腫瘤干細(xì)胞：靶向清除與免疫聯(lián)合策略演講人01腫瘤干細(xì)胞：靶向清除與免疫聯(lián)合策略02引言：腫瘤干細(xì)胞——腫瘤治療的核心挑戰(zhàn)與突破方向03腫瘤干細(xì)胞的核心生物學(xué)特性：靶向與免疫干預(yù)的理論基礎(chǔ)04靶向清除腫瘤干細(xì)胞策略：精準(zhǔn)打擊的“武器庫(kù)”05免疫聯(lián)合策略：打破CSCs免疫逃逸的“協(xié)同防線”06挑戰(zhàn)與展望：邁向個(gè)體化聯(lián)合治療的新時(shí)代07結(jié)論目錄01腫瘤干細(xì)胞：靶向清除與免疫聯(lián)合策略02引言：腫瘤干細(xì)胞——腫瘤治療的核心挑戰(zhàn)與突破方向引言：腫瘤干細(xì)胞——腫瘤治療的核心挑戰(zhàn)與突破方向在腫瘤研究領(lǐng)域，“腫瘤干細(xì)胞（CancerStemCells,CSCs）”概念的提出，標(biāo)志著我們對(duì)腫瘤生物學(xué)特性的認(rèn)知進(jìn)入了一個(gè)新維度。作為腫瘤組織中具有自我更新、無(wú)限增殖及多向分化能力的“種子細(xì)胞”，CSCs不僅是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的根源，更是導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及治療抵抗的核心元兇。在臨床實(shí)踐中，我們常常觀察到：即使通過(guò)手術(shù)、化療或放療使原發(fā)腫瘤體積顯著縮小，仍有部分患者會(huì)在治療后數(shù)月甚至數(shù)年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移——這一現(xiàn)象的背后，正是CSCs的“頑強(qiáng)存活”與“再生能力”。傳統(tǒng)腫瘤治療策略（如化療、放療）主要針對(duì)快速增殖的腫瘤細(xì)胞，而對(duì)處于靜息期或具有高DNA修復(fù)能力的CSCs效果有限。此外，CSCs獨(dú)特的生物學(xué)特性（如高表達(dá)藥物外排泵、低表達(dá)免疫原性、處于免疫抑制性微環(huán)境中）使其能逃避免疫監(jiān)視，成為“治療逃逸”的關(guān)鍵。因此，如何特異性清除CSCs，打破其“種子庫(kù)”功能，已成為根治腫瘤、改善患者預(yù)后的核心科學(xué)問(wèn)題。引言：腫瘤干細(xì)胞——腫瘤治療的核心挑戰(zhàn)與突破方向近年來(lái)，隨著對(duì)CSCs生物學(xué)特性研究的深入，靶向清除策略（如表面標(biāo)志物靶向、信號(hào)通路干預(yù)、代謝重編程調(diào)控等）逐漸成為研究熱點(diǎn)。然而，單一靶向治療難以完全克服CSCs的異質(zhì)性和適應(yīng)性耐藥，而免疫系統(tǒng)的介入則為清除CSCs提供了新思路。CSCs與免疫系統(tǒng)的相互作用（如免疫逃逸機(jī)制、免疫微環(huán)境重塑）已成為腫瘤免疫治療的重要研究方向。基于此，“靶向清除+免疫聯(lián)合”的策略應(yīng)運(yùn)而生——通過(guò)靶向治療直接殺傷CSCs，同時(shí)激活免疫系統(tǒng)清除殘留CSCs及轉(zhuǎn)移灶，實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)打擊”與“免疫監(jiān)視”的協(xié)同增效。本文將從腫瘤干細(xì)胞的生物學(xué)特性入手，系統(tǒng)闡述靶向清除CSCs的主要策略，深入分析免疫聯(lián)合機(jī)制的科學(xué)依據(jù)與實(shí)踐進(jìn)展，并探討當(dāng)前面臨的挑戰(zhàn)與未來(lái)方向，以期為腫瘤治療新策略的研發(fā)提供理論參考。03腫瘤干細(xì)胞的核心生物學(xué)特性：靶向與免疫干預(yù)的理論基礎(chǔ)自我更新與分化能力：腫瘤“種子”的維持機(jī)制CSCs的核心特征是“自我更新（self-renewal）”能力，即通過(guò)不對(duì)稱分裂（一個(gè)CSC分裂為一個(gè)CSC和一個(gè)分化細(xì)胞）或?qū)ΨQ分裂（兩個(gè)子細(xì)胞均為CSC）維持自身數(shù)量的穩(wěn)定性，同時(shí)不斷分化產(chǎn)生具有增殖能力的腫瘤細(xì)胞，形成腫瘤異質(zhì)性。這一過(guò)程受多種信號(hào)通路（如Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog等）精密調(diào)控。例如，Wnt通路通過(guò)β-catenin的核轉(zhuǎn)位激活下游靶基因（如c-Myc、CyclinD1），促進(jìn)CSCs的自我更新；Notch通路通過(guò)調(diào)控細(xì)胞命運(yùn)決定基因（如Hes1、Hey1），維持CSCs的未分化狀態(tài)。值得注意的是，CSCs的分化能力使其具有“可塑性”——在特定微環(huán)境（如缺氧、炎癥、治療壓力）下，非CSCs可逆分化為CSCs，補(bǔ)充CSCs池。這種“可塑性”使得單純清除現(xiàn)有CSCs難以根治腫瘤，需結(jié)合策略抑制其再生能力。表面標(biāo)志物與異質(zhì)性：精準(zhǔn)識(shí)別的難點(diǎn)與機(jī)遇CSCs通常表達(dá)特異性表面標(biāo)志物，如CD44（在乳腺癌、結(jié)直腸癌中高表達(dá)）、CD133（在膠質(zhì)瘤、肺癌中高表達(dá)）、ALDH1（在乳腺癌、胰腺癌中高表達(dá)）等。這些標(biāo)志物為CSCs的分離、鑒定提供了工具，但也面臨挑戰(zhàn)：一是CSCs表面標(biāo)志物的“異質(zhì)性”——同一腫瘤中可能存在多個(gè)CSCs亞群，表達(dá)不同標(biāo)志物；二是標(biāo)志物的“非特異性”——部分標(biāo)志物也在正常干細(xì)胞中表達(dá)，導(dǎo)致靶向治療的脫靶效應(yīng)。例如，在急性髓系白血?。ˋML）中，CD34+CD38-亞群被定義為CSCs，但部分患者存在CD34+CD38+亞群具有干細(xì)胞活性，且標(biāo)志物表達(dá)可隨治療動(dòng)態(tài)變化。這種異質(zhì)性要求我們?cè)诎邢虿呗灾行桕P(guān)注“共性靶點(diǎn)”（如多種CSCs亞群共有的分子）或“組合靶點(diǎn)”，以提高清除效率。表面標(biāo)志物與異質(zhì)性：精準(zhǔn)識(shí)別的難點(diǎn)與機(jī)遇（三）腫瘤微環(huán)境（TME）對(duì)CSCs的調(diào)控：免疫逃逸的“土壤”CSCs的存活與功能依賴于腫瘤微環(huán)境的支持。TME中包括免疫細(xì)胞（如Treg、MDSCs、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞TAMs）、間質(zhì)細(xì)胞（如癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞CAFs）、細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）及細(xì)胞因子（如TGF-β、IL-6、VEGF）等，共同構(gòu)成“免疫抑制性微環(huán)境”，促進(jìn)CSCs的免疫逃逸。具體而言，Treg細(xì)胞通過(guò)分泌IL-10、TGF-β抑制效應(yīng)T細(xì)胞功能；MDSCs通過(guò)精氨酸酶1（ARG1）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）消耗精氨酸，抑制T細(xì)胞增殖；TAMs（M2型）通過(guò)分泌EGF、TGF-β促進(jìn)CSCs的自我更新與侵襲轉(zhuǎn)移。此外，CSCs自身可通過(guò)表達(dá)免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-L1、CTLA-4）或分泌免疫抑制性因子（如Galectin-9），直接抑制免疫細(xì)胞活性。表面標(biāo)志物與異質(zhì)性：精準(zhǔn)識(shí)別的難點(diǎn)與機(jī)遇這種“免疫微環(huán)境-CSCs”的相互作用，使得單純免疫治療難以有效清除CSCs，而聯(lián)合靶向策略（如抑制免疫抑制性細(xì)胞或因子）可能重塑微環(huán)境，增強(qiáng)免疫應(yīng)答。04靶向清除腫瘤干細(xì)胞策略：精準(zhǔn)打擊的“武器庫(kù)”表面標(biāo)志物靶向：直接識(shí)別與殺傷CSCs基于CSCs特異性表面標(biāo)志物的靶向治療是當(dāng)前研究最成熟的策略之一，主要包括單克隆抗體、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）及雙特異性抗體等。表面標(biāo)志物靶向：直接識(shí)別與殺傷CSCs單克隆抗體與抗體偶聯(lián)藥物（ADC）單克隆抗體通過(guò)特異性結(jié)合CSCs表面標(biāo)志物，誘導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性（CDC）或直接阻斷信號(hào)通路。例如，抗CD44抗體（如RG7356）在臨床試驗(yàn)中顯示出對(duì)AML、多發(fā)性骨髓瘤的療效，通過(guò)抑制CD44介導(dǎo)的信號(hào)通路（如PI3K/Akt）誘導(dǎo)CSCs凋亡。ADC藥物則通過(guò)抗體連接細(xì)胞毒性藥物，實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)遞送”。例如，抗CD133-ADC（如CT-0508）在膠質(zhì)瘤模型中可特異性靶向CD133+CSCs，釋放毒素（如MMAE）殺傷CSCs，同時(shí)減少對(duì)正常組織的損傷。目前，抗CD44-ADC、抗EpCAM-ADC等已進(jìn)入臨床前研究階段，部分在實(shí)體瘤（如乳腺癌、前列腺癌）中顯示出promising的效果。表面標(biāo)志物靶向：直接識(shí)別與殺傷CSCs雙特異性抗體與CAR-T細(xì)胞療法雙特異性抗體可同時(shí)結(jié)合CSCs表面標(biāo)志物和免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞）表面的激活分子（如CD3），招募T細(xì)胞殺傷CSCs。例如，CD44×CD3雙特異性抗體（如HxGb-251）在體外實(shí)驗(yàn)中可有效激活T細(xì)胞，清除CD44+CSCs，抑制腫瘤生長(zhǎng)。CAR-T細(xì)胞療法通過(guò)基因修飾T細(xì)胞表達(dá)靶向CSCs抗原的CAR（嵌合抗原受體），實(shí)現(xiàn)特異性殺傷。例如，CD133-CAR-T在肝癌模型中可顯著降低CD133+CSCs比例，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移；GD2-CAR-T在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中顯示出對(duì)CSCs的清除效果。然而，CSCs的低免疫原性及腫瘤微環(huán)境的抑制性限制了CAR-T療效，需聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)劑（如PD-1抑制劑）增強(qiáng)效果。信號(hào)通路干預(yù)：阻斷CSCs的自我更新“開(kāi)關(guān)”Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog等信號(hào)通路是調(diào)控CSCs自我更新的核心通路，其異常激活與CSCs的存活、增殖及耐藥密切相關(guān)。針對(duì)這些通路的抑制劑已成為研究熱點(diǎn)。信號(hào)通路干預(yù)：阻斷CSCs的自我更新“開(kāi)關(guān)”Wnt/β-catenin通路抑制劑Wnt通路異常激活見(jiàn)于多種腫瘤（如結(jié)直腸癌、乳腺癌），β-catenin的核轉(zhuǎn)位是關(guān)鍵步驟。目前抑制劑主要包括：①Porcupine抑制劑（如LGK974）：阻斷Wnt蛋白的分泌，抑制通路激活；②β-catenin/TCF4抑制劑（如PRI-724）：阻斷β-catenin與TCF4的結(jié)合，抑制下游靶基因轉(zhuǎn)錄。在臨床試驗(yàn)中，LGK974聯(lián)合化療在胰腺癌中可降低CSCs比例，延長(zhǎng)患者無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）。信號(hào)通路干預(yù)：阻斷CSCs的自我更新“開(kāi)關(guān)”Notch通路抑制劑Notch通路通過(guò)調(diào)控細(xì)胞分化維持CSCs的未分化狀態(tài)。γ-分泌酶抑制劑（GSIs，如MRK003）可阻斷Notch受體裂解，抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。然而，GSIs的胃腸道毒性（如腹瀉、嘔吐）限制了其臨床應(yīng)用。新型抑制劑（如抗Notch1抗體）通過(guò)特異性阻斷Notch1受體，減少脫靶效應(yīng)，在白血病模型中顯示出良好的安全性。信號(hào)通路干預(yù)：阻斷CSCs的自我更新“開(kāi)關(guān)”Hedgehog通路抑制劑Hedgehog通路在基底細(xì)胞癌、髓母細(xì)胞瘤中高度激活。抑制劑包括SMO抑制劑（如Vismodegib、Sonidegib）和下游抑制劑（如GLI抑制劑GANT61）。Vismodegib在基底細(xì)胞癌中已獲批上市，可顯著減少CSCs數(shù)量，降低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。然而，耐藥性（如SMO突變）的出現(xiàn)，需聯(lián)合其他靶向藥物（如Wnt抑制劑）克服。代謝重編程調(diào)控：切斷CSCs的“能量供應(yīng)”CSCs具有獨(dú)特的代謝特征，以適應(yīng)缺氧、酸性等微環(huán)境，維持自我更新與存活。例如，CSCs傾向于依賴糖酵解（Warburg效應(yīng)）而非氧化磷酸化（OXPHOS）供能，同時(shí)增強(qiáng)脂肪酸氧化（FAO）和谷氨酰胺代謝，以滿足生物合成需求。代謝重編程調(diào)控：切斷CSCs的“能量供應(yīng)”糖酵解通路抑制劑靶向糖酵解的關(guān)鍵酶（如HK2、PKM2、LDHA）可抑制CSCs能量代謝。例如，2-DG（己糖類似物）抑制HK2活性，減少ATP生成，在乳腺癌模型中可誘導(dǎo)CSCs凋亡；LDHA抑制劑（如FX11）通過(guò)阻斷乳酸生成，逆轉(zhuǎn)免疫抑制性微環(huán)境，增強(qiáng)免疫應(yīng)答。代謝重編程調(diào)控：切斷CSCs的“能量供應(yīng)”谷氨酰胺代謝抑制劑谷氨酰胺是CSCs合成氨基酸、核酸和谷胱甘肽的重要底物。谷氨酰胺酶抑制劑（如CB-839）可阻斷谷氨酰胺分解，抑制CSCs增殖。在胰腺癌模型中，CB-839聯(lián)合吉西他濱可顯著降低CSCs比例，延長(zhǎng)生存期。代謝重編程調(diào)控：切斷CSCs的“能量供應(yīng)”線粒體代謝調(diào)控部分CSCs依賴OXPHOS供能（如腦瘤、白血病中的CSCs）。線粒體復(fù)合物I抑制劑（如Metformin）或線粒體分裂抑制劑（如Mdivi-1）可破壞線粒體功能，誘導(dǎo)CSCs凋亡。例如，Metformin在乳腺癌中可通過(guò)抑制線粒體呼吸，減少CSCs自我更新。表觀遺傳修飾靶向：逆轉(zhuǎn)CSCs的“惡性表型”表觀遺傳異常（如DNA甲基化、組蛋白修飾、非編碼RNA調(diào)控）是CSCs維持干細(xì)胞特性和耐藥性的重要機(jī)制。表觀遺傳藥物可通過(guò)修飾基因表達(dá)，誘導(dǎo)CSCs分化或凋亡。表觀遺傳修飾靶向：逆轉(zhuǎn)CSCs的“惡性表型”DNA甲基化抑制劑DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑（DNMTis，如5-Azacytidine、Decitabine）可逆轉(zhuǎn)抑癌基因（如p16、CDH1）的高甲基化，恢復(fù)其表達(dá)，在AML、MDS中可誘導(dǎo)CSCs分化，增強(qiáng)化療敏感性。表觀遺傳修飾靶向：逆轉(zhuǎn)CSCs的“惡性表型”組蛋白修飾抑制劑組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HDACis，如Vorinostat、Panobinostat）可增加組蛋白乙?；せ钜职┗蜣D(zhuǎn)錄，抑制CSCs自我更新。在淋巴瘤模型中，HDACis聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑可增強(qiáng)T細(xì)胞浸潤(rùn)，清除CSCs。表觀遺傳修飾靶向：逆轉(zhuǎn)CSCs的“惡性表型”非編碼RNA調(diào)控microRNA（如miR-34a、miR-200c）和長(zhǎng)鏈非編碼RNA（如HOTAIR、XIST）可通過(guò)調(diào)控CSCs相關(guān)基因（如Notch、Wnt）影響其功能。例如，miR-34amimic可抑制SIRT1，促進(jìn)CSCs凋亡；Anti-HOTAIR可逆轉(zhuǎn)EMT，抑制轉(zhuǎn)移。目前，非編碼RNA藥物（如miR-34a類似物MRX34）已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，但遞送效率問(wèn)題仍需解決。05免疫聯(lián)合策略：打破CSCs免疫逃逸的“協(xié)同防線”CSCs的免疫逃逸機(jī)制：免疫治療的關(guān)鍵障礙盡管免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICIs）在部分腫瘤中取得顯著療效，但對(duì)CSCs的清除效果有限，其機(jī)制主要包括：①低免疫原性：CSCs低表達(dá)MHC分子、腫瘤抗原（如NY-ESO-1、MAGE-A），難以被T細(xì)胞識(shí)別；②免疫檢查點(diǎn)分子高表達(dá)：CSCs高表達(dá)PD-L1、CTLA-4、LAG-3等，通過(guò)與免疫細(xì)胞表面的抑制性受體結(jié)合，抑制其活性；③免疫抑制性微環(huán)境：Treg、MDSCs、TAMs等浸潤(rùn)，分泌抑制性因子，形成“免疫赦免區(qū)”；④抗原呈遞功能障礙：樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）成熟障礙，無(wú)法有效呈遞CSCs抗原，激活T細(xì)胞。免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合：釋放免疫細(xì)胞的“殺傷潛能”免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如抗PD-1/PD-L1、抗CTLA-4抗體）可阻斷免疫抑制信號(hào)，激活T細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞。然而，CSCs的低免疫原性限制了其效果，需聯(lián)合靶向策略增強(qiáng)免疫應(yīng)答。免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合：釋放免疫細(xì)胞的“殺傷潛能”聯(lián)合靶向藥物增強(qiáng)免疫原性靶向藥物（如HDACis、DNMTis）可上調(diào)CSCs的MHC分子和腫瘤抗原表達(dá)，促進(jìn)抗原呈遞。例如，HDACis（如Vorinostat）可增加黑色素瘤CSCs的MHC-I表達(dá)，聯(lián)合抗PD-1抗體可顯著增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷效果。此外，Wnt抑制劑（如LGK974）可減少CSCs的免疫抑制因子分泌，重塑微環(huán)境，增強(qiáng)ICIs療效。免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合：釋放免疫細(xì)胞的“殺傷潛能”聯(lián)合疫苗激活特異性免疫CSCs疫苗（如DC疫苗、多肽疫苗、溶瘤病毒疫苗）可通過(guò)激活特異性T細(xì)胞，靶向清除CSCs。例如，負(fù)載CD133多肽的DC疫苗在肝癌中可誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞反應(yīng)，清除CD133+CSCs；溶瘤病毒（如T-VEC）可選擇性感染并裂解CSCs，釋放腫瘤抗原，增強(qiáng)免疫應(yīng)答。目前，CSCs疫苗聯(lián)合ICIs在臨床試驗(yàn)中顯示出良好的安全性（如黑色素瘤、胰腺癌）。CAR-T細(xì)胞療法聯(lián)合：克服CSCs的“免疫抵抗”CAR-T細(xì)胞療法在血液腫瘤中取得突破，但在實(shí)體瘤中面臨CSCs異質(zhì)性、微環(huán)境抑制等挑戰(zhàn)。聯(lián)合策略可提高其療效：①聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)劑：如抗PD-1抗體可逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞的耗竭狀態(tài)，增強(qiáng)CAR-T對(duì)CSCs的殺傷；②聯(lián)合代謝調(diào)節(jié)劑：如CB-839（谷氨酰胺抑制劑）可減少TAMs的免疫抑制活性，改善CAR-T浸潤(rùn)；③雙CAR-T設(shè)計(jì)：同時(shí)靶向兩種CSCs標(biāo)志物（如CD133+CD44+），克服異質(zhì)性，提高清除效率。例如，CD133×GD2雙CAR-T在神經(jīng)母細(xì)胞瘤模型中可同時(shí)清除CD133+和GD2+CSCs，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。免疫微環(huán)境重塑聯(lián)合：打破“免疫抑制”的壁壘CSCs的免疫抑制性微環(huán)境是其逃逸的關(guān)鍵，聯(lián)合靶向策略可重塑微環(huán)境，增強(qiáng)免疫應(yīng)答：免疫微環(huán)境重塑聯(lián)合：打破“免疫抑制”的壁壘靶向免疫抑制性細(xì)胞CSF-1R抑制劑（如Pexidartinib）可抑制M2型TAMs的分化，減少IL-10、TGF-β分泌，改善微環(huán)境。在肝癌模型中，CSF-1R抑制劑聯(lián)合抗PD-1抗體可增加CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)，清除CSCs。CCR4抑制劑（如Mogamulizumab）可清除Treg細(xì)胞，解除對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞的抑制，在淋巴瘤中顯示出與ICIs的協(xié)同效應(yīng)。免疫微環(huán)境重塑聯(lián)合：打破“免疫抑制”的壁壘靶向免疫抑制性因子TGF-β抑制劑（如Galunisertib）可阻斷TGF-β信號(hào)，抑制CSCs的自我更新及EMT，增強(qiáng)T細(xì)胞活性。在胰腺癌中，Galunisertib聯(lián)合吉西他濱可降低CSCs比例，延長(zhǎng)生存期。此外，抗VEGF抗體（如Bevacizumab）可減少腫瘤血管生成，改善缺氧微環(huán)境，促進(jìn)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)。免疫微環(huán)境重塑聯(lián)合：打破“免疫抑制”的壁壘調(diào)節(jié)代謝微環(huán)境CSCs的代謝產(chǎn)物（如乳酸、腺苷）可抑制免疫細(xì)胞功能。LDHA抑制劑（如FX11）可減少乳酸分泌，逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞抑制；CD73抑制劑（如Oleclumab）可阻斷腺苷生成，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性。這些代謝調(diào)節(jié)劑聯(lián)合ICIs可改善免疫微環(huán)境，增強(qiáng)對(duì)CSCs的清除。06挑戰(zhàn)與展望：邁向個(gè)體化聯(lián)合治療的新時(shí)代當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)盡管靶向清除與免疫聯(lián)合策略在臨床前研究中展現(xiàn)出巨大潛力，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨諸多挑戰(zhàn)：當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)CSCs的異質(zhì)性與可塑性同一腫瘤中存在多個(gè)CSCs亞群，且其標(biāo)志物和生物學(xué)特性可隨治療動(dòng)態(tài)變化，導(dǎo)致靶向治療的“脫靶效應(yīng)”和耐藥。此外，非CSCs可逆分化為CSCs，補(bǔ)充CSCs池，使得單一治療難以完全清除。當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)聯(lián)合策略的優(yōu)化與毒性控制聯(lián)合治療（如靶向藥物+免疫檢查點(diǎn)抑制劑+化療）可能增加不良反應(yīng)（如免疫相關(guān)不良事件irAEs、靶向藥物毒性），需探索最佳劑量、給藥順序及療程。例如，PD-1抑制劑聯(lián)合CTLA-4抗體的irAEs發(fā)生率顯著高于單藥，需密切監(jiān)測(cè)。當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)個(gè)體化治療的精準(zhǔn)性CSCs的標(biāo)志物和免疫微環(huán)境存在顯著的個(gè)體差異，需基于多組學(xué)（基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白組、代謝組）數(shù)據(jù)，為患者制定“個(gè)體化聯(lián)合方案”。目前，液體活檢（如循環(huán)腫瘤細(xì)胞CTCs、循環(huán)腫瘤DNActDNA）為CSCs監(jiān)測(cè)提供了新工具，但其靈敏度和特異性仍需提高。當(dāng)前面臨的主要挑戰(zhàn)遞送系統(tǒng)與生物利用度靶向藥物（如ADC、CAR-T細(xì)胞、非編碼RNA）的遞送效率是限制其療效的關(guān)鍵。例如，CAR-T細(xì)胞在實(shí)體瘤中難以浸潤(rùn)至腫瘤中心；ADC藥物在腫瘤組織中的分布不均，導(dǎo)致殺傷效率低。新型遞送系統(tǒng)（如納米載體、外泌體）可提高藥物靶向性和生物利用度，但仍處于臨床前研究階段。未來(lái)研究方向?yàn)榭朔鲜鎏魬?zhàn)，未來(lái)研究需關(guān)注以下方向：未來(lái)研究方向深入解析CSCs的生物學(xué)特性通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序、空間轉(zhuǎn)錄組等技術(shù)，揭