合成生物細胞治療研發(fā)工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.CRISPR-Cas9系統(tǒng)中，引導RNA的縮寫是______。2.CAR-T細胞治療中，CAR的全稱是______。3.合成生物常用原核表達宿主菌是______（舉1例）。4.CAR的胞外域主要識別______。5.實現(xiàn)單堿基替換的基因編輯工具是______（舉1例）。6.合成生物常用調控元件是______（舉1例）。7.CAR-T細胞常用效應T細胞來源是______。8.外源DNA導入細胞的方法是______（舉1例）。9.細胞治療核心是實現(xiàn)______特異性殺傷靶細胞。10.合成生物常用測序技術是______（舉1例）。二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.以下不屬于基因編輯工具的是？A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.PCR2.CAR-T胞內域主要包含的信號分子是？A.CD3ζB.CD4C.CD8D.CD193.常用于CAR-T轉導的病毒載體是？A.腺病毒B.慢病毒C.噬菌體D.煙草花葉病毒4.“底盤細胞”不具備的功能是？A.提供代謝環(huán)境B.調控基因表達C.直接殺傷靶細胞D.基因回路載體5.屬于異體來源的細胞治療是？A.自體CAR-TB.通用型CAR-TC.自體NKD.自體TIL6.單堿基編輯器主要實現(xiàn)哪種修飾？A.大片段插入B.點突變C.基因敲除D.基因敲入7.啟動子的功能是？A.終止轉錄B.起始翻譯C.起始轉錄D.結合核糖體8.CAR-T治療B淋巴瘤的常用靶點是？A.CD19B.CD20C.CD30D.CD459.T細胞激活的共刺激信號是？A.CD28-CD80/86B.CD4-CD8C.CD3-CD28D.CD19-CD310.不屬于合成生物學范疇的是？A.基因合成B.代謝工程C.細胞培養(yǎng)D.基因回路設計三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.合成生物常用基因編輯工具包括？A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.逆轉錄酶2.CAR-T的組成部分包括？A.胞外抗原結合域B.跨膜域C.胞內信號域D.熒光蛋白域3.合成生物常用宿主細胞包括？A.大腸桿菌B.HEK293C.CHOD.植物細胞4.細胞治療的優(yōu)勢包括？A.靶向特異性強B.可長期存活C.副作用可控D.適用所有腫瘤5.基因回路的組成元件包括？A.啟動子B.終止子C.調控蛋白基因D.報告基因6.屬于細胞治療類型的是？A.CAR-TB.CAR-NKC.TILD.基因編輯干細胞7.慢病毒載體的優(yōu)勢包括？A.基因組整合B.轉導效率高C.適用于分裂細胞D.無免疫原性8.單堿基編輯器類型包括？A.CBEB.ABEC.TBED.GBE9.CAR的優(yōu)化方向包括？A.提高抗原親和力B.增加共刺激信號C.降低脫靶D.延長存活10.合成生物常用數據庫包括？A.GenBankB.UniProtC.PDBD.PubMed四、判斷題（每題2分，共20分）1.CRISPR-Cas9只能敲除不能敲入。（）2.CD19僅表達于B細胞。（）3.底盤細胞無需改造。（）4.慢病毒可轉導非分裂細胞。（）5.單堿基編輯器無需雙鏈斷裂。（）6.CAR-T胞內域僅含CD3ζ。（）7.啟動子強弱不影響表達量。（）8.異體CAR-T無需配型。（）9.TIL從腫瘤組織分離。（）10.細胞治療無需考慮倫理。（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述CRISPR-Cas9的基本原理。2.簡述CAR-T治療的基本流程。3.簡述底盤細胞的設計原則。4.簡述CAR-T常見副作用及應對。六、討論題（每題5分，共10分）1.討論通用型CAR-T的研發(fā)難點及解決思路。2.討論合成生物學在下一代細胞治療中的應用方向。參考答案一、填空題1.sgRNA2.嵌合抗原受體3.大腸桿菌（E.coli）4.腫瘤相關抗原（TAA）5.堿基編輯器（BaseEditor）6.啟動子（或終止子等）7.患者外周血8.轉染（或電穿孔等）9.靶向10.Sanger測序（或NGS）二、單項選擇題1.D2.A3.B4.C5.B6.B7.C8.A9.A10.C三、多項選擇題1.ABC2.ABC3.ABCD4.AB5.ABCD6.ABCD7.ABC8.AB9.ABCD10.ABCD四、判斷題1.×2.√3.×4.√5.√6.×7.×8.×9.√10.×五、簡答題1.CRISPR-Cas9原理：Cas9與sgRNA結合成復合物，sgRNA互補序列識別靶DNA（需PAM序列NGG），Cas9切割靶DNA雙鏈（DSB）；細胞通過NHEJ修復產生插入/缺失實現(xiàn)敲除，通過HDR引入模板實現(xiàn)敲入/點突變。2.CAR-T流程：①采集患者外周血T細胞；②慢病毒轉導CAR基因；③體外擴增CAR-T細胞；④回輸患者體內；⑤監(jiān)測療效（腫瘤負荷）和副作用（CRS等）。3.底盤設計原則：①正交性（無外源回路干擾）；②穩(wěn)定性（代謝/表達可控）；③兼容性（適配多種元件）；④安全性（含自殺基因等開關）。4.常見副作用及應對：①CRS（細胞因子風暴）：用托珠單抗（抗IL-6）或激素；②神經毒性（ICANS）：激素+支持治療；③脫靶：優(yōu)化sgRNA設計。六、討論題1.通用型CAR-T難點及解決：難點：①HLAmismatch（免疫排斥）→敲除HLA-I+CD47；②GVHD→敲除TCRα鏈；③存活短→優(yōu)化CAR結構/PEG修飾。目前處于臨床早期，需進一步提升安全性