檢驗科臨床檢驗指南（2025）一、血液一般檢驗（一）紅細胞計數(shù)1.檢測原理目前常用的是全自動血細胞分析儀檢測法，其原理基于電阻抗法或光散射法。電阻抗法是將等滲電解質(zhì)溶液稀釋的細胞懸液置入不導電的容器中，將小孔管（又稱傳感器）插進細胞懸液中。小孔管內(nèi)充滿電解質(zhì)溶液，并有一個內(nèi)電極，小孔管外側(cè)細胞懸液中有一個外電極。當接通電源后，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流，稀釋細胞懸液從小孔管外側(cè)通過小孔管壁上寶石小孔（直徑一般為70100μm）向小孔管內(nèi)部流動，使小孔感應區(qū)內(nèi)電阻增高，引起瞬間電壓變化形成脈沖信號，脈沖振幅越高，細胞體積越大；脈沖數(shù)量越多，細胞數(shù)量越多，由此得出細胞計數(shù)結(jié)果。光散射法是利用激光照射細胞，根據(jù)細胞對光的散射特性來分析細胞的大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等信息，進而進行細胞計數(shù)。2.標本采集采用靜脈采血法，一般采集23ml靜脈血，注入含有EDTAK?抗凝劑的采血管中，輕輕顛倒混勻58次，防止血液凝固。采血時應嚴格遵守無菌操作原則，避免標本污染。3.參考區(qū)間成年男性：（4.05.5）×1012/L；成年女性：（3.55.0）×1012/L；新生兒：（6.07.0）×1012/L。4.臨床意義紅細胞增多可見于相對性增多，如嚴重嘔吐、腹瀉、大量出汗、大面積燒傷等導致的血液濃縮；絕對性增多，如真性紅細胞增多癥，以及機體長期缺氧引起的繼發(fā)性紅細胞增多，如慢性阻塞性肺疾病、高原居民等。紅細胞減少主要見于各種貧血，如缺鐵性貧血、巨幼細胞貧血、再生障礙性貧血等，也可見于失血、溶血等情況。（二）血紅蛋白測定1.檢測原理常用的是氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）測定法。血液中除硫化血紅蛋白（SHb）外的各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白（Hi），再與氰離子（CN?）結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白。HiCN最大吸收峰為540nm，在特定條件下，其吸光度與血紅蛋白含量成正比，通過比色法可測定血紅蛋白含量。2.標本采集同紅細胞計數(shù)，采集靜脈血注入EDTAK?抗凝管中。3.參考區(qū)間成年男性：120160g/L；成年女性：110150g/L；新生兒：170200g/L。4.臨床意義其臨床意義與紅細胞計數(shù)相似，但在某些貧血類型中，血紅蛋白降低的程度與紅細胞數(shù)量減少的程度可能不一致。例如，缺鐵性貧血時，血紅蛋白降低更為明顯；而巨幼細胞貧血時，紅細胞數(shù)量減少更為突出。（三）白細胞計數(shù)及分類計數(shù)1.檢測原理白細胞計數(shù)同樣可采用全自動血細胞分析儀，基于電阻抗法或光散射法進行計數(shù)。白細胞分類計數(shù)則是在計數(shù)的基礎上，利用細胞的不同特性，如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、化學組成等，通過特定的技術將白細胞分為中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞等不同類型。常見的分類方法有三分群法和五分類法，三分群法是根據(jù)白細胞體積大小將其分為小細胞群（主要為淋巴細胞）、中間細胞群（包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞等）和大細胞群（主要為中性粒細胞）；五分類法則能更準確地將白細胞分為上述五種具體類型。2.標本采集靜脈采血23ml注入EDTAK?抗凝管，混勻。3.參考區(qū)間白細胞計數(shù)：成人（4.010.0）×10?/L；兒童（5.012.0）×10?/L；新生兒（15.020.0）×10?/L。白細胞分類計數(shù)：中性粒細胞：50%70%；淋巴細胞：20%40%；單核細胞：3%8%；嗜酸性粒細胞：0.5%5%；嗜堿性粒細胞：0%1%。4.臨床意義白細胞總數(shù)及分類計數(shù)的變化對疾病的診斷和病情監(jiān)測有重要意義。中性粒細胞增多常見于急性感染，尤其是化膿性細菌感染，也可見于嚴重組織損傷、急性大出血、急性中毒等情況；減少見于某些病毒感染、血液系統(tǒng)疾病、物理化學因素損傷等。淋巴細胞增多常見于病毒感染，如麻疹、風疹、流行性腮腺炎等，也可見于淋巴細胞白血病等；減少主要見于應用腎上腺皮質(zhì)激素、烷化劑等。嗜酸性粒細胞增多常見于過敏性疾病、寄生蟲感染、某些皮膚病等；減少見于長期應用腎上腺皮質(zhì)激素等。嗜堿性粒細胞增多可見于慢性粒細胞白血病等；單核細胞增多見于某些感染，如瘧疾、結(jié)核病等，以及單核細胞白血病等。二、尿液檢驗（一）一般性狀檢查1.尿量（1）檢測方法準確收集24小時尿液，用量筒測量尿液體積。（2）參考區(qū)間正常成人24小時尿量為10002000ml。（3）臨床意義尿量增多可見于生理性因素，如大量飲水、飲啤酒等；病理性因素如糖尿病、尿崩癥等。尿量減少可分為少尿（24小時尿量少于400ml）和無尿（24小時尿量少于100ml），常見于腎前性因素（如休克、脫水等導致腎血流量減少）、腎性因素（如急性腎小球腎炎、腎衰竭等）和腎后性因素（如尿路結(jié)石、腫瘤等導致尿路梗阻）。2.外觀（1）檢測方法通過肉眼直接觀察尿液的顏色、透明度等。（2）參考區(qū)間正常新鮮尿液呈淡黃色、清晰透明。（3）臨床意義尿液顏色異常可提示多種疾病。紅色尿液可能為血尿，可見于泌尿系統(tǒng)結(jié)石、腫瘤、感染等；濃茶色或醬油色尿液可能為血紅蛋白尿，常見于蠶豆病、血型不合的輸血反應等；乳白色尿液可能為乳糜尿，多見于絲蟲病等。尿液渾濁可能是由于尿液中含有大量白細胞、細菌、結(jié)晶等，提示泌尿系統(tǒng)感染、結(jié)石等疾病。3.氣味（1）檢測方法通過嗅覺辨別尿液的氣味。（2）參考區(qū)間正常新鮮尿液具有微弱的芳香氣味。（3）臨床意義尿液氣味異常也有一定的臨床意義。氨味提示尿液在膀胱內(nèi)停留時間過長，尿素分解產(chǎn)生氨；爛蘋果味見于糖尿病酮癥酸中毒；蒜臭味見于有機磷中毒等。（二）化學檢查1.尿蛋白（1）檢測原理常用的是干化學法，其原理基于指示劑蛋白誤差法。在pH為3.2的條件下，溴酚藍產(chǎn)生陰離子，與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合后發(fā)生顏色變化，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。（2）標本采集隨機尿或晨尿，一般留取中段尿。（3）參考區(qū)間定性試驗：陰性；定量試驗：<150mg/24h。（4）臨床意義尿蛋白陽性可分為生理性蛋白尿和病理性蛋白尿。生理性蛋白尿可見于劇烈運動、發(fā)熱、精神緊張等情況，一般為暫時性的。病理性蛋白尿見于腎小球疾病，如腎小球腎炎、腎病綜合征等，主要是由于腎小球濾過膜損傷導致蛋白質(zhì)濾出增多；腎小管疾病，如腎盂腎炎等，是由于腎小管重吸收功能障礙導致蛋白質(zhì)排出增多；也可見于全身性疾病，如糖尿病腎病、高血壓腎病等。2.尿糖（1）檢測原理干化學法采用葡萄糖氧化酶過氧化物酶法。葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化為葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使色素原氧化顯色，顏色深淺與葡萄糖含量成正比。（2）標本采集同尿蛋白。（3）參考區(qū)間定性試驗：陰性；定量試驗：0.565.0mmol/24h。（4）臨床意義尿糖陽性可分為血糖增高性糖尿，如糖尿病、甲狀腺功能亢進等；血糖正常性糖尿，如腎性糖尿，是由于腎小管重吸收葡萄糖功能減退所致。此外，大量進食碳水化合物、靜脈注射大量葡萄糖等也可引起暫時性尿糖陽性。3.尿酮體（1）檢測原理干化學法采用亞硝基鐵氰化鈉法。尿中的乙酰乙酸和丙酮在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉反應生成紫色化合物，顏色深淺與酮體含量成正比。（2）標本采集隨機尿。（3）參考區(qū)間定性試驗：陰性。（4）臨床意義尿酮體陽性常見于糖尿病酮癥酸中毒，是由于體內(nèi)胰島素缺乏，脂肪分解加速，產(chǎn)生大量酮體所致。也可見于饑餓、妊娠劇吐等情況，由于糖代謝障礙，脂肪分解增加，導致酮體生成增多。（三）顯微鏡檢查1.檢測方法取新鮮混勻尿液10ml于離心管中，以1500r/min離心5分鐘，棄去上清液，留取沉渣0.2ml，混勻后取1滴置于載玻片上，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察。2.參考區(qū)間紅細胞：03個/HP（高倍視野）；白細胞：05個/HP；上皮細胞：少量；管型：偶見透明管型。3.臨床意義紅細胞增多可見于泌尿系統(tǒng)結(jié)石、腫瘤、感染等；白細胞增多主要見于泌尿系統(tǒng)感染，如腎盂腎炎、膀胱炎等。上皮細胞增多可見于泌尿系統(tǒng)炎癥、損傷等。管型的出現(xiàn)對腎臟疾病的診斷有重要意義，如透明管型增多可見于發(fā)熱、劇烈運動等生理情況，也可見于腎臟疾病的早期；顆粒管型提示腎臟有實質(zhì)性病變；紅細胞管型見于腎小球腎炎等；白細胞管型見于腎盂腎炎等。三、糞便檢驗（一）一般性狀檢查1.外觀（1）檢測方法通過肉眼直接觀察糞便的顏色、形狀、質(zhì)地等。（2）參考區(qū)間正常成人糞便呈黃褐色、圓柱狀、軟便。（3）臨床意義糞便顏色異常可提示多種疾病。黑色柏油樣便提示上消化道出血，是由于血紅蛋白中的鐵在腸道內(nèi)與硫化物結(jié)合形成硫化亞鐵所致；暗紅色血便多見于下消化道出血，如痔瘡、肛裂、結(jié)腸癌等；陶土樣便見于膽道梗阻，是由于膽汁排泄受阻，糞便中缺乏膽色素所致。糞便形狀改變也有重要意義，如細條狀便可能提示直腸狹窄，常見于直腸癌；稀水樣便可見于急性腸炎、食物中毒等。2.氣味（1）檢測方法通過嗅覺辨別糞便的氣味。（2）參考區(qū)間正常糞便有一定的臭味。（3）臨床意義惡臭味糞便見于消化不良、胰腺疾病等；腥臭味糞便見于阿米巴痢疾；酸臭味糞便見于脂肪消化不良等。（二）顯微鏡檢查1.檢測方法取少量糞便置于載玻片上，加12滴生理鹽水，混勻后加蓋玻片，在顯微鏡下觀察。2.參考區(qū)間正常糞便中可見少量植物細胞、淀粉顆粒等，偶見白細胞。3.臨床意義白細胞增多見于腸道炎癥，如細菌性痢疾等，且中性粒細胞增多為主。紅細胞增多見于腸道下段炎癥或出血，如阿米巴痢疾、結(jié)腸癌等。寄生蟲卵的發(fā)現(xiàn)對腸道寄生蟲感染的診斷有確診意義，如蛔蟲卵、鉤蟲卵、鞭蟲卵等。真菌孢子和菌絲的出現(xiàn)可能提示腸道真菌感染，多見于長期使用抗生素、免疫抑制劑等情況。（三）隱血試驗1.檢測原理常用的是化學法，如鄰聯(lián)甲苯胺法。血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有過氧化物酶活性，能催化過氧化氫釋放新生態(tài)氧，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化成藍色化合物。2.標本采集采集少量糞便送檢，檢測前3天應避免食用動物血、肉類、含鐵藥物等，以免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。3.參考區(qū)間陰性。4.臨床意義隱血試驗陽性對消化道出血的診斷有重要價值。消化性潰瘍時，隱血試驗多為間歇性陽性；消化道腫瘤時，多為持續(xù)性陽性。因此，隱血試驗可作為消化道腫瘤篩查的重要指標之一。四、臨床生物化學檢驗（一）肝功能檢驗1.血清總膽紅素測定（1）檢測原理改良JG法。血清中的結(jié)合膽紅素可直接與重氮試劑反應，生成紫紅色偶氮膽紅素；非結(jié)合膽紅素在加速劑咖啡因苯甲酸鈉醋酸鈉作用下，也能與重氮試劑反應生成偶氮膽紅素。通過比色法測定總膽紅素和結(jié)合膽紅素的含量，非結(jié)合膽紅素含量可通過總膽紅素減去結(jié)合膽紅素得到。（2）標本采集空腹靜脈采血35ml，避免標本溶血。（3）參考區(qū)間總膽紅素：3.417.1μmol/L；結(jié)合膽紅素：06.8μmol/L；非結(jié)合膽紅素：1.710.2μmol/L。（4）臨床意義總膽紅素升高可分為生理性和病理性。生理性升高可見于新生兒生理性黃疸。病理性升高見于肝細胞性黃疸，如病毒性肝炎、肝硬化等，是由于肝細胞受損，對膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄功能障礙所致；梗阻性黃疸，如膽管結(jié)石、膽管癌等，是由于膽汁排泄受阻，結(jié)合膽紅素反流入血所致；溶血性黃疸，如蠶豆病、血型不合的輸血反應等，是由于紅細胞破壞過多，非結(jié)合膽紅素生成增多所致。2.血清氨基轉(zhuǎn)移酶測定（1）檢測原理常用速率法。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）催化丙氨酸和α酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸，丙酮酸在乳酸脫氫酶的作用下被還原為乳酸，同時NADH被氧化為NAD?，通過監(jiān)測340nm波長處吸光度的下降速率來測定ALT活性。天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）催化天門冬氨酸和α酮戊二酸生成草酰乙酸和谷氨酸，草酰乙酸在蘋果酸脫氫酶的作用下被還原為蘋果酸，同時NADH被氧化為NAD?，同樣通過監(jiān)測340nm波長處吸光度的下降速率來測定AST活性。（2）標本采集空腹靜脈采血，避免劇烈運動和飲酒，以免影響結(jié)果。（3）參考區(qū)間ALT：540U/L；AST：840U/L；ALT/AST比值：1.15左右。（4）臨床意義ALT主要存在于肝細胞胞質(zhì)中，是反映肝細胞損傷的敏感指標。ALT升高常見于各種肝臟疾病，如病毒性肝炎、藥物性肝損傷等。AST除存在于肝細胞中外，還存在于心肌、骨骼肌等組織中。在肝細胞損傷時，AST也可升高，急性肝炎時，ALT升高更為明顯，ALT/AST比值常大于1；而在慢性肝炎、肝硬化等疾病中，AST升高更為顯著，ALT/AST比值常小于1。心肌梗死時，AST也可明顯升高。3.血清白蛋白測定（1）檢測原理溴甲酚綠法。在pH為4.2的緩沖液中，溴甲酚綠與白蛋白結(jié)合形成綠色復合物，其顏色深淺與白蛋白含量成正比，通過比色法測定白蛋白含量。（2）標本采集空腹靜脈采血。（3）參考區(qū)間3550g/L。（4）臨床意義血清白蛋白降低常見于肝臟疾病，如肝硬化、肝癌等，由于肝臟合成白蛋白功能減退；也可見于營養(yǎng)不良、蛋白丟失過多，如腎病綜合征、大面積燒傷等。升高可見于嚴重脫水等導致的血液濃縮。（二）腎功能檢驗1.血清肌酐測定（1）檢測原理苦味酸法。肌酐與苦味酸在堿性條件下反應生成橙紅色復合物，通過比色法測定肌酐含量。（2）標本采集空腹靜脈采血。（3）參考區(qū)間男性：53106μmol/L；女性：4497μmol/L。（4）臨床意義血清肌酐升高是反映腎小球濾過功能受損的重要指標。在腎臟疾病早期，由于腎臟有較強的代償能力，血清肌酐可正常；當腎小球濾過功能下降到正常的50%以下時，血清肌酐才會升高。常見于各種原因引起的腎衰竭，如慢性腎小球腎炎、糖尿病腎病等。2.血尿素氮測定（1）檢測原理脲酶波氏比色法。脲酶將尿素分解為氨，氨與苯酚及次氯酸鈉在堿性條件下反應生成藍色靛酚，顏色深淺與尿素含量成正比，通過比色法測定尿素氮含量。（2）標本采集空腹靜脈采血。（3）參考區(qū)間成人：3.27.1mmol/L；兒童：1.86.5mmol/L。（4）臨床意義血尿素氮升高可分為腎前性、腎性和腎后性因素。腎前性因素如脫水、心力衰竭等導致腎血流量減少，使尿素氮濾過減少；腎性因素如腎小球腎炎、腎衰竭等導致腎小球濾過功能受損；腎后性因素如尿路梗阻等導致尿素氮排泄障礙。血尿素氮降低可見于蛋白質(zhì)攝入不足、肝功能嚴重受損等。3.血尿酸測定（1）檢測原理尿酸酶過氧化物酶法。尿酸在尿酸酶的作用下被氧化為尿囊素和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使色素原氧化顯色，顏色深淺與尿酸含量成正比，通過比色法測定尿酸含量。（2）標本采集空腹靜脈采血。（3）參考區(qū)間男性：150416μmol/L；女性：89357μmol/L。（4）臨床意義血尿酸升高常見于痛風，是由于嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄減少所致；也可見于某些腎臟疾病，如腎衰竭等，以及腫瘤化療、放療后，由于細胞破壞增多，核酸分解增加，導致尿酸生成增多。血尿酸降低可見于惡性貧血、范可尼綜合征等。（三）血脂測定1.總膽固醇測定（1）檢測原理膽固醇氧化酶法。膽固醇酯在膽固醇酯酶的作用下被水解為游離膽固醇和脂肪酸，游離膽固醇在膽固醇氧化酶的作用下被氧化為膽甾4烯3酮和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使色素原氧化顯色，顏色深淺與總膽固醇含量成正比，通過比色法測定總膽固醇含量。（2）標本采集空腹靜脈采血1214小時，避免高脂飲食。（3）參考區(qū)間合適水平：<5.18mmol/L；邊緣升高：5.186.19mmol/L；升高：≥6.22mmol/L。（4）臨床意義總膽固醇升高是動脈粥樣硬化的重要危險因素之一，常見于高脂血癥、糖尿病、甲狀腺功能減退等。降低可見于嚴重肝臟疾病、營養(yǎng)不良等。2.甘油三酯測定（1）檢測原理甘油磷酸氧化酶過氧化物酶法。甘油三酯在脂蛋白脂肪酶的作用下被水解為甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶的作用下被磷酸化，然后在甘油磷酸氧化酶的作用下被氧化為磷酸二羥丙酮和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使色素原氧化顯色，顏色深淺與甘油三酯含量成正比，通過比色法測定甘油三酯含量。（2）標本采集同總膽固醇。（3）參考區(qū)間合適水平：<1.70mmol/L；邊緣升高：1.702.25mmol/L；升高：≥2.26mmol/L。（4）臨床意義甘油三酯升高常見于高脂血癥、糖尿病、酗酒等。降低可見于甲狀腺功能亢進、肝功能嚴重受損等。3.高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）和低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）測定（1）檢測原理HDLC測定常用選擇性抑制法，通過加入特定試劑抑制其他脂蛋白與酶試劑的反應，只讓HDL與酶試劑反應，從而測定HDLC含量。LDLC測定可采用Friedewald公式計算法（LDLC=總膽固醇HDLC甘油三酯/2.2，當甘油三酯>4.52mmol/L時，該公式不適用）或直接測定法。（2）標本采集同總膽固醇。（3）參考區(qū)間HDLC：男性：1.161.42mmol/L；女性：1.291.55mmol/L；合適水平：≥1.04mmol/L；降低：<1.04mmol/L。LDLC：合適水平：<3.37mmol/L；邊緣升高：3.374.12mmol/L；升高：≥4.14mmol/L。（4）臨床意義HDLC被認為是“好膽固醇”，具有抗動脈粥樣硬化的作用，HDLC降低是動脈粥樣硬化的危險因素之一。LDLC被認為是“壞膽固醇”，LDLC升高可促進動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，是冠心病的重要危險因素。五、臨床免疫學檢驗（一）免疫球蛋白檢測1.檢測原理常用免疫比濁法?？乖c相應抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復合物，使反應液出現(xiàn)濁度。當抗體量固定時，濁度的高低與抗原的含量成正比，通過檢測反應液的濁度來測定免疫球蛋白的含量。2.標本采集空腹靜脈采血。3.參考區(qū)間IgG：7.016.6g/L；IgA：0.73.5g/L；IgM：0.42.3g/L。4.臨床意義免疫球蛋白升高可分為多克隆性升高和單克隆性升高。多克隆性升高常見于慢性感染、自身免疫性疾病等，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關節(jié)炎等。單克隆性升高主要見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥等，表現(xiàn)為某一種免疫球蛋白顯著升高。免疫球蛋白降低可見于先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷病等，如艾滋病患者可出現(xiàn)多種免疫球蛋白降低。（二）補體檢測1.總補體活性（CH??）測定（1）檢測原理綿羊紅細胞（SRBC）與相應抗體（溶血素）結(jié)合形成免疫復合物，可激活補體經(jīng)典途徑，導致SRBC溶解。通過觀察不同稀釋度的血清使50%的SRBC發(fā)生溶血的情況，來測定總補體活性。（2）標本采集空腹靜脈采血，避免標本溶血。（3）參考區(qū)間50100kU/L。（4）臨床意義CH??升高可見于急性炎癥、組織損傷等。降低可見于補體成分消耗過多，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動期、急性腎小球腎炎等；補體合成減少，如肝硬化等；先天性補體缺乏等。2.補體C3測定（1）檢測原理同免疫球蛋白檢測的免疫比濁法。（2）標本采集同CH??。（3）參考區(qū)間0.851.70g/L。（4）臨床意義C3是補體系統(tǒng)中含量最多的成分，其變化具有重要的臨床意義。C3升高可見于急性炎癥、傳染病早期等。降低常見于腎小球腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，是由于補體經(jīng)典途徑或旁路途徑激活，導致C3消耗過多；也可見于肝臟疾病，如肝硬化等，導致C3合成減少。（三）自身抗體檢測1.抗核抗體（ANA）檢測（1）檢測原理間接免疫熒光法。以Hep2細胞為抗原底物片，加入患者血清，若血清中存在ANA，則與細胞內(nèi)的抗原結(jié)合，再加入熒光標記的抗人免疫球蛋白抗體，在熒光顯微鏡下可觀察到細胞內(nèi)出現(xiàn)熒光，根據(jù)熒光的模式和強度來判斷ANA的陽性與否及滴度。（2）標本采集靜脈采血。（3）參考區(qū)間陰性。（4）臨床意義ANA是自身免疫性疾病的篩選指標，陽性常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、硬皮病等多種自身免疫性疾病。不同的熒光模式可能提示不同的自身抗體類型和疾病類型，如均質(zhì)型常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡；核仁型常見于硬皮病等。2.類風濕因子（RF）檢測（1）檢測原理膠乳凝集法。將變性IgG包被在聚苯乙烯膠乳顆粒上，當加入患者血清時，若血清中存在RF，則與膠乳顆粒上的變性IgG結(jié)合，導致膠乳顆粒凝集，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。（2）標本采集靜脈采血。（3）參考區(qū)間陰性。（4）臨床意義RF主要見于類風濕關節(jié)炎，陽性率可達70%80%，但也可見于其他自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征等，以及某些感染性疾病，如傳染性單核細胞增多癥等。六、臨床微生物學檢驗（一）標本采集1.血液標本（1）采集時間一般在患者發(fā)熱初期或高峰時采集，盡量在使用抗生素前采集。（2）采集方法嚴格遵守無菌操作原則，消毒皮膚后，用注射器抽取靜脈血510ml，分別注入需氧和厭氧培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻。2.痰液標本（1）采集時間晨痰為佳，采集前患者應先用清水漱口，以減少口腔細菌污染。（2）采集方法深咳，將痰液咳出至無菌容器中。對于無痰或咳痰困難者，可采用霧化吸入等方法誘導咳痰。3.尿液標本（1）采集時間清潔中段尿，一般留取晨尿。（2）采集方法女性患者應先清洗外陰，然后用棉球擦拭尿道口，留取中段尿；男性患者應翻轉(zhuǎn)包皮，清洗尿道口后留取中段尿。將尿液收集于無菌容器中。4.糞便標本（1）采集時間新鮮糞便，盡量在發(fā)病早期采集。（2）采集方法用無菌竹簽挑取有膿血、黏液等異常部分的糞便，置于無菌容器中。（二）細菌培養(yǎng)與鑒定1.細菌培養(yǎng)（1）培養(yǎng)基選擇根據(jù)不同的標本和可能的病原菌選擇合適的培養(yǎng)基。如血培養(yǎng)常用需氧和厭氧培養(yǎng)基；痰液培養(yǎng)常用血平板、巧克力平板等；糞便培養(yǎng)常用選擇性培養(yǎng)基，如SS瓊脂平板等。（2）培養(yǎng)條件一般細菌在3537℃、5%10%CO?環(huán)境下培養(yǎng)1824小時。對于一些特殊細菌，如結(jié)核分枝桿菌，需要在特定的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下培養(yǎng)較長時間。2.細菌鑒定（1）形態(tài)學鑒定通過顯微鏡觀察細菌的形態(tài)、大小、染色性等特征，如革蘭染色可將細菌分為革蘭陽性菌和革蘭陰性菌；抗酸染色可用于鑒定結(jié)核分枝桿菌等。（2）生化鑒定利用細菌對各種生化底物的代謝能力不同，通過生化試驗來鑒定細菌。如糖發(fā)酵試驗、吲哚試驗、尿素酶試驗等。（3）血清學鑒定利用已知的特異性抗體來鑒定細菌的種、型等。如沙門菌的血清學分型。（4）分子生物學鑒定近年來，分子生物學技術在細菌鑒定中得到廣泛應用。如聚合酶鏈反應（PCR）技術可快速檢測細菌的特定基因序列，用于細菌的種屬鑒定；16SrRNA基因測序可準確鑒定細菌的種類。（三）藥敏試驗1.檢測方法（1）紙片擴散法（KB法）將含有一定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，藥物在瓊脂中擴散，抑制細菌生長，形成抑菌圈。根據(jù)抑菌圈的大小判斷細菌對該抗菌藥物的敏感性。（2）稀釋法包括肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法。將抗菌藥物進行不同濃度的稀釋，然后接種測試菌，觀察細菌生長情況，以最低抑菌濃度（MIC）來判斷細菌對該抗菌藥物的敏感性。2.結(jié)果判讀根據(jù)美國臨床和實驗室標準協(xié)會（CLSI）等制定的標準，將細菌對藥物的敏感性分為敏感（S）、中介（I）和耐藥（R）。敏感表示使用常規(guī)劑量的抗菌藥物治療有效；中介表示需要增加藥物劑量或選用其他藥物；耐藥表示使用常規(guī)劑量的抗菌藥物治療無效。藥敏試驗結(jié)果對于臨床合理選用抗菌藥物具有重要指導意義。七、分子診斷檢驗（一）核酸提取1.原理核酸提取的基本原理是破壞細胞結(jié)構(gòu)，使核酸釋放出來，然后去除蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)，得到純凈的核酸。常用的方法有酚氯仿抽提法、硅膠膜吸附法等。酚氯仿抽提法是利用酚和氯仿的變性作用，使蛋白質(zhì)變性沉淀，然后通過離心將核酸與蛋白質(zhì)分離；硅膠膜吸附法是利用核酸在高鹽低pH條件下可吸附在硅膠膜上，而雜質(zhì)不吸附，然后通過洗滌去除雜質(zhì)，最后在低鹽高pH條件下將核酸洗脫下來。2.操作步驟以硅膠膜吸附法為例，首先將標本加入裂解液中，使細胞裂解，釋放核酸；然后將裂解液轉(zhuǎn)移至硅膠膜離心柱中，離心使核酸吸附在硅膠膜上；接著用洗滌液洗滌離心柱，去除雜質(zhì)；最后用洗脫液將核酸從硅膠膜上洗脫下來。3.質(zhì)量控制提取的核酸應進行質(zhì)量檢測，常用的方法有紫