(dǎo)致肝竇結(jié)構(gòu)紊亂。毛細(xì)血管化的LSECs不僅阻礙肝細(xì)胞與血液的物質(zhì)交換（如脂質(zhì)代謝、藥物清除），還可分泌促纖維化因子（如TGF-β1、PDGF），激活HSCs，形成“LSECs-HSCs”串?dāng)_。2.血管生成與收縮：TGF-β1誘導(dǎo)LSECs分泌血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和血管生成素-1（Ang-1），促進(jìn)肝竇新生血管形成，但這些新生血管結(jié)構(gòu)異常，缺乏完整的周細(xì)胞覆蓋，易導(dǎo)致肝內(nèi)血流阻力增加，加重門靜脈高壓。免疫微環(huán)境紊亂：纖維化的“炎癥驅(qū)動(dòng)”肝纖維化本質(zhì)上是“炎癥驅(qū)動(dòng)的纖維化”，而TGF-β1是調(diào)控免疫微環(huán)境的核心因子，其通過影響巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等免疫細(xì)胞的分化與功能，形成“炎癥-纖維化”惡性循環(huán)：1.巨噬細(xì)胞M1/M2極化：TGF-β1誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型（替代型活化巨噬細(xì)胞）極化，M2型巨噬細(xì)胞高表達(dá)IL-10、TGF-β1，促進(jìn)ECM合成和HSCs活化，同時(shí)抑制M1型巨噬細(xì)胞的促炎功能（如TNF-α、IL-6分泌），使炎癥反應(yīng)從“急性”轉(zhuǎn)為“慢性”。在肝纖維化模型中，清除M2型巨噬細(xì)胞可顯著減輕纖維化程度，提示其作為“纖維化放大器”的作用。免疫微環(huán)境紊亂：纖維化的“炎癥驅(qū)動(dòng)”2.T細(xì)胞亞群失衡：TGF-β1協(xié)同IL-6誘導(dǎo)初始T細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，Th17細(xì)胞分泌IL-17，通過中性粒細(xì)胞浸潤和炎癥因子釋放，加重肝損傷；同時(shí)，TGF-β1抑制Treg細(xì)胞（調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）的分化，削弱其免疫抑制功能，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)失控。06TGF-β1信號(hào)通路的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：平衡與失衡的“雙刃劍”TGF-β1信號(hào)通路的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)：平衡與失衡的“雙刃劍”TGF-β1信號(hào)通路并非單向線性傳導(dǎo)，而是通過“正調(diào)控-負(fù)調(diào)控”的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)實(shí)現(xiàn)精細(xì)平衡。在生理?xiàng)l件下，負(fù)調(diào)控機(jī)制確保TGF-β1的短暫激活；在病理?xiàng)l件下（如慢性肝損傷），負(fù)調(diào)控機(jī)制被抑制，正調(diào)控機(jī)制被放大，導(dǎo)致通路持續(xù)激活，推動(dòng)纖維化進(jìn)展。TGF-β1信號(hào)通路的正調(diào)控機(jī)制1.轉(zhuǎn)錄水平的激活：肝細(xì)胞損傷后，NF-κB、AP-1等炎癥轉(zhuǎn)錄因子被激活，結(jié)合到TGF-β1基因啟動(dòng)子區(qū)域，促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄。例如，在酒精性肝病中，乙醇代謝產(chǎn)生的乙醛可激活NF-κB，上調(diào)TGF-β1mRNA表達(dá)，增加TGF-β1蛋白分泌。2.翻譯后修飾的增強(qiáng)：小泛素樣修飾物（SUMO）可通過SUMO化修飾Smad4，增強(qiáng)其與Smad2/3的結(jié)合能力，促進(jìn)靶基因轉(zhuǎn)錄；ROS可通過氧化修飾TβRI的半胱氨酸殘基，增強(qiáng)其激酶活性，放大TGF-β1信號(hào)。TGF-β1信號(hào)通路的正調(diào)控機(jī)制3.microRNAs的調(diào)控：多種microRNAs通過靶向負(fù)調(diào)控因子增強(qiáng)TGF-β1信號(hào)。例如，miR-21靶向Smad7（抑制性Smad），miR-199a靶向GAX（抑制HSCs活化的轉(zhuǎn)錄因子），在肝纖維化中高表達(dá)，促進(jìn)HSCs活化和ECM沉積。TGF-β1信號(hào)通路的負(fù)調(diào)控機(jī)制1.抑制性Smads（I-Smads）：Smad7是TGF-β1信號(hào)通路的“經(jīng)典抑制因子”，其通過競爭性結(jié)合TβRI，阻止Smad2/3磷酸化；同時(shí)招募E3泛素連接酶（如Smurf1/2），促進(jìn)TβRI降解。在肝纖維化早期，肝細(xì)胞可通過自分泌Smad7反饋抑制TGF-β1信號(hào)，但隨著纖維化進(jìn)展，Smad7表達(dá)被miR-21等抑制，負(fù)調(diào)控機(jī)制失效。2.偽受體（DecoyReceptors）：BMP和AMH受體調(diào)節(jié)蛋白（BAMBI）是TGF-β1受體的偽受體，其胞外結(jié)構(gòu)域與TβRII相似，可競爭性結(jié)合TGF-β1，但缺乏胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域，阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在肝硬化患者中，BAMBI表達(dá)顯著降低，提示其作為“負(fù)調(diào)控開關(guān)”的丟失。TGF-β1信號(hào)通路的負(fù)調(diào)控機(jī)制3.細(xì)胞內(nèi)降解途徑：泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）和自噬可降解TGF-β1信號(hào)分子。例如，Smurf1通過泛素化降解Smad2，自噬可通過清除活化的TβRI抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在肝纖維化中，UPS功能紊亂和自噬受損導(dǎo)致TGF-β1信號(hào)分子蓄積，放大纖維化效應(yīng)。調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的失衡與肝纖維化的進(jìn)展肝纖維化的本質(zhì)是TGF-β1信號(hào)通路的“調(diào)控失衡”：當(dāng)正調(diào)控機(jī)制（如轉(zhuǎn)錄激活、SUMO化、miR-21）持續(xù)增強(qiáng)，負(fù)調(diào)控機(jī)制（如Smad7、BAMBI）被抑制時(shí)，TGF-β1信號(hào)通路呈“慢性激活狀態(tài)”，HSCs持續(xù)活化，ECM過度沉積，炎癥微環(huán)境持續(xù)，最終形成不可逆的纖維化。例如，在非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）進(jìn)展為NASH的過程中，高脂飲食誘導(dǎo)的ROS可抑制Smad7表達(dá)，同時(shí)激活miR-21，導(dǎo)致TGF-β1信號(hào)通路持續(xù)激活，推動(dòng)纖維化進(jìn)展。07靶向TGF-β1信號(hào)通路的抗纖維化治療策略：從基礎(chǔ)到臨床靶向TGF-β1信號(hào)通路的抗纖維化治療策略：從基礎(chǔ)到臨床基于TGF-β1信號(hào)通路在肝纖維化中的核心作用，靶向該通路已成為抗纖維化藥物研發(fā)的“熱點(diǎn)”。然而，TGF-β1的生理功能廣泛（如免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)），單純抑制其活性可能導(dǎo)致免疫抑制、傷口愈合延遲等副作用。因此，精準(zhǔn)調(diào)控“病理性激活”而非完全阻斷“生理性信號(hào)”是治療的關(guān)鍵。目前，靶向策略主要包括以下幾類：中和TGF-β1活性：阻斷信號(hào)起始1.抗TGF-β1中和抗體：如fresolimumab（GC1008）是全人源抗TGF-β1單克隆抗體，可結(jié)合游離TGF-β1，阻止其與受體結(jié)合。在早期臨床試驗(yàn)中，fresolimumab可降低NASH患者的血清TGF-β1水平，改善肝纖維化標(biāo)志物，但部分患者出現(xiàn)自身免疫反應(yīng)，提示需優(yōu)化給藥方案（如局部遞送）。2.可溶性TGF-β1受體：如solubleTβRII（sTβRII）是TβRII的胞外結(jié)構(gòu)域，可作為“誘餌受體”結(jié)合TGF-腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo)的sTβRII基因治療可顯著降低肝纖維化模型中的膠原沉積，且無明顯副作用，具有良好的臨床轉(zhuǎn)化前景。抑制TGF-β1受體激酶活性：阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)1.小分子TβRI激酶抑制劑：如galunisertib（LY2157299）是口服小分子TβRI激酶抑制劑，可特異性阻斷TβRI的激酶活性，抑制Smad2/3磷酸化。在晚期肝癌臨床試驗(yàn)中，galunisertib可延長患者生存期，同時(shí)改善肝纖維化指標(biāo)；在NASH模型中，其可減少HSCs活化，抑制EMT進(jìn)展。2.多靶點(diǎn)激酶抑制劑：如sorafenib（索拉非尼）是肝癌靶向藥物，可同時(shí)抑制TβRI、VEGFR、PDGFR等激酶，在抑制肝癌增殖的同時(shí)，可通過阻斷TGF-β1信號(hào)減輕肝纖維化。臨床研究顯示，sorafenib治療可降低肝硬化患者的肝靜脈壓力梯度（HVPG），改善門靜脈高壓。調(diào)控下游信號(hào)分子：精準(zhǔn)干預(yù)效應(yīng)環(huán)節(jié)1.Smad通路調(diào)控：（1）Smad7基因治療：通過腺病毒載體將Smad7基因?qū)敫闻K，可恢復(fù)負(fù)調(diào)控機(jī)制，抑制HSCs活化。在四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化模型中，Smad7過表達(dá)可使膠原沉積減少60%，且無肝毒性。（2）Smad7穩(wěn)定劑：如SIS3是Smad3特異性抑制劑，可阻斷Smad3磷酸化，減少ECM合成。在臨床前研究中，SIS3可顯著改善膽管結(jié)扎模型的纖維化程度，但其口服生物利用度低，需開發(fā)新型遞送系統(tǒng)（如納米粒）。2.非Smad通路調(diào)控：（1）ROCK抑制劑：如法舒地爾可抑制RhoA/ROCK信號(hào)，減少HSCs收縮和遷移，同時(shí)促進(jìn)NO釋放，改善肝竇血流。在肝硬化患者中，法舒地爾可降低門靜脈壓力，改善肝功能。調(diào)控下游信號(hào)分子：精準(zhǔn)干預(yù)效應(yīng)環(huán)節(jié)（2）PI3K/Akt抑制劑：如LY294002可阻斷TGF-β1誘導(dǎo)的Akt磷酸化，抑制HSCs轉(zhuǎn)分化。但其脫靶效應(yīng)較強(qiáng)，需開發(fā)高選擇性抑制劑（如Copanlisib）。聯(lián)合治療策略：克服單一靶點(diǎn)的局限性由于肝纖維化是“多因素、多通路”驅(qū)動(dòng)的疾病，單一靶向TGF-β1通路的治療效果有限，聯(lián)合治療成為趨勢：011.TGF-β1抑制劑+抗炎藥物：如TGF-β1中和抗體聯(lián)合PPARγ激動(dòng)劑（如吡格列酮），可同時(shí)抑制炎癥和纖維化，在NASH模型中表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)。022.TGF-β1抑制劑+抗氧化劑：如