2T/XXXXXXX—XXXX達(dá)烏里龍膽種苗繁育技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了達(dá)烏里龍膽育苗技術(shù)的播種育苗、組織培養(yǎng)育苗、田間管理、種子采收及貯藏和苗木本文件適用于干旱半干旱地區(qū)達(dá)烏里龍膽種苗繁育的生產(chǎn)技術(shù)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2930.4草種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)GB/T2930.9草種子檢驗(yàn)規(guī)程重量測(cè)定GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1達(dá)烏里龍膽GentianadahuricaFischer又名達(dá)烏里秦艽、小秦艽，為龍膽科（Gentianaceae）龍膽屬（Gentiana）多年生草本，與大葉秦艽（GentianamacrophyllaPall.）、麻花秦艽（GentianastramineaMaxim.）、粗莖秦艽（GentianacrassicaulisDuthieexBurk.）共同收載于2025版《中國藥典》和蒙藥志中，以其干燥根和花入藥。其干燥根，具有祛風(fēng)濕、退虛熱、止痛功效；其干燥花，具有清熱解毒、止咳祛痰功效，為蒙藥。4播種育苗4.1育苗保護(hù)地智能溫室、日光溫室等保護(hù)地。4.2育苗基質(zhì)草炭土:蛭石以體積比1:1混合攪拌均勻作為基質(zhì)。4.3苗床準(zhǔn)備智能溫室苗床基質(zhì)厚度8cm～10cm，日光溫室畦播基質(zhì)厚度15cm～20cm。4.4播種時(shí)間3月中下旬，溫室溫度保持在20℃以上即可播種。4.5播種量種子千粒重為0.15g～0.20g，發(fā)芽率為70%以上，凈度95%以上，播種量1.0g/m2～1.5g/m2。千粒重測(cè)定按照GB/T2930.9規(guī)定執(zhí)行，發(fā)芽率測(cè)定按照GB/T2930.4規(guī)定執(zhí)行。4.6種子播前處理3T/XXXXXXX—XXXX在種植前一年冬季上凍前，將種子用清水浸泡5h～6h后撈出按種子體積拌濕沙2～3倍，埋入地下20cm以下層積。4.7播種方法平整苗床，澆1次透水，待水滲透后，體積比為1:1的種子與細(xì)沙均勻混合后撒播于苗床，用細(xì)篩覆薄土，厚度約0.5cm不超過種子厚度的3倍。播后需覆蓋薄膜保溫保濕，出苗60%時(shí)撤去薄膜。4.8容器分苗幼苗3～4片真葉時(shí)分苗到已裝好基質(zhì)的營養(yǎng)缽，基質(zhì)見4.2，每缽1～2株，分苗后澆一次透水。4.9露地定植5月將營養(yǎng)缽苗移栽定植。栽植深度8cm～12cm，株距15cm～20cm，行距30cm～50cm，定植后澆一次透水。5組織培養(yǎng)育苗5.1外植體材料將當(dāng)年收獲的種子在-20℃以下低溫處理45d后，作為外植體。5.2種子處理將種子置于0.2%的硝酸鉀溶液中攪拌10min后，做外植體處理。5.3無菌體系的建立1)將0.2%硝酸鉀溶液處理后的種子在流水的條件下沖洗1h以上：2)在鼓風(fēng)工作、紫外燈滅菌0.5h后的超凈臺(tái)上操作；3)在無水乙醇中浸泡30s，然后用無菌水淋洗3次；4)在4%NaClO中浸泡9min，然后用無菌水淋洗5次；5)種子在無菌濾紙上吸干水分。5.4培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度25℃±1℃,光照強(qiáng)度2500lx,白天16h光照，夜間8h無光條件培養(yǎng)。5.5愈傷誘導(dǎo)以達(dá)烏里龍膽組培苗為材料，切莖段進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+30g蔗糖+7g瓊脂，常溫培養(yǎng)15d至30d或1個(gè)月以上可獲得愈傷組織。5.6分化培養(yǎng)以誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的愈傷組織為材料，進(jìn)行分化培養(yǎng)，培養(yǎng)基為MS+0.1mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+30g蔗糖+7g瓊脂，常溫培養(yǎng)1個(gè)月以上，獲得分化的不定芽。5.7生根培養(yǎng)以分化培養(yǎng)獲得的不定芽為材料，進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)基為1/2MS+2,4-D0.25mg/L+NAA0.05mg/L+30g蔗糖+7g瓊脂，常溫培養(yǎng)1個(gè)月以上，獲得生根的達(dá)烏里龍膽組培苗。5.8煉苗將生長健壯、根長1cm～2cm的組培苗進(jìn)行煉苗，前2d閉瓶煉苗，而后3d開瓶煉苗。5.9移栽T/XXXXXXX—XXXX4煉苗后，取出組培苗，用清水洗去根部殘留的培養(yǎng)基。栽入沙土、草炭土、腐熟羊龔2:2:1混合的基質(zhì)中。20d后組培苗長出2片真葉時(shí)可移栽定植。6田間管理6.1水肥管理栽植后，5d～7d澆水1次，苗期保證土壤水分干濕交替，土壤通透。6月中旬開始加強(qiáng)肥水管理，以氮肥為主，7月末之前速生期每10d～15d噴施1次葉面肥，施2次～3次。8月至9月停止?jié)菜攵肮嘁淮畏鈨鏊?.2中耕除草及時(shí)除草、松土3次～4次。6.3病蟲害防治少有病蟲害。若使用農(nóng)藥應(yīng)符合GB/T8321的規(guī)定。7種子采收及貯藏7.1采收一般在9月成熟，根據(jù)種子成熟度適時(shí)采收。采后，種子置于通風(fēng)處陰干。7.2貯藏在冷涼干燥、通風(fēng)的地方貯藏，用布袋或紙袋包裝，附種子標(biāo)簽。常溫種子貯藏不超過2年。8苗木出圃8.1起苗起苗前4d～5d給苗圃澆透水。裸根苗起苗時(shí)應(yīng)注意保護(hù)根系，起苗深度應(yīng)在