生物技術(shù)生物科技公司生物技術(shù)研發(fā)工程師實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要2023年6月5日至8月23日，我在一家生物技術(shù)公司擔(dān)任生物技術(shù)研發(fā)工程師實(shí)習(xí)生，負(fù)責(zé)基因編輯實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的搭建與優(yōu)化。核心工作成果包括：完成CRISPRCas9系統(tǒng)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，使目標(biāo)基因敲除效率提升至85%；優(yōu)化Lenti病毒包裝工藝，病毒滴度從1×10^6TU/mL提升至3×10^8TU/mL，并成功應(yīng)用于A3細(xì)胞系的轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染效率達(dá)72%；系統(tǒng)梳理并標(biāo)準(zhǔn)化了10項(xiàng)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)流程，編寫(xiě)了詳細(xì)的操作手冊(cè)。期間應(yīng)用了qPCR、流式細(xì)胞術(shù)、WesternBlot等核心技術(shù)，通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了優(yōu)化方案的有效性，數(shù)據(jù)記錄完整并歸檔至公司數(shù)據(jù)庫(kù)。提煉出的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與數(shù)據(jù)管理方法可直接應(yīng)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)中，提升了團(tuán)隊(duì)工作效率。二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過(guò)程實(shí)習(xí)目的主要是將課堂上學(xué)到的分子生物學(xué)知識(shí)應(yīng)用到實(shí)際研發(fā)項(xiàng)目中，了解生物技術(shù)公司的運(yùn)作模式和項(xiàng)目流程。實(shí)習(xí)單位是一家專(zhuān)注于基因治療藥物研發(fā)的公司，主要研究方向是利用CRISPR技術(shù)進(jìn)行遺傳病干預(yù)。公司有專(zhuān)門(mén)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，設(shè)備挺全乎，從細(xì)胞培養(yǎng)到基因測(cè)序都有。實(shí)習(xí)內(nèi)容挺豐富的。6月5號(hào)到7月15號(hào)，我跟著導(dǎo)師做了CRISPRCas9系統(tǒng)的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。目標(biāo)是敲除A3細(xì)胞系里的一個(gè)特定基因，看看編輯效率怎么樣。用了不同的gRNA設(shè)計(jì)，做了三組平行實(shí)驗(yàn)，用qPCR檢測(cè)脫靶效應(yīng)，結(jié)果顯示最優(yōu)gRNA的敲除效率能達(dá)到85%，比文獻(xiàn)報(bào)道的高一些。7月16號(hào)到8月5號(hào)，我參與了一個(gè)Lenti病毒包裝項(xiàng)目，負(fù)責(zé)優(yōu)化工藝。之前病毒滴度只有1×10^6TU/mL，我調(diào)整了轉(zhuǎn)染試劑的比例和培養(yǎng)條件，最后滴度提升到3×10^8TU/mL，轉(zhuǎn)染效率也跟上了，A3細(xì)胞系轉(zhuǎn)染后表達(dá)熒光蛋白的比例從60%漲到72%。8月6號(hào)到8月23號(hào)，我整理了分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)流程，把常用的qPCR、WesternBlot、流式細(xì)胞術(shù)等操作標(biāo)準(zhǔn)化，編了本操作手冊(cè)，現(xiàn)在團(tuán)隊(duì)新員工入職都用這個(gè)。遇到過(guò)兩個(gè)挑戰(zhàn)。一個(gè)是gRNA設(shè)計(jì)效率不高，有些靶點(diǎn)敲除效果差。我查了數(shù)據(jù)庫(kù)，學(xué)了生物信息學(xué)工具，用CRISPOR網(wǎng)站重新篩選了一批gRNA，最后找到三個(gè)效果不錯(cuò)的。另一個(gè)是Lenti病毒包裝時(shí)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率上不去。導(dǎo)師教我用透化劑聚乙烯亞胺，調(diào)整了轉(zhuǎn)染時(shí)間和溫度，慢慢就解決了。實(shí)習(xí)最大的收獲是掌握了基因編輯和病毒包裝的實(shí)操技能，還學(xué)會(huì)了數(shù)據(jù)分析和標(biāo)準(zhǔn)化流程編寫(xiě)。最大的啟發(fā)是做研發(fā)得既細(xì)心又耐心，實(shí)驗(yàn)失敗是常事兒，得一個(gè)坑一個(gè)坑地填。公司管理上，我覺(jué)得培訓(xùn)機(jī)制可以再完善些，比如新員工上手慢，要是能提供更系統(tǒng)的培訓(xùn)資料就好了。建議可以搞個(gè)內(nèi)部知識(shí)庫(kù)，把操作SOP和常見(jiàn)問(wèn)題都整理著，新人就能直接查。崗位匹配度上，我覺(jué)得我可以更好地參與到項(xiàng)目討論里，多了解些臨床應(yīng)用前景，這樣回去寫(xiě)論文、做畢設(shè)會(huì)更有方向。三、總結(jié)與體會(huì)這八周，從6月5號(hào)到8月23號(hào)，在生物技術(shù)公司的經(jīng)歷讓我對(duì)科研有了更深的認(rèn)識(shí)。實(shí)習(xí)的價(jià)值閉環(huán)是，我不僅把學(xué)到的CRISPR、Lenti病毒包裝技術(shù)用在了實(shí)際項(xiàng)目中，還通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)提升了效率，比如將gRNA敲除效率從75%提升到85%，Lenti病毒滴度從1×10^6TU/mL提高到3×10^8TU/mL，這些數(shù)據(jù)不是紙上談兵，是實(shí)實(shí)在在在實(shí)驗(yàn)中一步步做到的。編寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)化操作手冊(cè)的過(guò)程，也讓我體會(huì)到把知識(shí)體系化的重要性，這對(duì)我后續(xù)學(xué)習(xí)很有幫助。這次經(jīng)歷直接影響了我的職業(yè)規(guī)劃。我發(fā)現(xiàn)自己對(duì)基因編輯領(lǐng)域特別感興趣，特別是看到CRISPR技術(shù)如何一步步走向臨床應(yīng)用，感覺(jué)前景廣闊。我計(jì)劃回去后系統(tǒng)學(xué)習(xí)生物信息學(xué)和臨床研究知識(shí)，考慮報(bào)考相關(guān)的證書(shū)，比如基因編輯工程師認(rèn)證。實(shí)習(xí)讓我明白，做研發(fā)不是一個(gè)人閉門(mén)造車(chē)，而是需要團(tuán)隊(duì)協(xié)作，對(duì)結(jié)果負(fù)責(zé)。從學(xué)生到職場(chǎng)人的心態(tài)轉(zhuǎn)變也挺明顯，以前實(shí)驗(yàn)失敗就有點(diǎn)急，現(xiàn)在能更冷靜地分析問(wèn)題，抗壓能力確實(shí)強(qiáng)了?？粗约簠⑴c優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，再結(jié)合行業(yè)新聞，我感受到基因治療領(lǐng)域發(fā)展太快了，像CART、基因編輯藥物這些，技術(shù)迭代很快。我希望能跟上這個(gè)節(jié)奏，未來(lái)無(wú)論是繼續(xù)深造還是進(jìn)公司工作，都得不斷學(xué)習(xí)新知識(shí)，提升自己的動(dòng)手能力和解決問(wèn)題的能力。這次實(shí)習(xí)讓我真切體會(huì)到，理論結(jié)合實(shí)踐才能真正把知識(shí)吃透，也為我接下來(lái)的路定了方向。四、致謝感謝公司提供實(shí)習(xí)機(jī)會(huì)，讓我學(xué)到了很多實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)。特別感謝我的導(dǎo)師，在CRISPR實(shí)驗(yàn)和Lenti病毒包裝項(xiàng)