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文檔簡介
1、實驗9不同滲透脅迫條件下氨基酸含量的測定、實驗?zāi)康暮鸵?、學(xué)會常用實驗材料的培養(yǎng)和處理2 .掌握植物脯氨酸含量的測定方法3 .掌握常用實驗儀器的使用操作,提高實驗手的能力4 .了解學(xué)會文獻的查閱和整理、實驗設(shè)施修訂的一般原則和方法步驟,熟悉自己的實驗設(shè)施修訂能力實驗內(nèi)容和條件:實驗內(nèi)容: 1、實驗植物種子的處理和幼苗的培養(yǎng)2、不同滲透脅迫條件下的脅迫處理3、脯氨酸含量的測定。 條件: (使用儀器) 1、恒溫孵化機2、分光光度校正3、恒溫水族箱4、恒溫恒濕孵化機、方法步驟1、根據(jù)情況進行實驗組,實驗組人數(shù)控制為34人,選定組長2 .實驗課題的選定、實驗組分工、實驗用品的領(lǐng)取、實驗要求的記述3,
2、 各組實驗的安排4 .實驗工作(1)材料的選擇、培養(yǎng)和處理(2)脯氨酸含量的測定(3)實驗課題的總結(jié)和實驗報告。 實驗提案課題(1)實驗材料的選擇可以選擇不同的實驗材料,但要求培養(yǎng)容易、容易獲得。 (2)滲透脅迫處理不同的滲透脅迫條件、脅迫時間對植物的脅迫處理;(3)不同的滲透脅迫條件對植物氨基甲酸積累的影響采用張志良的方法進行。 脯氨酸含量的測定,實驗原理植物受到滲透脅迫,引起性生理水資源短缺,植物體內(nèi)脯氨酸含量在一定程度上反映了植物內(nèi)的水分情況。 因此,其含量可作為植物水資源短缺的參考指標(biāo)。 酸性條件下茚三酮和氨基甲酸反應(yīng)生成紅色化合物。 其含量與色度成正比,因此可以用分光光度校正來測定。
3、 實驗器材和試劑,1 .實驗器材: 722型分光光度修訂,水浴釜,燒酒,移液器。 2 .實驗試劑:冰冰乙酸、3%磺水楊酸類、標(biāo)準(zhǔn)脯氨酸溶液、酸性茚三酮試劑。 實驗步驟,1 .定標(biāo)曲線的曲線(1)在分析天平上準(zhǔn)確稱取25mg脯氨酸,放入小的燒杯,用少量的蒸餾水溶解后,放入250ml的瓶子,加入蒸餾水定容至刻度,該參比溶液中每ml含有100g脯氨酸。 (2)系列脯氨酸濃度的調(diào)制,取6瓶50ml的容量瓶,分別加入脯氨酸原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0及6.0ml,用蒸餾水定容至刻度,橫搖,各瓶的脯氨酸濃度分別為2、4、6、8 (5)用注射器將各管上層的前置甲苯(紅色甲苯相)溶液輕輕地吸在比色杯中,以甲苯溶液為空白對照進行對照,在520nm的波長下進行比色。 (6)定標(biāo)曲線圖:求出吸光率值(y )根據(jù)脯氨酸濃度(x )變化的回歸式后,利用回歸式繪制定標(biāo)曲線。實驗步驟、1 .采集地上構(gòu)件0.5g后,加入3%磺水楊酸類5ml進行研磨,均化為離心管,在沸水中提取10分鐘,蒸發(fā)制冷至室溫后,以3000r/min離心10分鐘,采集上清液2ml,分別加入蒸餾水2ml,蒸發(fā)制冷后520nm 從定標(biāo)曲線中檢測出脯氨酸含量。 注意事項,1 .選擇實驗材料時,不要選擇生長良好的葉子,不要選擇枯死的葉子。 此外,為了不影響實驗結(jié)果,請勿選擇變黃、變紅的葉片。 2 .茚三酮是無色的,但與脯氨酸發(fā)生顯色
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