合成生物學底盤菌株優(yōu)化工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（共10題，每題1分）1.合成生物學中最常用的原核底盤菌株是________。2.CRISPR-Cas9中識別靶序列的關鍵元件是________。3.密碼子優(yōu)化的核心目的之一是提高基因________效率。4.底盤菌株優(yōu)化中，敲除非必需基因可減少________負擔。5.適合分泌重組蛋白的革蘭氏陽性菌底盤是________。6.代謝流分析常用的同位素標記碳源是________。7.調控基因表達的核心元件包括啟動子、終止子和________。8.定向進化的常用方法包括易錯PCR和________。9.營養(yǎng)缺陷互補標記依賴宿主的________特性。10.適用于原核生物的人工染色體是________（如BAC）。二、單項選擇題（共10題，每題2分）1.最適合分泌重組蛋白的底盤是（）A.大腸桿菌K12B.枯草芽孢桿菌C.釀酒酵母D.畢赤酵母2.密碼子優(yōu)化不考慮的因素是（）A.宿主密碼子偏好B.密碼子-反密碼子配對C.基因長度D.稀有密碼子分布3.CRISPR中PAM序列的作用是（）A.結合Cas9B.識別靶序列C.啟動轉錄D.終止編輯4.底盤優(yōu)化核心方向不包括（）A.代謝網絡重構B.培養(yǎng)基調整C.非必需基因敲除D.毒性代謝物降解5.不屬于基因編輯工具的是（）A.CRISPR-Cas9B.TALENC.易錯PCRD.ZFN6.通量平衡分析（FBA）的基礎是（）A.同位素標記B.基因組代謝網絡模型C.酶活性測定D.代謝物組學7.屬于真核底盤的是（）A.大腸桿菌B.枯草芽孢桿菌C.釀酒酵母D.銅綠假單胞菌8.啟動子強度過高會導致（）A.翻譯效率降低B.代謝負擔增加C.基因丟失D.啟動子失活9.熒光蛋白標記可用于（）A.檢測蛋白表達B.篩選編輯陽性株C.代謝流分析D.碳源利用10.屬于組成型啟動子的是（）A.PtacB.PbadC.PlacD.Pveg（枯草芽孢桿菌）三、多項選擇題（共10題，每題2分）1.底盤選擇基本原則包括（）A.安全性B.遺傳操作性C.代謝特性D.適配性E.成本2.常用基因編輯工具包括（）A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.易錯PCRE.DNAshuffling3.密碼子優(yōu)化關鍵因素有（）A.宿主密碼子頻率B.密碼子-反密碼子配對C.基因長度D.稀有密碼子分布E.啟動子GC含量4.底盤優(yōu)化常見策略包括（）A.非必需基因敲除B.關鍵酶過表達C.反饋抑制解除D.代謝網絡重構E.培養(yǎng)基優(yōu)化5.常用調控元件包括（）A.組成型啟動子B.誘導型啟動子C.終止子D.RBSE.增強子6.代謝流分析常用方法包括（）A.13C標記MFAB.FBAC.酶活性測定D.代謝物組學E.轉錄組學7.底盤篩選常用標記包括（）A.抗生素抗性B.營養(yǎng)缺陷互補C.熒光蛋白D.酶活性E.生長速率8.影響CRISPR效率的因素包括（）A.sgRNA設計B.Cas9表達量C.靶序列GC含量D.細胞周期E.培養(yǎng)基溫度9.人工染色體類型包括（）A.YACB.BACC.PACD.MACE.質粒10.底盤優(yōu)化下游應用包括（）A.生物醫(yī)藥B.生物能源C.環(huán)境修復D.食品加工E.化工原料生產四、判斷題（共10題，每題2分）1.大腸桿菌是最常用的原核底盤菌株。（）2.密碼子優(yōu)化僅替換稀有密碼子。（）3.CRISPR只能用于基因敲除。（）4.枯草芽孢桿菌無細胞壁障礙，適合分泌蛋白。（）5.代謝流分析必須依賴同位素標記。（）6.基因組簡化是底盤優(yōu)化的重要方向。（）7.啟動子越強，產物產量越高。（）8.熒光蛋白可篩選整合重組元件的菌株。（）9.DNAshuffling屬于定向進化方法。（）10.釀酒酵母適合合成復雜真核蛋白。（）五、簡答題（共4題，每題5分）1.簡述底盤菌株選擇的基本原則。2.密碼子優(yōu)化的作用及關鍵考慮因素。3.CRISPR-Cas9在底盤編輯中的基本流程。4.代謝流分析的目的及常用方法。六、討論題（共2題，每題5分）1.如何平衡底盤優(yōu)化中“代謝負擔”與“目標產物產量”？2.底盤優(yōu)化面臨的主要挑戰(zhàn)及應對策略。---答案部分一、填空題答案1.大腸桿菌（K12株）2.sgRNA（單導向RNA）3.翻譯4.代謝5.枯草芽孢桿菌6.13C標記葡萄糖7.RBS（核糖體結合位點）8.DNAshuffling（基因洗牌）9.營養(yǎng)缺陷10.細菌人工染色體（BAC）二、單項選擇題答案1.B2.C3.A4.B5.C6.B7.C8.B9.B10.D三、多項選擇題答案1.ABCD2.ABC3.ABD4.ABCD5.ABCDE6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCDE四、判斷題答案1.√2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.√10.√五、簡答題答案1.底盤選擇原則：①安全性（無致病性）；②遺傳操作性（成熟編輯工具）；③代謝特性（生長快、網絡清晰）；④適配性（匹配目標產物）；⑤穩(wěn)定性（元件不丟失）。2.密碼子優(yōu)化：作用是提高翻譯效率、改善蛋白折疊。關鍵因素：宿主密碼子頻率、配對強度、稀有密碼子分布、同義密碼子偏好、GC含量。3.CRISPR流程：①靶序列設計（含PAM）；②載體構建（sgRNA+Cas9）；③轉化底盤；④PCR/測序驗證；⑤抗性/熒光篩選陽性株。4.代謝流分析：目的是定量代謝流向、識別瓶頸。方法：13C標記MFA、FBA、酶活性測定、代謝物組學。六、討論題答案1.平衡策略：①元件強度調控（誘導型啟動子）；②代謝網絡重構（敲除非必需基因）；③動態(tài)調控（代謝物感應回路