中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB5009.253—2016

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

動物源性食品中全氟辛烷磺酸(

PFOS

)和

全氟辛酸(

PFOA)的測定

2016-08-31發(fā)布2016-09-20實施

中華人民共和國

國家衛(wèi)生和計劃生育委員會

發(fā)布

GB5009.253—2016

1

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

動物源性食品中全氟辛烷磺酸(

PFOS)和

全氟辛酸(

PFOA)的測定

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動物源性食品中全氟辛烷磺酸(

PFOS)和全氟辛酸(PFOA)含量的同位素稀釋液相

色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于動物源性食品中PFOS和PFOA含量的測定。

2原理

試樣中PFOS和PFOA經(jīng)乙腈提取,通過分散固相萃取凈化,用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定,采用

內(nèi)標(biāo)法定量。

3試劑和材料

除非另有說明,所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的一級水。

3.1甲醇(CH3OH):色譜純。

3.2乙腈(CH3CN):色譜純。

3.3鹽酸(HCl)。

3.4氯化鈉(NaCl)。

3.5乙酸銨(CH3COONH4):色譜純。

3.6N-丙基乙二胺固相吸附劑(PSA):40μm~60μm,ProElut填料,或相當(dāng)者。

3.7C18吸附劑:40μm~60μm,ProElut填料,或相當(dāng)者。

3.8石墨化碳黑吸附劑(GCB):40μm~60μm,ProElut填料,或相當(dāng)者。

3.9乙酸銨溶液(5mmol

/L):準(zhǔn)確稱0.

3855g(精確至0.

0001g)乙酸銨,用水溶解定容至1000mL。

3.10全氟辛烷磺酸(PFOS)和全氟辛酸(PFOA)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:準(zhǔn)確稱取PFOA[純度≥98%,CAS:

335-67-1,CF3(CF2)6COOH]和PFOS(純度≥99%,CAS:1763-23-1,C8HF17O3S)各10.00mg(精確至

0.0001g),用甲醇稀釋至100mL,配置成濃度均為100μg/mL的PFOA和PFOS標(biāo)準(zhǔn)溶液。-4℃

環(huán)境下保存,有效期為6個月。

3.11PFOA標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:吸取PFOA標(biāo)準(zhǔn)品溶液,用甲醇稀釋,配制成濃度為100.0μg/L的PFOA

標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液;

PFOS標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:吸取PFOS標(biāo)準(zhǔn)溶液,用甲醇稀釋,配制成濃度為100.0μg/L的

PFOS標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。均在-4℃環(huán)境下保存,有效期為4個月。

注:全氟辛烷磺酸(PFOS)在溶液中以全氟辛烷磺酸離子狀態(tài)存在,樣品溶液以及標(biāo)準(zhǔn)溶液以全氟辛烷磺酸定量。

3.12混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,用甲醇稀釋,配制成PFOA濃度依次為0.05μg/L、

0.1μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、10.0μg/L,PFOS濃度依次為0.1μg/L、0.2μg/L、1.0μg/L、

10.0μg/L、20.0μg/L、40.0μg/L的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。-4℃環(huán)境下保存,有效期為2個月。

3.1313C4-PFOA標(biāo)準(zhǔn)品溶液:通過甲醇稀釋配制,稀釋至濃度為50.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液;

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1,2,3,4-

13C

4-PFOS標(biāo)準(zhǔn)品溶液:通過甲醇稀釋配制,稀釋至濃度為50.0μg

/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。均在

-4℃環(huán)境下保存,有效期為6個月。

3.14內(nèi)標(biāo)混合使用溶液Ⅰ:吸取13C4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS標(biāo)準(zhǔn)品溶液,用甲醇稀釋,配制

成13C

4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS濃度分別為10.0μg

/L和50.

0μg/L的內(nèi)標(biāo)混合使用溶液。

-4℃環(huán)境下保存,有效期為4個月。

3.15內(nèi)標(biāo)混合使用溶液Ⅱ:吸取13C4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS內(nèi)標(biāo)混合使用溶液Ⅰ,用甲醇稀

釋,配制成13C

4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS濃度分別為1.0μg

/L和5.

0μg/L的內(nèi)標(biāo)混合使用溶液。

-4℃環(huán)境下保存,有效期為2個月。

3.16含有碳13同位素內(nèi)標(biāo)的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液以及內(nèi)標(biāo)混合使用溶液Ⅰ,

用甲醇稀釋,配制成PFOA濃度依次為0.

05μg/L、0.1μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、10.0μg/L,

PFOS濃度依次為0.1μg/L、0.2μg/L、1.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、40.0μg/L,以及13C4-PFOA和

1,2,3,4-

13C

4-PFOS濃度均分別為1.0μg

/L和5.

0μg/L的含有13C同位素內(nèi)標(biāo)的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶

液。-4℃環(huán)境下保存,有效期為2個月。

3.17濾膜:0.22μm,有機(jī)相型。

4儀器和設(shè)備

4.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀:配有電噴霧離子源(ESI)。

4.2氮吹儀。

4.3粉碎機(jī)。

4.4離心機(jī),轉(zhuǎn)速≥5000r/min。

4.5均質(zhì)機(jī),參考轉(zhuǎn)速:3400r/min~24000r/min。

4.6分析天平:感量0.1mg和0.01g。

5樣品制備

魚、蝦、蟹、貝類、章魚、雞肉、豬肉、牛肉取其可食部分(去骨,去殼),切成小塊,用粉碎機(jī)制成肉糜;

蛋品去殼,制成勻漿;牛奶,混勻備用。將樣品置于玻璃樣品瓶中,密封,標(biāo)識后置于-18℃保存。

6分析步驟

6.1樣品前處理

6.1.1提取

稱取試樣5g(準(zhǔn)確至0.

01g)(樣品使用前解凍均質(zhì)),置于50mL聚丙烯離心管中,加入內(nèi)標(biāo)混合

使用溶液Ⅱ400μL,加水5mL,漩渦混合1min,加入10mL乙腈(3.

2)和30μL鹽酸(3.3),震蕩

10min。加入

2g

氯化鈉(

3.4),再次振搖10min,以5000r/min離心10min。移取上層乙腈溶液于另

一試管中,在45℃水浴中氮氣吹至約4mL,待凈化。

6.1.2凈化

將上述溶液轉(zhuǎn)移至裝有100mgPSA(3.

6)、40mgC18(3.7)和20mgGCB(3.8)的15mL聚丙烯離

心管中,振搖10min,以5000r/min離心10min,移取上清溶液于另一試管中,在45℃水浴中氮氣吹

至干,用1mL甲醇(3.

1)溶解,吸入1mL注射器,經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜過濾后,待測。

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6.2測定

6.2.1液相色譜參考條件

6.2.1.1為降低高效液相色譜管道中引入的PFOS和PFOA的污染,液相系統(tǒng)中加一預(yù)柱,并對部分

特氟龍材質(zhì)管路替換為PEEK管路或不銹鋼管路。

6.2.1.2分析色譜柱:C18,150mm×2.1mm(內(nèi)徑),5μm,或相當(dāng)者。

6.2.1.3預(yù)吸附柱:C18,50mm×4.6mm(內(nèi)徑),5μm,或相當(dāng)者。

6.2.1.4流動相梯度洗脫程序見表1。

6.2.1.5流速:200μL/min。

6.2.1.6進(jìn)樣量:10μL。

表1流動相梯度洗脫程序

時間

min

5mmol/L乙酸銨

%

甲醇

%

0.009010

1.009010

1.015050

9.002080

9.017030

10.07030

6.2.2質(zhì)譜參考條件

6.2.2.1離子源:電噴霧離子源負(fù)離子模式(ESI

-)。

6.2.2.2掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)。

6.2.2.3分辨率:單位分辨率。

其他質(zhì)譜條件參見附錄A。

6.2.3定性測定

按照6.

2.1和6.2.2所述條件測定試樣和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,試樣的質(zhì)量色譜峰保留時間應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

一致,允許偏差小于±2.

5%;定性離子對的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)工作溶液的相對豐度一致,定性

離子參考附錄A表A.

1,相對豐度允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍,則可判斷樣品中存在相應(yīng)的被

測物。

表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度

%

>50>20~50>10~20≤10

允許的最大偏差

%

±20±25±30±50

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6.2.4定量測定

以各混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中的PFOA或PFOS濃度和PFOA或PFOS與其相對應(yīng)的13C同位

素標(biāo)記物的峰面積比繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,按照內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量計算。在6.

2.1所述的色譜條件下,PFOA和

PFOS的參考保留時間約為7.66min和8.78min,

13C

4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS的參考保留時間

約為7.

66min和8.79min,標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)圖參見附錄B。

標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液中待測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性響應(yīng)范圍內(nèi),如果含量超過范圍,則

重新取樣分析,增加相應(yīng)內(nèi)標(biāo)添加量,使內(nèi)標(biāo)濃度與待測液濃度相匹配,然后用甲醇稀釋到適當(dāng)濃度后

分析。

6.3空白試驗

除不加試樣外,均按6.

1及6.2所述操作步驟進(jìn)行。

7質(zhì)量控制

7.1取樣抽樣

取樣抽樣均應(yīng)采用不銹鋼儀器,避免接觸塑料。

7.2有機(jī)溶劑和試驗器皿

本標(biāo)準(zhǔn)中使用到的所有有機(jī)溶劑及試驗器皿,在使用前,應(yīng)進(jìn)行空白試驗。如本底值高于定量限,

應(yīng)對有機(jī)溶劑進(jìn)行重蒸,或更換試驗器皿,直至本底值低于定量限。

8分析結(jié)果的表述

試樣中PFOA和PFOS的含量按式(1)計算:

X=

(

A-A0)×V×f

m

…………(1)

式中:

X———試樣中PFOA或PFOS的含量,單位為微克每千克(

μg

/

kg

);

A

———試液中PFOA或PFOS色譜峰與相對應(yīng)內(nèi)標(biāo)物色譜峰的峰面積比值,經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的

對應(yīng)的PFOA或PFOS濃度,單位為微克每升(

μg

/L);

A0———空白溶液中PFOA或PFOS色譜峰與相對應(yīng)內(nèi)標(biāo)物色譜峰的峰面積比值,經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線求

得的對應(yīng)的PFOA或PFOS濃度,單位為微克每升(

μg

/L);

V

———試液最終定容體積,單位為毫升(mL);

f

———試液稀釋倍數(shù);

m

———試樣的質(zhì)量,單位為克(

g)。

計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示,結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

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9精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的30%。

10其他

本方法PFOA和PFOS的檢出限分別為0.

002μg/

kg

和0.

02μg/

kg

,定量限分別為0.

01μg/

kg

和

0.1μg/

kg

。

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附錄A

質(zhì)譜參考條件

質(zhì)譜參考條件:

a)噴嘴電壓:-500V;

b)霧化氣壓力:45Pa;

c)鞘氣溫度:260℃;

d)鞘氣流速:11L/min;

e)干燥氣溫度:300℃;

f)干燥氣流速:6L/min;

g)毛細(xì)管電壓:-3500V;

h)定性離子對、定量離子對、碎裂電壓、碰撞電壓、駐留時間見表A.1。

表A.

1給出了PFOA、PFOS、

13C

4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS的定性離子對、定量離子對、碎裂

電壓、碰撞電壓、駐留時間。

表A.

1PFOA、PFOS、

13C

4-PFOA和1,2,3,4-

13C

4-PFOS的

定性離子對、定量離子對、碎裂電壓、