1、第九章 體液葡萄糖檢驗,本章內(nèi)容概要：,第二節(jié) 體液葡萄糖測定,第一節(jié) 概述,本章教學要求：,1、掌握糖尿病的診斷標準、病因?qū)W分型；血糖的測定方法 GOD法和己糖激酶法）；葡萄糖耐量試驗的原理和方法,2、熟悉胰島素降血糖的主要機制；各種糖尿病監(jiān)控指標的 生理意義和測定方法,3、了解糖代謝紊亂的各種疾?。黄渌w液葡萄糖的測定。,1、氧化供能：分解代謝提供人體75%能量； 2、人體組成成分之一： 糖占人體干重的2%; 形成糖原儲存在肝臟與肌肉中； 形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受體等）、糖脂（神經(jīng)組織和細胞膜重要組分）； 3、轉(zhuǎn)變：其它糖及糖衍生物（核糖、脫氧核糖、氨基多糖）等；非糖物質(zhì)（脂肪、

2、氨基酸核酸）。 4、糖代謝紊亂供能障礙一系列代謝變化,糖的生理功能（能量資源和結(jié)構(gòu)材料）,體液糖的測定項目：,血糖濃度測定 口服糖耐量試驗 糖化血紅蛋白試驗 糖化血清白蛋白測定 胰島素測定 C-肽測定等,第一節(jié) 概 述,一、血糖的來源、去路和調(diào)節(jié),血糖及血糖水平的概念:,血糖：指血液中的葡萄糖.,血糖水平：即血糖濃度。,正常血糖濃度： 3.96.7mmol/L,（一） 血糖的來源、去路和調(diào)節(jié),（二）血糖濃度的調(diào)節(jié),1、肝臟調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)運調(diào)控：肝細胞膜G 載體可允許G 快速轉(zhuǎn)運，達到平衡時，肝內(nèi)外G 濃度幾乎相等。 酶的雙向調(diào)控功能途徑：從器官水平通過神經(jīng)-激素的作用，使肝細胞內(nèi)各種糖代謝的酶活性改

3、變。 升糖調(diào)節(jié)1：具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶，可促進肝糖原水解， 補充和升高血糖。 升糖調(diào)節(jié)2：肝臟具有活性高且易誘導(dǎo)的糖異生酶類，禁食或饑餓時能將非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖（占55-90%）。 降糖調(diào)節(jié)：促進組織攝取葡萄糖，促進肝糖原合成、抑制肝糖原分解、抑制糖異生。,2、神經(jīng)調(diào)節(jié),部位 1、下丘腦 2、自主神經(jīng)（交感和副交感神經(jīng)）,方式： 1、直接作用于肝臟； 2、調(diào)節(jié)激素的分泌而影響血糖。,內(nèi)臟神經(jīng),迷走神經(jīng),3、激素調(diào)節(jié),降低血糖濃度的激素,胰島素 胰島素樣生長因子,升高血糖濃度的激素 胰高血糖素 腎上腺素 生長激素 皮質(zhì)醇 甲狀腺激素,胰島素 胰島素結(jié)構(gòu) 胰島素作用于靶細胞的機制 影響胰

4、島素生物活性效應(yīng)的因素 胰島素功能,胰島細胞 前胰島素原 胰島素 C肽 有活性 無活性,胰島素結(jié)構(gòu):51個aa的蛋白類激素,等摩爾,胰島素作用于靶細胞的機制,胰島素的生物活性效應(yīng)取決于： 1、靶細胞上胰島素受體的絕對或相對數(shù)量 2、到達靶細胞的胰島素濃度 3、胰島素與靶細胞受體的親和力 4、胰島素與受體結(jié)合后的細胞內(nèi)改變情況,胰島素降血糖機理: 1、加快葡萄糖轉(zhuǎn)運速率 2、促進糖原合成 3、加速糖氧化分解 4、促進糖轉(zhuǎn)化為脂肪 5、抑制糖異生,糖代謝紊亂： 高血糖癥與糖尿病 低血糖癥 酮癥 半乳糖血癥,二、 糖代謝紊亂,(一)高血糖癥與糖尿病,高血糖癥:空腹血漿血糖（FPG）7.3mmol/L

5、（130mg/dl）,生理性：包括飲食性（高糖飲食）或情感性（情緒緊張，腎上腺分泌增加）,病理性：見于糖尿?。粌?nèi)分泌腺（甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)或髓質(zhì)、胰島細胞功能亢進；顱內(nèi)壓升高刺激血糖中樞；嘔吐、腹瀉、高熱等引起的脫水。,1、概念：,尿糖：若血糖濃度高于腎糖閾值9.0mmol/L，即超過了腎小球濾過率，出現(xiàn)尿糖。,。,糖尿?。╠iabetes mellitus,DM） 定義：是一種慢性、復(fù)雜的代謝紊亂性疾病，系胰島素相對或絕對不足，或利用缺陷引起。 臨床特征：血糖持續(xù)升高，甚至出現(xiàn)糖尿。長期患有糖尿病常伴有脂類、蛋白質(zhì)代謝紊亂、水、電解質(zhì)紊亂及酸堿平衡紊亂，甚至出現(xiàn)一系列并發(fā)癥如眼、腎的微血管病

6、變及神經(jīng)病變，重者可致死亡。 發(fā)病機制 1、胰腺細胞的自身免疫性損傷 2、機體對胰島素的作用產(chǎn)生抵抗,臨床表現(xiàn)：“三多一少”：多尿、多飲、多食、體重減輕。,2、糖尿病的診斷標準：,，不主張作第三次OGTT試驗。,3、糖尿病的分類：,糖尿病的分類分型 國際糖尿病學會推薦依據(jù)糖尿病病因分成四類 1型糖尿病 2型糖尿病 特殊類型糖尿病 妊娠期糖尿病（GDM）,（1）1型糖尿病 胰島素依賴型糖尿病、免疫介導(dǎo)糖尿病、特發(fā)性糖尿病 免疫介導(dǎo)糖尿病發(fā)病機制： 胰腺細胞的破壞引起胰島素絕對不足，且具有酮癥酸中毒傾向。與遺傳因素和環(huán)境因素有關(guān)。 大多數(shù)患者體內(nèi)存在自身抗體： 胰島細胞胞漿抗體（ICA） 胰島素自

7、身抗體（IAA） 谷氨酸脫羧酶自身抗體 酪氨酸磷酸化酶自身抗體IA-2和IA-2,免疫介導(dǎo)糖尿病特點： 青少年多見 起病較急 血漿胰島素和C肽含量低，糖耐量曲線呈低平狀態(tài) 胰腺細胞自身免疫性損傷是重要的發(fā)病機制 治療依賴胰島素為主 易發(fā)生酮癥酸中毒 遺傳因素在發(fā)病中起重要作用，與HLA基因型相關(guān),（2）2型糖尿病 胰島素非依賴型糖尿病 發(fā)病機制： 表現(xiàn)為胰島素抵抗，即靶細胞膜上胰島素受體數(shù)目減少 或者缺陷，即患者胰島細胞對胰島素不敏感，胰島細胞 功能減退。,2型糖尿病特點： 典型病例常見肥胖的中老年人 起病緩慢 血漿中胰島素含量絕對值并不降低，但在糖刺激后呈延遲釋放 ICA等自身抗體呈陰性 單

8、用口服降糖藥一般可以控制血糖 發(fā)生酮癥酸中毒比例較1型低 有遺傳傾向，但與HLA基因型無關(guān)。,（）妊娠性糖尿病,（）特殊類型的糖尿病 1、細胞基因缺陷 2、胰島素作用基因缺陷 3、胰腺的外分泌疾病 4、內(nèi)分泌疾病,4、糖尿病的代謝變化, 高血糖癥 糖尿、多尿、水鹽丟失 高脂血癥和高膽固醇血癥 酮血癥 乳酸血癥,（二）低血糖癥 1、概念： 低血糖癥 是指血糖濃度低于2.2mmol/L（葡萄糖氧化酶法）時臨床出現(xiàn)一系列因血糖濃度過低引起的癥候群。,發(fā)病原因：來源 去路,激素效應(yīng)：升血糖激素缺乏，降血糖激素過剩。 肝病變：肝功嚴重損傷致肝糖原減少和糖異生嚴重障礙。 長期饑餓或劇烈運動時代謝率增加，血

9、糖消耗過多。,分類：,低血糖癥,空腹性低血糖,刺激性低血糖,反應(yīng)性低血糖癥,外源性低血糖癥,酒精性低血糖癥,半乳糖性低血糖癥,餐后性低血糖癥,功能性低血糖癥,型糖尿病或糖耐量受損伴有的低血糖癥,營養(yǎng)性低血糖,（三）酮癥,1、概念：,酮體：乙酰乙酸、-羥丁酸及丙酮三者統(tǒng)稱為酮體,20%,78%,2%,酮血癥：酮體形成過多引起血中含量增高，稱為酮血癥。,酮體形成過多的原因,糖尿?。?糖攝取不足：脂肪動員,糖原貯積?。褐緞訂T,堿中毒：代償,2、酮體的生成：,糖代謝障礙,脂肪酸分解,3、酮體的測定及臨床意義：,（不能同時檢測酮體三種成分）,Gerhardts 氧化鐵試驗,乙酰乙酸,硝普納反應(yīng),丙酮,

10、測定,臨床意義：1、如有酮體存在，需確定酮酸中毒狀態(tài) 2、酮血癥的診斷對指導(dǎo)胰島素治療最有價值。,（四）半乳糖血癥,1、概念：,半乳糖血癥是機體不能轉(zhuǎn)化利用半乳糖及其中間代謝產(chǎn)物的一種常染色體隱性遺傳病，主要特征為血和尿中半乳糖增高。,2、生化缺陷：酶的缺陷,半乳糖,半乳糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸,UDPG,UDP-半乳糖,葡萄糖-6-磷酸,半乳糖激酶,半乳糖-1-磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶 （最常見）,UDP-半乳糖-4-差向酶,臨床表現(xiàn)：酶缺乏導(dǎo)致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉積在肝臟、腎腦、眼晶狀體 和紅細胞中，引起相應(yīng)的病變。,代謝過程：,第二節(jié) 體液葡萄糖測定,一、血糖測定,測定方法,無機化學法

11、,有機化學法,酶法,（一）無機化學法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的還原性,（二）有機化學法：鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等,Cu2+,OH-,Cu+,Glu,磷鉬酸,顯色,鄰甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏堿 藍綠色化合物,縮合,脫水,分子重排,特異性差,干擾因素多,（三）酶法,（1）己糖激酶法（HK） （2）葡萄糖氧化酶法（GOD法）,葡萄糖ATP葡萄糖-磷酸ADP 葡萄糖-6-磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖內(nèi)酯+NADPH NADPH在340nm有吸收峰，其吸光度增加與標本中的葡萄糖濃度成正比。,原理：,評價： 本法特異性高，靈敏度高，干擾因素少，適用于自動化

12、分析，為葡萄糖測定的參考方法，但是試劑較貴。,、己糖激酶法（法）,操作簡單，特異性較高，是血糖測定的首選方法但溶血、 GSH、Vc、膽紅素，GSH可引起測定結(jié)果負偏差。,2、葡萄糖氧化酶法(GOD),原理：,葡萄糖O2+H2O GOD 葡萄糖酸內(nèi)酯2O222O2 + 4-氨基安替比林+酚 POD 紅色醌類化合物 + 2O +O2,評價,葡萄糖耐量試驗 概念 適應(yīng)證 操作方法 葡萄糖耐量曲線 臨床意義,二、糖耐量試驗,（一）葡萄糖耐量試驗,概念：耐糖現(xiàn)象、糖耐量增加、糖耐量降低 糖耐量試驗：口服或注射一定量葡萄糖后，每間隔一定時間測定血糖水平，稱為糖耐量試驗。（GTT）,口服葡萄糖耐量試驗（OG

13、TT） 靜脈葡萄糖耐量試（IGTT）,1、空腹血糖水平在臨界值（67mmol/L)而又疑為糖尿病患者； 2、空腹或餐后血糖濃度正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群； 3、以前糖耐量異常的危險人群； 4、妊娠性糖尿病的診斷； 5、臨床上出現(xiàn)腎病、神經(jīng)病變和視網(wǎng)膜病而又無法做出合理解釋者； 6、作為流行病學研究的手段。,OGTT試驗適應(yīng)證：,試驗前三天，受試者每日食物中糖含量不應(yīng)低于150g，且維持正?；顒佑绊懺囼灥乃幬飸?yīng)在三天前停用，受試前應(yīng)空腹1016h. 坐位取血后5分鐘內(nèi)飲入250ml含75g無水葡萄糖的糖水，妊娠婦女用量為100g，兒童按1.75g/kg體重給予，不超75g。糖后每隔30分鐘

14、取血1次，共4次。必要時可延長時間，可長達服糖后小時。于采血同時，每隔1小時留取尿液作尿糖試驗。整個過程不可吸煙、和咖啡、喝茶或進食。,OGGT方法：標準化,參考范圍： 空腹血糖6.1mmol；服糖后3060分鐘血糖升高達峰值， 一般10mmol；服糖后小時內(nèi)恢復(fù)至空腹血糖水平。同時測 定上述各時間的尿糖均為陰性。,臨床意義：,糖尿病性糖耐量,糖耐量受損,妊娠期糖尿病,妊娠期糖尿病 指在妊娠期間任何程度的糖耐量減退或糖尿病發(fā)作，不論是否使用胰島素或飲食治療，也無論分娩后這一情況是否持續(xù)。 在分娩6周后，應(yīng)復(fù)查血糖水平和糖尿病的診斷標準重新確定。,（二）乳糖耐量試驗：評價乳糖不耐受性,血清糖化血紅蛋白（Hb)的檢測 *臨床意義： 、Hb反映測定前周內(nèi)血糖的平均水平，故可作為糖尿病長期控制的良好指標。 、可鑒別糖尿病性高血糖及應(yīng)激性高血糖，前者Hb水平多增高，后者正常。,果糖胺血清糖化白蛋白測定（Alb） *臨床意義： 血清白蛋白比血紅蛋白半衰期短，約為19天，測定Alb可有效反映患者過去23周內(nèi)平均血糖水平，是糖尿病近期控制的一個指標。,胰島素測定 臨床意義： 、