1、a,1,臨床生化定標(biāo)方法分析,基蛋生物 潘石,a,2,K因子法,理論k值：根據(jù)摩爾系數(shù)（）來計(jì)算。通常試劑生產(chǎn)降價(jià)給出的k值都屬于此。 實(shí)測(cè)k值：是根據(jù)儀器當(dāng)前的實(shí)際狀態(tài)，試劑的穩(wěn)定性等因子數(shù)測(cè)得的值。 校準(zhǔn)k值：通過高質(zhì)量校準(zhǔn)直接校準(zhǔn)得到的k值 K因數(shù)法適用的分析方法有一點(diǎn)終點(diǎn)法，兩點(diǎn)終點(diǎn)法，兩點(diǎn)速率法，多點(diǎn)速率法。,a,3,K=SV/TV s2Abs、k2; s2Abs、k2; s3Abs、k3; s4Abs、k4; s5Abs、k5;參與計(jì)算。,a,5,Logit-log3p適用于一點(diǎn)終點(diǎn)法、兩點(diǎn)速率法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法等分析方法。 logit-log4p適用于一點(diǎn)終點(diǎn)法、兩點(diǎn)速率法、兩點(diǎn)終點(diǎn)

2、法、三點(diǎn)雙項(xiàng)目分析法、速率法A、速率法B等分析方法。 Logit-log5p適用于一點(diǎn)終點(diǎn)法、兩點(diǎn)速率法、兩點(diǎn)終點(diǎn)法、速率A等分析方法。,a,6,樣條函數(shù)法是為N也是標(biāo)準(zhǔn)被（N）有I標(biāo)準(zhǔn)液（N1）之間的范圍適應(yīng)于前后的測(cè)定值并使之戰(zhàn)近，總體成為一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，需費(fèi)用樣條函數(shù)擬合的校準(zhǔn)方法。 樣條函數(shù)法適用,a,7,通常，生化分析儀器都設(shè)置有樣品最小用量和最小體積，如日立7170反應(yīng)體積為180-380ul，最大體積為570ul，最小吸樣量2ul，在不影響結(jié)果的準(zhǔn)確度，精密度的前提下，可適當(dāng)調(diào)整樣品和試劑的用量。 樣品與試劑的比例（SV/RV），也可表示為樣品分?jǐn)?shù)樣品體積與反應(yīng)液總體積。 SV/T

3、V是方法學(xué)基本參數(shù)，在其他參數(shù)不變時(shí)，直接影響結(jié)果的計(jì)算。一般情況下以試劑說明為準(zhǔn)，不宜輕易改動(dòng)。,a,8,如總膽固醇與甘油三脂的測(cè)定，血清樣品與試劑的最佳比列為1:100，樣本的最低用量不能小于3ul。,a,9,測(cè)定方法的選擇： 自動(dòng)生化儀一般都可選擇一點(diǎn)終點(diǎn)法，兩點(diǎn)速率法，速率A法等。對(duì)于，一種新的實(shí)驗(yàn)方法，通常選擇高中低嘗試樣本與標(biāo)準(zhǔn)品觀察其它反應(yīng)進(jìn)程曲線。若均在5min之內(nèi)呈直線，可采用速率A測(cè)定。如反應(yīng)進(jìn)程曲線不呈直線而且需5-10min，甚至更長的時(shí)間才能達(dá)到終點(diǎn)，可采用兩點(diǎn)速率法測(cè)定，如反應(yīng)曲線在2-3min，甚至更短的時(shí)間即達(dá)到終點(diǎn)，則采用終點(diǎn)法為宜。,a,10,同一項(xiàng)目可用不

4、同的方法測(cè)定 如血清肌酐測(cè)定通常的就有氧化酶和苦味酸，兩點(diǎn)速率法和酶法的。 當(dāng)前情況下大多以使用，JAFFF法苦味酸法的，由于價(jià)格便宜，但苦味酸污染管道及比色杯。 酶法測(cè)定肌酐價(jià)格雖然貴但其測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，試劑抗干擾力強(qiáng)。標(biāo)本用量少，污染少，有逐漸被酶法試劑盒取代的趨勢(shì)。,a,11,同一個(gè)項(xiàng)目相同的試劑也可用不同的方法進(jìn)行測(cè)定，在血清葡萄糖測(cè)定方法中，己糖激酶HK法的特異性高，分析方法中有一點(diǎn)終點(diǎn)法，兩點(diǎn)終點(diǎn)法，速率A法，有研究表明，三種分析方法中只有兩點(diǎn)終點(diǎn)法能扣除其光譜干擾（溶血、脂濁、黃疸）的影響，到反應(yīng)終點(diǎn)的第二點(diǎn)間仍能保持相對(duì)的與校準(zhǔn)曲線基本一致的曲線，其吸光度差值乃能保持原比例，因而

5、檢測(cè)結(jié)果較正確。誤差較小，能較好地克服（溶血、脂濁、黃疸）取得較準(zhǔn)確的結(jié)果。,a,12,波長的選擇應(yīng)根據(jù)吸收光譜曲線，選擇特定反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)吸光度吸收的最高峰值時(shí)的。波長為測(cè)定波長及雙單波長測(cè)定的主波長。 副波長的選擇原則是干擾因數(shù)在主波長與副波長有相同的吸光度或是越接近越好，但不影響測(cè)定的靈敏度及副波長的正確選擇有利于提高測(cè)定的靈敏度和減少測(cè)定誤差，單波長測(cè)定易受到樣品溶血，黃疸，脂血等因素的干擾，雙波長測(cè)定可以通過副波長加以修正，減少甚至消除干擾因素，提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。,a,13,雙波長的選擇常見： 血紅蛋白在340nm和380nm波長吸光度相同， 以NADH和NADPH作為測(cè)定底物或產(chǎn)物的試

6、驗(yàn)常用340nm、380nm 340、405 ALP和GGT常用405nm、476nm TRINDER反應(yīng)多選取520nm、600nm或550nm、660nm 免疫比濁常用340nm、700nm等。,a,14,分析時(shí)間的選擇 分析時(shí)間主要包括反應(yīng)時(shí)間，監(jiān)測(cè)時(shí)間（讀點(diǎn)）和讀數(shù)間隔時(shí)間，延遲時(shí)間，根據(jù)反應(yīng)類型，儀器和試劑的狀況，就遵循有利于抗干擾，有足夠靈敏度以及準(zhǔn)確度的原則適當(dāng)調(diào)配延遲時(shí)間和讀數(shù)時(shí)間的長短。,a,15,定血清葡萄糖、膽固醇的試劑盒由于增加了可加快反應(yīng)速率的工具酶的量 3-4min反應(yīng)完全，設(shè)置5min已足夠。目前多數(shù)自動(dòng)生化分析儀設(shè)置有多個(gè)反應(yīng)時(shí)間可選（如日立7170,5min，10min，15min），須預(yù)先選定，多數(shù)儀器設(shè)定在10min左右,a,16,監(jiān)測(cè)時(shí)間是指該時(shí)間內(nèi)的測(cè)定讀數(shù)要用于結(jié)果計(jì)算。它的設(shè)置與加樣點(diǎn)、加試劑點(diǎn)、監(jiān)測(cè)時(shí)間（讀數(shù)點(diǎn)）、讀數(shù)間隔時(shí)